简介：【目的】二化螟是水稻的重要害虫之一,钙黏蛋白(cadherin,CAD)是一类重要的Bt杀虫蛋白受体,在获得二化螟钙黏蛋白基因(CsCAD1)的基础上,明确CsCAD1蛋白与Cry1Ac和Cry2Aa蛋白的结合能力。【方法】利用PCR技术克隆CsCAD1基因片段,将构建的pET-28a-(+)-CsCAD1重组质粒转入原核表达菌株BL21(DE3)中,IPTG诱导表达。目的蛋白经Ni柱亲和纯化后SDS-PAGE电泳检测,利用westernblot和ligandblot技术分析其与Cry1Ac和Cry2Aa蛋白的结合能力。【结果】重组载体可在表达菌株BL21中表达一个约44ku的蛋白,原核表达载体构建成功。SDS-PAGE显示该蛋白条带单一,且纯度较好。Ni柱亲和层析纯化该目的蛋白后进行Ligandblot分析,结果显示CsCAD1重组蛋白可以与Cry1Ac和Cry2Aa蛋白结合。【结论】CsCAD1蛋白可以与Cry1Ac和Cry2Aa蛋白结合,是潜在的Cry蛋白受体,所得结果有助于阐明Cry1Ac和Cry2Aa蛋白对二化螟的作用机制。

简介：研究了取食转Bt-cry1Ah基因玉米花粉对龟纹瓢虫Propylaeajaponica（Thunberg）体内解毒酶和中肠蛋白酶活性的影响。利用饲喂结合比色方法,比较龟纹瓢虫取食转Bt-cry1Ah基因玉米花粉和非转基因玉米花粉后体内α-乙酸萘酯酶、乙酰胆碱酯酶、谷胱甘肽-S-转移酶、中肠总蛋白酶、类胰蛋白酶和类胰凝乳蛋白酶的酶活性。结果发现：在解毒酶方面,取食Bt玉米花粉的龟纹瓢虫4龄幼虫和蛹的α-乙酸萘酯酶活性显著低于取食非Bt玉米花粉的龟纹瓢虫（对照组）,取食Bt玉米花粉的龟纹瓢虫的乙酰胆碱酯酶和谷胱甘肽-S-转移酶活性在各个发育时期与对照相比均无显著差异。在中肠蛋白酶方面,与对照组相比,取食Bt玉米花粉的龟纹瓢虫的总蛋白酶和强碱性类胰蛋白酶活性在各个发育时期均无显著差异;但取食Bt玉米花粉的龟纹瓢虫的弱碱性类胰凝蛋白酶和类胰凝乳蛋白酶活性在蛹期显著低于取食非Bt玉米花粉的龟纹瓢虫。由此可见,龟纹瓢虫取食含有Cry1Ah杀虫蛋白的玉米花粉后,体内代谢解毒酶和中肠蛋白酶与Cry1Ah杀虫蛋白相互作用,可能会引起某些酶活性的变化。因此,转cry1Ah基因玉米花粉对龟纹瓢虫的潜在影响还需要进一步的研究。

简介：【目的】蛋白样品的制备是获得良好双向凝胶电泳（2-DE）图谱的前提,建立合理的西花蓟马蛋白的双向电泳体系,获得分辨率较高、重复性较好的图谱,能够为后续的研究提供有力支撑.【方法】实验以西花蓟马成虫为实验材料,对比了饱和酚法、TCA/丙酮法和直接裂解法3种蛋白提取方法,从中选出最适宜双向电泳分析的一种蛋白提取方法.【结果】3种方法蛋白提取率差异显著,直接裂解法蛋白提取率最高,饱和酚法的蛋白提取率最低;3种方法的SDS-PAGE条带数差异不明显;TCA/丙酮法的双向凝胶图谱效果最好,蛋白点最多.【结论】TCA/丙酮法能够有效去除西花蓟马蛋白中的干扰物质,是最适合西花蓟马双向凝胶电泳的蛋白提取方法,为后续西花蓟马在蛋白组学方面的研究奠定了基础.

