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  • 简介:细胞色素P450基因的新奇完整的长度被孤立在杀虫药剂抵抗(命名CYP6CX1v1)并且易受影响(命名CYP6CX1v2)Bemisiatabaci,作为B遗传因子型被识别,福建,中国(Sj)。CYP6CX1(1940bp包含了1557bp开的读框架)对CYP6成员普通的包括的保存领域在carboxyl附近的helix-K,氧绑定主题AGLDPV和保存顺序PEKFNP的通常认为的曲流绑定顺序ETLR和PERF例如heme有约束力的主题PFGEGPRFCIA,结束。有在R和SB之间的氨基酸残余的四不同代替。tabaci(Thr300翼,Thr354Pro,Arg486His和Ile503Thr),在哪个之中替换Ile503Thr位于底层识别地点区域。CYP6CX1v1的mRNA抄写水平象CYP6CX1v2的一样高是2.38褶层。结果显示了从B遗传因子型B的CYP6CX1。在Sj的tabaci是CYP6成员之一,并且提高了CYP6CX1表示和氨基酸残余的代用品可能在域B涉及抵抗机制。tabaci。

  • 标签: 细胞色素P450基因 识别位点 烟粉虱 杀虫剂 氨基酸残基 抗性
  • 简介:【目的】薇甘菊颈盲蝽是入侵植物薇甘菊的天敌昆虫。CYP4家族基因在专食性昆虫与宿主植物的相互作用中发挥着极其重要的作用,探明其在不同部位的表达情况,可为薇甘菊生物控制提供科学依据。【方法】采用RACE技术克隆薇甘菊颈盲蝽CYP基因,实时荧光定量PCR检测其在不同部位的表达情况。【结果】PmCYP4C1基因全长1713bp,其中ORF长1500bp,共编码500个氨基酸,理论分子质量为57.44ku,无信号肽;与其他昆虫CYP4家族基因的同源性大于40%,与温带臭虫CYP的亲缘关系最近。该基因在雌、雄虫各部位均有表达,且都是足部的表达量明显地高于其他部位;雌、雄虫的表达差异在于雄虫翅膀中的表达量明显地高于触角和残体,但在雌虫中这3个部位的表达量无显著差异,且雄虫翅膀中的表达量显著地高于雌虫,是其2.37倍。【结论】薇甘菊颈盲蝽PmCYP4基因除参与代谢有毒物质外,其主要功能可能是编码与薇甘菊颈盲蝽运动相关的酶。

  • 标签: 薇甘菊颈盲蝽 细胞色素P450 基因克隆 表达分析
  • 简介:利用重叠延伸PCR法对扩展青霉碱性脂肪酶(PEL)基因进行体外定点突变,并构建了含突变基因的重组质粒pPIC3.5K-lip-D92P.将该质粒在毕赤酵母GS115菌株中表达.与野生型表达产物PEL-GS相比较,突变体表达产物PEL-D92P-GS最适作用温度为45℃,比野生型提高了5℃;其热稳定性与野生型相当;突变体在40℃下的表达量为109U/mL,约为野生型的29%.结果分析表明,Pro替代Asp92后,可能是由于Pro一级结构的特点,使酶结构更加稳定,在高温下更适于与底物结合.

  • 标签: 扩展青霉 碱性脂肪酶 最适作用温度 定点突变 重叠延伸PCR法 蛋白质工程
  • 简介:拟建立抗HIV-p24蛋白的单克隆抗体细胞株及双抗体夹心法,用于检测艾滋病病人血清中的p24抗原.用纯化的基因工程表达的HIV-p24蛋白免疫BALB/c小鼠.取免疫小鼠的脾细胞和小鼠骨髓瘤Sp2/0细胞融合,有限稀释法克隆细胞,ELISA筛选特异性抗体.结果克隆筛选出12株细胞,初步建立了检测HIV-p24抗原的双抗体夹心酶联免疫吸附试验.本方法为监控艾滋病病毒感染的窗口期和艾滋病病人临床治疗效果提供了检测手段.

