简介：目的：经改良和优化,建立高纯度BALB/c小鼠大脑皮质神经元培养的方法。方法：采用L-多聚赖氨酸包被细胞培养板,取新生BALB/c小鼠（出生24h内）大脑皮质组织,经0.25%胰酶消化后吹打成单个细胞,按1×10^6/孔接种于35mm的六孔板中,用神经元细胞培养种植液培养6h后换神经元细胞培养饲养液,培养40h时加入阿糖胞苷抑制神经胶质细胞的生长,随时观察神经元培养情况。结果：培养5d的神经元细胞形态最为典型;经免疫荧光方法鉴定,神经元细胞纯度为93%。结论：经方法改良与优化,获得了高纯度的原代培养小鼠大脑皮质神经元细胞

简介：目的：探讨早期肠内营养辅助治疗重症胰腺炎的临床效果。方法：选择2009年4月-2012年2月我院收治的重症胰腺炎患者共46例，随机分为实验组和对照组各23例，实验组在综合治疗的基础采用早期肠内营养治疗（EN），而对照组在综合治疗的基础上采用全胃肠外营养治疗（TPN），比较两组患者的血清总蛋白、白蛋白、尿素氮水平及血淋巴细胞百分比变化、血淀粉酶和尿淀粉酶恢复正常时间、住院时间及病死率，并比较两组治疗前及治疗后24、48及72小时的APACHEII评分。结果：治疗后，实验组患者的血清总蛋白、白蛋白、尿素氮水平及血淋巴细胞百分比变化均较对照组明显增高，差异有统计学意义（P〈0．05），而血淀粉酶、尿淀粉酶恢复时间、病死率及住院时间分别均明显较对照组降低或缩短，差异有统计学意义（P〈0．05）。治疗24、48及72小时后，实验组APACHEII评分均较治疗前显著减低（P〈o．05），而对照组治疗24、48h后APACHEⅡ评分与治疗前比较差异无统计学意义（P〉0．05），治疗72h后APACHEII评分较治疗前显著减低（P〈O．05）。结论：采用早期肠内营养辅助治疗重症胰腺炎患者能有效保护肠黏膜屏障功能，改善患者的营养状况，增强患者的免疫力，并改善患者的预后。

简介：目的：探讨激活处理对人未受精卵子和早期胚胎三磷酸腺苷（ATP）含量影响。方法：收集辅助生殖治疗周期中体外受精（IVF）以及单精子卵母细胞浆内注射（ICSI）时的未受精卵子（包括GV期、MⅠ期、MⅡ期卵母细胞）,以及早期胚胎（2-cell、4-cell胚胎）,采用生物化学发光法测定在未处理和进行激活处理后的ATP含量。结果：1未处理的GV期、MⅠ期、MⅡ期卵子和2-cell、4-cell期胚胎的ATP含量分别为1.14±0.15、1.41±0.14、1.45±0.12、1.61±0.25、2.05±0.23pmol,激活处理后GV期、MⅠ期、MⅡ期卵子和2-cell、4-cell期胚胎的ATP含量分别为1.60±0.17、1.86±0.25、2.06±0.38、2.26±0.53、2.55±0.46pmol;2激活处理后GV期、MⅠ期卵子的ATP含量显著性高于未处理组（P〈0.05）。结论：人GV期、MⅠ期、MⅡ期卵子和2-cell、4-cell期胚胎中ATP含量逐渐增加;经激活处理后,仅GV期、MⅠ期卵子的ATP含量有显著性变化。

简介：目的探究ripply1基因在斑马鱼早期背腹轴发生过程中的作用.方法利用斑马鱼整封原位杂交技术揭示ripply1基因在斑马鱼早期胚胎发育过程中的表达模式,通过显微注射技术在胚胎1细胞期注射ripply1的mRNA来高表达Ripply1蛋白并在后期观察胚胎背腹标记基因的变化及胚胎形态变化.利用Tol2转基因技术构建ripply1启动子驱动的GFP转基因鱼.结果原位杂交结果显示ripply1基因在斑马鱼原肠早期胚盾期特异表达在胚盾处,即预定的背部.高表达ripply1后,在胚盾期背部标记基因表达范围扩大,腹部标记基因表达减弱,受精后24小时胚胎表现出严重的背部化表型：头部增大,腹部卵黄延伸减弱,尾部躯干及尾部区域减少,有的甚至形成了第二个体轴.得到的转基因鱼揭示ripply1母源表达,并且转录起始位点上游1200个碱基驱动的GFP能模拟内源基因的表达图式.结论ripply1可能参与斑马鱼胚胎早期背腹轴的发生.