简介：AtthestartofournewJournalofBiosafety,IwaspromptedbymyCo-Editors-in-Chief,ProfessorWanandProfessorYou,toprovideregularreviewsorupdatesonbiosafetyforourreaders,giventhatImostlyresideoutsideChina,andhavemanyinternationalconnections.Thatisaverybigtask,andIwasnotsurethatIcoulddoitasthejournaldemands.However,Ihadthoughtthatinalighterway,IcouldattempttopresentmythoughtsonsomeissuesthatIfeelareofimportancetoday.Chinaisveryquicklyopeningtotheworld,economically,scientifically,andinmanyotherfields,andformanycolleaguesinsideandoutsideChina,thisisanewsituation.Duringmycareer,IhaveworkedinseveralcountriesofEurope,inNewZealand,andhadprojectsonothercontinents.Thisgavemeexperiencesindifferentpartsofourglobe,andIfeelthatallofus,ecologists,havetostartthinkingmorewidely,andbeawareofdevelopments,especiallyofhumanimpacts,onfarawayplaces.Somyviewwhenwritingtheseessayswilltrytobebothlocalandglobal.ThereforeIhavechosentheoveralltitleforthisseriesofessays'Thoughtsofatravellingecologist'.Belowyouwillbeabletoreadthefirstone-Ihopeyouwillenjoythem.Ifyoufeelliketoadd,orcommentonmyessays,pleasefeelfreetodoso.Anyfeedbackwillbemostwelcome.

简介：【背景】转Bt基因抗虫棉已经在我国进行了近20年的大规模商业化种植,产生了显著的经济和环境效益。但是,靶标害虫棉铃虫的抗性是转Bt基因抗虫棉产业健康发展所面临的最大问题,而抗性监测是解决这一问题的必要管理措施。盐城市是江苏省转基因抗虫棉的主产区,但有关该地区棉铃虫对转Bt基因抗虫棉的抗性基因频率未见报道。【方法】于2012年在盐城三龙镇和东台镇棉区采集田间棉铃虫种群,检测了初孵幼虫对花铃期转Bt基因抗虫棉中30幼嫩叶片的敏感性,用区分剂量法检测了2龄幼虫对Bt蛋白的抗性基因频率。【结果】取食转Bt基因抗虫棉叶片后,棉铃虫初孵幼虫在9d内全部死亡;三龙镇和东台镇棉铃虫2龄幼虫对Bt蛋白的抗性基因频率分别为7.6×10-3和6.9×10-3。【结论与意义】目前,盐城棉区的棉铃虫对转Bt基因抗虫棉仍保持很高的敏感性,棉铃虫种群对Bt蛋白的抗性基因频率没有发生显著变化,但仍需持续监测。

简介：【背景】在我国，由于Bt棉的种植，棉铃虫和红铃虫等靶标害虫得到了控制，但棉田其他鳞翅目害虫如甜菜夜蛾和斜纹夜蛾的危害仍较严重。美国商业化种植的双价棉BollgardⅡ所表达的Cry2Ab蛋白不仅对棉铃虫有较好的控制效果，而且对甜菜夜蛾和草地贪夜蛾有较好的控制作用。因此，该双价棉在我国被环境释放前，有必要研究其对棉田其他鳞翅目害虫的影响。【方法】在人工饲料中分别添加质量浓度为1．25、2．5、5．0、10．0和20．0μg·g^-1的Cry2Ab蛋白，采用生物测定的方法，在室内研究了其对甜菜夜蛾和斜纹夜蛾低龄幼虫存活率和体质量抑制率的影响。【结果】随着Cry2Ab蛋白浓度的增大，甜菜夜蛾初孵幼虫和1龄幼虫的存活率逐渐降低，2龄幼虫和3龄幼虫以及斜纹夜蛾各龄期幼虫的存活率在不同浓度处理下与对照差异均不显著。但与对照相比，高浓度处理对这2种害虫各龄期幼虫的体质量均有显著影响。【结论与意义】高浓度Cry2Ab蛋白（10．0和20．0μg·g^-1）对甜菜夜蛾低龄幼虫有较好的控制作用，但对斜纹夜蛾低龄幼虫的控制效果不太理想。这为该双价基因棉花在我国的推广提供了依据。

