简介：摘要目的探讨溶质载体家族39（SLC39）A14对弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）OCI-LY3细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法将人DLBCL细胞株OCI-LY3分为Vector组（瞬时转染空载对照质粒）和SLC39A14组（转染SLC39A14质粒）。采用CCK-8法检测两组OCI-LY3细胞增殖情况，Transwell法检测细胞迁移和侵袭情况，蛋白质印迹法检测OCI-LY3细胞SLC39A14蛋白表达水平以及PI3K-AKT-mTOR信号通路相关蛋白表达情况。结果与Vector组相比，第3天至第5天SLC39A14组细胞增殖能力均增加（均P<0.05）。Transwell细胞迁移实验结果显示，36 h后Vector组迁移细胞数为（64±4）个，SLC39A14组为（236±25）个，SLC39A14组细胞迁移能力增强，差异有统计学意义（t＝15.02，P<0.05）；侵袭实验结果显示，Vector组侵袭细胞数为（32±2）个，SLC39A14组为（127±17）个，SLC39A14组细胞侵袭能力增强，差异有统计学意义（t＝8.33，P<0.05）。蛋白质印迹法检测结果显示，SLC39A14组pmTOR、pAKT、pPI3K蛋白表达水平均升高。结论SLC39A14可能通过PI3K-AKT-mTOR信号通路参与DLBCL发生、发展。

简介：摘要目的探讨抑制星形胶质细胞丝裂原活化蛋白激酶14（MAPK14）表达对减轻谷氨酸兴奋性毒性进而发挥神经元保护的作用机制。方法慢病毒介导MAPK14干扰载体由上海吉凯基因化学技术有限公司合成，星形胶质细胞从出生48 h的SD大鼠获取，通过慢病毒介导转染体外培养的星形胶质细胞，按照随机数字表法分为三组：（1）未转染组，为正常星形胶质细胞，细胞加入杜氏培养液（DMEM）进行培养；（2）阴性对照组，转染MAPK14空载干扰载体；（3）慢病毒转染组，转染MAPK14干扰载体。转染72 h后星形胶质细胞与神经元共培养48 h，随后构建谷氨酸兴奋性毒性环境作用2 h。检测指标包括：慢病毒载体转染星形胶质细胞最佳转染指数（MOI）；rPCR检测转染72 h后MAPK14和谷氨酸转运蛋白1（GLT-1）mRNA表达水平；Western blot检测转染72 h后MAPK14及GLT-1蛋白表达水平；分光光度法和流式细胞术分别检测谷氨酸兴奋性毒性环境作用2 h后神经元乳酸脱氢酶（LDH）水平和神经元死亡率。结果（1）慢病毒转染星形胶质细胞最佳MOI值为30，转染后的星形胶质细胞生长良好。（2）转染72 h后，与未转染组（0.013 1±0.001 1）和阴性对照组（0.013 9±0.001 0）比较，慢病毒转染组MAPK14 mRNA表达水平（0.005 7±0.000 6）显著下降（P<0.01）；与未转染组（0.008 7±0.000 3）和阴性对照组（0.008 9±0.001 1）比较，慢病毒转染组GLT-1 mRNA表达水平（0.009 1±0.001 2）未见明显变化（P>0.05）。（3）转染72 h后，与未转染组（0.61±0.05）和阴性对照组（0.63±0.01）比较，慢病毒转染组MAPK14蛋白表达水平（0.29±0.04）显著下降（P<0.01）；与未转染组（0.20±0.03）和阴性对照组（0.23±0.09）比较，慢病毒转染组GLT-1蛋白表达水平（0.73±0.06）显著上升（P<0.01）。（4）谷氨酸兴奋毒性作用2 h后，慢病毒转染组LDH水平［（109.67±2.40）U/L］较未转染组［（141.52±3.88）U/L］和阴性对照组［（141.29±3.61）U/L］显著降低（P<0.01），慢病毒转染组神经元死亡率［（38.72±0.26）%］较未转染组［（52.94±1.36）%］和阴性对照组［（54.30±1.23）%］显著降低（P<0.01）。结论慢病毒介导MAPK14干扰载体转染星形胶质细胞后能上调GLT-1表达水平、促进谷氨酸重摄取，从而减轻神经元谷氨酸兴奋性毒性，可为进一步利用星形胶质细胞基因调节减轻创伤性脑损伤后谷氨酸兴奋性毒性神经元损伤提供新的实验依据。

简介：摘要目的探讨Pokemon蛋白与P14ARF-MDM2-p53通路蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)发病中的作用。方法纳入2015年10月至2016年10月河北医科大学第一医院行手术治疗的35例NSCLC患者为NSCLC组。同时，将癌旁正常支气管断端组织29例及肺炎组织25例分别作为支气管对照组和肺泡对照组。采用免疫组织化学法检测3组中Pokemon、P14ARF、MDM2和p53蛋白的表达情况，分析其与临床病理资料的关系及各蛋白间的相关性。结果Pokemon、MDM2、p53蛋白在NSCLC组中的表达均显著高于支气管对照组和肺泡对照组(P值均<0.01)，P14ARF蛋白在NSCLC组中的表达显著低于支气管对照组和肺泡对照组(χ2＝25.39，P<0.01)。p53和MDM2蛋白的表达与NSCLC的分化程度相关(P＝0.02、0.03)。在NSCLC组中，Pokemon与P14ARF蛋白表达呈负相关性(r＝－0.58，P<0.05)，P14ARF与MDM2蛋白表达呈负相关性(r＝－0.51，P<0.05)，MDM2与p53蛋白的表达呈正相关性(r＝0.86，P<0.05)。结论Pokemon通过P14ARF-MDM2-p53通路在NSCLC发病过程中发挥癌基因作用。