  • 标签: 抗HIV-P24单克隆抗体细胞株 重组HIV-P24蛋白 酶联免疫吸附试验 艾滋病毒
  • 简介:Hybridoma房间在抗体生产率追随者暴露显示增加到张力亢进的条件。然而,内在的机制很好没被理解。在现在的学习,我们假设激活的T房间的原子因素5(NFAT5)/tonicityenhancer绑定蛋白质(TonEBP)工作增加hybridomacells的抗体生产率。NFAT5是osmosensitive哺乳动物的抄写因素。然而,它在没在张力亢进的周围被洗的各种各样的器官的无所不在的表示建议NFAT5可以也在等渗的条件下面调整细胞生长和功能。在这研究,我们由西方的污点分析在hybridoma房间检验了表示ofNFAT5,并且发现它在张力亢进的媒介显著地增加了。为了推进,在hybridoma房间定义NFAT5的功能,RNA干扰技术习惯于down在SGB-8房间(一根hybridoma房间线)调整NFAT5的表示。在等渗的媒介,hybridoma房间的抗体生产率被NFAT5while的down规定减少细胞增殖没被影响。这里介绍的结果表明那NFAT5不仅在hybridoma房间在渗透的压力反应小径起一个重要作用而且为最佳的抗体生产率是必要的。

  • 标签: 杂交瘤细胞 单克隆抗体产率 RNA干扰 NFAT5转录因子 减量调节
  • 简介:昆虫chitinases从皮骨骼或midgut的peritrophicmetrix涉及几丁质的降级。在草之小穗migratoria,二复制Cht5s(LmCht5-1和LmCht5-2)被显示了有不同分子的特征和生物角色。探索二LmCht5s的蛋白质性质,我们heterologously在SF9房间用baculovirus表示系统表示了两酶,并且描绘运动并且净化的酶的糖类绑定性质。LmCht5-1和LmCht5-2展出了类似的pH和温度最佳。LmCht5-1有更低的K为oligomeric底层的m价值(4MU-(GlcNAc)3),和更高的K为更长的底层(CM-Chitin-RBV)的m价值与LmCht5-2相比。催化领域当模特儿的氨基酸和相同的比较介绍了类似的提姆桶结构并且区分了在二蛋白质之间的氨基酸。LmCht5-1有几丁质绑定域(CBD)紧,到胶体的几丁质的界限,而是LmCht5-2没为绑定有CBD到胶体的几丁质。我们的结果建议LmCht5-1和LmCht5-2,在催化领域的区域II有批评glutamate残余,展出了chitinolytic活动劈开聚合并且oligomeric底层。LmCht5-1对oligomeric底层举办了相对更高的活动,4MU-(GlcNAc)3,而LmCht5-2向更长的底层展出了更高的活动,CM-Chitin-RBV。这些调查结果是有用的让进一步的研究在昆虫生长和开发澄清他们的不同角色。

