阿莫西林中2-乙基己酸的测定

阿莫西林中 2-乙基己酸的测定

李鑫

山西省检验检测中心 030031

摘要 目的：气相色谱法测定原料药阿莫西林中2-乙基己酸有机溶剂的残留量。方法：以3-环己丙酸作为内标物，在聚乙二醇毛细管柱上进行测定，分离效果良好。检测器温度：300℃；进样口温度：200℃；结果：2-乙基己酸在0.002568294-2.568294mg/ml浓度范围内线性关系良好，线性方程为y=1.3541x-0.0379，R=0.9991，专属性、检出限、定量限、重复性、回收率等均符合相关要求，该方法适用于阿莫西林中2-乙基己酸的测定。

关键词 2-乙基己酸；阿莫西林；气相色谱法；溶剂残留

1. 仪器及条件

梅特勒XS-204电子天平，梅特勒XP-105电子天平

岛津GC-2010 plus气相色谱仪

检测器：FID检测器 检测器温度：300℃

进样方式：直接进样 分流比：40:1 进样口温度：200℃

流速：9.0ml/min 载气：高纯氮气

氢气：40ml/min 空气：400ml/min 尾吹气：30ml/min

理论塔板数：＞5000 分离度：＞2.0，分析方法：内标法

色谱柱：采用聚乙二醇为固定液的毛细管柱 型号：DB-WAX 30m×0.53mm×1.0μm， 编号：USE737147H

升温程序：恒温150℃

2. 对照品、试剂及样品

2.1 标准物质：2-乙基己酸 厂家：上海研拓生物科技有限公司；

批号：YT2907；纯度：99.5%

3. 环己丙酸 厂家：上海研拓生物科技有限公司；

批号：YT2907；纯度：99.0%

2.2 试剂：环己烷 厂家：国药集团化学试剂有限公司；批号：13018039；纯度：≥99.5%

盐酸 厂家：天津科密欧；批号：144918；纯度：36%--38%

2.3 样品：阿莫西林原料药

3. 方法学验证内容

3.1 内标溶液的制备

称取3-环己丙酸0.50380g，置500ml量瓶中，用环己烷溶解并稀释至刻度，摇匀，既得。

2-乙基己酸对照品溶液的制备

精密称取2-乙基己酸对照品2.58120g，置50ml量瓶中，用环己烷稀释至刻度，得浓度为51.36588mg/ml的储备液。

3.2 标准曲线

分别精密量取上述储备液0.1ml、0.1ml、0.1ml、0.5ml、1.0ml、5.0ml、5.0ml、3.0ml、5.0ml至200ml、100ml、50ml、50ml、50ml、50ml、25ml、10ml、10ml的容量瓶中，用环己烷定容至刻度，再分别量取上述系列溶液5ml至50ml量瓶中，用内标溶液定容至刻度，分别取上述溶液各1ml，加33%盐酸溶液4.0ml，剧烈振摇1分钟，静置使分层，取上层液，即得浓度为0.002568294 mg/ml、0.005136588 mg/ml、0.010273176 mg/ml、0.05136588 mg/ml、0.10273176mg/ml、0.5136588mg/ml、1.0273176mg/ml、1.5409764mg/ml、2.568294mg/ml、的标准曲线。

直接进样，测定2-乙基己酸和3-环己丙酸的色谱峰面积，以2-乙基己酸系列标准工作液的浓度为横坐标，以2-乙基己酸与3-环己丙酸峰面积的比值为纵坐标，绘制标准曲线，见表1。

表1 乙醇标准工作曲线峰面积

y=1.3541x-0.0379 R=0.9991

3.3 供试品制备及检测

样品处理与制备：

精密称取供试品0.3g，平行两份，加33%盐酸溶液4.0ml使溶解，精密加入内标溶液1 ml，剧烈振摇1分钟，静置使分层，取上层溶液作为供试品溶液。直接进样，测定峰面积，按内标法以峰面积计算，即得。结果2-乙基己酸未检出。。

3.4 专属性

精密称取空白样品0.3g，加33%盐酸溶液4.0ml，精密加入内标溶液1 ml，剧烈振摇1分钟，静置使分层，取上层溶液作为空白溶液，直接进样，在2-乙基己酸与3-环己丙酸出峰处未发现干扰峰。

3.5 检出限确定

精密量取对照溶液（0.2568294mg/ml）0.5ml置50ml量瓶中，用内标溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml，加33%盐酸溶液4.0ml，剧烈振摇1分钟，静置使分层，取上层液作为供试品溶液，进样，信噪比约为3，故检出限为0.002568mg/ml。

3.6 定量限确定

精密量取对照溶液（1.0273mg/ml）0.5ml置50ml量瓶中，用内标溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml，加33%盐酸溶液4.0ml，剧烈振摇1分钟，静置使分层，取上层液作为供试品溶液，进样，信噪比约为3，故检出限为0.010273mg/ml。

3.7 重复性试验

照“样品处理与制备”项操作，制得供试品，平行六份，按标准曲线法计算，结果见表2。

表2 重复性试验结果

3.8 精密度试验

照“样品处理与制备”项操作，制得供试品，直接进样，连续进样6次，测定峰面积，按标准曲线法以峰面积计算，即得。结果见表3。

表3 精密度试验结果

3.9 回收率试验

精密称取2-乙基己酸对照品1.8405g，置50ml量瓶中，用环己烷稀释至刻度，得浓度为36.626mg/ml的储备液。

精密量取对照溶液（36.626mg/ml）0.5ml，置10ml量瓶中，用内标溶液稀释至刻度。精密称取空白样品0.3g，平行6份，分别加入上述溶液各1ml，加33%盐酸溶液4.0ml，剧烈振摇1分钟，静置使分层，取上层溶液作为供试品溶液。直接进样，测定峰面积，按内标法以峰面积计算，即得。结果见表4。

表4 2-乙基己酸回收试验结果

4 结论

4.1 该方法以阿莫西林为样品测定2-乙基己酸，进行了包括线性、专属性、重复性、精密度、回收率等在内的方法学验证。验证结果均符合要求，证明该方法对于2-乙基己酸的测定准确有效。

4.2 样品处理过程中在静置分层时，如有必要，可离心，也可进行二次提取：分取出下层溶液，精密加入内标溶液1ml，静置使分层（如有必要，可离心），弃去下层溶液，合并上清液，作为供试品溶液。

参考文献

【1】中华人民共和国药典，中国医药科技出版社，国家药典委员会，2020

【2】国家食品药品监督管理局 化学药物质量控制分析方法验证技术指导原则 2005