简介：摘要目的建立猪带绦虫（Ts）14-3-3.2原核表达系统，并观察Ts14-3-3.2蛋白在Ts成虫和囊尾蚴中的表达情况。方法在遵义医科大学寄生虫学教研室前期获得Ts14-3-3.2基因序列的基础上，采用基于PCR的精确合成（PAS）方法全基因合成Ts14-3-3.2基因，经限制性内切酶NdeⅠ和XbaⅠ双酶切后连接质粒pCzn1，构建重组质粒pCzn1-Ts14-3-3.2。将重组质粒转化至大肠埃希菌ArcticExpress感受态细胞中诱导表达，采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和考马斯亮蓝染色分析和鉴定表达产物，通过镍（Ni）柱亲和纯化获得纯化Ts14-3-3.2重组蛋白。采用该纯化重组蛋白免疫新西兰大白兔，制备Ts14-3-3.2重组蛋白多克隆抗体，采用免疫印迹法（Western blot）检测Ts14-3-3.2蛋白在Ts成虫和囊尾蚴中的表达情况。结果成功构建重组质粒pCzn1-Ts14-3-3.2，诱导表达后菌体上清液和沉淀均在相对分子质量约29.31 × 103处出现Ts14-3-3.2目的蛋白条带。纯化后带有His标签的Ts14-3-3.2重组蛋白能被抗His单克隆抗体识别，获得效价为1∶512 000的Ts14-3-3.2重组蛋白多克隆抗体。Western blot结果显示，Ts14-3-3.2蛋白在Ts成虫和囊尾蚴中均有表达。结论成功建立Ts14-3-3.2原核表达系统，获得了高纯度、高效价的Ts14-3-3.2重组蛋白多克隆抗体。Ts14-3-3.2蛋白在Ts成虫和囊尾蚴阶段均有表达。

简介：摘要目的通过生物信息学分析建立结直肠癌竞争性内源RNA(ceRNA)网络，对筛选出的ceRNA C14orf132-GAS1的表达及意义进行探讨。方法基于肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库对结直肠癌数据集进行分析，筛选差异表达的长非编码RNA(lncRNA)和mRNA，采用倍数法(fold change)和t检验识别差异表达基因，校正后P<0.05且|log2 fold change|>1的基因被鉴定为差异表达基因。采用超几何检验方法筛选出lncRNA-mRNA形成的ceRNA对，并对可能的靶微小RNA(miRNA)进行筛选。从TCGA数据库下载结直肠癌临床数据集。使用R包的"survival"和"survminer"进行生存分析。选取30例新鲜的结直肠癌及癌旁组织，应用荧光实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)对筛选出的ceRNA对和miRNA进行检测，并对这些分子间的相关关系进行Pearson相关分析。结果肿瘤组织中上调的mRNA数量为1 731，下调的为3 691；上调的lncRNA为1 126，下调的为2 105；上调的miRNA为14，下调的为190。经过筛选，确定C14orf132-miR-33a-GAS1轴可能为结直肠癌进展中有重要意义的ceRNA。生物信息学结果显示，C14orf132-GAS1作为ceRNA对，在肿瘤中表达水平(13.37±1.76、14.45±4.55)低于正常组织(15.71±0.62、16.00±2.42，t＝-9.44、-2.40，P<0.05)；miR-33a在肿瘤中表达水平(5.53±1.84)高于正常组织(3.25±0.77，t＝4.10，P<0.01)。组织验证结果与生物信息学结果符合。结论由C14orf132-miR-33a-GAS1轴形成的ceRNA机制可能在结直肠癌进展过程中发挥重要作用。

