王明秋(黑龙江省疾病控制中心黑龙江哈尔滨150030)
【摘要】目的探讨刺五加王浆口服液抗疲劳作用。方法经口灌胃给予ICR小鼠刺五加王浆口服液(高剂量组:10mL/kg?BW;中剂量组:3.3mL/kg?BW;低剂量组:1.0mL/kg?BW),30天后,进行负重游泳试验;取血进行血乳酸曲线下面积和血清尿素测定试验;取肝脏进行肝糖原测定试验。结果高剂量组和中剂量组负重游泳时间延长(P<0.05,P<0.01);各剂量组肝糖原浓度升高(P<0.01);中剂量组血乳酸曲线下面积减少(P<0.01);各剂量组血清尿素浓度无统计学差异(P>0.05)。结论刺五加王浆口服液具有抗疲劳作用。
【关键词】刺五加王浆口服液抗疲劳肝糖原血乳酸血清尿素
【中图分类号】R965【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2012)30-0080-02
“疲劳”是由于乳酸及其他代谢产物堆积,肌张力下降、运动耐久性降低的状态。人体长时间保持某种状态(久坐等),即可使机体处于疲劳状态。若长期处于疲劳状态,其循环系统、消化系统和运动系统等都会受到影响,导致各种疾病的发生。刺五加(ManyprickleAcathopanaxRoot)根茎中含有刺五加苷和维生素等营养物质[1]。蜂王浆含有蛋白质、维生素及肌醇等多种人体需要营养与代谢物质[2]。本研究旨在探讨刺五加与蜂王浆混合液成品(刺五加王浆口服液)的抗疲劳作用。
1材料与方法
1.1试剂与动物分组:刺五加王浆口服液(哈药集团三精制药股份有限公司),血清尿素测定试剂盒(中生北控有限公司),破膜液,5%三氯醋酸(蒸馏水配制)(TCA),蒽酮试剂(0.05%蒽酮、1%硫脲、用72%H2SO4)。清洁级雄性ICR小鼠160只由吉林大学基础医学院动物实验中心提供,许可证号:SCXK(吉)20030001,体重18-22g。将ICR小鼠随机分为4组,每组进行一种试验,每种试验分为三个剂量组和一个阴性对照组。第一组进行负重游泳试验。第二组进行肝糖原测定试验,第三组进行血乳酸曲线下面积试验,第四组进行血清尿素测定试验。
1.2剂量选择:试验设三个剂量组及一个阴性对照组,高剂量为10mL/kg?BW(相当于人体推荐口服剂量的30倍)、中剂量为3.3mL/kg·BW(相当于人体推荐口服剂量的10倍)、低剂量为1.0mL/kg·BW(相当于人体推荐口服剂量的3倍)。三个剂量组的动物分别给予不同浓度受试物,阴性对照组给予相应体积蒸馏水,各组动物均按20mL/kg?BW连续灌胃30天后,进行各项指标的检测。
1.3方法
1.3.1负重游泳试验
末次给予受试样品30min后,将尾跟部负重5%体重铅皮的小鼠置于游泳箱中游泳。水深不少于30cm,水温25℃±1℃,记录小鼠自游泳开始至死亡的时间,即小鼠负重游泳时间。
1.3.2肝糖原测定
末次给予受试样品30min后,处死动物,取肝脏经生理盐水漂洗后用滤纸吸干,精确称取肝脏100mg,加入8mLTCA,每管匀浆1min,将匀浆液倒入离心管,离心15min,将上清液转移至另一试管内。按《保健食品检验与评价技术规范》(2003版)进行肝糖原测定。
1.3.3血乳酸曲线下面积试验
末次给予受试样品30min后采血,小鼠不负重,在温度为30℃水中游泳10min后停止。在游泳前、游泳后及休息20min后的三个时间点各从内眦采血20μL加入到40μL破膜液中,立即充分振荡破碎细胞,进行血乳酸曲线下面积计算。
