简介：摘要目的分析轻症和重症甲型H1N1流行性感冒(以下简称流感)患者外周血转录组的差异，评估影响患者疾病严重程度的指标。方法纳入2018年1月至5月上海复旦大学附属华山医院确诊的10例甲型H1N1流感患者(轻症组与重症组各5例)，以健康人群(5名)作为对照。采集研究对象的外周血进行RNA转录组测序并分析其结果。计量资料比较采用t检验和Mann-Whitney U检验，计数资料比较采用Fisher确切概率法。转录组测序结果的数据分析采用生物信息学方法。结果重症组患者血小板计数为(163.4±21.5)×109/L，低于轻症组患者的(255.6±52.5)×109/L，差异有统计学意义(t ＝3.636，P＝0.007)。两组患者的性别、年龄、白细胞计数、中性粒细胞比例、淋巴细胞比例和血红蛋白值的差异均无统计学意义(均P>0.05)。外周血转录组研究结果显示，重症组患者的外周血基质金属蛋白酶8(matrix metalloproteinase 8，MMP8)测序结果的平均值为18.41，高于轻症组的2.33及健康对照组的1.43，差异均有统计学意义(均P<0.01)。基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9，MMP9)的平均值在重症组为174.00，高于轻症组的22.91和健康对照组的34.65，差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论MMP8及MMP9有望作为判断甲型H1N1流感患者疾病严重程度的分子生物学标志物。

简介：摘要目的分析人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus, HIV)感染、结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis，MTB)感染，以及共感染患者的CD8+T细胞耗竭状态。方法纳入2019年8月至2020年1月无锡市第五人民医院和太仓市第一人民医院所收治的HIV感染和(或)MTB感染患者87例，其中HIV感染18例，活动性结核(active tuberculosis, ATB)34例，潜伏性结核(latent tuberculosis, LTB)19例，HIV感染合并ATB 7例，HIV感染合并LTB 9例，同时纳入11名健康对照者。收集所有受试者的外周血，进行全血细胞表面染色和细胞内染色，使用流式细胞术检测CD8+T细胞上的活化分子CD62配体、CD44、CD127，转录因子脱中胚蛋白(eomesodermin, EOMES)、T细胞因子1(T cell factor 1, TCF-1)、T盒转录因子(T-box expressed in T cells, T-bet)、B淋巴细胞诱导成熟蛋白1(B lymphocyte-induced maturation protein 1, Blimp-1)，抑制性受体程序性死亡蛋白-1(programmed death-1, PD-1)、T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(T-cell immunoglobulin and mucin domain 3, Tim-3)的表达情况。统计学分析采用曼-惠特尼U检验。结果HIV感染组活化分子CD62配体、CD44的平均荧光强度(mean fluorescence intensity，MFI)低于健康对照组，而抑制性受体Tim-3则高于健康对照组，差异均有统计学意义(U＝31.00、1.00、0.00，均P<0.010)；HIV感染合并LTB组CD62配体、CD44的MFI低于LTB组，而PD-1、Tim-3则高于LTB组，差异均有统计学意义(U＝4.00、26.00、6.00、3.00，均P<0.010)；HIV感染合并ATB组CD62配体、CD44、CD127的MFI低于ATB组，而PD-1、Tim-3则高于ATB组，差异均有统计学意义(U＝9.00、40.00、45.50、28.00、7.00，均P<0.010)。HIV感染组的终末效应CD8+T细胞表达水平高于健康对照组，而中枢记忆CD8+T细胞则低于健康对照组，差异均有统计学意义(U＝15.00、33.00，均P<0.010)；HIV感染合并LTB组的终末效应CD8+T细胞表达水平高于LTB组，而中枢记忆CD8+T细胞低于LTB组，差异均有统计学意义(U＝7.00、20.00，均P<0.010)；HIV感染合并ATB组的终末效应CD8+T细胞高于ATB组，而中枢记忆CD8+T细胞低于ATB组，差异均有统计学意义(均U＝7.00，P<0.001)。HIV感染组PD-1+Tim-3+T细胞的表达水平高于健康对照组，HIV感染合并LTB组PD-1+Tim-3+T细胞的表达水平高于LTB组，HIV感染合并ATB组PD-1+Tim-3+T细胞的表达水平高于ATB组，差异均有统计学意义(U＝21.00、6.00、5.50，均P<0.001)。HIV感染合并LTB组的转录因子EOMES和TCF-1的MFI低于HIV感染组，而T-bet的MFI则高于HIV感染组，差异均有统计学意义(U＝3.00、4.00、9.00，均P<0.001)；HIV感染合并ATB组的转录因子EOMES和TCF-1的MFI低于HIV感染组，而T-bet和Blimp-1的MFI则高于HIV感染组，差异均有统计学意义(U＝11.00、14.00、7.00、22.00，均P<0.050)。结论合并HIV感染的MTB感染患者其免疫功能更为低下，CD8+T细胞耗竭程度更高。此外，合并LTB和ATB感染的HIV感染者较单纯HIV感染者的CD8+T细胞耗竭程度更高。