简介：摘要目的研究甲基转移酶样蛋白14（METTL14）在卵巢上皮性癌（卵巢癌）组织中的表达及其临床意义，探讨上调和下调METTL14表达对卵巢癌细胞系A2780、SKOV3细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法（1）组织标本检测：选取2019年12月—2020年11月在广西医科大学附属肿瘤医院行手术治疗的20例卵巢癌患者的新鲜癌组织标本，收集同期因子宫肌瘤行子宫及双侧附件切除术的15例患者的新鲜正常卵巢组织标本作为对照，免疫组化法检测卵巢癌与正常卵巢组织中METTL14蛋白表达的差异。另收集2014年1月—2019年10月在广西医科大学附属肿瘤医院行手术治疗的121例卵巢癌患者的癌组织蜡块，免疫组化法检测卵巢癌组织中METTL14蛋白的表达，并分析METTL14蛋白表达与卵巢癌患者临床病理特征及预后的关系。（2）细胞实验：分别使用慢病毒载体、小分子干扰RNA（siRNA）技术，构建上调、下调METTL14表达的卵巢癌A2780、SKOV3细胞系，并采用逆转录（RT）-实时荧光定量PCR（qPCR）技术和蛋白印迹（western blot）法分别验证其METTL14 mRNA和蛋白的表达。后续的细胞实验分为5组，LV-METTL14组（转染慢病毒载体上调METTL14表达）及其对照LV-NC组（转染阴性对照慢病毒空载体），si-METTL14组（转染si-METTL14-2下调METTL14表达）及其对照si-NC组（转染阴性对照siRNA），以及空白组（未转染）。采用液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）法检测各组卵巢癌细胞中N-6甲基腺嘌呤（m6A）修饰水平的变化，分别采用活细胞计数（CCK-8）法、划痕实验以及穿膜（transwell）小室侵袭和迁移实验检测各组卵巢癌细胞增殖、愈合以及侵袭和迁移能力的变化。结果（1）20份卵巢癌组织中METTL14蛋白的免疫组化总评分为（6.2±3.7）分，显著高于15份正常卵巢组织［（3.3±2.5）分；t=-2.64，P=0.012］。121例卵巢癌患者中，METTL14蛋白高表达（免疫组化总评分≥6分）69例（57.0%，69/121），METTL14蛋白低表达（免疫组化总评分<6分）52例（43.0%，52/121）；METTL14蛋白高表达与METTL14蛋白低表达患者比较，手术病理分期更晚，淋巴结转移率、腹腔转移率、腹水发生率更高，分别比较，差异均有统计学意义（P均<0.05）；METTL14蛋白高表达患者的总生存率显著低于METTL14蛋白低表达者（P=0.009）。（2）LC-MS/MS法分析显示，LV-METTL14组A2780和SKOV3细胞中m6A的表达水平分别为0.213±0.024、0.181±0.018，均显著高于LV-NC组（分别为0.109±0.022、0.128±0.020；P均<0.05）；而si-METTL14组A2780和SKOV3细胞中m6A的表达水平分别为0.063±0.012、0.069±0.015，均显著低于si-NC组（分别为0.108±0.014、0.121±0.014；P均<0.05）。CCK-8法检测显示，si-METTL14组SKOV3细胞在培养在36、48、60 h时的吸光度（A）值均显著低于si-NC组（P均<0.05）；LV-METTL14组A2780和SKOV3细胞在培养48、60 h时的A值均显著高于LV-NC组（P均<0.01）。划痕实验显示，培养24 h，si-METTL14组A2780和SKOV3细胞的迁移率低于si-NC组，LV-METTL14组A2780和SKOV3细胞的迁移率高于LV-NC组，分别比较，差异均有统计学意义（P均<0.01）。在transwell小室侵袭、迁移实验中，培养24 h，si-METTL14组A2780和SKOV3细胞的穿膜细胞数均少于si-NC组，LV-METTL14组A2780和SKOV3细胞的穿膜细胞数均多于LV-NC组，分别比较，差异均有统计学意义（P均<0.01）。结论METTL14蛋白高表达的卵巢癌患者的预后更差。上调METTL14表达可提高卵巢癌细胞m6A修饰水平，促进卵巢癌细胞的增殖、侵袭和迁移；反之，下调METTL14表达则降低卵巢癌细胞m6A修饰水平，抑制卵巢癌细胞的增殖、侵袭和迁移。

简介：摘要目的探讨食管癌5-氟尿嘧啶(5-Fu)耐药细胞外泌体来源的长链非编码RNA(lncRNA)小核仁RNA宿主基因14(SNHG14)在食管癌耐药中的作用。方法实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测郑州大学第一附属医院30例食管癌患者和30例健康对照血浆中lncRNA SNHG14的表达。浓度梯度法构建食管癌5-Fu耐药细胞3组EC9706/5-Fu和3组KYSE150/5-Fu，分离并收集各组食管癌细胞外泌体，RT-qPCR检测SNHG14的表达。分别将3组食管癌细胞EC9706和KYSE150与耐药细胞来源外泌体共培养，细胞计数试剂盒(CCK-8)检测5-Fu作用下细胞活性。敲低3组EC9706/5-Fu细胞中的SNHG14后分离外泌体，通过CCK-8、Transwell、Tunnel实验检测该外泌体对EC9706细胞药物敏感度、迁移和凋亡的影响。采用t检验或单因素方差分析(One-Way ANOVA)进行统计分析。结果食管癌患者血浆中lncRNA SNHG14的表达高于健康对照组(3.30±0.20比1.33±0.09，t＝49.910，P<0.001)，耐药食管癌细胞(EC9706/5-Fu和KYSE150/5-Fu)外泌体中lncRNA SNHG14的表达高于对照食管癌细胞(2.55±0.42比0.99±0.06，t＝6.347；1.70±0.07比0.99±0.11，t＝9.191，P<0.05)。在5-Fu作用下，EC9706/5-Fu-exo和KYSE150/5-Fu-exo组的细胞活性分别高于EC9706-exo和KYSE150-exo组[(165.23±5.97)%比(103.90±10.99)%，t＝8.494；(139.35±3.82)%比(99.99±5.67)%，t＝9.953，P<0.05]。EC9706/5-Fu-exo-si-SNHG14组细胞凋亡高于EC9706/5-Fu-exo组[(9.03±0.63)%比(5.53±0.73)%，F＝40.290]；细胞侵袭低于EC9706/5-Fu-exo组[(117.92±15.54)%比(339.52±27.43)%，F＝152.000]；5-Fu作用下细胞活性低于EC9706/5-Fu-exo组[(134.69±6.01)%比(160.38±4.69)%，F＝64.090]；细胞中JAK和p-STAT3的蛋白表达低于EC9706/5-Fu-exo组(0.86±0.07比1.87±0.10，F＝363.100；0.96±0.08比1.83±0.06，F＝388.700)，差异有统计学意义(P<0.001)。结论食管癌耐药细胞外泌体来源lncRNA SNHG14能够通过激活JAK/STAT3通路提高食管癌对5-Fu的药物耐受。