简介：近年来,研究者已经评价的大量具有潜在诊断价值标志物,尤其是应用念珠菌特异性抗原的血清抗体早期诊断侵袭性念珠菌病有了长足进展。如HWP1、ENO1等IgG抗体的单个或多个组合快速准确地诊断早期念珠菌病,不仅适用于免疫正常患者,而且适用于免疫受损患者,因此,在临床上具有潜在的巨大的应用价值。

简介：目的：探讨乙型肝炎病毒（HBV）感染者血清中白介素-32（IL-32）水平的变化及其临床意义。方法：对100例HBV感染者和30例健康者检测外周血清白细胞介素-32（IL-32）的含量,比较IL-32水平变化的规律,并分析其与临床疾病谱和HBV复制水平的关系。结果：（1）急性乙型肝炎、中度慢性乙型肝炎、重度慢性乙型肝炎患者血清IL-32水平与对照组有显著性差异（P〈0.001）;轻度慢性乙型肝炎患者血清IL-32水平高于健康对照组,但无统计学意义（P〉0.05）;急性乙型肝炎、中、重度慢性乙型肝炎患者血清IL-32水平均显著高于轻度慢性乙型肝炎组,且有统计学意义（P〈0.001）;急性乙型肝炎、重度慢性乙型肝炎患者血清IL-32水平均高于中度慢性乙型肝炎组,有统计学意义（P〈0.001）;急性乙型肝炎、重度慢性乙型肝炎组之间无明显差异（P〉0.05）。（2）HBV感染者HBV-DNA阳性组IL-32水平较阴性组为高,但无差异;高、中、低病毒载量组之间血清IL-32水平也无差异（P〉0.05）。（3）慢性乙型肝炎患者不同ALT水平组血清IL-32水平均高于对照组（P〈0.05）;且低、中、高ALT水平组之间与IL-32水平也有统计学意义;IL-32水平与ALT水平正相关。结论：HBV感染可导致机体血清IL-32水平的变化,且随炎症加重呈上升趋势,证实IL-32在炎症反应中发挥重要作用,IL-32可能参与了慢性HBV感染者肝组织损伤及病情发展的过程。血清IL-32水平变化与HBV复制水平无关。

简介：目的(1)建立RT-PCR方法,定性测定SIV感染猴血浆中病毒RNA,比较其与传统血浆病毒分离方法的敏感性;(2)建立DNA-PCR方法,检测SIV感染猴外周血淋巴细胞(PBMCs)中的前病毒DNA.(3)检验DNA-PCR和RNA-PCR方法在猴SAIDS模型应用中的实用性和可操作性.方法用SIVmac251静脉感染恒河猴,定期采血,从血浆中提取病毒RNA,以RNA为模板通过RT-PCR法扩增,凝胶电泳定性;从感染猴PBMC中提取带有整合的SIV前病毒DNA的细胞基因组DNA,巢式PCR扩增,凝胶电泳定性.结果DNA-PCR和RNA-PCR经两轮扩增后均得到一长度为477bp的特异条带,测序鉴定确为目的片段.9只实验猴感染SIV后7d,RNA-PCR结果为7/9阳性,DNA-PCR结果为100%阳性,而血浆病毒分离只有5/9阳性;此后一直到感染后的42d,RNA-PCR和DNA-PCR的结果一直为100%阳性,而血浆病毒分离阳性率在感染后35d下降到4/9,到42d时下降为零.结论PCR方法比病毒分离方法的敏感性高.尤其是DNA-PCR,既可检测具有活跃病毒复制的受感染细胞,又可检测那些携带病毒处于转录休眠期的细胞,所以在感染的早期和中后期--血浆病毒水平较低的情况下或病毒处于潜伏感染的阶段,它作为猴艾滋病(SAIDS)模型病毒学指标之一有其必要性和重要性.这个指标的检测方法应该是较血浆病毒RNA检测更为敏感.

简介：肺曲霉感染分为侵袭性曲霉病、半侵袭性曲霉病（包括过敏性支气管肺曲霉病和过敏性肺炎）、过敏性曲霉病和曲霉球等4型。肺曲霉球是寄生型的肺曲霉感染，大多寄生在肺结核、支气管扩张、肺囊肿、慢性肺脓肿、肺癌等的空洞或空腔内。

简介：目的了解HIV感染者口咽及鼻腔内真菌分离阳性率。方法用无菌拭子采集口咽腔溃疡、白斑、口角炎等和咽颊区黏膜分泌物，鼻腔取下鼻甲黏膜或中鼻道黏膜分泌物，直接接种于1mL沙堡弱液体培养基中。取该离心沉淀物作真菌直接镜检，并接种于科玛嘉念珠菌显色培养基置37℃培养48h后鉴定。如为丝状真菌，转种于察氏琼脂。25℃培养1周后根据菌落形态结合镜下结构鉴定菌种。结果94例HIV感染者在口咽腔中真菌培养阳性62例（66％），分离出65株真菌，在鼻腔中真菌培养阳性48例（51％），分离出57株真菌。结论HIV感染者免疫功能低下，易继发真菌机会性感染，口咽及鼻腔真菌的高寄居率是HIV侵袭性真菌感染的先兆症状，真菌菌种以白念珠菌比例为最高，口咽及鼻腔分别61％和33％。

