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  • 简介:摘要目的探讨微小RNA(miRNA,miR)-25过表达对食管癌TE1、KSYE-150细胞增殖与侵袭的影响。方法实验样本均来自青岛市中医院2016年1月至2017年6月45例食管癌患者肿瘤组织、癌旁正常组织(距肿瘤边缘>5 cm,且病理检查无癌细胞浸润)。实验分为空白对照组、阴性对照组、模拟物转染组、抑制物转染组,分别将miR-25模拟物、抑制物转入食管癌TE1、KSYE-150细胞株,检测miR-25表达水平、TE1、KSYE-150细胞增殖能力及细胞周期变化。多组间比较行单因素方差分析,两组比较行配对t检验。结果(1)食管癌组织miR-25表达(1.288±0.214)明显高于正常组织miR-25表达(t=33.058,P<0.01);(2)TE1细胞模拟物转染组miR-25表达(2.452±0.360)明显高于阴性对照组,抑制物转染组miR-25表达(0.576±0.110)明显低于阴性对照组(t=8.212、7.553,P<0.05,P<0.01);KSYE-150细胞模拟物转染组miR-25表达(3.124±0.450)明显高于阴性对照组,抑制物转染组miR-25表达(0.624±0.120)明显低于阴性对照组(t=10.297、6.452,P<0.05,P<0.01),差异有统计学意义;(3)转染24、48、72、96 h,模拟物转染组TE-1细胞活性(35.25±5.24、96.45±8.21、165.36±18.24、223.45±20.24)明显高于阴性对照组(t=11.137、9.216、7.575、10.547,P<0.05,P<0.01),抑制物转染组TE-1细胞活性(4.21±0.72、22.36±4.21、52.15±7.36、63.45±7.36)明显低于阴性对照组(t=4.874、8.940、6.830、7.368,P<0.05,P<0.01);模拟物转染组KSYE-150细胞活性(42.36±6.36、102.65±13.45、172.36±22.45、242.31±25.35)明显高于阴性对照组(t=12.449、7.381、7.110、10.464,P<0.05,P<0.01);抑制物转染组KSYE-150细胞活性明显低于阴性对照组(5.42±0.75、25.12±7.24、62.45±8.36、67.36±8.45)(t=5.827、6.699、4.872、6.689,P<0.05),差异均有统计学意义;(4)模拟物转染组TE-1细胞G0/G1期(46.52±6.20)明显低于阴性对照组,S期(46.96±7.12)明显高于阴性对照组(t=4.096,5.044,P<0.05),抑制物转染组TE-1细胞G0/G1期(84.52±7.54)明显高于阴性对照组,S期(6.05±0.78)明显低于阴性对照组(t=4.352,13.715,P<0.05,P<0.01);模拟物转染组KSYE-150细胞G0/G1期(44.36±6.32)明显低于阴性对照组,S期(49.25±6.58)明显高于阴性对照组(t=4.544,5.009,P<0.05,P<0.01),抑制物KSYE-150细胞G0/G1期(81.25±7.43)明显高于阴性对照组,S期(8.78±1.12)明显低于阴性对照组(t=4.577,10.127,P<0.05,P<0.01)。结论miR-25过表达将促进食管癌细胞株TE-1、KSYE-150增殖与侵袭,抑制miR-2表达会抑制食管癌细胞株TE-1、KSYE-150增殖,促进癌细胞凋亡。

  • 标签: 食管癌 微小RNA-25 TE-1细胞株 KYES-150细胞株 增殖 侵袭
  • 简介:摘要微小RNA (microRNA, miRNA)是非编码小RNA分子,可通过调控脑中端粒酶逆转录酶(telomerase reverse transcriptase, TERT)对认知功能产生影响。关于麻醉药的研究表明,miRNA参与调节麻醉药相关的认知障碍,但麻醉药对TERT的活性、表达水平的调节及其内在机制尚不明确。miRNA可靶向胰岛素生长因子(insulin-like growth factor, IGF)与NF-κB信号分子调节中枢神经系统TERT水平与活性,且当前研究发现麻醉药调控miRNA亦经相关通路影响认知功能,综上分析可对麻醉药影响认知功能中TERT的存在意义与内在调节机制提出一种新想法,TERT活性信号通路受麻醉药与miRNA调节可能为探寻麻醉药调控TERT介导神经元凋亡的研究带来新想法。