简介：昆虫是在勘探让新奇的可加水分解纤维素的酶从lignocellulosic生物资源改进乙醇燃料的生产的一个大部分未开发的资源。lignocellulosic乙醇生产的费用被期望在一个单个过程由纤维素降级(saccharification)和产生葡萄糖的发酵的联合减少到乙醇，由Saccharomycescerevisiae转变了表示有效绗维素酶的酵母催化。当时S。cerevisiae是一个确定的heterologous表达式系统，昆虫的功能的表达式上没有可得到的数据为这种的可加水分解纤维素的酶。为了探讨这知识，豁开，S。cerevisiae被转变表示从红面粉甲壳虫编码endoglucanase的全身的cDNA，Triboliumcastaneum(TcEG1)，并且评估了转基因的产品(rTcEG1)的活动。在S的TcEG1cDNA的表示。cerevisiae在强壮的glyceraldehyde-3磷酸盐脱氢酶倡导者控制下。有教养的转变酵母作为功能的β-1,4-endoglucanase分泌了rTcEG1蛋白质，它允许transformants在作为唯一的可得到的碳来源包含纤维素的选择媒介上幸存。为分泌rTcEG1的底层特性的评估表明了endoglucanase活动，尽管某活动也对复杂纤维素底层被检测。与在生产rTcEG1活动与pH条件增加了的biofuel的使用潜在地相关，与在pH检测的最高的活动12。我们的结果在S为昆虫绗维素酶的功能的生产表明潜力。cerevisiae并且在强壮的碱的环境证实rTcEG1活动的稳定性。

简介：[目的]随着杀虫剂阿维菌素的广泛应用，靶标生物对其抗性问题日益严重。以往的研究显示，细胞膜转运蛋白P糖蛋白可能与抗药性有关。但在昆虫对阿维菌素的抗性研究中，由于目前市场上缺少专门针对昆虫的商业化抗体，使得这一研究受限。为此，本研究尝试应用其他物种的抗体开展P糖蛋白的检测。[方法]以果蝇为测试昆虫，以阿维菌素作为测试药物，采用免疫印迹方法用鼠抗人P糖蛋白单克隆抗体检测阿维菌素敏感品系与阿维菌素抗性品系果蝇中的P糖蛋白的表达水平。[结果]检测出果蝇体内P糖蛋白的特异性表达，且无明显非特异性条带；与敏感品系果蝇相比，阿维菌素抗性品系果蝇P糖蛋白的表达水平明显升高。[结论]用针对人及其他脊椎动物的P糖蛋白单克隆抗体检测果蝇P糖蛋白的表达可行，且果蝇对阿维菌素的抗性可能与P糖蛋白的表达升高有关。

简介：【目的】为探究转Cry1Ac/1Ab基因棉花对异色瓢虫生长发育及其捕食功能的影响。【方法】以转Cry1Ac/1Ab基因棉与其亲本常规棉为实验材料,利用取食不同棉花品种叶片的棉铃虫饲喂异色瓢虫幼虫。【结果】与常规亲本棉相比,取食饲喂转基因棉花叶片的初孵棉铃虫幼虫的异色瓢虫幼虫从1龄发育至化蛹期时间延长0.77d,但差异不显著;除1龄幼虫体重增加(0.0773mg)外,其余各龄期幼虫体重均有所下降,但差异均不显著;异色瓢虫1、2、3、4龄幼虫对初孵棉铃虫捕食量均随棉铃虫密度的增加而增加,捕食功能反应均符合HollingⅡ圆盘方程。【结论】转Cry1Ac/1Ab基因棉花对异色瓢虫生长发育无显著影响,饲喂取食转Cry1Ac/1Ab基因棉花的棉铃虫对异色瓢虫捕食功能无显著差异。

