简介：目的检测人乳头瘤病毒（HPV）L1壳蛋白在宫颈上皮内瘤变（CIN）患者宫颈脱落细胞中的表达，以寻求预测CIN的生物学标志物。方法收集2008年12月至2011年8月在河南省漯河市中心医院有指征行阴道镜活检患者的宫颈脱落细胞标本480例，采用免疫细胞化学法检测HPVL1壳蛋白的表达。结果480例患者HPVL1壳蛋白的总阳性率为40．2％（193／480），其中正常／慢性宫颈炎、CIN1、CIN2、CIN3和宫颈鳞状细胞癌（SCC）HPVL1壳蛋白的阳性表达率分别为40．5％（17／42）、66．2％（131／198）、26．4％（28／106）、17．3％（17／98）和0（0／36）。其中CIN1组、SCC组与正常／慢性宫颈炎组，CIN1组与CIN2／3组，CIN1、CIN2／3组与SCC组HPVLI壳蛋白阳性表达率比较，差异均有统计学意义（P均＜0．01）。结论HPVL1壳蛋白在宫颈上皮内瘤变中的阳性表达随病变程度的加重而呈下降趋势，提示其有望成为预测宫颈癌前病变程度的标志物。

简介：HER-2具有配体诱导的酪氨酸蛋白激酶活性,与表皮生长因子结合后可启动细胞核内相关基因表达,促进细胞增殖[1]。1987年Slamon等[2]对189例乳腺癌患者进行研究后发现,其中30%存在HER-2扩增或过表达,并且,HER-2是有别于肿瘤大小、淋巴结及激素受体外的乳腺癌重要预后因子,是影响乳腺癌患者复发和生存的独立预后因素。

简介：目的观察敲减BTBD7基因后人乳腺癌MCF-7细胞的运动侵袭能力的变化,并探讨其作用机制。方法将经慢病毒转染shRNA,敲减BTBD7基因表达后的细胞作为实验组（MCF-7-shBTBD7）,未进行慢病毒转染的细胞为对照组（MCF-7-vec）。应用划痕愈合实验、Transwell侵袭实验、MTT法绘制细胞生长曲线等方法来检测实验组和对照组内MCF-7细胞的侵袭转移以及增殖能力之间的区别,两组试验结果比较采取独立样本t检验。在此基础上通过肿瘤信号通路筛选芯片筛选出BTBD7作用的下游信号通路,并以Westernblot实验验证这条信号通路是否确实参与其中发挥作用。结果划痕愈合实验结果显示,与对照组相比,实验组MCF-7细胞的迁移能力显著降低[24h愈合率：（85.95±5.30）%比（43.38±4.01）%,t=18.108,P〈0.001];Transwell侵袭实验显示实验组和对照组细胞侵袭能力出现明显的差别,与对照组相比,实验组细胞的侵袭能力显著降低（24h细胞计数：152±7比50±8,t=27.378,P〈0.001）;MTT实验显示从第4天开始两组细胞增殖能力出现差异,对照组细胞数为（3.17±0.23）×10^4/ml,明显高于实验组的细胞数为（2.58±0.21）×10^4/ml,差异具有统计学意义（t=3.189,P〈0.050）;第7天对照组的细胞数为（9.57±0.36）×10~4/ml,仍然显著高于实验组的细胞数（7.29±0.37）×10^4/ml,差异具有统计学意义（t=7.654,P〈0.050）。通过双荧光素酶检测系统检测肿瘤信号通路筛选芯片的结果表明Wnt信号通路的相对荧光强度在两组间差异有统计学意义（t=12.509,P〈0.001）,Westernblot实验结果同样表明,与对照组相比,实验组的c-Myc、MMP-7以及β-catenin的蛋白水平均发生变化。结论BTBD7基因可能通过作用于Wnt/β-catenin信号通路促进人乳腺癌MCF-7细胞的侵袭转移。

简介：目的探讨第三代杂交捕获技术定量分型（daltonbiohybridcapture3,DH3）检测高危型人乳状瘤病毒（humanpapilomavirus,HPV）在宫颈癌筛查中的应用价值。方法采用DH3和第二代杂交捕获技术（HC2）检测264例宫颈癌筛查女性宫颈脱落细胞的HPV,同时行TCT检查,TCT结果异常者（≥意义不明确的非典型鳞状细胞）行阴道镜下宫颈活检。比较两种方法检测HPV结果的一致性及检出宫颈病变情况。结果264例女性中,HC2法检出HPV阳性者32例（12.12%）。DH3法检出HPV阳性者39例（14.77%）,其中HPV16/18阳性患者14例（35.90%）。264例女性中,DH3和HC2检出HPV结果的符合率为94.32%（249/264）;15例结果不一致,其中8例的检测值在临界值,排除此8例后再次统计分析,符合率为97.27%（249/256）。264例中TCT异常者10例,阴道镜下宫颈活检LSIL1例、HSIL2例、宫颈癌1例。DH3HPV16/18阳性女性TCT异常及宫颈病变检出率（71.43%,10/14;21.42%,3/14）显著高于HC2HPV阳性检出率（31.25%,10/32;9.38%,3/32）（P〈0.05）。结论DH3与HC2检测高危型HPV符合率高,DH3HPV16/18阳性宫颈病变检出率高,DH3技术可作为临床上宫颈癌初筛的有效手段。