  • 标签: 端粒酶逆转录酶 微小RNA 麻醉药 神经元凋亡 认知功能
  • 简介:摘要目的探讨血浆微小RNA-30b-5p(miR-30b-5p)联合血管外肺水指数(EVLWI)对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者预后的评估价值。方法选择2016年1月至2019年6月儋州市人民医院收治的120例ARDS患者作为研究对象。收集患者的性别、年龄、体重指数(BMI)、基础疾病、病因以及心率(HR)、呼吸频率(RR)、氧合指数(OI)、动脉血二氧化碳分压(PaCO2)和急性生理学与慢性健康状况评分Ⅱ(APACHEⅡ)等基线值,根据住院期间生存情况分为存活组和死亡组,根据OI分为轻中度组(OI>100 mmHg,1 mmHg=0.133 kPa)和重度组(OI≤100 mmHg)。采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测血浆miR-30b-5p表达,并测定EVLWI。绘制受试者工作特征曲线(ROC),分析血浆miR-30b-5p及EVLWI预测ARDS患者死亡的价值;用Pearson相关法分析住院期间不同预后ARDS患者血浆miR-30b-5p与EVLWI的相关性。结果120例ARDS患者均纳入分析,死亡组42例,存活组78例;轻中度组67例,重度组53例。死亡组患者APACHEⅡ评分高于存活组,但两组性别、年龄、BMI、基础疾病、病因及HR、RR、OI和PaCO2基线值比较差异均无统计学意义。死亡组患者血浆miR-30b-5p表达水平及EVLWI均明显高于存活组〔miR-30b-5p(2-ΔΔCt):2.28±0.74比0.52±0.06,EVLWI(mL/kg):15.38±4.60比10.24±2.15,均P<0.01〕。重度组血浆miR-30b-5p表达水平、EVLWI及住院病死率均明显高于轻中度组〔miR-30b-5p(2-ΔΔCt):2.05±0.65比0.93±0.17,EVLWI(mL/kg):14.65±4.20比11.36±2.28,住院病死率:58.5%(31/53)比16.4%(11/67),均P<0.01〕。ROC曲线分析显示,血浆miR-30b-5p及EVLWI预测ARDS患者住院期间死亡的最佳截断值分别为1.62和13.28 mL/kg,两项指标联合预测的ROC曲线下面积(AUC)明显高于二者单独预测(0.897比0.827和0.785),且联合预测的敏感度和特异度均较高,分别为90.5%和84.2%。Pearson相关分析显示,ARDS死亡患者血浆miR-30b-5p与EVLWI呈显著正相关(r=0.768,P<0.01);而存活者二者无明显相关性(r=0.118,P>0.05)。结论血浆miR-30b-5p和EVLWI与ARDS患者病情严重程度及预后相关,二者联合对ARDS患者预后具有一定评估价值。

  • 标签: 急性呼吸窘迫综合征 微小RNA-30b-5p 血管外肺水指数 预后评估
  • 简介:AbstractGastric cancer (GC) is a common malignancy and is the third leading cause of cancer-related death. At present, there is no simple and effective screening method for early-stage GC, and the treatment results and prognosis are poor. With the continuous improvement of molecular biology techniques, research on circular RNA (circRNA) has gradually expanded over time. Much data supports the role of circRNA in tumorigenesis. Moreover, due to its structural specificity and biological stability, circRNA is anticipated to be a potential biomarker for tumor diagnosis. Studies have confirmed that circRNA can participate in the proliferation, invasion, metastasis, and apoptosis of GC. These findings will lead to novel directions for the diagnosis and treatment of GC. This article reviews the structure and function of circRNA, summarizes the current studies on circRNA, and discusses the potential diagnostic value of circRNA in GC.