1.3.4血清尿素测定
末次给予受试样品30min后,在温度为30℃的水中不负重游泳90min,休息60min后摘眼球取血0.5mL(不加抗凝剂)。置4℃冰箱约3h后,制备血清,测定血清尿素浓度。
1.4试验数据统计:应用STATA8.0统计软件对试验数据进行分析。
2结果
2.1刺五加王浆口服液对小鼠负重游泳时间和肝糖原含量的影响
小鼠不同剂量刺五加王浆口服液灌胃30天后,高、中剂量组游泳时间明显长于阴性对照组(P<0.05,P<0.01);高、中、低剂量组肝糖原含量均显著高于对照组(P<0.01)。
表1刺五加王浆口服液对小鼠负重游泳时间和肝糖原含量的影响
*与阴性对照组比较有显著性差异(P<0.05),**与阴性对照组比较有显著性差异(P<0.01)。
2.2刺五加王浆口服液对小鼠血清尿素和血乳酸曲线下面积的影响
经口给予小鼠不同剂量刺五加王浆口服液30天后,中剂量组三个时间点血乳酸曲线下面积显著低于对照组(P<0.01);血清尿素水平,各剂量组无明显变化。
表2刺五加王浆口服液对小鼠血乳酸曲线下面积和血清尿素含量的影响
**与阴性对照组比较有显著性差异(P<0.01)。
3讨论
抗疲劳的评价方法主要有两个方面:运动耐力试验和生化指标改变的检测。肝糖原是生化指标中能量物质的代表检测项目。肝糖原含量与疲劳发生的快慢或程度高度相关[3]。刺五加王浆口服液各剂量组肝糖原含量显著高于对照组,说明刺五加王浆口服液可以通过减轻疲劳的发生速度起到抗疲劳作用。血乳酸和尿素含量是生化指标中代谢产物的代表检测项目。血乳酸是肌肉活动的主要代谢产物,可反映无氧代谢水平、从而间接反映疲劳产生和消除速度[4]。本次试验结果显示3.3mL/kg?BW的刺五加王浆口服液可以降低疲劳过程中无氧代谢水平,减缓疲劳的产生速度,起到抗疲劳作用。血清尿素浓度可反映体内蛋白质的分解情况,其浓度与机体机能、疲劳程度及负荷量大小呈密切正相关[4]。刺五加王浆口服液对小鼠血清中尿素浓度没有影响,说明刺五加王浆口服液不影响机体蛋白质的分解过程。负重游泳试验是反映机体疲劳程度最直接、最客观的指标。本次试验中高、中剂量组负重游泳试验为阳性,说明一定剂量的刺五加王浆口服液具有抗疲劳作用。
中药或天然植物有效成分对疲劳的预防与促进恢复的功效主要与增强机体抗氧化酶活性,减少氧自由基生成,以及调节内分泌系统和组织代谢机能等作用有关[5]。文献资料显示,刺五加总苷具有改善睡眠作用[1],蜂王浆具有增强免疫力作用[2]。通过本次试验证实两者的混合液成品(刺五加王浆口服液)具有抗疲劳作用,但其深入的抗疲劳机制还需进一步研究。
参考文献
[1]韩春霞,李廷利,郭冷秋.刺五加水煎剂改善睡眠作用研究.中华中医药学刊[J].2007,25(10):2084-2085.
[2]付英杰.蜂王浆近年研究与应用综述.第十二届山东省药剂学术会议.2006,09.
[3]浦钧宗.“多耐”运动保健饮料对动物和人体的影响.中国运动医学杂志[J],1992,11(4):208.
[4]郑哲君,李晓莉,王朔.抗疲劳功能食品的研究进展.食品科技[J],2006,32(2):42-44.
[5]王玮,金吉中,郜叶红等.抗运动性疲劳单味中药研究概述.中药材[J],2004,27(2):138-140.