简介：摘要目的比较检测幽门螺杆菌（Hp）感染时14C尿素呼气试验（14C-UBT）法和胃镜病理活检组织的免疫组织化学（IHC）法差异，同时统计新疆地区Hp感染率并分析相关因素。方法纳入行IHC和14C-UBT法检测Hp感染患者共5 747例；筛选其中“同时”（两种检测间隔<1周，取材包含胃窦）行IHC检测及14C-UBT检测的病例共3 944例，精确比较胃镜病理组织IHC染色及14C-UBT差异；联合两种方法统计5 747例患者Hp感染总体阳性率，统计学分析与常见临床病理因素的相关性。结果同时行14C-UBT及IHC检测病例中14C-UBT检测灵敏度为94.9%，IHC检测灵敏度65.1%，差异有统计学意义（P<0.01）。联合两种检测方法统计，5 747例患者Hp感染总阳性率48.6%。不同性别、年龄组、民族及地域差异均有统计学意义（均P<0.01）；性别、年龄完全匹配的汉/维病例（555对）阳性率分别为41.4%及73.3%，差异有统计学意义（P<0.01）。结论14C-UBT法灵敏度显著高于IHC法，但也存在漏诊，联合应用有助于提高Hp感染检出率。新疆Hp总感染率高于既往报道，民族差异是最主要因素，防控重点为维吾尔族群众尤其是年轻人。

简介：摘要目的探讨基于维奈托克的治疗方案对t（11；14）复发难治多发性骨髓瘤（RRMM）患者的治疗效果。方法回顾性分析海军军医大学长征医院2019年6月收治的1例接受基于维奈托克治疗方案的t（11；14）RRMM患者资料，并进行相关文献复习。结果该t（11；14）RRMM患者经三线治疗进展后，予以选择性bcl-2抑制剂维奈托克联合达雷妥尤单抗、地塞米松治疗，疾病达到部分缓解，且一度血象恢复，美国东部肿瘤协作组（ECOG）体能状态评分由3分下降至1分，生命质量明显改善。结论t（11；14）RRMM患者可从基于维奈托克的治疗中获益，未来尚需对维奈托克治疗多发性骨髓瘤的安全性、敏感性等进行深入探索。

简介：摘要目的研究靶向CD19的嵌合抗原受体T细胞（CAR-T细胞）治疗复发难治Ph染色体阳性急性B淋巴细胞白血病（R/R Ph+ B-ALL）的安全性及有效性。方法对2016年11月至2019年4月采用CD19 CAR-T细胞治疗的14例R/R Ph+ B-ALL患者的临床资料进行回顾性分析。结果14例患者中，男7例，女7例，中位年龄33（7~66）岁。输注CAR-T细胞后第28天近期疗效：总反应率（ORR）为100.0%（14/14），其中完全缓解（CR）率为92.9%（13/14）；部分缓解（PR）率为7.1%（1/14）。CAR-T细胞治疗后有12例（85.7%）发生细胞因子释放综合征（CRS），其中1级1例、2级4例、3级6例、4级1例；1例（例3）发生CAR-T细胞相关脑病综合征（CRES）；全部14例患者均有Ⅲ~Ⅳ级血液学不良反应；13例CR患者均发生B细胞发育不全。上述不良反应均可控。中位随访441（182~923）d，中位总生存期、无进展生存期分别515（95% CI 287~743）d、207（95% CI 123~301）d。结论CD19 CAR-T细胞治疗复发难治性Ph+ B-ALL安全有效，短期疗效显著，长期疗效有待进一步提高。

简介：摘要目的探索直接抗病毒药(DAAs)对慢性丙型肝炎患者外周血单个核细胞频率及其活化因子sCD14s、CD163的影响。方法收集初治慢性丙型肝炎患者15例，健康对照者10名资料；慢性丙型肝炎患者给予DAAs治疗12周，分别在第0、4、12周收取血标本，健康对照者血标本作为对照。流式细胞术检测外周血经典型CD14++CD16-单个核细胞和促炎型CD14+CD16+单个核细胞频率，用酶联免疫吸附法检测血清sCD14s、sCD163。计量资料两组间比较采用t检验，多组间比较先行方差分析，进一步两两比较，用LSD-t检验。结果DAAs治疗前外周血CD14+CD16+单个核细胞频率(18.49%±1.54%比10.65%±0.83%)、血清sCD14s[ (64 407.38±5 778.49）pg/ml比（28 370.76±2 357.68）pg/ml]和sCD163[（22 853.80±4 137.61）pg/ml比（2 934.41±223.31）pg/ml）]均高于健康对照者（P < 0.05），而外周血CD14++CD16-单个核细胞频率则低于健康对照者(59.14%±0.54%比72.75%±1.31%，P < 0.01)。DAAs治疗过程中CD14+CD16+单个核细胞频率、血清sCD14和sCD163均显著下降，治疗12周后CD14+CD16+单个核细胞降至接近正常水平（12.42%±1.60%比10.65%±0.83%, P > 0.05)，血清sCD14和sCD163仍高于健康对照者[sCD14：（44 390.06±3 330.17） pg/ml比（28 370.76±2 357.68） pg/ml, P < 0.01；sCD163:（11 494.79±1 836.97）pg/ml比（2 934.41±223.31） pg/ml，P < 0.01]；而CD14++CD16-单个核细胞频率DAAs治疗过程中逐渐升高，并在治疗12周后接近健康对照水平，两组差异无统计学意义(71.54%±2.99%比72.75%±1.31%，P > 0.05)。结论DAAs治疗可降低慢性丙型肝炎患者外周血单个核细胞的活化。