  • 标签: Circular RNA Gastric cancer Biomarker Diagnosis
  • 简介:摘要目的观察微小RNA(miRNA,miR)-98-5p靶向高迁移率族蛋白A2(HMGA2)对胃癌细胞上皮-间充质转化(EMT)的影响并探讨其作用机制。方法采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测GES-1、BGC-823、SGC-7901、MGC-803细胞(购自中国科学院上海细胞库和ATCC细胞库)中miR-98-5p的mRNA表达水平;构建绿色荧光蛋白(GFP)-NC和GFP-miR-98-5p慢病毒稳定细胞株,采用生物信息学和双荧光素酶报告基因验证miR-98-5p和HMGA2的靶向关系;采用蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞中HMGA2、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达;采用Transwell检测细胞的侵袭能力。组间比较采用t检验,计数资料采用率(%)表示,组间比较采用χ2检验。结果与GES-1细胞(1.94±0.16)比较,BGC-823(0.41±0.03)、SGC-7901(0.53±0.05)、MGC-803(0.50±0.04)细胞中miR-98-5p的mRNA相对表达水平下降,差异有统计学意义(t=7.437、6.288、6.305,P<0.05)。双荧光素酶报告基因检测显示,与GFP-NC细胞比较(1.77±0.12),转染HMGA2-WT后GFP-miR-98-5p细胞(0.42±0.05)的相对荧光素酶活性下调(t=6.701,P<0.05),差异有统计学意义。Western blot结果显示,GFP-NC、GFP-miR-98-5p、GFP-miR-98-5p+pcDNA和GFP-miR-98-5p+HMGA2细胞中HMGA2的表达水平分别为2.15±0.17、0.44±0.05、0.46±0.04、2.30±0.19;Vimentin的表达水平分别为1.85±0.13、0.47±0.04、0.45±0.05、1.39±0.09;E-cadherin的表达水平分别为0.36±0.03、1.60±0.11、1.65±0.10、0.72±0.05。与GFP-NC细胞比较,miR-98-5p过表达细胞中HMGA2和Vimentin的表达下降,E-cadherin的表达增加(t=8.032、7.981、8.692,P<0.05),差异有统计学意义;Transwell结果显示,与GFP-NC细胞[(88.17±9.16)个]比较,GFP-miR-98-5p细胞[(33.34±5.53)个]的侵袭个数下降(t=4.231,P<0.05),差异有统计学意义;与GFP-miR-98-5p细胞[(34.66±5.39)个]比较,GFP-miR-98-5p+HMGA2细胞[(62.51±7.03)个]的侵袭个数上调(t=3.858,P<0.05),差异有统计学意义。结论miR-98-5p在胃癌细胞中低表达,miR-98-5p过表达可通过靶向HMGA2抑制胃癌细胞的EMT,从而抑制肿瘤的侵袭和转移。

  • 标签: 微小RNA-98-5p 胃癌 高迁移率族蛋白A2 波形蛋白 E-钙黏蛋白 侵袭
  • 简介:摘要目的探讨微小RNA(miRNA,miR)-519靶向ATP结合盒转运体G1(ABCG1)对乳腺癌细胞吉西他滨耐药性的影响。方法选取2015年6月到2018年6月来焦作市人民医院接受治疗的乳腺癌患者148例。根据患者对吉西他滨化疗敏感性分为敏感组和耐药组。荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析两组乳腺癌组织中miR-519表达水平。构建miR-519或对照miRNA过表达慢病毒载体,包装慢病毒,感染MCF-7乳腺癌细胞,构建miR-519(miR-519组)和对照组细胞株(miRNA对照组)。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法分析miR-519组和miRNA对照组细胞对吉西他滨的敏感性。采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-519的靶基因;采用蛋白质印迹法(Western blot)分析miR-519对靶基因表达的影响。组间数据比较采用t检验,以P<0.05为差异有统计学意义。结果与吉西他滨敏感组(1.21±0.23)比较,耐药组患者肿瘤组织中miR-519 mRNA表达水平(0.30±0.12)明显下降,差异有统计学意义(t=3.091,P<0.05)。CCK-8结果显示,miR-519组和miRNA对照组细胞增殖能力(1.76±0.23比1.65±0.26)比较差异无统计学意义(t=0.691,P>0.05)。经吉西他滨处理后,miR-519组细胞增殖能力(0.68±0.19)较miRNA对照组细胞(1.12±0.22)明显下降,差异有统计学意义(t=2.819,P<0.05)。生物信息学和双荧光素酶报告基因显示ABCG1是miR-519靶基因。耐药组肿瘤组织中ABCG1蛋白表达水平(1.65±0.25)明显高于敏感组肿瘤组织(0.84±0.19),差异有统计学意义(t=2.619,P<0.05)。miR-519组细胞ABCG1蛋白表达水平(0.34±0.11)较miRNA对照组细胞(1.43±0.24)明显增加,差异有统计学意义(t=3.014,P<0.05)。结论miR-519可能通过ABCG1调控乳腺癌对吉西他滨的敏感性。