简介：Themechanismsofmagnetoreceptionhavebeenproposedasthemagnetitebased,thechemicalradical-pairandbiocompassmodel,inwhichmagnetiteparticles,thecryptochrome(Cry)oriron-sulfurclusterassembly1(IscA1)maybeinvolved.However,littleisknownabouttheassociationamongthemolecules.HereweinvestigatedthemolecularcharacterizationandthemRNAexpressionofIscA1indifferentdevelopmentalstages,tissuesandmagneticfieldsinthemigratorybrownplanthopper(BPH),Nilaparvatalugens.NlIscA1containsanopenreadingframeof390bp,encodingaminoacidsof129,withthepredictedmolecularweightof14.0kDaandtheisoelectricpointof9.10.Well-conservedFe-Sclusterbindingsiteswereobservedinthepredictedprotein.PhylogeneticanalysisdemonstratedNlIscA1tobeclusteredintotheinsect'sIscA1.NlIscA1showedup-regulatedmRNAexpressionduringtheperiodofmigration.ThemRNAexpressionofNlIscA1couldbedetectedinallthethreetissuesofhead,thoraxandabdomen,withthehighestexpressionlevelintheabdomen.ForthemacropterousmigratoryNilaparvatalugens,mRNAexpressionofNlIscA1andN.lugenscryptochromel(Nlcry1)wereup-regulatedunderthemagneticfieldsof5Gaussand10Gaussinstrength(vs.localgeomagneticfield),whileN.lugenscryptochrome2(Nlcry2)remainedstable.Forthebrachyterousnon-migratoryNilaparvatalugens,nosignificantchangeswerefoundinmRNAexpressionofNlIscA1,Nlcry1andNlcry2amongdifferentmagneticfields.ThesefindingspreliminarilyrevealthattheexpressionofNlIscA1andNlcry1exhibitedcoordinatedresponsestothemagneticfield.Itsuggestssomepotentialassociationsamongtheputativemagneto-sensitivemoleculesofcryptochromeandiron-sulfurclusterassembly.

简介：丝胶是在Bombyxmori的中间的丝绸腺明确地表示的一种水溶性的蛋白质。当sericin-1基因倡导者被克隆，转基因的向量被构造表示外国蛋白质时，特定的电子螺旋管，Bmhel-8，在Bombyxmori和Bombyxmandarina的一些遗传型在sericin-1基因倡导者顺序被识别。给Bmhel-8电子螺旋管transposon在一些遗传型仅仅是在场的，它能是在sericin-1倡导者的突变而产生之遗传的变化的来源。sericin-1倡导者顺序的长度是约1063或643bp。顺序或等位基因的更大的尺寸被归功于到Bmhel-8的存在。蚕遗传型能为也是同型结合的更矮或更大的倡导者顺序或异质接合，包含两等位基因。在sericin-1倡导者的Bmhel-8展出enhancer活动，在BmE房间线由一个双酶的记者系统示威了。而且，Bmhel-8在sericin-1显示enhancer活动倡导者驱动的基因表达式系统但是不调整sericin-1的织物特定的表达式。

简介：提炼俄语的小麦蚜虫(RWA)，Diuraphisnoxia(Mordvilko)(Homoptera：Aphididae)，是小谷物的一个主要害虫。就象喂植物的蚜虫一般来说，在RWA和主人植物之间的相互作用被管理在昆虫方面上，由在口水的蛋白质和酶。在这个工作，我们在编码RWA唾液的腺的蛋白质和酶的抄本检验了顺序变化。我们在1和2份使用的教材从豌豆蚜虫orthologs导出的RWA遗传因子型进行了反向的抄写聚合酶链反应，并且克隆17个通常认为的唾液的腺抄本的区域。为四个抄本，我们没在在二遗传因子型之间的序列观察差别。为另外的13个抄本，例如编码蔗糖酶，trehalase和蛋白质C002的抄本，在每遗传因子型以内并且在二遗传因子型之间，大量变化被观察。通常，二遗传因子型分享了仅仅一变体，它典型地是在两遗传因子型的最普通的变体。大多数抄本比同义的codon在他们的变体之中变化的有非同义的更多。我们的结果为区分二遗传因子型和卓见进他们的进化提供可能的分子的标记。

简介：【背景】此研究为“十二五”转基因生物新品种培育国家项目中创建新的转基因棉花品种环境安全评价技术而设。【方法】以转双价双成抗虫基因（cry1Ac＋cry2Ab）棉和转双价抗虫、抗除草剂基因（cry1Ac＋肼强阳）棉为观察品种，非转基因棉赣棉11号为对照品种，在荒地用撒播和3cm深度播种2种方式，于2011年5月一2012年3月对棉花出苗率、株高、生育进程、棉吐絮瓣数、絮瓣脱落率、自生苗等生存竞争能力进行比较，检测、评价其杂草化的风险，并探讨、验证检测技术的可行性。【结果】在荒地条件下，以2种方式播种的转cry1Ac＋cry2Ab基因棉和转cry1Ac＋EP5P5基因棉与非转基因棉相比，上述各项指标的竞争能力总体上未表现显著优势。【结论与意义】转cry1Ac＋cry2Ab基因棉和转cry1Ac＋EPSPS基因棉在荒地条件下生长无杂草化风险。同时，研究证明，在荒地自然生态条件下，可以采用撒播和3cm深度播种方法检测新的转基因棉花品种在生存竞争能力上的杂草化风险，在测评上有互为参照效应，为定性评价新的转基因棉花品种的杂草化风险提供了保障。