简介：摘要目的观察chr14∶101402109-101464448C在胰腺癌组织、血清中的表达，分析其与患者临床病理特征间的相关性，观察其对胰腺癌细胞增殖和侵袭的影响。方法实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测60例胰腺癌组织及血清中chr14∶101402109-101464448C表达，LSD-t检验分析其表达差异，χ2检验分析其与患者临床病理因素间的相关性。计算chr14∶101402109-101464448C诊断胰腺癌的敏感性、特异性和准确率。受试者工作特征(ROC)曲线分析其作为胰腺癌诊断分子标志物的效能。RT-qPCR法检测胰腺癌细胞株(BxPC-3、Capan-1、PANC-1、AsPC-1、HPAC)与正常胰腺导管上皮细胞株HPDE中chr14∶101402109-101464448C的表达，单因素方差分析其表达差异，分别构建chr14∶101402109-101464448C过表达组、对照组(pEX-NC组)的PANC-1细胞株及敲减组、对照组(si-NC组)的BxPC-3细胞株，RT-qPCR检测转染情况；噻唑蓝(MTT)法、平板克隆实验检测各细胞增殖及克隆形成；细胞划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移侵袭能力，采用LSD-t检验或秩和检验进行统计分析。结果chr14∶101402109-101464448C在胰腺癌组织及血清中表达水平分别高于癌旁正常组织及健康者血清(12.88±0.29比1.01±0.20，9.79±0.11比0.99±0.11)，差异有统计学意义(t组织＝27.38，t血清＝64.84，均P<0.05)，其表达与患者年龄、性别、病理学类型、肿瘤部位无明显相关(χ年龄2＝0.221，χ性别2＝0.009，χ病理类型2＝0.044，χ肿瘤部位2＝0.192，均P>0.05)，但与肿瘤大小、CA19-9水平、肿瘤分化程度、TNM分期及淋巴结转移显著相关(χ肿瘤大小2＝4.706，χCA19-92＝9.706，χ分化程度2＝6.899，χ淋巴结转移2＝4.252，均P<0.05)。chr14∶101402109-101464448C检测胰腺癌的敏感度、特异性和准确率分别为78.3%(47/60)、70.0%(42/60)及81.7%(49/60)，均高于CA19-9(均P<0.05)，其作为诊断胰腺癌分子生物标志物的ROC曲线下面积为0.939[95%可信区间(CI)：0.893~0.985，P<0.01]。各胰腺癌细胞株中chr14∶101402109-101464448C表达水平均明显高于HPDE细胞株(5.97±0.12、5.77±0.20、5.08±0.14、5.71±0.09、5.70±0.10比1.00±0.06，FBxPC-3＝3.009，FCapan-1＝7.786，FPANC-1＝4.115，FAsPC-1＝1.072，FHPAC＝2.566，均P<0.05)。成功构建过表达的PANC-1细胞株(pEX-chr14∶101402109-101464448C)及敲减表达的BxPC-3细胞株(si-chr14∶101402109-101464448C)，前者的细胞增殖、克隆、侵袭及迁移能力均显著高于pEX-NC组(均P<0.05)，而后者却较si-NC组均显著降低(均P<0.05)。结论chr14∶101402109-101464448C在胰腺癌中高表达，且与患者临床病理特征相关，沉默chr14∶101402109-101464448C可抑制胰腺癌细胞增殖及侵袭转移。

简介：摘要根治性胃癌切除术联合D2淋巴结清扫术，作为胃癌患者的标准术式在国内外各大医疗中心已广泛开展。然而对于淋巴结的具体清扫范围，至今仍存在争议。在最新版日本胃癌治疗指南中，第14v组淋巴结（沿肠系膜上静脉根部）再次被定义为区域性淋巴结，并且明确了远端胃癌出现幽门下区域淋巴结（第6组）转移，建议行D2+肠系膜上静脉（第14v组）淋巴结清扫。为了探讨第6组和第14v组淋巴结在胃癌根治术中清扫的相关性和临床意义，本文通过国内外文献复习发现，第6组淋巴结转移与第14v组淋巴结转移有关；第6组淋巴结状态是第14v组淋巴结阴性状态和假阴性率的有效预测因素；对于第14v组淋巴结阴性、而第6组阳性的胃癌患者，第14v组的清扫可能也有一定的意义。根治性胃切除术中，增加第14v组淋巴结清扫是安全的，但重要的是，要区分可以从第14v组淋巴结清扫中受益的患者人群。我国天津医科大学肿瘤医院梁寒教授目前牵头的一项关于国内多中心、大样本、前瞻性的临床试验（NCT02272894），有望为第14v组淋巴结清扫的临床意义提供更高级别的证据。