  • 标签: 微小RNA-519 ATP结合盒转运体G1 乳腺癌 吉西他滨 耐药性
  • 简介:摘要目的观察微小RNA(miRNA,miR)-182通过靶向特定富含AT碱基DNA序列结合蛋白2(SATB2)基因对结直肠癌细胞增殖迁移的作用,探讨其对SATB2/烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(nox4)通路的调节机制。方法对数期生长人结肠癌细胞(HT-29)细胞,采用脂质体转染法将si-miR-182、Control-si转至HT-29细胞,分别设为Si-miR-182组、N-miR-182组,另取不做任何处理细胞为对照组。测定3组细胞中miR-182基因表达、增殖和迁移、SATB2、nox4、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)mRNA和蛋白表达。重复计量资料比较采用重复测量方差分析,两两样本比较采用LSD-t检验。结果Si-miR-182组miR-182基因相对表达量(0.35±0.05)低于对照组(1.24±0.26)和N-miR-182组(1.20±0.25),差异均有统计学意义(t=7.517、7.455,P<0.05);Si-miR-182组培养24、48、72 h MTT试验吸光度(A)值均低于对照组和N-miR-182组,差异均有统计学意义(24 h:t=2.667、2.664;48 h:t=4.559、4.524;72 h:t=7.257、6.981;P<0.05);与培养24 h比较,3组培养48、72 h MTT试验A值均升高(48 h:t=5.507、5.092、3.741;72 h:t=11.330、10.637、9.229;P<0.05),且72 h MTT试验A值高于48 h,差异均有统计学意义(t=7.411、6.941、5.214,P<0.05)。Si-miR-182组细胞迁移率[(53.90±3.19)%]低于对照组[(81.66±5.92)%]和N-miR-182组[(80.35±5.40)%],差异均有统计学意义(t=9.231、9.430,P<0.05);Si-miR-182组细胞SATB2、E-cadherin mRNA和蛋白相对表达量高于对照组和N-miR-182组(SATB2:t=10.930、11.158;E-cadherin:t=9.288、9.369;P<0.05),nox4、Vimentin mRNA和蛋白相对表达量低于对照组和N-miR-182组,差异均有统计学意义(nox4:t=8.955、7.590;Vimentin:t=6.543、6.644;P<0.05)。结论沉默miR-182基因可显著抑制结直肠癌细胞增殖及迁移能力,可能通过激活SATB2、E-cadherin的表达、抑制nox4、Vimentin的表达、参与SATB2/nox4通路共同调控。

  • 标签: 微小RNA-182 特定富含AT碱基DNA序列结合蛋白2 结直肠癌 增殖 迁移
  • 简介:摘要目的探讨微小RNA-140-5p(miR-140-5p)在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)中的表达及其在ESCC细胞增殖和侵袭中的作用。方法即时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qPCR)分析ESCC组织和细胞样本中miR-140-5p的表达。将阴性对照和miR-140-5p类似物转染Eca109和KYSE70细胞,细胞增殖与活性检测试剂盒(CCK-8)和Transwell分别检测转染后细胞的增殖和侵袭能力的变化,双荧光素酶报告实验证实miR-140-5p与葡萄糖转运蛋白1(Glut1)的相互作用,Western blot用来检测转染后Glut1蛋白的表达。结果GEO数据分析结果表明,ESCC组织中miR-140-5p的表达水平显著低于正常组织,差异均具有统计学意义(P<0.01)。qPCR结果显示,ESCC组织和细胞中miR-140-5p的表达均显著低于正常组织和正常食管上皮细胞Het-1A,差异均具有统计学意义(P<0.01)。miR-140-5p的表达与ESCC患者肿瘤的分化程度、TNM分期和淋巴结转移均密切相关,高表达miR-140-5p的ESCC患者生存率显著高于低表达患者,差异具有统计学意义(P<0.05)。miR-140-5p类似物显著上调Eca109和KYSE70细胞中miR-140-5p的表达,其表达上调显著抑制Eca109和KYSE70细胞的增殖和侵袭能力。双荧光素酶报告实验结果表明,Glut1是ESCC细胞中miR-140-5p的直接作用靶点,其在ESCC组织中表达显著上调,其与miR-140-5p表达呈负相关关系,miR-140-5p类似物显著抑制Eca109和KYSE70细胞中Glut1蛋白的表达。结论miR-140-5p在ESCC的发生发展中发挥重要作用,靶向miR-140-5p/Glut1可能成为ESCC患者新的治疗策略。

  • 标签: 食管肿瘤 癌,鳞状细胞 微RNAs 葡萄糖转运体1型 细胞增殖 肿瘤侵润
  • 简介:摘要目的探讨miR-224在脂多糖(LPS)诱导的肺微血管内皮细胞(PMVEC)损伤中的作用及机制。方法分离清洁级BALB/c小鼠(购自浙江大学实验动物中心)原代PMVEC并体外培养,使用1.0 mg/L LPS处理PMVEC以诱导细胞损伤。通过转染miR-224抑制序列或p21的小干扰RNA(siRNA)序列分别下调PMVEC的微小RNA-224(miR-224)及p21表达水平。采用细胞计数试剂盒法及流式细胞仪检测PMVEC的细胞活力变化及凋亡率变化。实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)及蛋白质印迹法(Western blot)检测PMVEC的miR-224及p21表达水平。使用双荧光素酶报告实验分析miR-224及p21的靶向关系。两组间的均数比较采用t检验,多组间的均数两两比较在采用单因素方差分析基础上使用最小显著差异法(LSD)检验。结果与未经任何处理的PMVEC比较,LPS处理后细胞相对细胞活力降低至(42.333±7.586)%,凋亡率提高至(32.141±2.449)%,miR-224表达增加至1.791±0.167,p21 mRNA水平降低至0.527±0.058,以上差异有统计学意义(t=8.532、7.261、7.113及8.467,P值均<0.01)。与单纯LPS处理的细胞比较,miR-224下调的细胞在LPS处理后的相对细胞活力增加且凋亡率显著降低,差异有统计学意义(F=62.618、32.643,P<0.01)。抑制p21表达会消除miR-224下调带来的这种保护作用。结论miR-224可能通过靶向抑制p21参与调控LPS诱导的PMVEC损伤。抑制miR-224可能有助于脓毒症后急性肺损伤或急性呼吸窘迫综合征的防治。

