脐带血采集方式以及质量影响因素的研究进展

脐带血采集方式以及质量影响因素的研究进展

柴怡

柴怡

（协和干细胞基因工程有限公司300384）

【摘要】人脐带血中含有丰富的造血干细胞，是除了骨髓以及外周血以外的另一种造血干细胞来源，在再生障碍性贫血、白血病和淋巴瘤等疾病中发挥着治疗作用。所输入脐带血中所含的造血干细胞数量是影响移植成功与否的首要因素。因此，如何提高脐带血的采集质量，分离获得足够多的造血干细胞，已成为目前临床上制约脐带血源造血干细胞移植手术应用于更多患者的瓶颈。本文分析了采集方式对脐带血采集质量的影响，同时还分析了一些常见的对采集质量产生影响的因素。

【关键词】脐带血采集质量采集方法

【中图分类号】R446.11【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2014）08-0015-02

目前，脐带血源造血干细胞的基础研究以及临床应用有较多的报道，备受学者的关注[1-4]。基于人们对脐带血造血干细胞的生物学特性有了更加深刻的认识与了解，脐带血源造血干细胞的优势也越来越明显。目前，临床上脐带血采集主要有两种方式，一种为体内采集法，指胎盘在子宫内尚未分娩出时进行的采集；另一种为体外采集法，指胎盘分娩出后再进行的采集。本文从临床上两种分娩方式即经阴道顺产和剖腹产分别进行两种采集方式的分析。

1.经阴道顺产的情况下

1.1体内采集法一旦胎盘分娩出后，立即用止血钳夹住脐带，用碘酒和75%酒精消毒脐带，用穿刺针刺入脐静脉，脐带血会受重力的作用流入含有抗凝剂的无菌采集袋中。采集结束后，将采集袋置于4℃冰箱保存。

1.2体外采集法一旦胎盘分娩出后，立即将其置于备有采集设备的无菌采集区域，胎盘中间有一个孔能够使脐带自然下垂，用碘酒和75%酒精消毒脐带，用穿刺针刺入脐静脉，脐带会在重力的作用下流入含有抗凝剂的无菌采集袋中。采集结束后，将采集袋置于4℃冰箱保存。

Solves等人[5]比较了这两种采集方式。体内采集的样本量为264例，体外采集的样本量为305例。研究人员分析比对了两组间脐带血采集量、有核细胞数、CD34+细胞数及集落形成单位细胞数（CFUs）的差异。（1）脐带血采集量：体内采集法获得（108.82±28.6）ml，体外采集法获得（98±28.47）ml；（2）分离前有核细胞数：体内采集（12.51±5.39）*108，体外采集法（11.14±4.79）*108；（3）分离浓缩后有核细胞数：体内采集（10.54±4.15）*108，体外采集法（8.55±3.52）*108；（4）CD34+细胞数：体内采集（3.65±3.38）*106，体外采集法（8.55±3.52）*106；（5）CD34+细胞所占百分比：体内采集法0.31±0.2，体外采集法0.32±0.16；（6）集落形成单位细胞数：体内采集（154.14±141.61）*104，体外采集法（121.13±113.98）*104。研究结果显示，在经阴道顺产的情况下，与体外采集法相比，体内采集法能够获得更多的脐带血采集量、有核细胞总数、CD34+细胞数及CFUs。同时有核细胞总数和CD34+细胞数之间（r=0.693；P<0.01）；有核细胞总数和CFUs之间（r=0.537；P<0.01）；CD34+细胞数和CFUs之间（r=0.641；P<0.01）有重要意义的联系。这说明了有核细胞总数可以反映脐带血的造血能力。此外，研究结果还显示体外采集法会增加微生物感染的可能性，这可能是胎盘分娩出后在体外进行操作的原因[6]。

两种采集方法会有明显不同结果的原因主要在以下三个方面：（1）体外采集法易导致胎盘分娩出后出现剥离面出血；（2）体外采集法较体内采集法的胎盘血管中形成了更多的血凝块；（3）体外采集法中从脐带被止血钳夹住到开始采集的时间较体内采集法长。因为体外采集法需要等到胎盘分娩出后才能进行采集。