  • 标签: 昆虫几丁质酶 异源表达 东亚飞蝗 杆状病毒表达系统 羧甲基甲壳素 催化结构域
  • 简介:为了研究干旱胁迫下内生真菌对玉米幼苗生长的影响和筛选具有提高玉米抗旱潜能的优良菌种,在温室盆栽条件下,将分离自新疆荒漠盐生植物根系的5种内生真菌Curvulariainaequalis、Fusariumavenaceum、Neocamarosporiumsp.AS65231、PleosporalesAS29261和Ulocladiumsp.AS91282分别接种到玉米幼苗根系,进行干旱胁迫培养6周,测定苗期玉米的株高、生物量、可溶性糖含量、过氧化物酶(POD)活性和丙二醛(MDA)含量。研究结果表明:干旱胁迫下,与不接菌对照相比,接种C.inaequalis、F.avenaceum、PleosporalesAS29261和Ulocladiumsp.AS91282可显著提高玉米幼苗地下生物量(P〈0.05),而接种Neocamarosporiumsp.AS65231对其影响不显著;接种F.avenaceum和Ulocladiumsp.AS91282可极显著提高玉米根系可溶性糖含量(P〈0.01);接种C.inaequalis、PleosporalesAS29261和Ulocladiumsp.AS91282对根系POD活性影响不显著,而F.avenaceum和Neocamarosporiumsp.AS65231显著降低了根系POD活性;接种Neocamarosporiumsp.AS65231和Ulocladiumsp.AS91282显著降低根系的MDA含量(P〈0.01)。然而,与不接菌对照相比,接种5种内生真菌对玉米幼苗的株高、地上生物量和总生物量,以及叶片的可溶性糖含量、POD活性和MDA含量等均无显著影响。综合比较来看,干旱胁迫下接种内生真菌Ulocladiumsp.AS91282对促进玉米幼苗抗干旱能力优于其他4种菌。

  • 标签: 内生真菌 盐生植物 抗旱性 生物量 POD MDA
  • 简介:为了验证普通菜豆脯氨酸合成酶基因PvP5CS2在改善作物抗旱性方面的作用,构建了普通菜豆PvP5CS2基因的烟草表达载体pCAPE2-PvP5CS2,利用农杆菌将PvP5CS2导入烟草,获得15株阳性转PvP5CS2基因植株。干旱胁迫条件下,转基因烟草植株和野生型植株叶片中脯氨酸含量、叶片相对含水量和萎蔫叶片数的差异均达到极显著水平。转基因烟草的脯氨酸含量、叶片相对含水量分别是野生型的2.30倍和1.26倍,而萎蔫叶片数只相当于野生型的90%。表明超表达PvP5CS2基因的烟草植株在干旱胁迫条件下能积累较多的脯氨酸,抗旱性得到初步改善。

  • 标签: PvP5CS2 转基因烟草 抗旱
  • 简介:骨头导出髓的间充质的干细胞(MSC)是为房间移植在临床的应用程序显示出一个重要潜力的pluripotent干细胞。在现在的论文,proteomic技术被用来接近与猪的骨头髓MSC联系的蛋白质侧面并且在5-azacytidine(5-aza)的效果上调查MSC蛋白质的规定。超过1,700蛋白质种类根据胶化分析与MSC被分开。与控制MSC介绍的表达式相比,有起来调整的11个蛋白质点并且26在5-aza-treated房间的蛋白质模式下面调整。21蛋白质的一个总数被MALDI-TOF-MS分析成功地识别,在哪个之中一些有趣的蛋白质,例如高山哈B-crystallin,在A2的附属建筑,和stathmin1,被报导了通过不同发信号的小径在房间增长和区别包含。我们的数据应该为MSC区别和apoptosis的未来学习是有用的。

  • 标签: 5-氮胞苷 基因表达 骨髓干细胞 电泳实验
  • 简介:据《科学家》网站报道,从”合成基因组”到”砷基生命”,今年夺人眼球的研究论文着实不少,但最重要的论文来自对于生命分子基础的研究。近日2010年生物学各领域最重要的5篇论文排名出炉。