  • 标签: 脓毒症 脂多糖 内皮细胞 急性肺损伤 急性呼吸窘迫综合征 微小RNA p21
  • 简介:摘要脂代谢参与了多种代谢相关疾病的发生、发展与调控,涉及营养调节、激素调节和体内平衡。近年来,越来越多的证据表明,非编码RNA的异常表达与代谢性疾病的发生和发展有关。其中,环状RNA作为一种新的非编码RNA,通过与相应的微小RNARNA结合蛋白相互作用,在脂代谢相关疾病如肥胖、2型糖尿病、动脉粥样硬化以及非酒精性脂肪性肝病等的发生、发展中起重要作用。

  • 标签: 环状RNA 脂代谢 脂代谢相关疾病
  • 简介:摘要目的探讨LINC01133/微小RNA(miRNA,miR)-205/谷胱甘肽过氧化物酶3(GPX3)轴对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响及其机制。方法收集河南省人民医院2018年1月到2020年1月手术摘除的129例乳腺癌和癌旁组织,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析LINC01133和miR-205表达水平;在MCF-7细胞建立LINC01133过表达和miR-205沉默细胞系,分别作为LINC01133组、lncRNA对照组、miR-205 KD组和miR对照组。分别采用细胞计数试剂盒(CCK-8)分析细胞增殖能力,采用Transwell分析细胞迁移能力;采用生物信息学分析LINC01133和miR-205关系及其靶蛋白;采用蛋白质印迹法(Western blot)分析靶蛋白表达水平。组间比较采用t检验。结果与癌旁组织LINC01133表达水平(1.12±0.15)比较,乳腺癌组织中LINC01133表达水平(0.57±0.10)显著下调,差异有统计学意义(t=3.011,P<0.05)。与lncRNA对照组细胞LINC01133表达水平(1.05±0.11)比较,LINC01133组细胞LINC01133表达水平(2.48±0.21)显著增加,差异有统计学意义(t=4.108,P<0.05)。与lncRNA对照组细胞吸光度值(2.29±0.20)比较,LINC01133组细胞吸光度值(1.54±0.16)显著下降,差异有统计学意义(t=3.025,P<0.05)。与lncRNA对照组细胞迁移数量[(80.71±8.19)个]比较,LINC01133组细胞迁移数量[(43.77±6.47)个]显著下降,差异有统计学意义(t=2.810,P<0.05)。生物信息分析显示LINC01133的靶miRNA是miR-205,miR-205的靶基因是GPX3,miR-205与GPX3 mRNA 3’端非编码区(3’UTR)区域存在碱基互补。与lncRNA对照组细胞GPX3蛋白表达水平(0.28±0.10)比较,LINC01133组细胞中GPX3蛋白表达水平(1.08±0.22)显著增加,差异有统计学意义(t=2.791,P<0.05)。与miRNA对照组细胞GPX3蛋白表达水平(0.58±0.16)比较,miR-205 KD组细胞GPX3蛋白表达水平(1.98±0.24)显著增加,差异有统计学意义(t=3.019,P<0.05)。结论LINC01133在乳腺癌中呈低表达,通过miR-205/GPX3轴参与乳腺癌的增殖和迁移。

