34例胃肠道间质瘤的临床病理及免疫组化特征

34例胃肠道间质瘤的临床病理及免疫组化特征

王忠文沈红程涛

王忠文沈红程涛（云南省昭通市第一人民医院病理科云南昭通657000）

【摘要】目的探讨胃肠道间质瘤（gastrointestinalstromaltumor，GIST）的组织学特征和免疫组化表达及其诊断及鉴别诊断。方法回顾性分析云南省昭通市第一人民医院收治的34例GIST患者的临床病理资料，并对其石蜡包埋组织采用免疫组化SP染色法检测CD117、CD34、DOG-1、vimentin、α-SMA、Desmin、S-100、NSE的表达，分析其免疫组化特点。结果CD117、CD34、DOG-1、vimentin、阳性表达率分别为94.1％、76.5％、97.1％、100％，多为弥漫强阳性，α-SMA、S-100、NSE阳性表达率分别为26.5％、2.9％、20.6％，为局灶阳性或弱阳性，Desmin全部阴性。结论CD117、CD34、DOG-1可作为诊断GIST的一线抗体，联合应用vimentin、α-SMA、Desmin、S-100、NSE，可提高GIST的诊断与鉴别诊断准确率。

【关键词】胃肠道间质瘤组织学特征免疫组化

胃肠道间质瘤（gastrointestinalstromaltumor，GIST）是消化道最常见的间叶源性肿瘤之一，是不同于神经鞘瘤、平滑肌瘤、平滑肌肉瘤及其他间叶源性肿瘤的独立的肿瘤。它可以发生在胃肠道的任何部位，此外，还有约5％发生在胃肠道外。目前，GIST的确诊依赖于c-kit蛋白（CD117）阳性表达，但仍然有少部分具有典型临床病理特征的GIST不表达CD117，近来，有文献提出DOG-l(discoveredonGIST1)在GIST中高表达[1]。我们通过观察34例GIST的组织学特征及免疫组化表达，探讨GIST的诊断与鉴别诊断，以提高对GIST的认识与了解。

1材料与方法

1.1临床资料收集云南省昭通市第一人民医院病理科2007年1月～2013年2月确诊的34例胃肠道间质瘤病例，其中男28例，女6例；年龄36～70岁，平均51.6岁；肿瘤部位：胃20例，小肠9例，结肠5例；临床表现有：腹部胀痛、食欲不振、呕吐、呕血、便血、腹部肿块，其中一例以肠蛔虫症收住，剖腹探查发现回盲部肿块（图1），剖开肠管可见大量蛔虫。肿瘤位于胃肠道粘膜下者突向胃肠道腔内，粘膜光滑，部分出现溃疡，位于浆膜下者，大体形态为结节状，与周围组织常有不同程度粘连，位于肌壁间者，可同时向粘膜和浆膜面不同程度突出。肿瘤切面灰白、灰红、实性，部分伴有囊性、出血性改变（图2），危险度较低者，质地较韧、脆，危险度较高者，质地较软，部分呈鱼肉样。

1.2方法标本均采用10％中性福尔马林固定，常规石蜡包埋，连续切片厚度3um，免疫组化染色采用SP法，DAB显色，以PBS缓冲液（0.01mol/L，pH7.4）代替第一抗体作阴性对照，用已知阳性组织切片作阳性对照。所用单克隆抗体、SP试剂盒、DAB显色剂及阳性对照片均由福州迈新生物技术开发有限公司生产。操作严格按SP试剂盒说明书进行。

1.3结果判定CD117、CD34、DOG-1阳性为细胞膜或∕和细胞质中出现棕黄色颗粒（图3-5），vimentin、α-SMA、Desmin、NSE阳性为细胞质中出现棕黄色颗粒，S-100阳性为细胞核或细胞核与细胞质同时出现棕黄色颗粒（图6）。肿瘤危险度评估，根据2008版NIH（美国国立卫生署）原发GIST切除后危险度分级[2]。

1.4统计学分析采用SPSS16.0统计学软件，设P＜0.05为差异有统计学意义。

2结果

本研究中，GIST形态以梭形细胞为主，少数为梭形细胞及上皮样细胞混合。梭形细胞胞浆丰富，呈嗜酸性，核呈杆状或短梭形，少量可见核端空泡，细胞呈交叉束状、旋涡状、栅状排列，上皮样细胞呈圆形、类圆形或多边形，胞浆丰富，呈嗜酸性，部分上皮样细胞有核周空晕，肿瘤部分区域的上皮样细胞可有透明或印戒细胞样改变，细胞呈弥漫片状、小巢状等排列，肿瘤细胞有不同程度异型性及核分裂像（图7～9）。肿瘤组织CD117、CD34、DOG-1、vimentin、Desmin阳性率分别为94.1％（32／34）、76.5％（26／34）、97.1％（33／34）、100％（34／34）、0％（0／34），均为弥漫阳性或强阳性；α-SMA、S-100、NSE阳性率分别为26.5％（9／34）、2.9％（1／34）、20.6％（7／34），均为局灶阳性，各项免疫组化阳性率与肿瘤的危险程度无明显相关性（P＞0.05），（表1）。