简介：目的(1)建立RT-PCR方法，定性测定SIV感染猴血浆中病毒RNA，比较其与传统血浆病毒分离方法的敏感性；(2)建立DNA-PCR方法，检测SIV感染猴外周血淋巴细胞(PBMCs)中的前病毒DNA。(3)检验DNA．PCR和RNA-PCR方法在猴SAIDS模型应用中的实用性和可操作性。方法用SIVmac251静脉感染恒河猴，定期采血，从血浆中提取病毒RNA，以RNA为模板通过RT-PCR法扩增，凝胶电泳定性；从感染猴PBMC中提取带有整合的SIC前病毒DNA的细胞基因组DNA，巢式PCR扩增，凝胶电泳定性。结果DNA-PCR和RNA-PCR经两轮扩增后均得到一长度为477bp的特异条带，测序鉴定确为目的片段。9只实验猴感染SIV后7d，RNA-PCR结果为7／9阳性，DNA-PCR结果为100％阳性，而血浆病毒分离只有5／9阳性；此后一直到感染后的42d，RNA-PCR和DNA-PCR的结果一直为100％阳性，而血浆病毒分离阳性率在感染后35d下降到4／9，到42d时下降为零。结论PCR方法比病毒分离方法的敏感性高。尤其是DNA-PCR，既可检测具有活跃病毒复制的受感染细胞，又可检测那些携带病毒处于转录休眠期的细胞，所以在感染的早期和中后期——血浆病毒水平较低的情况下或病毒处于潜伏感染的阶段。它作为猴艾滋病(SAIDS)模型病毒学指标之一有其必要性和重要性。这个指标的检测方法应该是较血浆病毒RNA检测更为敏感。

简介：丙型肝炎病毒（HCV）是造成慢性肝炎，肝硬化及肝癌的重要原因之一，目前全球约有1.7亿人感染HCV。然而缺乏有效的HCV感染模型，严重阻碍了对HCV致病机制的认识。最近几年以JFH1株和Huh-7细胞系为基础，通过对不同病毒株基因组的重组和细胞系的优化，进一步提高其感染能力，在HCV感染系统的建立上取得了突破性进展。我们简要综述近几年在HCV感染细胞模型方面取得的进展。

简介：目的了解长海医院院内患者深部真菌感染的流行病学情况。方法对2000-2004年间在长海医院住院治疗患者的深部真菌感染进行调查和分析。结果5年间院内深部真菌感染的发病率上升明显，院内深部真菌感染的主要部位是呼吸道和泌尿道，主要的致病菌为念珠菌。结论院内深部真菌感染病例近年呈上升趋势。白念珠菌仍是院内深部真菌感染的主要病原菌。

简介：目的了解引起夫妻双方生殖器念珠菌病的病原菌是否为同一种致病菌，并行药物敏感性检测，以指导临床治疗。方法采用常规念珠菌培养方法培养，API20CAUX进行鉴定，微量稀释法行药敏检测。结果88例患者（44对夫妻）中，检出白念珠菌73例。夫妻双方共同由同一菌种致病例数为41对，白念珠菌引起者为36对，光滑念珠菌引起者为2对，近平滑2对，克柔念珠菌1对。与对照组相比，差异有统计学意义。体外药敏显示88株念珠菌对制霉菌素全部敏感，对克霉唑也高度敏感，对伊曲康唑、氟康唑有不同程度的耐药。结论夫妻一方患有生殖器念珠菌病时，另一方应做好性伴通知工作，行相应检查，必要时行药敏实验，以降低念珠菌病的复发率。

简介：近年,人们对毛霉与毛霉病的关注度不断提高。这不仅由于毛霉感染的发生率快速上升,更因为其临床诊治尚有许多问题悬而未决,加之分子分类学技术的巨大进步,毛霉相关的种系发生、分类鉴定、新种变种等方面开始出现不少新的甚至使人困惑的意见或争议,值得医学真菌学领域的研究者和临床医生予以重视。为此,本文就近期毛霉相关的分类与命名的变化、新出现的病原菌、实验室快速诊断鉴定、毛霉病流行病学及临床表现、毛霉体外药敏实验及联合治疗等方面研究进展和动态结合笔者自己的观点做一简要评述。

简介：在如今信息化社会之中,运用互联网将各类数据资源进行整合是一项基本的特点.在如今信息化逐步深入的情况下,高校对教育资源共享问题的重视也逐步提高,实验室的建设与管理工作也要结合信息化发展.本文从实验室管理的现状出发,分析当前实验室管理存在的问题,提出信息化实验室的管理模式,并对信息化实验室管理模式的开展提出一些科学建议,以促进高校实验室管理工作的开展.