  • 标签: LINC01133 乳腺癌 微小RNA-205 谷胱甘肽过氧化物酶3 增殖 迁移
  • 简介:摘要目的探讨微小RNA(miR)-216a-5p在妊娠期糖尿病(GDM)患者胎盘中的表达及其对滋养层HTR-8/SVneo细胞侵袭、迁移的影响及可能机制。方法收集2018年10月至2019年10月烟台市烟台山医院的28例GDM孕妇(GDM组)和28例正常孕妇(对照组)胎盘组织,将体外培养HTR-8/SVneo细胞分为空白组(正常培养)、模拟物(mimics)-NC组(转染mimics-NC)和miR-216a-5p mimics组(转染miR-216a-5p mimics),采用实时荧光定量PCR检测胎盘组织和各组HTR-8/SVneo细胞中miR-216a-5p表达水平,Transwell实验检测各组HTR-8/SVneo细胞侵袭和迁移,免疫印迹法(Western blot)检测各组HTR-8/SVneo细胞中E-钙黏附蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、锌指E盒结合蛋白-1(ZEB1)和N-钙黏附分子(N-cadherin)蛋白表达,双荧光素酶报告基因实验检测miR-216a-5p和ZEB1的靶向关系。结果与对照组比较,miR-216a-5p在GDM组胎盘组织中表达明显升高(2.86±0.35 vs 0.96±0.07, P<0.05);与mimics-NC组比较,miR-216a-5p mimics组细胞中miR-216a-5p和E-cadherin蛋白表达水平明显升高[(1.01±0.08)vs(22.48±3.26),(0.25±0.03)vs(0.68±0.05)],而细胞侵袭、迁移能力和细胞中Vimentin、N-cadherin、ZEB1蛋白表达水平明显降低[(106.83±9.35)vs(59.16±5.28),(205.48±18.25)vs(87.32±6.50),(0.65±0.05)vs(0.35±0.02),(0.55±0.04)vs(0.32±0.03),(0.50±0.03)vs(0.36±0.02)](P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验结果证实miR-216a-5p可与ZEB1靶向结合。结论miR-216a-5p在GDM患者胎盘组织中表达上调,可能通过靶向调控ZEB1表达抑制滋养层HTR-8/SVneo细胞转移。

  • 标签: 妊娠期糖尿病 微小RNA-216a-5p 滋养层细胞 锌指E盒结合蛋白-1
  • 简介:摘要目的探讨微小RNA-216a(miR-216a)在AP并发肺损伤患者中的表达水平及其对内皮细胞通透性的影响。方法收集2015年12月至2016年3月间海军军医大学第一附属医院消化内科收治的40例AP患者,根据患者是否并发急性肺损伤(ALI),分为AP伴ALI组(AP-ALI组,13例)和AP不伴ALI组(AP组,27例)。以8名健康志愿者为对照组。抽血分离血浆并抽提RNA,采用RT-PCR法检测3组血浆miR-216a水平。使用外泌体抽提试剂盒提取血浆中的外泌体,并通过电镜观察进行外泌体鉴定。抽提外泌体RNA,检测外泌体中miR-216a的水平。将AP-ALI组患者血浆外泌体分别与人脐静脉内皮细胞(HUVEC,AP-ALI-HUVEC组)、转染anti-miR-216a的HUVEC(AP-ALI-anti-miR-216a HUVEC组)共培养24 h,以未做任何处理的HUVEC作为对照组,用Millicell ERS-2上皮伏特欧姆计测量3组跨内皮细胞电阻,以表示其通透性。结果AP-ALI组血浆miR-216a水平为14.45±1.64,显著高于AP组的11.08±1.60和对照组的5.37±1.54,差异有统计学意义(P值均<0.01)。电镜下可见血浆外泌体呈杯状膜泡样,大小50~90 nm。AP-ALI组血浆外泌体miR-216a水平为14.03±1.58,显著高于AP组的10.86±1.31和对照组的5.01±0.79,差异有统计学意义(P值均<0.01)。以对照组HUVEC细胞的电阻值为1,AP-ALI-HUVEC组跨内皮细胞的电阻比值显著低于AP-ALI-anti-miR-216a HUVEC组(0.74±0.04比1.02±0.08),差异有统计学意义(P<0.05)。结论miR-216a水平在AP并发ALI患者血浆外泌体中显著增加。miR-216a可增加HUVEC细胞的通透性,可能与AP时肺损伤的发生相关。