简介：应用prima蛋白加农药马拉硫磷对橘小实蝇进行防治，每8d点喷一次，共喷5次。试验结果表明：prima蛋白与马拉硫磷混合后点喷对橘小实蝇的诱杀效果显著，保果率达到64．71％左右，卡方检验的结果为P=0．027〈0．05，表明点喷prima蛋白与马拉硫磷的混合溶液对柚子的保果效果显著。

简介：在蚕，白鸡蛋1(w-1)异种，被白眼睛和白鸡蛋描绘，在Bombyxkynurenine3-monooxygenase(KMO)是缺乏的活动。Toinvestigatew-1异种显型是否被介绍野类型的KMO基因救，我们在细胞质的肌动朊基因倡导者(A3KMO)或本国的KMO基因倡导者(KKMO)的控制下面与野类型的BombyxKMO基因构造了转基因的蚕。我们与KKMO构造与A3KMO和一根线创造了二根转基因的线。在这些线的成年人的眼睛是棕色的，并且转基因的女性生的鸡蛋也是棕色的。Reversetranscription聚合酶链反应(RT-PCR)分析证明A3KMO蚕线在中间勇气的、胖身体表示了抄本，并且肾小体小管。KKMO线仅仅在胖身体表示了抄本并且肾小体小管。在转基因的线的眼睛和卵色的紧张与KMO表示水平成正比。有趣地，有A3KMO构造的转基因的幼虫有轻褐幼虫的表皮，而是KKMO线不。这些结果显示野类型的KMO基因能作为标记基因被使用视觉上屏蔽转基因的蚕。

简介：摘要二乙酰胆碱酯酶(王牌)基因在许多昆虫种类被报导了。在象Helicoverpaassulta和Plutellaxylostellas那样的害虫，ace1基因编码是organophosphorus(OP)和氨基甲酸酯杀虫剂的主要目标的占优势的synaptic酶。杀虫剂选择影响王牌基因进化，这被报导了。驯养的蚕，Bombyx粗腐殖质i，也有二王牌基因。当这没在过去的十年面对杀虫剂选择，我们在蚕学习了王牌基因表情和酶活动。二王牌基因，Bm-ace1和Bm-ace2的表情层次，被量的即时聚合酶链反应估计。Bm-ace2在不同发展阶段或纸巾的所有测试样品比Bm-ace1更高度被表示，建议ace2，而非ace1，在Bombyx粗腐殖质i是乙酰胆碱酯酶(疼痛)的主要类型。这与上述的鳞翅目ons不一致农业害虫，部分由于可以在这些害虫导致ace1基因的高表示的杀虫剂的普遍使用。除在头的高表示以外，Bm-ace1也在丝绸腺高度表示，Bm-ace2充满细菌线，暗示两王牌基因可以有在开发的潜在的non-hydrolytic角色。而且，我们发现二王牌基因和他们的比率(ace2/ace1)的mRNA层次在第一和第三中间形态把白天改变到白天。这质问作为一个酶答案用粗略的摘录估计酶的活动的常规方法，因为它是AChE1和AChE2的混合物。为分开不同疼痛的一个有效、简单的方法为可靠毒物学的分析是必要的。

简介：[背景]福寿螺是首批被列入我国外来入侵物种黑名单的生物.近年来,有关福寿螺的研究主要集中在生物学特性、农业危害及防控等方面.其中,关于饥饿胁迫对福寿螺的影响亦有报道,但饥饿胁迫造成其器官组织损伤后的表观结构变化尚未见报道.[方法]本文研究了饥饿胁迫下福寿螺的存活和产卵情况,并通过扫描电镜对福寿螺头部和肝脏表面结构进行观察.[结果]福寿螺在饥饿25d后存活率达90％以上;饥饿组在25d内平均每缸产卵量为4.00块,明显低于对照组的24.33块,且福寿螺在饥饿12d后停止产卵.通过扫描电镜观察可见,头部皱缩并有侵蚀絮状物堆叠,肝脏螺旋结构松散,并伴有深浅不一的裂痕和侵蚀状损伤.[结论与意义]短期饥饿（25d）对福寿螺存活影响不大,但其产卵量受到明显影响,且头部和肝脏存在明显的外表破损.该结果为研究福寿螺入侵机制及防控策略提供了一定的参考.