简介：天然药物活性物质与功能国家重点实验室于2011年由科技部批准成立，依托单位是中国医学科学院药物研究所。实验室主任和学术委员会主任分别为庾石山研究员和于德泉院士。实验室现有中国工程院院士1名，国家杰出青年基金获得者4名，长江学者特聘教授3名，“新世纪百千万人才工程国家级人选”6名，国家“千人计划”（青年项目）人选3名，国家优秀青年科学基金获得者2名。

简介：美国圣路易大学医学部的研究者最近发现了一种新的可能预防I型糖尿病的方法,并且在小鼠身上实验成功。I型糖尿病是一种慢性自身免疫性疾病,很多种免疫T细胞都已经被证实参与调节I型糖尿病的发展。其中一种T细胞-TH17细胞的角色却存在争议。为了了解TH17细胞的具体作用,圣路易斯大学医学部的研究者自己合成了一种高亲和性的配体-SR1001,来选择性的反向激动两种能调节TH17细胞发育和功能的重要核受体RORalpha和RORgamma,从而达到抑制TH17细胞分化和功能的目的。

简介：目的观察氧诱导视网膜病模型（OIR）中曲安奈德（TA）对CD14＋细胞聚集及VEGF表达的干预作用,初步探讨曲安奈德抑制视网膜新生血管生长的可能机制。方法清洁级C57BL/6哺乳期小鼠36只（共36个眼球）,随机将其分为四组：①正常对照组（6个眼球）,6只17日龄正常小鼠先行FFA眼底造影,然后每鼠随机摘取一个眼球,行眼球石蜡切片HE染色。②单纯高氧组（6个眼球）,6只17日龄OIR模型小鼠处理同单纯对照组。③TA高氧组（12个眼球）,12只12日龄OIR模型小鼠随机一眼注射TA2μL,再于17日龄后行FFA眼底造影后摘除术眼,其中6个眼球行眼球石蜡切片HE染色及视网膜CD14和VEGF免疫组化染色,另6个眼球行视网膜VEGFmRNA的real-timePCR检测。④BSS高氧（12个眼球）,12只12日龄OIR模型小鼠随机一眼注射BSS2μL,余处理同TA高氧组。用t检验两两比较各组视网膜突破内界膜的内皮细胞核数,视网膜CD14与VEGF免疫组化染色的平均吸光度值（IOD/AOI）,及VEGFmRNA的相对含量值（2-ΔCt×105）。结果与正常对照组相比,高氧诱导组突破视网膜内界膜的内皮细胞核数目明显增多（t=29.62,P〈0.001）。与BSS高氧组相比,TA高氧组突破视网膜内界膜的内皮细胞核数明显减少（t=19.879,P〈0.001）。TA高氧组和BSS高氧组小鼠视网膜神经上皮均可见VEGF,CD14阳性染色,但BSS高氧组的VEGF、CD14含量明显高于TA高氧组（t=-2.743,P〈0.05;t=-3.592,P〈0.01）。并且视网膜SDF-1与CD14的蛋白含量存在正相关（r=0.662,n=12,P〈0.05）。视网膜VEGFmRNA表达在BSS高氧组也明显高于TA高氧组（t=-4.754,P〈0.005）。结论TA能有效抑制小鼠视网膜新生血管形成,其机制可能是通过阻遏循环中CD14＋细胞的聚集,进而减少VEGF等细胞因子表达而发挥作用。

简介：目的探讨自配的获能液和受精液用于长爪沙鼠体外受精的可行性,为长爪沙鼠的胚胎保种提供参考。方法用自配的获能液和受精液对长爪沙鼠进行体外受精,并用改良后的KSOM培养液对长爪沙鼠的2细胞胚胎进行体外培养试验。结果长爪沙鼠体外受精率在60%以上,沙鼠2细胞胚胎能够在体外进一步发育。结论初步建立了长爪沙鼠体外受精和胚胎发育体系,但需要进一步优化。

简介：目的研究山苍子油对小鼠系统性白念珠菌感染的治疗作用。方法建立小鼠系统性白念珠菌感染模型，观察给药后小鼠中位生存时间，并检测给药后小鼠肾脏菌落形成单位计数。结果山苍子油能明显延长小鼠的中位生存时间，降低肾脏菌落形成单位计数。结论山苍子油对小鼠系统性白念珠菌感染具有治疗作用，值得进一步研究和开发。