  • 标签: 重症急性胰腺炎 肺损伤 miR-216a 细胞通透性
  • 简介:摘要目的探讨微小RNA(miRNA,miR)-96如何通过胰岛素样生长因子1类受体(IGF1R)调控七氟醚诱导新生大鼠认知功能障碍。方法将大鼠(购自上海斯莱克实验动物有限公司)随机分为6组,对照组大鼠吸入浓度为40%的O2,实验组小鼠吸入不同浓度的七氟烷麻醉(购自上海雅培上海有限公司),包括1%七氟醚组,2%七氟醚组,4%七氟醚组,4%七氟醚+miR-96过表达组和4%七氟醚+miR-96抑制组。通过给予不同浓度的七氟醚(1%、2%和4%)联合miR-96激动或抑制剂,在mRNA和蛋白水平检测IGF1R、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3的表达,测定海马神经元凋亡情况。通过测定荧光素酶活性,验证miR-96是否靶向作用于IGF1R。采用Morris水迷宫测验评价学习记忆能力。测量数据用均值±标准差(Mean±SD)表示,采用t检验对正态分布和均方差的数据进行分析,在双因素相关分析中,则采用Spearman秩相关。结果对照组、4%七氟醚组、4%七氟醚+miR-96过表达组和4%七氟醚+miR-96抑制组miR-96相对表达量分别为0.37±0.01、2.09±0.06、2.84±0.12、1.71±0.03,IGF1R相对表达量分别为2.64±0.08、0.51±0.06、0.29±0.02、1.25±0.03,吸入七氟醚后miR-96表达显著增加(t=63.230、45.870、94.750,P<0.05),IGF1R表达显著降低(t=47.630、63.720、36.380,P<0.05),差异有统计学意义。与4%七氟醚组比较,4%七氟醚+miR-96过表达组miR-96表达增强(t=12.500,P<0.05),IGF1R表达降低(t=7.780,P<0.05);而在4%七氟醚+miR-96抑制剂组中则相反(t=12.670、24.670,P<0.05),差异有统计学意义。结论七氟醚麻醉诱导新生大鼠发生认知功能障碍的潜在机制与miR-96通过抑制IGF1R调控有关。

  • 标签: 七氟醚 微小RNA-96 胰岛素样生长因子1受体 认知功能障碍
  • 简介:摘要目的研究血清微小RNA-21(miRNA-21)与肿瘤标志物[癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白(CYFRA21-1)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)]对早期非小细胞肺癌的诊断价值。方法从2018年1月至2019年3月大庆龙南医院所收治的恶性肿瘤患者中选取22例非小细胞肺癌患者为研究组,再选择相同时间段内在该院进行健康体检的22例为对照组。对两组对象进行相应检查,对血清miRNA-21、主要肿瘤标志物的水平、以及病理类型与标志物水平的关系进行分析。结果研究组血清miRNA-21(2.15±0.9)、CEA(34.1±4.9)ng/mL、NSE(27.1±2.2)ng/mL、CYFRA21-1(12.1±1.2)ng/mL,均高于对照组(t=6.524、27.392、23.339、27.685,均P=0.000);腺癌患者血清微小RNA-21(1.88±1.14)、CEA(30.1±19.9)ng/mL、细胞角蛋白(12.8±5.2)ng/mL,均低于鳞癌患者,NSE[(26.1±3.2)ng/mL]水平高于鳞癌患者,差异均有统计学意义(t=1.158、1.192、0.423、1.913,P=0.260、0.247、0.677、0.070);Ⅲ~Ⅳ期非小细胞肺癌患者血清miRNA-21(2.58±0.96)、CEA(38.1±17.9)ng/mL、CYFRA21-1(16.8±6.2)ng/mL、NSE(26.9±10.2)ng/mL,均高于Ⅰ~Ⅱ期非小细胞肺癌患者,但仅CYFRA21-1差异有统计学意义(P<0.05),其它三项差异无统计学意义(t=1.478、0.574、2.114、1.015,P=0.155、0.573、0.047、0.322)。结论非小细胞肺癌患者接受血清miRNA-21与肿瘤标志物CEA、CYFRA21-1、NSE的联合检查,诊断准确率较高,这对于患者的诊治与预后评估等十分关键,可作为非小细胞肺癌患者的首选诊断方式。

  • 标签: 癌,非小细胞肺 微小RNA-21 肿瘤标志物CEA 细胞角蛋白 神经元特异性烯醇化酶 早期 诊断价值
  • 作者: 田英超 曾冰清 章开 汤智慧
  • 学科: 医药卫生 >
  • 创建时间:2020-11-08
  • 出处:《药物不良反应杂志》 2020年第10期
  • 机构:解放军总医院医疗保障中心药剂科,北京 100853;火箭军特色医学中心药剂科,北京 100088,深圳市宝安区石岩人民医院药剂科,深圳 518108,江西省肿瘤医院药剂科,南昌 330029,解放军总医院医疗保障中心药剂科,北京 100853
  • 简介:摘要1例29岁女性患者因准备怀孕服用多维元素片(29)(每片含碘150 μg)近1年。孕前检查发现甲状腺功能异常,游离甲状腺素(FT4)23.2 pmol/L,游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)5.56 pmol/L,促甲状腺激素(TSH)0.10 mU/L。遵医嘱立即停用多维元素片(29)。停用该药5 d后复查甲状腺功能仍异常,FT4 21.2 pmol/L,FT3 5.39 pmol/L,TSH 0.08 mU/L,促甲状腺素受体抗体<0.3 U/L;停药59 d后复查,甲状腺功能恢复正常,FT4 16.35 pmol/L,FT3 4.97 pmol/L,TSH 2.36 mU/L,考虑患者的甲状腺功能异常为多维元素片(29)所致。

