简介:[摘要] 目的 探讨低氧处理对脐带血中有核细胞(total nucleated cell, TNC)、干细胞及T淋巴细胞等成分的影响。方法 采集脐带血10份,每份分为2组即空气氧组与低氧组,检测每个样本的白细胞数并作为TNC数,应用流式细胞术检测干细胞(CD34+细胞)、T淋巴细胞(CD3+细胞)占CD45+细胞的比例,计算出干细胞与T淋巴细胞的数值。应用配对样本的t检验,分别比较空气氧组与低氧组在TNC数、干细胞比例、T淋巴细胞比例、干细胞数、T淋巴细胞数方面的差别。结果 1. 空气氧组、低氧组TNC数分别为(13.12±1.89)×109/L、(12.57±1.63)×109/L,低氧组TNC数低于空气氧组(P =0.001)。2. 两组在干细胞比例、T细胞比例、干细胞数、T细胞数方面均无差异(P >0.05)。结论 空气氧处理有利于提高脐带血中的TNC数,而不会改变干细胞与T淋巴细胞数。
简介:目的比较乙肝肝硬化患者骨髓血,新生儿脐带血体外有核细胞收集的数量,有核细胞的种类和数量,干细胞质量等。方法乙肝肝硬化患者骨髓干细胞分离15例,脐带血干细胞分离15例。对分离前、后的骨髓和脐带血的相关细胞数量进行比较。结果骨髓平均标本量为200ml显著性大于脐血平均标本量90ml;骨髓平均有核细胞数显著大于脐血平均有核细胞数,分别为26.94×109/L和8.72×109/L;分离后的脐带血淋巴细胞和单核细胞百分比显著性大于骨髓血,淋巴细胞分别为60.56%和46.75%,单核细胞分别为17.9%和10.7%。分离后脐带血的干细胞中的CD34、CD73分选显著性多于骨髓血。分别为5.7比1.6和2.4比1.6。结论骨髓获取量多于脐带血,干细胞的数量及质量比较,脐带血优于乙肝肝硬化骨髓血。
简介:目的探讨为临床移植有效地分离和冷冻保存无关供者脐带血中的造血干细胞的方法.方法将由普通或改进的两种不同采集袋采集的脐带血,用两步离心法分离、浓缩脐带血中的有核细胞,用BioArchiveSystem(生物档案系统)或常规的程控降温系统将之冷冻,保存在-196℃液氮中.用流式细胞术和细胞培养法检测脐带血中的CD34+细胞和造血祖细胞含量.结果脐带血用改进的采集袋分离后,有核细胞和红细胞的回收率分别为86.4%±4.6%和44.2%±9.6%,而普通采集袋的回收率为78.4%±7.9%和49.8%±11.7%;将富含有核细胞悬液的体积浓缩到20ml时,有核细胞和红细胞的回收率分别为74.62±9.3%和34.9%±19.1%,浓缩体积为32ml回收率为86.4%±4.6%和45.1%±7.8%,但两者的CD34+细胞和造血祖细胞的回收率无统计学意义;冷冻脐带血融化后有核细胞、CD34+细胞和CFU-C回收率分别为84.2%±10.1%、96.0%±21.8%和115.1%±23.3%.苔盼蓝拒染率93.8%±4.4%.结论改进的采集袋能够明显提高有核细胞回收率.采用两步离心法和两种冻存方法能够有效地富集和冻存脐带血中的造血干细胞.
简介:摘要:目的 探讨阴道分娩中的脐带血采集方法,比较改良消毒法与目前传统方法在脐血采集中的不同效果,以减少脐带血采集过程血污染概率。方法 收集2020年1月至2021年9月我院产科两院区成功采集的阴道分娩脐带血样本1631份,按不同院区分组,A院区为试验组,B院区为对照组,两组分别采用改良法与传统法进行脐血采集,并对两组脐带血采集污染情况进行比较分析。结果 试验组980份脐带血采集中有55份病原菌检测阳性,阳性率为5.61%,B院区651份中有53份阳性,阳性率为8.14%;两组比较,差异有统计学意义(P 0.05)。 结论 脐带血微生物污染率与采集方法密切相关,通过改良脐血采集方式,可以有效降低脐带血采集污染率,提高脐带血的质量。
简介:大量的实验和临床资料表明,脐带血干细胞移植可成功的用于造血干细胞重建,本文从3000份脐带血的采集、分离、浓缩、低温保存、融化和各种测定等方面的经验,阐述如何在我国建立符合cGMP要求的高质量脐带血造血干细胞库,采用密闭式收集的脐带血和羟乙基淀粉(HES)混合,浓缩有核白细胞,经过微生物及组织配型(HLA)检测后,以液氮深低温保存供临床应用,贮存脐带血平均有核细胞(NC)总数为(1.2±0.6)×10^9,CD34^+细胞为(3.0±3.7)×10^6,CFU-GM为(1.1±0.7)×10^6,CFU-GEMM为(1.1±1.2)×10^6,回收率分别为91%,88%,85%和82%,红细胞和血红蛋白的回收率平均为(39±9)%和(40±8)%,平均同存体积为(35.1±7.1)ml,从脐带血收集到分离的平均时间为145小时,贮存前的脐带血活细胞比率大于95%,冻融后的活细胞比率大于92%,单个核细胞,CD34阳性细胞和CFU-GM的回收率分别为96%,90%,和91%。