简介：【目的】建立一种基于环介导等温扩增(loop-mediatedisothermalamplification,LAMP)技术,从植物罹病组织中直接检测3种常见的根结线虫,为根结线虫的监测和防治提供技术支持。【方法】分别采用3种根结线虫的种类特异性引物对所选择的根结线虫的DNA片段进行PCR扩增,扩增产物纯化、回收并测序。根据3种根结线虫的测序结果,针对种类特异区段,采用PrimerExplorerV4软件,分别设计3种根结线虫的LAMP引物。设计的引物组人工合成后,以提取的纯化种群线虫DNA为模板,分别进行引物组的特异性测试,筛选出分别针对3种根结线虫的最佳引物组。【结果】研究设计的3种根结线虫的LAMP特异性引物能够直接从植物根结中检测出南方、花生、爪哇3种常见根结线虫,LAMP快速检测体系为:dNTPS浓度为1mmol·L^-1,Mg2+的浓度为5mmol·L^-1,不添加甜菜碱,反应时间为45min。【结论】本实验建立的南方、花生、爪哇根结线虫LAMP快速分子检测方法,具有特异性强、灵敏度高、简单、快速、经济等特征,能够从罹病植物组织中快速准确地检测出南方、花生和爪哇根结线虫,具有极高的实践应用价值。

简介：Theinsectcuticleplaysimportantrolesinnumerousphysiologicalfunctionstoprotectthebodyfrominvasionofpathogens,physicalinjuryanddehydration.Inthisreport,weconductedacomprehensivegenome-widesearchforgenesencodingproteinswithperitrophinA-type(ChtBD2)chitin-bindingdomain(CBD)inthesilkworm,Bombyxmori.Oneofthesegenes,whichencodesthecuticleproteinBmCBP1,wasadditionallycloned,anditsexpressionandlocationduringtheprocessofdevelopmentandmoltinginB.moriwereinvestigated.Intotal,46protein-codinggeneswereidentifiedinthesilkwormgenome,includingthoseencoding15cuticleproteinsanalogoustoperitrophinswithoneCBD(CPAP1s),ninecuticleproteinsanalogoustoperitrophinswiththreeCBD(CPAP3s),15peritrophicmembraneproteins(PMPs),fourchitinases,andthreechitindeacetylases,whichcontainedatleastoneChtBD2domain.MicroarrayanalysisindicatedthatCPAP-encodinggeneswerewidelyexpressedinvarioustissues,whereasPMPgeneswerehighlyexpressedinthemidgut.QuantitativepolymerasechainreactionandwesternblottingshowedthatthecuticleproteinBmCBP1washighlyexpressedintheepidermisandhead,particularlyduringmoltingandmetamorphosis.Animmunofluorescencestudyrevealedthatchitinco-localizedwithBmCBP1attheepidermalsurfaceduringmolting.Additionally,BmCBP1wasnotablyup-regulatedby20-hydroxyecdysonetreatment.Theseresultsprovideagenome-levelviewofthechitin-bindingproteininsilkwormandsuggestthatBmCBP1participatesintheformationofthenewcuticleduringmolting.

简介：抽象昆虫由被不变的微生物引起的表面分子的识别激活的一个有效天生的免疫系统保护自己免于微生物引起的感染。在水果苍蝇果蝇melanogaster，细菌的存在在主人与抗菌剂肽的表示被联系免疫者能干的纸巾。主人受体检测感染并且中继信号装适当有免疫力的反应。在果蝇像血球的l(2)有Pefabloc的mbn房间感染前处理，一个通常使用的丝氨酸朊酶禁止者，导致了二主要效果：它响应现场克否定的细菌和细菌的表面分子(peptidoglycans污染的粗略的lipopolysaccharide)堵住了抗菌剂肽Diptericin的表示，它导致了词法变化。