  • 标签: 生物学领域 出炉 研究论文 分子基础 科学家 基因组
  • 简介:目的了解实验所用常见致病真菌能否在常用医用原材料上生存及生存时间。方法选择8种常见致病真菌,活化后将它们分别接种在5种常用的医用原材料上,接种后及以后的每24h将接种有真菌的医用材料放入巯基乙酸盐液体培养基中并观察能否生存,记录存活时间。结果红色毛癣菌和须癣毛癣菌在棉布、纸板、铁皮、玻璃表面存活25~28d,在地板胶表面存活14~15d;新生隐球菌在棉布、纸板、铁皮表面存活24~27d,在玻璃和地板胶表面存活14~18d;茄病镰刀菌在上述5种材料上存活22~27d;石膏样小孢子菌在棉布、纸板、铁皮和玻璃表面存活20~27d,在地板胶表面存活8d;申克孢子丝菌在棉布、纸板、玻璃和地板胶表面存活17~24d,在铁皮表面存活10d;白念珠菌在棉布、纸板、铁皮和地板胶表面存活15~20d,在玻璃表面存活4d;犬小孢子菌在棉布、纸板、铁皮、玻璃和地板胶上存活时间分别为10d、9d、3d、2d和1d。结论实验所用各种真菌在医用原材料上都能存活,其时间长短不仅与菌种有关,还与所存在的材料有关。真菌在吸水性强、表面粗糙的材料(棉布、纸板)上的平均存活时间长于在吸水性差、表面光滑的材料(玻璃、铁皮和地板胶)。

  • 标签: 真菌 生存时间 材料
  • 简介:5R618是高抗叶锈病小麦品系。为了确定该品系所携带的抗叶锈基因,以5R618与感病小麦品种郑州5389杂交获得F1,自交获得F2分离群体以及F2∶3家系,用叶锈菌生理小种THJP对亲本、F2分离群体以及F2∶3家系进行叶锈抗性鉴定,然后进行分子标记分析。结果显示,5R618对生理小种THJP的抗病性由1对显性基因控制,该基因暂命名为Lr5R。经过亲本和抗感池间分子标记筛选以及F2∶3家系的标记检测,Lr5R定位于染色体3DL上,barc71和STS24-16是Lr5R最近的2个标记,遗传距离分别为0.9cM和2.1cM。

  • 标签: 小麦抗叶锈病基因 遗传分析 分子标记
  • 简介:在大肠杆菌中,利用新构建的含T7g-10LRBS以及λ-PR启动子的新型原核表达载体,通过表达gag-pol基因片段,获得了具有天然序列的人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)核心蛋白p24的高效表达。克隆的gag-pol基因片段在其阅读框架移位区域插入了4bp碱基,其表达的病毒蛋白酶在阅读框架上与gag一致,从而实现了对gag-pol融合蛋白的有效加工,产生成熟的核心蛋白p24及其它产物。重组p24以可溶形式存在,可以被抗p24的单克隆抗体特异识别。测定的N端8个氨基酸序列与从病毒纯化的p24完全一致。在使用硫酸铵沉淀后,采用两步离子柱层析,可将重组蛋白纯化到95%以上的纯度。结果表明,纯化的p24可以作为特异性很强的试剂而用于HIV感染的诊断及病情的预后,并可用于p24的生化及结构分析。

  • 标签: HIV-1 核心蛋白 表达 纯化 鉴定
  • 简介:目的:探讨Neu-p11对自发性高血压大鼠(SHR)血压及血清一氧化氮(NO)和内皮素-1(ET-1)含量的影响。方法:40只SHR大鼠随机分为4组(n=10):SHR模型组、Neu-p11低剂量组(5mg/kg)、Neu-p11中剂量组(15mg/kg)和Neu-p11高剂量组(50mg/kg)。另取10只WKY大鼠设为正常对照组。每日腹腔注射药物一次,连续5周,观察药物对大鼠收缩压、血清NO及ET-1含量的影响。结果:Neu-p11能有效降低自发性高血压大鼠的收缩压,Neup11低剂量组、Neu-p11中剂量组和Neu-p11高剂量组与SHR组相比具有显著性差异(P<0.05);Neu-p11能升高自发性高血压大鼠血清NO含量,降低自发性高血压大鼠血清ET-1含量,与SHR组相比,各组均有显著性差异(P<0.05)。结论:Neu-p11具有抗高血压作用,其作用可能与促进血清中的NO合成与释放以及降低血清ET-1的含量有关。