所收集脐带血中,未发现有人免疫缺陷病毒抗体(HIVAb)阳性,梅毒阳性率为0.1%,乙型肝炎表面抗原(HBsAg)阳性率为0.8%,乙型肝炎核心抗体(HBcAb)阳性率为3.2%,丙型肝炎抗体(HCVAb)阳性率为0.2%,母血巨细胞病毒(CMV)免疫学检测阳性率为87.1%,细菌污染率为1.2%,异常血红蛋白为0.1%,所贮存脐带血具有3个以上HLA位点和待查病人的相合机率为100%,6个HLA位点完全相筌地的机率为5%,若病人所需最低NC为2.7×10^7/kg,则所存脐带血中有近50%可供体重为50公斤左右病人应用。以上资料表明:(1)在中国建立一座能保存2万份以上规模的脐带血库是必要的,也是可行的,(2)我们目前所采用的方法和程序能保证高质量而且资料齐全的脐带血供临床应用。(3)脐带血体积和单个核细胞数和造血干/祖细胞含量呈正相关,仅收集体积大于60ml以及细胞数大于8×10^8的脐带血。
简介:摘要目的分析脐带血干细胞治疗脑梗塞后遗症近期疗效。方法将62例脑梗塞后遗症患者分为研究组(30例)和对照组(32例),研究组给予脐带血干细胞治疗,对照组采用常规康复训练方法,比较两组治疗前后运动功能和肌张力改善情况。结果研究组治疗后Fugl-Meyer评分从(52.2±17.6)升至(69.5±20.4),Ashworth评分从(2.4±1.2)降至(1.3±0.8);对照组治疗后Fugl-Meyer评分从(51.8±18.2)升至(58.2±20.5),Ashworth评分从(2.3±1.0)降至(1.5±1.0),组间差值比较差异显著(P<0.05)。结论在常规康复训练基础上联合脐带血干细胞治疗脑梗塞后遗症,效果更为理想,可有效改善患者运动功能和肌张力障碍,且安全性较高,值得在临床上加以推广。
简介:摘要脐带血中含有大量的间充质干细胞,引发了医学界的研究热潮。本文旨在整合近年国内外文献信息对脐带血间充质干细胞的临床进展进行阐述。笔者翻阅近2年大量文献,参考多项临床及试验数据,综合医学研究人员的最新研究成果,分系统阐述脐带血间充质干细胞的临床应用。最终发现,脐带血间充质干细胞有强大的多向分化潜能,这类细胞也可作为目的基因的载体表达特异性蛋白,有些目的基因也可通过质粒转染脐带血间充质干细胞,从而使目的基因的特性表现出来。脐带血间充质干细胞甚至可以通过体液因素和旁分泌途径增加自身向某一组织定向分化的能力。脐带血间充质干细胞的这些特性使其在多个系统疾病中都有很好的应用前景。
简介:摘要目的优化脐带血单个核细胞的分离方法,培养、纯化及鉴定脐血间充质干细胞(UCB-MSCs),并观察其生物学特性,探讨单份和混合UCB-MSCs的区别。方法采用四联袋方法和试管方法分离脐带血单个核细胞,比较两种方法分离后单个核细胞的回收率、细胞数及红细胞混入量。鉴定UCB-MSCs向神经样细胞横向分化的能力。酶联免疫吸附试验(ELISA)方法分析单份组和混合组培养液上清中白细胞介素(IL)-2和γ-干扰素(IFN-γ)含量。符合正态分布并方差齐的,根据数据类型应用参数检验中的单因素方差分析或t检验,不符合正态分布的应用非参数检验中秩和检验。结果试管法和四联袋法分离的单个核细胞回收率分别为(60.23±6.34)%、(71.92±11.30)%(P<0.05)。试管法和四联袋法分离后单个核细胞(MNC)数量分别为(6.12±1.21)×107、(9.29±3.11)×107个(P<0.05)。混合组的培养液上清中IL-2和IFN-γ含量高于单份组。单份组和混合组的IL-2水平分别为(0.52±0.13)、(1.50±0.23) pg/ml(P<0.05);单份组和混合组IFN-γ水平分别为(43.16±4.75)、(56.07±6.67) pg/ml(P<0.05)。巢蛋白(Nestin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)及神经胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)染色均为阳性表达。结论采用四联袋方法分离的单个核细胞回收率和细胞数均高于试管方法,四联袋法分离单个核细胞是一种高效、高质量和安全的分离方法,UCB-MSCs可以向神经样细胞分化,混合组UCB-MSCs增殖活跃,分泌更多IL-2和IFN-γ细胞因子。