简介：AbstractBackground:Developing effective spinal cord repair strategies for spinal cord injury (SCI) is of great importance. Emerging evidence suggests that microRNAs (miRNAs) are closely linked to SCI recovery. This study aimed to investigate the function of miR-34c in the neuronal recovery in rats with SCI.Methods:A rat model with SCI was established. Differentially expressed miRNAs were identified by a microarray analysis. MiR-34c expression in rats was measured by reverse transcription quantitative polymerase chain reaction. Altered expression of miR-34c or C-X-C motif ligand 14 (CXCL14) was introduced in SCI rats to measure their roles in neuronal recovery. Western blot analysis was performed to determine the phosphorylation of Janus kinase 2 (JAK2) and signal transducer and activator of transcription-3 (STAT3). Neuronal apoptosis in rat spinal cord tissues was detected. The concentrations of SCI recovery-related proteins thyrotropin releasing hormone (TRH), prostacyclin (PGI2), and ganglioside (GM) were evaluated by enzyme-linked immunosorbent assay. Data were analyzed using a t-test with a one-way or two-way analysis of variance.Results:Rats with SCI presented decreased grip strength (112.03 ± 10.64 vs. 17.32 ± 1.49 g, P < 0.01), decreased miR-34c expression (7 days: 3.78 ± 0.44 vs. 0.95 ± 0.10, P < 0.05), and increased CXCL14 expression (7 days: 0.61 ± 0.06 vs. 2.91 ± 0.27, P < 0.01). MiR-34c was found to directly bind to CXCL14. Overexpression of miR-34c increased grip strength (11.23 ± 1.08 vs. 31.26 ± 2.99 g, P < 0.01) and reduced neuronal apoptosis in spinal cord tissues (53.61% ± 6.07% vs. 24.59% ± 3.32%, P < 0.01), and silencing of CXCL14 also increased the grip strength (12.76 ± 1.13 vs. 29.77 ± 2.75 g, P < 0.01) and reduced apoptosis in spinal cord tissues (55.74% ± 6.24% vs. 26.75% ± 2.84%, P < 0.01). In addition, miR-34c upregulation or CXCL14 downregulation increased the concentrations of TRH, PGI2, and GM, and reduced phosphorylation of JAK2 and STAT3 in rats with SCI (all P < 0.01).Conclusion:The study provided evidence that miR-34c could promote neuronal recovery in rats with SCI through inhibiting CXCL14 expression and inactivating the JAK2/STAT3 pathway. This study may offer new insights into SCI treatment.

简介：摘要目的探讨非衍生化串联质谱法（MS/MS）中十四烯酰基肉碱（C14∶1）/十二烯酰基肉碱（C12∶1）在新生儿筛查极长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症（VLCADD）中的应用价值，并探索筛查VLCADD的最佳指标组合方案。方法回顾性分析2014年1月至2021年12月南京市新生儿疾病筛查中心和苏州市新生儿疾病筛查中心17例MS/MS筛查发现并经酰基辅酶A脱氢酶极长链（ACADVL）基因确诊的VLCADD患儿和423 507名经MS/MS筛查正常的新生儿资料。采用受试者工作特征（ROC）曲线分别确定所有新生儿组、足月新生儿组和正常出生体重新生儿组C14∶1/C12∶1筛查VLCADD的截断值。同时将不同指标单独或联合组成5个结果判读方案，分别为方案1（C14∶1/C12∶1）、方案2（C14∶1）、方案3（C14∶1+C14∶1/C2+C14∶1/C16）、方案4（C14∶1/C12∶1+C14∶1）和方案5（C14∶1/C12∶1+C14∶1+C14∶1/C2+C14∶1/C16），并计算各方案的检出率、假阳性率、阳性预测值，采用χ²检验比较其筛查效率。结果所有新生儿组、足月新生儿组和正常出生体重新生儿组C14∶1/C12∶1的截断值均为2.80。5个判读方案筛查VLCADD的检出率均为17/17。其中方案1假阳性率［26.15‰（11 075/423 524）］最高，阳性预测值［0.15%（17/11 092）］最低。方案4（方案5）假阳性率最低，为［0.02‰（10/423 524）］，阳性预测值最高，为［62.96%（17/27）］，与方案1、方案2、方案3比较，假阳性率（χ²值分别为302.30、11 191.50和32.06）和阳性预测值（χ²值分别为102.51、3 485.61和13.83）差异均有统计学意义（P均<0.001）。结论C14∶1/C12∶1是新生儿筛查VLCADD有效的辅助判读指标，推荐C14∶1/C12∶1+C14∶1为非衍生化串联质谱法判读VLCADD的最佳筛查指标组合。