表1CD117、CD34、DOG-1、vimentin、α-SMA、Desmin、S-100及NSE在GIST中阳性表达情况

图1肿瘤位于回盲部，表面光滑，呈结节状

图2肿瘤切面灰白、实性、局部出血

图3肿瘤组织位于肠粘膜下，CD117阳性，SP法

图4梭形肿瘤细胞胞膜胞质DOG-1强阳性，SP法

图5上皮样肿瘤细胞胞膜DOG-1强阳性，SP法

图6肿瘤组织内灶性S-100阳性，SP法

图7梭形肿瘤细胞呈束状交织排列，核分裂多见

图8上皮样肿瘤细胞可见核周空晕，核分裂多见

图9梭形细胞和上皮样细胞混合，部分细胞可见核端空泡

3讨论

GIST是不同于真正的平滑肌瘤和雪旺瘤的一种独立的肿瘤，最早于1983年由Mazur和Clark研究发现并命名[3]。随着众多学者的深入研究及电镜、免疫组化、分子生物学的不断发展和应用，对GIST也有了更深刻、更全面的认识。2010年9月，在COSO学术年会期间，胃肠间质瘤专家委员会38位专家对2009版中国胃肠道间质瘤诊断治疗专家共识进行更新、修改并补充2011年的最新资料，形成了最新的2011版“共识”。重新对GIST进行定义：是胃肠道最常见的间叶源性肿瘤，由突变的c-kit或血小板源性生长因子受体α(PDGFRA)基因驱动，组织学上多由梭形细胞、上皮样细胞、偶或多形性细胞，排列成束状或弥漫状图像．免疫组化检测通常为CDl17或DOG-1表达阳性[2]。目前，普遍认为GIST起源于胃肠道Cajal间质细胞（interstitialcellsofCajal，ICC）或向ICC分化的多潜能干细胞，其诊断必须依据大体病理学、病理组织学和免疫组织化学检测结果共同作出[4]。

CD117是c-kit原癌基因的蛋白产物，为Ⅲ型跨膜蛋白酪氨酸激酶生长因子受体蛋白，表达于原始造血干细胞亚群、肥大细胞、黑色素细胞、精原细胞及胃肠道ICC，在GIST中的阳性率高达81％-100％[5]，是诊断GIST较为可靠的免疫标记物，但仍有约10％的GIST不表达CD117。

CD34是一种造血前体细胞抗原，是较早用于诊断GIST的常用标记物，并在内皮细胞、kapois’s肉瘤及一些纤维源性肿瘤中有表达，在GIST中阳性表达率约70％-80％，在孤立性纤维瘤中阳性率几乎近100％，而在平滑肌源性肿瘤中无表达[6][7]。

DOG-1是2004年West[1]等运用基因表达谱技术发现的一种GIST中高表达的功能未知基因，位于人类染色体11q13上的CCND1-EMS1位点，含有26个外显子，编码960个氨基酸组成，分子量为114kDa，是一种8次跨膜蛋白，推测其功能可能为一种钙依赖的氯离子通道蛋白。复习文献显示DOG-1在GIST中的特异性和敏感性均高于CD117，尤其在CD117阴性的GIST中，对GIST的诊断有很大的价值，有国内文献报告[8]，CD117阴性的GIST中阳性率高达93.1％（54／58），在孤立性纤维瘤中不表达[7]。

本组研究，2例CD117阴性中，1例CD34阴性、DOG-1阳性，另1例CD34和DOG-1均为阳性；8例CD34阴性中，6例CD117阳性，DOG-1全部阳性。可见，联合检测CD117、CD34及DOG-1有助于提高GIST的诊断率。

胃肠道ICC具有向肌源性和神经源性分化的潜能，因此部分GIST病例可局灶表达肌性或神经性标记，但不是其主要特征。GIST对S-100及NSE的阳性表达率，各文献报道不一[9]。本组研究，S-100阳性表达率低，且为局灶表达，可用于GIST与神经源性肿瘤的鉴别。NSE局灶性低表达，可提高GIST与神经源性肿瘤的鉴别。有国内文献报告[10]，NSE阳性的高表达率，有助于GIST的诊断，本研究中，NSE阳性表达率较低，可能与研究病例较少有关。α-SMA局灶性低表达及Desmin阴性可除外平滑肌源性肿瘤，与CD34联合检测，可用于GIST与平滑肌源性肿瘤的鉴别。

综上所述，联合应用CD117、CD34、DOG-1、vimentin、α-SMA、Desmin、S-100、NSE，可提高GIST的诊断与鉴别诊断准确率。

参考文献

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