  • 标签: Neu-p11 自发性高血压大鼠 血压 NO ET-1
  • 简介:随着我国医疗水平的不断提高,我国在糖尿病与糖尿病肾病上的研究加深,对TLR4/P38Mapks信号通路与糖尿病肾病相关性的研究更进一步,笔者在前人探究结果的基础上,开展探究活动。糖尿病与糖尿病肾病患者的TLR4/P38Mapks表达都高于健康人群,因此TLR4/P38Mapks表达与糖尿病肾病患者的病情存在密切关系,且糖尿病与糖尿病肾病患者的TLR4/P38Mapks表达与尿蛋白排泄率、尿素氮之间存在正相关,而DN组TLR4/P38Mapks表达又与患者血清中的IL-6、IL-8之间也存在正相关关系。本文先是对MAPKs信号通路生化特征与糖尿病肾病的相关性进行概述,又详细阐述了糖尿病肾病与TLR4的相关性。

  • 标签: TLR4/P38Mapks 信号通路 糖尿病肾病 相关性 研究进展
  • 简介:瘢痕疙瘩是指皮肤损伤后愈合过程中胶原纤维过度增生而形成的超出原损害范围的皮肤良性肿瘤.耳垂做为好发部位.其治疗目的是消除瘢痕疙瘩,恢复耳垂的正常解剖结构,防止复发.目前有效策略为多种治疗方法联合应用,本文对其治疗现状综述如下.

  • 标签: 耳垂 瘢痕疙瘩 联合 治疗
  • 简介:目的:检测前列腺癌及癌旁正常前列腺组织中RNA结合蛋白QKI-5的表达情况并分析其临床意义。方法:收集前列腺癌及与之匹配的癌旁组织124例,通过免疫组化染色、Westernblot、实时PCR方法检测其QKI-5的表达水平,并分析QKI-5的表达与前列腺癌临床病理特征的关系。结果:前列腺癌组织中QKI-5蛋白及mRNA表达水平均明显低于癌旁正常前列腺组织,并且随着Gleason评分的增高而降低(P〈0.05)。前列腺癌组织中QKI-5的表达与其Gleason评分(r=-0.939,P〈0.05)、TNM分期(r=-0.913,P〈0.05)、血清PSA值(r=-0.743,P〈0.05)均密切相关。结论:QKI-5在前列腺癌的发生发展过程中可能起抑癌基因的作用,并可能作为前列腺癌的诊断、病情分析和预后评估的参考指标。

  • 标签: RNA结合蛋白QKI-5 前列腺癌 表达 WESTERN BLOT
  • 简介:Thenuclearmatrixattachmentregions(MARs)andthebindingnuclearmatrixproteinsinthe5'-flankingcisactingelementsofthehumanε-globingenehavebeenexamined.UsinginvitroDNA-matrixbindingassay,ithasbeenshownthatthepositivestage-specificregulatoryelement(ε-PREII,-446bp--419bp)upstreamofthisgenecouldspecificallyassociatewiththenuclearmatrixfromK562cells,indicatingthatε-PREIImaybeanerythroidspecificfacultativeMAR.IngelmobilityshiftassayandSouthwesternblottingassay,anerythroid-specificnuclearmatrixprotein(ε-NMPk)inK562cellshasbeenrevealedtobindtothispositiveregulatoryelement(ε-PREII).Furthermore,wedemonstratedthatthesilencer(-392bp--177bp)upstreamofthehumanε-globingenecouldassociatewiththenuclearmatricesfromK562,HELandRajicells.Inaddition,thenuclearmatrixproteinspreparedfromthesethreecelllinescouldalsobindtothissilencer,suggestingthatthissilencerelementmightbeaconstitutivenuclearmatrixattachmentregion(constitutiveMAR).Ourresultsdemonstratedthatthenuclearmatrixandnuclearmatrixproteinsmightplayanimportantroleintheregulationofthehumanε-globingeneexpression.

  • 标签: 核基质蛋白 K562细胞 结合区 人ε珠蛋白基因 基因表达 分子调节机制