简介：摘要目的评估厦门市实施入境人员“14+7隔离”与“核酸+总抗体筛查”策略（联合筛查策略）对发现境外输入性新型冠状病毒（新冠病毒）感染者的作用。方法研究对象为2020年3月17日至12月31日厦门市入境人员、7月18日至12月31日外地隔离不足21 d的入境人员。收集和分析实施联合筛查策略后的境外输入性新型冠状病毒感染者的发现时间、路径和检测情况。结果在174 628名入境人员和943名外地入境人员中，共发现304例境外输入性新冠病毒感染者，其中163例（53.6%）为总抗体阳性后经多次及多部位核酸检测确诊，27例（8.9%）在入境14 d后首次核酸阳性，136例入境“14 d”隔离期间首次核酸检测阳性，仅8例在总抗体阳性后首次核酸检测阳性，128例在平均2.3次（最高6次）核酸检测阴性后转为阳性。联合筛查策略比“14 d隔离+核酸筛查”策略估算多检出155例，占入境感染者总数的51.0%，提高检出率约1倍。截至2021年2月26日尚未发现厦门市入境人员引起的续发感染。结论厦门市对入境人员实施联合筛查策略，可有效筛查入境14 d后转为核酸阳性的新冠病毒感染者，与“14 d隔离+核酸筛查”策略相比，有效提高检出率，降低境外输入引起续发传播的风险。

简介：摘要目的探讨血浆可溶性白细胞分化抗原14亚型(soluble leukocyte differentiation antigen 14 subtype，又称Presepsin)联合中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase associated lipocalin，NGAL)对儿童脓毒症早期诊断和预后预测的价值。方法选取2017年6月至2020年10月我院收治的94例脓毒症患儿，41例发生休克为脓毒性休克组，53例未发生休克为脓毒症组。选择同期本院体检健康儿童41例为对照组。检测3组血浆Presepsin、NGAL、降钙素原(procalcitonin，PCT)和C-反应蛋白(C-reactive protein，CRP)水平。记录脓毒症患儿小儿危重病例评分、序贯器官衰竭(sequential organ failure，SOFA)评分。根据患儿入院28 d病死率分为存活组75例，死亡组19例。比较存活组和死亡组血浆Presepsin、NGAL、PCT和CRP水平及小儿危重病例评分、SOFA评分。采用Pearson检验和受试者工作特征曲线分析血浆Presepsin、NGAL与小儿危重病例评分、SOFA评分的相关性以及对儿童脓毒症早期诊断、预后预测的价值。结果脓毒症组和脓毒性休克组血浆Presepsin、NGAL、PCT和CRP水平均高于对照组，且脓毒性休克组均高于脓毒症组(P<0.05)；死亡组血浆Presepsin、NGAL、PCT、CRP水平和SOFA评分均高于存活组，小儿危重病例评分低于存活组(P<0.05)。血浆Presepsin、NGAL与小儿危重病例评分均呈负相关(r＝-0.676，P<0.001；r＝-0.664，P<0.001)，与SOFA评分均呈正相关(r＝0.781，P<0.001；r＝0.749，P<0.001)。当血浆Presepsin水平为468.91 ng/L时，诊断脓毒症的敏感度为85.6%，特异度为77.5%。当血浆NGAL水平为38.94 ng/mL时，诊断脓毒症的敏感度为82.4%，特异度为65.8%。血浆Presepsin联合NGAL早期诊断儿童脓毒症的曲线下面积(area under curve，AUC)为0.912(95%CI 0.865～0.959)，高于血浆Presepsin的AUC 0.857(95%CI 0.785～0.928)和NGAL的AUC 0.761(95%CI 0.680～0.841)。当血浆Presepsin水平为816.92 ng/L时，预测脓毒症预后的敏感度为73.2%，特异度为76.1%。当血浆NGAL水平为51.27 ng/mL时，预测脓毒症预后的敏感度为67.4%，特异度为68.0%。血浆Presepsin联合NGAL预测儿童脓毒症预后的AUC为0.891(95%CI 0.816～0.966)，高于血浆Presepsin的AUC 0.795(95%CI 0.698～0.892)和NGAL的AUC 0.714(95%CI 0.577～0.851)。结论临床通过检测血浆Presepsin和NGAL水平有助于早期诊断儿童脓毒症和判断病情严重程度，对评价患儿预后有指导意义，有利于改善患儿预后。

简介：摘要目的探讨C-Fos与丝裂原活化蛋白激酶14（MAPK14）相互作用参与调控类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞（RA-FLS）增殖、凋亡的机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链式反应PCR（RT-qPCR）、蛋白质印迹法检测RA-FLS和正常成纤维样滑膜细胞（FLS）细胞C-Fos mRNA和蛋白表达水平。将RA-FLS细胞分为C-Fos过表达组（转染pcDNA3.1-Myc-C-Fos质粒）、过表达对照组（转染pcDNA3.1-Myc空质粒）、C-Fos沉默组（转染siRNA-C-Fos）、沉默对照组（转染siRNA-NC）和空白对照组（未加任何处理）。细胞计数试剂（CCK-8）检测各组细胞增殖能力，流式细胞实验检测各组细胞凋亡的变化，蛋白质印迹法检测各组细胞C-Fos、MAPK14、p-MAPK14、ki-67、Bax蛋白表达水平。间接免疫荧光实验检测C-Fos和MAPK14在细胞中的定位关系。免疫共沉淀方法检测C-Fos-MAPK14的相互作用关系。采用GraphPad Prism 5统计学软件进行数据分析，正态分布的数据以±s表示，2组间比较采用独立样本t检验；多组比较采用应采用方差分析，进一步两两比较采用LSD-t检验。结果RA-FLS细胞中C-Fos mRNA（5.37±0.91）相对表达量明显高于FLS细胞（1.46±0.32）（t=9.94，P<0.001）。C-Fos在RA-FLS蛋白水平（1.12±0.15）均显著高于FLS（0.81±0.07）（t=3.18，P=0.017）。与空白对照组和过表达对照组相比，过表达C-Fos可显著促进RA-FLS细胞增殖，抑制细胞凋亡率，上调细胞p-MAPK14、ki-67蛋白水平，下调细胞Bax蛋白水平（均P<0.05）；与空白对照组和沉默对照组相比，沉默C-Fos可显著抑制RA-FLS细胞的增殖，增加细胞凋亡率，下调细胞p-MAPK14、ki-67蛋白水平，上调细胞Bax蛋白表达水平（均P<0.05）。间接免疫荧光实验结果表明C-Fos与MAPK14均可在RA-FLS细胞核中表达，免疫共沉淀实验验证C-Fos与MAPK14蛋白具有相互作用。结论C-Fos与MAPK14相互作用促进磷酸化MAPK14蛋白表达，从而促进RA-FLS增殖，并抑制凋亡。

