简介:摘要:宫颈癌是全球女性最常见的恶性肿瘤之一,其致病因子之一是人乳头瘤病毒(HPV)的高风险型感染。HPV E6和E7基因的活化对于宫颈癌的发展起着重要的作用,因此,检测HPV E6/E7 mRNA的表达水平在宫颈癌中的诊断和治疗中具有重要的意义。本文将详细介绍HPV E6/E7 mRNA检测在宫颈癌中的研究进展,包括其原理、检测方法、临床应用。
简介:摘要目的分析E6/E7mRNA检测在宫颈病变筛查中的应用价值。方法选取本院2017年9月—2018年11月50例因宫颈疾病就诊的患者为研究对象,开展宫颈病变筛查。结果E6/E7mRNA检测方式宫颈疾病检出率为80.0%,与病理学检查比较差异不具备统计学意义(P>0.05)。E6/E7mRNA检测方式检测宫颈疾病的敏感性、阳性预测值、阴性预测值与病理学检查比较,差异不具备统计学意义(P>0.05)。结论E6/E7mRNA检测方式对ASC-US分流意义较为明确,能够有效指导阴道镜的合理使用。
简介:摘要目的通过突变整合于宿主细胞中的人乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV)16型的E6、E7致癌基因,探索预防和治疗宫颈癌的新方法。方法以SiHa细胞系为研究对象,设计靶向其内整合的HPV16 E6和E7基因的小引导RNA(small guide RNA,sgRNA),将其克隆入CRISPR/Cas9质粒,并应用其将E6、E7基因敲除,随后应用错位酶切法和克隆测序检测突变效果,并用细胞迁移与侵袭实验检测细胞的侵袭力。结果设计的sgRNA被克隆入CRISPR/Cas9质粒,经测序克隆正确。该质粒转染SiHa细胞后,可以引发靶点DNA的突变,致使E6和E7基因密码子改变,无法正确表达。E6、E7突变后SiHa细胞侵袭及增殖能力下降(t检验,pCas9组与psgE6-1-1-Cas9组相比,P=0.0006; pCas9组与psgE7-1-2-Cas9组相比,P=0.0007),促进肿瘤抑制因子P53的表达恢复,细胞的恶性度降低。
简介:摘要目的探讨甲状腺彩超、BRAF基因突变、超声造影及超声引导下细针穿刺(FNA)单用及联合对甲状腺结节良恶性诊断的效果。方法选取2014年10月至2017年1月北京大学深圳医院内分泌科、特诊科、甲乳外科收治的108例甲状腺结节患者,男35例,女73例,年龄(38.1±11.3)岁,年龄范围为18~69岁。采用彩超、BRAF基因突变、超声造影及FNA对其良恶性进行诊断,以术后病理结果为诊断标准,计算每种方法单用及联合使用的诊断准确率、灵敏度和阳性预测值。结果彩超准确率为55.65%,灵敏度为86.95%,阳性预测值为88.24%;BRAF基因突变准确率为67.83%,灵敏度为63.27%,阳性预测值为98.41%;超声造影准确率为84.35%,灵敏度为91.84%,阳性预测值为90.00%;FNA准确率为94.78%,灵敏度为95.92%,阳性预测值为97.92%;超声造影联合FNA准确率为88.70%,灵敏度为97.96%,阳性预测值为89.72%;BRAF基因突变联合FNA准确率为95.65%,灵敏度为97.96%,阳性预测值为96.97%;超声造影、BRAF基因突变联合FNA准确率为88.70%,灵敏度为97.96%,阳性预测值为89.72%。结论综合诊断准确率、灵敏度和阳性预测值,FNA为最优的诊断方法,超声造影次之,BRAF基因突变稍差,彩超最差;超声造影联合FNA、BRAF基因突变联合FNA或者超声造影、FNA与BRAF基因突变三者联合不能增加诊断效果。
简介:摘要目的通过对地区慢性乙型肝炎患者HBV病毒基因分型、耐药突变基因的检测,明确其基因型,确认患者是否耐药,从而指导临床抗病毒治疗。方法采用荧光定量PCR和基因芯片反向斑点杂交技术检测102例慢性乙型肝炎患者血清HBV基因型和耐药突变基因型。结果102例慢性乙型肝炎患者中(1)血清HBVDNA定量为(4.5±2.3)×103~(5.8±1.5)×108copies/ml(2)HBV基因型C型77例占77.5%,B型24例占23.5%,D型1例约占1%(3)其中79例未采取过核苷(酸)类药物抗病毒治疗的患者未出现耐药,23例使用过核苷(酸)类药物抗病毒治疗一个疗程以上的,耐药突变点变异为M204V/I型的13例,L180M型的为5例,L180M+M204VI的为5例,未检出其他突变基因型。23例耐药基因型中HBV-C基因型占20例,3例为HBV-B基因型。结论本地区HBV基因型以C型为主,核苷(酸)类药物抗病毒治疗过程中HBV-C基因型容易发生基因突变而耐药,且以M204V/I突变型为主。检测HBV基因型和耐药突变型是指导临床抗病毒治疗的重要指标。
简介:摘要目的检测牙源性角化囊肿(odontogenic keratocyst,OKC)是否存在SMO基因突变,进一步完善对OKC发病机制的认识。方法收集2012年9月至2017年6月就诊于北京大学口腔医学院·口腔医院口腔颌面外科的OKC患者,10例为痣样基底细胞癌综合征性OKC(女性4例,男性6例),20例为散发性OKC(女性7例,男性13例)。采集患者的病变组织,分离衬里上皮和纤维间质,采用Sanger测序法分别检测上皮与间质DNA中SMO基因突变情况。结果检测发现3个SMO基因突变位点,即1例综合征性OKC携带c. 2081C>G(p.P694R)突变,2例散发性OKC分别携带c. 907C>T(p.L303F)突变和c. 1247_1248delinsAA(p.G416E)突变,前2例突变为未被报道过的SMO新突变,且2例散发性OKC均不伴PTCH1突变。结论除PTCH1突变外,OKC还存在SMO基因突变,可能与OKC的发病机制有关。
简介:摘要目的了解自贡地区近两年临床分离的金黄色葡萄球菌中耐药基因qacA的携带情况。方法采用CLSI推荐的30mg头孢西丁纸片法进行耐甲西林金黄色葡萄球菌(MRSA)鉴定,采用PCR技术检测qacA基因。结果临床分离的143株金黄色葡萄球菌中65株为MRSA(其中qacA基因阳性率为10.8%),共有9株qacA基因呈阳性(阳性率为6.3%)。结论自贡地区临床分离的金黄色葡萄球菌中qacA基因携带率低于国外文献报道,与国内文献报道一致。