  • 标签: 维生素类 补充疗法 甲状腺功能试验 甲状腺功能亢进症
  • 简介:摘要环状RNA(circular RNA,circRNA)是一类具有闭合环状结构的非编码RNA分子,大量存在于真核转录组中。环状RNA在不同的物种中具有保守性,同时存在组织及不同发育阶段的表达特异性。由于环状RNA对核酸酶不敏感,故比线性RNA更稳定。环状RNA具有竞争性内源RNA机制(competing endogenous RNAs,ceRNA),调控可变剪切和转录过程,以及与功能蛋白结合等功能。基于环状RNA的特征和生物功能,其在疾病中发挥着重要的调控作用。随着研究发展,环状RNA在组织和疾病的表达机制和功能机制也取得了进步。本综述旨在总结环状RNA的起源、特征、生物功能以及在疾病中的最新作用。

  • 标签: 环状RNA 成环机制 生物学功能 生物标志物
  • 简介:摘要目的探讨骨髓间充质干细胞(BMMSCs)来源外泌体miR-200a对肾小管间质纤维化的影响及其机制。方法2019年3月至2020年7月,收集从4周龄SD大鼠(福建医科大学动物实验中心)提取的BMMSCs来源外泌体,与从新西兰兔提取的肾小管上皮细胞共培养,提取BMMSCs来源外泌体,与肾小管上皮细胞共培养,蛋白免疫印迹(Western blot)检测上皮-间充质转化(EMT)标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)蛋白的相对表达水平,明确外泌体对EMT的影响。构建过表达和低表达miR-200a的BMMSCs,分别与肾小管上皮细胞共培养,Western blot检测E-cadherin、N-cadherin和Vimentin蛋白及Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路各标志蛋白的表达水平。双荧光素酶报告实验验证肾小管上皮细胞中miR-200a与β-catenin基因CTNNB1是否直接结合。使用方差分析和独立样本t检验分析组间差异。结果高剂量外泌体组E-cadherin表达水平较低剂量组更低(0.51±0.09比0.78±0.12,t=3.115,P<0.05),而N-cadherin(2.05±0.22比1.40±0.13,t=6.478,P<0.001)和Vimentin(1.01±0.13比0.75±0.12,t=2.987,P<0.05)表达水平高于后者。高表达miR-200a外泌体处理组E-cadherin表达水平较低表达miR-200a外泌体处理组降低(0.71±0.09比1.48±0.14,t=4.751,P<0.05),而N-cadherin(1.55±0.12比0.75±0.10,t=11.603,P<0.01)和Vimentin(0.88±0.07比0.37±0.04,t=6.039,P<0.05)表达水平前者较后者更高。Wnt/β-catenin信号通路标志蛋白糖原合成酶激酶3β(GSK3β)表达量在组间差异无统计学意义(0.89±0.21比0.92±0.15,t=0.130,P>0.05),而低表达miR-200a外泌体处理组p-GSK3β、β-catenin和T细胞因子-1(TCF-1)表达水平均高于高表达miR-200a外泌体处理组(1.89±0.17比1.15±0.12,t=4.125,P<0.05;1.32±0.09比0.74±0.15,t=4.962,P<0.05;0.96±0.08比0.38±0.05,t=6.740,P<0.05)。双荧光素酶报告实验显示,野生型β-CTNNB1肾小管上皮细胞中,miR-200a组细胞荧光活性显著低于miR-NC组(0.51±0.07比0.98±0.08,t=13.251,P<0.01),差异有统计学意义。而突变型β-CTNNB1的细胞中,miR-200a组细胞荧光活性与miR-NC组差异无统计学意义(0.94±0.05比0.96±0.07,t=0.247,P>0.05)。结论BMMSCs来源外泌体miR-200a通过直接作用β-catenin基因CTNNB1,降低β-catenin表达,抑制Wnt/β-catenin通路激活,从而抑制肾小管上皮细胞EMT过程。

  • 标签: 肾间质纤维化 上皮-间充质转化 骨髓间充质干细胞 微小RNA-200a Wnt/β-连环蛋白通路
  • 简介:摘要甲状腺髓样癌(medullary thyroid cancer,MTC)患者相较于分化型甲状腺癌患者预后较差,手术方式也相对更加激进。但近年来国内外学者发现,甲状腺微小髓样癌(minute-medullary thyroid carcinoma,MMTC)预后似乎相较其他髓样癌的预后更好,也针对其出现了不同的治疗理念。本文选取国内外近几年关于MMTC的相关文献,对MMTC目前的研究进展进行综述。

  • 标签: 甲状腺微小髓样癌 RET 降钙素 甲状腺切除术