简介：摘要目的研究8岁、11岁和14岁受试者按性别和年龄划分的智能手机和平板电脑使用与客观测量的体育锻炼(PA)之间的相关性。方法我们从瑞典东南部三个中产阶级社区的六所学校招募了549名儿童和青少年(264名男孩)。使用密封式计步器客观测量每天的步数，每日填写一份关于智能手机和平板电脑使用情况的简短问卷。研究智能手机和平板电脑每日使用的平均分钟数与每日平均步数之间的相关性以及低使用者与高使用者之间的差异。结果总体来看，每天的步数与智能手机和平板电脑使用量呈一定的负相关(r＝－0.329，P<0.001)，但男孩(r＝－0.340，P<0.001)低于女孩(r＝－0.401，P<0.001)。当进一步按性别和年龄分层时，这种相关性仅存在于14岁的女孩(r＝－0.385，P<0.001)，且仅在这一组中，低使用者和高使用者之间存在差异(P＝0.005)。结论每天步数与智能手机和平板电脑使用量呈一定的负相关。当按性别和年龄组分层时，这种相关性只在14岁的女孩中观察到。研究结果可能针对未来青春期女孩的体育锻炼。

简介：摘要目的探讨血浆可溶性白细胞分化抗原14亚型(soluble leukocyte differentiation antigen 14 subtype，又称Presepsin)联合中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase associated lipocalin，NGAL)对儿童脓毒症早期诊断和预后预测的价值。方法选取2017年6月至2020年10月我院收治的94例脓毒症患儿，41例发生休克为脓毒性休克组，53例未发生休克为脓毒症组。选择同期本院体检健康儿童41例为对照组。检测3组血浆Presepsin、NGAL、降钙素原(procalcitonin，PCT)和C-反应蛋白(C-reactive protein，CRP)水平。记录脓毒症患儿小儿危重病例评分、序贯器官衰竭(sequential organ failure，SOFA)评分。根据患儿入院28 d病死率分为存活组75例，死亡组19例。比较存活组和死亡组血浆Presepsin、NGAL、PCT和CRP水平及小儿危重病例评分、SOFA评分。采用Pearson检验和受试者工作特征曲线分析血浆Presepsin、NGAL与小儿危重病例评分、SOFA评分的相关性以及对儿童脓毒症早期诊断、预后预测的价值。结果脓毒症组和脓毒性休克组血浆Presepsin、NGAL、PCT和CRP水平均高于对照组，且脓毒性休克组均高于脓毒症组(P<0.05)；死亡组血浆Presepsin、NGAL、PCT、CRP水平和SOFA评分均高于存活组，小儿危重病例评分低于存活组(P<0.05)。血浆Presepsin、NGAL与小儿危重病例评分均呈负相关(r＝-0.676，P<0.001；r＝-0.664，P<0.001)，与SOFA评分均呈正相关(r＝0.781，P<0.001；r＝0.749，P<0.001)。当血浆Presepsin水平为468.91 ng/L时，诊断脓毒症的敏感度为85.6%，特异度为77.5%。当血浆NGAL水平为38.94 ng/mL时，诊断脓毒症的敏感度为82.4%，特异度为65.8%。血浆Presepsin联合NGAL早期诊断儿童脓毒症的曲线下面积(area under curve，AUC)为0.912(95%CI 0.865～0.959)，高于血浆Presepsin的AUC 0.857(95%CI 0.785～0.928)和NGAL的AUC 0.761(95%CI 0.680～0.841)。当血浆Presepsin水平为816.92 ng/L时，预测脓毒症预后的敏感度为73.2%，特异度为76.1%。当血浆NGAL水平为51.27 ng/mL时，预测脓毒症预后的敏感度为67.4%，特异度为68.0%。血浆Presepsin联合NGAL预测儿童脓毒症预后的AUC为0.891(95%CI 0.816～0.966)，高于血浆Presepsin的AUC 0.795(95%CI 0.698～0.892)和NGAL的AUC 0.714(95%CI 0.577～0.851)。结论临床通过检测血浆Presepsin和NGAL水平有助于早期诊断儿童脓毒症和判断病情严重程度，对评价患儿预后有指导意义，有利于改善患儿预后。