2.剖腹产的情况下

2.1体内采集法对产妇进行子宫横切术，胎儿分娩出后，用碘酒和75%酒精消毒脐带，用穿刺针刺入脐静脉，脐带血会受重力的作用流入含有抗凝剂的无菌采集袋中。采集结束后，将采集袋置于4℃冰箱保存。

2.2体外采集法对产妇进行子宫横切术，胎盘分娩出后，立即将其置于备有采集设备的无菌采集区域，胎盘中间有一个孔能够使脐带自然下垂，用碘酒和75%酒精消毒脐带，用穿刺针刺入脐静脉，脐带会在重力的作用下流入含有抗凝剂的无菌采集袋中。采集结束后，将采集袋置于4℃冰箱保存。

Solves等人[7]也比较了这两种采集方式。体内采集的样本量为113例，体外采集的样本量为140例。研究人员分析比对了两组间脐带血采集量、有核细胞数、CD34+细胞数及集落形成单位细胞数（CFUs）的差异。（1）脐带血采集量：体内采集法获得（88.6±32.5）ml，体外采集法获得（92.5±27.6）ml；（2）有核细胞数：体内采集（90.8±55.6）*107，体外采集法（91.5±47.6）*107；（3）CD34+细胞数：体内采集（45.3±41.5）*105，体外采集法（38.2±21.2）*105；（4）集落形成单位细胞数：体内采集（156.6±160.1）*104，体外采集法（164±147.2）*104；（5）血小板：体内采集（214.3±55.1）*109，体外采集法（195.3±57）*109；（6）血细胞比容：体内采集法33±6.5，体外采集法35.2±5.9。研究结果显示，在剖腹产的情况下，两组之间除了血小板和血细胞比容外，其他各项检查均无显著性差异。血小板的差异可能是因为剥离面出血以及胎盘血管中的血凝块的原因。而对于血细胞比容的差异尚未有令人信服的解释。

3.影响采集质量的其他因素

Solves等人[8]的研究结果发现，胎盘重量和出生体质量是影响脐带血采集量、有核细胞数、CD34+细胞数、CFUs的主要因素。而其他一些因素如产妇的年龄、产妇是否吸烟、手术过程中是否施行硬膜外麻醉、新生儿性别和羊水性状等对采集质量无明显的影响。在临床实践中，既能够通过胎盘重量也可以通过出生体质量来预先估计采集量。出生体质量可以作为那些用体内采集法来采集脐带血的取舍标准，而胎盘重量可以作为那些用体外采集法来采集脐带血的标准。

目前的研究已证实了患者所输入的脐带血中所含的造血干细胞数量是影响移植成功与否的首要因素。因此，如何提高脐带血的采集质量，分离获得足够多的造血干细胞，已成为当前亟待解决的问题。本文分析总结了不同的采集方法及其他影响因素对采集质量的影响。

参考文献

[1]吴秀娥,温素芬,王桂英.人脐带血采集数量和质量的影响因素分析[J].现代医院,2011,03:21-23.

[2]罗伟琼,陈惠珍,黄春柳,陈小勇,李沈容,罗小珍,朱美玲.脐血采集方法、影响因素分析及注意事项[J].临床和实验医学杂志,2007,01:63-64.

[3]杜江榕,谢君辉,张军宏,李继云.人脐带血采集数量和质量的影响因素研究[J].吉林医学,2007,05:641-642.

[4]刘颖,郑郑.剖宫产手术中采集脐带血对母婴的影响[J].中日友好医院学报,2008,03:139-141.

[5]陈燕萍.采集脐带血对第三产程和产后出血的影响[J].中国乡村医药,2013,13:12.

[6]王芳.剖宫产下两种脐带血采集方法的对照研究[J].全科医学临床与教育,2013,05:594-595.

[7]师丽娜.脐血干细胞移植治疗失代偿期肝硬化临床有效性观察以及疗效指标意义观察[D].山东大学,2013.

[8]范秀波.脐带血干细胞体外培养条件优化与共培养研究[D].大连理工大学,2008.