简介：目的探讨针对多药耐药基因（MDR-1）的小分子干扰RNA（siRNAs）和反义脱氧寡核苷酸（asODNs）联合应用逆转人乳腺癌细胞MCF-7／ADR的作用效果。方法设计并合成针对MDR-1基因同一序列的siRNAs和asODNs及阴性对照siRNAs，采用转染试剂lipofectamine^TM2000分别转染人乳腺癌耐药细胞MCF-7／ADR；利用RT—PCR检测MDR—1mRNA和Westernblot检测MDR-1蛋白质的表达；采用罗丹明123外排实验检测P—gP的转运功能，MTT法检测MCF-7／ADR细胞对阿霉素的耐药逆转效果。结果siRNAs、asODNs、asODNs和siRNAs联合应用均能降低MDR-1mRNA及其蛋白质表达，提高P—gP的转运功能，使细胞对阿霉素的敏感性明显恢复；asODNs和siRNAs联合应用效果明显提高；低浓度siRNAs（200mmol／L）比高浓度asODNs（5umol／L）的效果强。结论siRNAs、asODNs能有效逆转人乳腺癌细胞MCF-7／ADR的多药耐药，asODNs和siRNAs联合应用效果明显加强。

简介：目的探讨生育期妇女宫颈上皮内瘤变（CIN）中高危型人乳头瘤病毒（HR—HPV）感染与Ki一67表达的关系。方法通过第二代杂交捕获方法（HC2）检测248例生育期妇女HR—HPV感染情况，同时采用免疫组化法测定Ki-67的表达情况。结果①正常或慢性宫颈炎组、CIN1、CIN2和CIN3组HR—HPV感染率分别为14％（7／50）、55．1％（38／69）、88．7％（63／71）和93．1％（54／58），差异有统计学意义（P〈0．05），②各级别CIN患者HR—HPV载量明显高于正常或慢性宫颈炎组，差异有统计学意义（P〈0．05），CIN各组HR—HPV载量两两比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）；③HR-HPV病毒载量与Ki-67呈正相关（r=0．817，P〈0．05）。结论HR-HPV载量持续高表达可能引起组织中Ki-67异常表达，可能是低级别CIN进展为高级别的原因。

简介：目的研究高危型人乳头瘤病毒（high-riskhumanpapillomavirus,hrHPV）E6/E7mRNA在结果意义不明的非典型鳞状上皮细胞（atypicalsquamouscellsofundeterminedsignificance,ASCUS）中的分流效率,探索其在ASCUS分流中的临床价值。方法选取2013年至2015年在青岛市立医院妇科门诊行细胞学筛查结果为ASCUS的女性405例,年龄21~65岁。根据HPV检测方法,分为3组：HC2组、HPV分型组、hrHPVE6/E7mRNA（E6/E7）组。比较3种HPV检测方法分流ASCUS的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、阴道镜转诊率、CIN2~＋/CIN3~＋检出率。结果（1）E6/E7分流ASCUS的CIN2~＋灵敏度为100.00%（90.51%~100.00%）,CIN2~＋/CIN3~＋的特异度分别为64.84%（53.06%~75.99%）、56.46%（43.98%~69.72%）,阴性预测值分别为100.00%（99.41%~100.00%）、100.00%（99.34%~100.00%）,与HC2和HPV分型比较差异无统计学意义（P〉0.05）。阳性预测值分别为40.79%（37.91%~44.29%）、15.79%（10.07%~20.94%）,高于HC2（P〈0.05）。阴道镜转诊率为47.80%,低于HC2和HPV分型（P〈0.05）。CIN2~＋检出率为19.50%,高于HC2（P〈0.05）。（2）E6/E7分流ASCUS检测CIN2~＋的曲线下面积为0.815,〉HC2和HPV分型（P〈0.05）。结论hrHPVE6/E7mRNA分流ASCUS的灵敏度、特异度与HC2相似,PPV和CIN2~＋检出率更高,阴道镜转诊率更低,可用于ASCUS的分流。