简介：目的探讨DNA甲基化在子宫内膜异位症发病机制中的作用以及DNA甲基转移酶抑制剂地西他滨在内异症治疗中的可行性。方法根据大鼠自体移植方法构建大鼠子宫内膜异位症模型,4周后2次开腹判断造模是否成功,用游标卡尺测量记录异位灶体积后将大鼠随机分为实验组（12只）、PBS组（12只）和对照组（11只）。同时选取未造模的正常大鼠作为空白组（10只）。实验组大鼠腹腔注射5-氮-2’-脱氧胞苷（2.5mg/kg/d）,PBS组注射等量PBS溶液,对照组未用药。应用免疫组织化学染色方法和WesternBlot法检测各组异位灶内DNA甲基转移酶1的表达情况。收集腹腔冲洗液用Elisa法检测肿瘤坏死因子（tumornecrosisfactor-α,TNF-α）含量。结果50只大鼠根据大鼠子宫内膜自体移植方法成功35只,造模成功率为70%（35/50）。实验组大鼠经药物处理后异位灶体积明显缩小（P〈0.05）,PBS组及对照组异位灶体积无明显改变（P〉0.05）。实验组用药后异位内膜组织上皮细胞体积缩小,腺体萎缩,囊液分泌减少;异位灶组织中DNA甲基转移酶1的表达低于PBS组及对照组（P〈0.05）,PBS组及对照组间表达无明显差异（P〉0.05）。治疗后实验组大鼠腹腔冲洗液中TNF-α含量较PBS组及对照组降低,造模组（实验组、PBS组、对照组）较空白组均升高（P〈0.05）。结论DNA甲基转移酶抑制剂能明显缩小异位灶体积,促进异位灶萎缩。DNA甲基转移酶抑制剂能抑制异位灶中DNA甲基转移酶表达,这可能是其抑制病灶生长的途径之一。DNA甲基转移酶抑制剂能抑制子宫内膜异位症大鼠模型腹腔环境中TNF-α的含量。

简介：目的通过比较观察激素敏感的MCF-7细胞在体外干细胞培养和常规培养条件下雌激素受体（ER）变化及对内分泌治疗药物的敏感性变化，初步探讨肿瘤干细胞与内分泌耐药的关系。方法分别于常规培养及干细胞培养条件下（悬浮球培养）培养激素敏感的MCF-7细胞株，流式细胞仪检测分子表型CD44^＋CD24^-/low与CD44＋CD24＋亚群细胞比例变化，免疫细胞化学法测定ERa和ERl3的表达变化，MTT法检测细胞对他莫西芬的敏感程度。分别以t检验、卡方检验、方差分析进行统计分析。结果干细胞培养条件下CD44^＋CD24^-/low亚群细胞的比例为（1.60±0．08）％，比常规培养条件下的（0．27±0．08）％显著增加（t=-12．10，P=0．00），而CD44＋CD24＋亚群细胞比例由（5．59±0．88）％增至（30．63±4．40）％（t=-5．58，P=0．00）。干细胞培养条件培养下ERα和ERβ表达率较常规培养下调，分别由85．27％和90．53％降至69．43％和73．20％，差异有统计学意义（χ^2=214．64，P=0．00；χ^2=303．58，P=0．00），且对他莫西芬的敏感性降低，IC50值由（9．82±0．31）μmol／L升至（16．46±0．50）μmol／L，再次诱导分化后ER并未出现上调，对他莫西芬的敏感性仍旧降低（F=113．63，P=0．00）。结论与常规培养相比较，体外干细胞培养条件下可以培养出含高比例具有干细胞特性的CD44＋CD24^-/low与CD44＋CD24＋亚群细胞的微球囊，其ER仍为阳性表达，但对他莫昔芬治疗敏感性减低，推测其可能是乳腺癌内分泌耐药的原因。