简介:目的研究新型NRG1依赖性HER3单克隆抗体对HER2过表达N87胃癌细胞Lapatinib耐药的逆转作用。方法HER2过度表达N87细胞接受不同浓度Lapatinib和/或NRG1依赖HER3单克隆抗体(3D4B3)处理后,利用CellTiter96Aqueous单溶液细胞增殖检测试剂盒检测细胞活力,利用BrdU掺入法检测细胞的增殖与凋亡。结果无NRG1刺激,Lapatinib对HER2过表达N87细胞增殖有显著抑制作用,而3D4B3几乎无抑制作用,联合应用无叠加效应。随着NRG1刺激和HER3的激活,Lapatinib的增殖抑制效应明显减弱或消失,Lapatinib联合3D4B3再次有效抑制N87细胞的增殖。结论3D4B3可能通过抑制HER2过表达N87胃癌细胞增殖部分逆转Lapatinib的耐药。
简介:目的比较不同厂家单克隆抗体检测封闭抗体的结果差异。方法使用BD公司及贝克曼-库尔特(BC)公司的复合CD4/CD8/CD3三色荧光抗体,对30例反复自然流产(Recurrentspontaneousabortion,RSA)患者进行流式细胞术封闭抗体(Blockingantibody,BA)检测,用kappa系数评价两种抗体检测结果的一致性,用McNemar检验比较两种抗体的差异及其对临床决策的影响。结果经McNemar检验,当以BA单项阴性为需要接受主动免疫治疗的标准,则两组差异有统计学意义(P〈0.05);若以BA双项阴性为需要治疗的标准,则两组差异无统计学意义(P〉0.05);两种抗体检测结果一致性较差,kappa系数=0.2。结论两种单克隆抗体检测封闭抗体的结果存在差异,实验室应明确使用抗体的厂家,尤其是对同一患者治疗前后检测封闭抗体变化时应使用相同厂家的抗体。
简介:【目的】原核表达纯化人锌指蛋白(zincfingerprotein580,ZNF580)并制备抗人ZNF580单克隆抗体。【方法】将构建的重组质粒pET30a-ZNF580转化大肠杆菌BL21(DE3),由异丙基-β-D-半乳糖苷(Isopropylbeta-D-galactosidase,IPTG)诱导表达并纯化目的蛋白。将纯化的蛋白免疫BALB/c小鼠,制备针对ZNF580的特异性单克隆抗体并通过ELISA和Westernblotting方法鉴定。【结果】含有该质粒的大肠杆菌BL21(DE3)经IPTG诱导表达后,产物蛋白分子量约为19kDa,通过将Sp2/0细胞与免疫鼠的脾细胞融合获得了1株能稳定表达ZNF580抗体的杂交瘤细胞株(H4E4C5),其分泌的单克隆抗体的IgG亚类IgG2b,ELISA检测腹水抗体效价为1:1.28×10~5,Westernblotting结果显示抗ZNF580单克隆抗体具有良好的特异性。【结论】本实验成功表达并纯化了ZNF580蛋白并制备了抗ZNF580蛋白的单克隆抗体,为进一步研究锌指蛋白ZNF580的功能奠定了基础。
简介:本研究探讨抗CD25单克隆抗体在单倍体相合骨髓移植术(hiBMT)后耐激素的急性移植物抗宿主病(aGVHD)治疗中的作用。对15例单倍体相合BMT后出现耐激素的Ⅱ-Ⅳ度aGVHD的患者给予巴利昔单克隆抗体20mg,第1、4天静脉点滴,未达到疗效的病人间隔1周后重复本治疗。结果显示:完全有效8例(53.33%),其中4例无病生存,2例生存伴局限性cGVHD,2例死于肺部感染;3例部分有效(20%),其中1例无病生存,1例死于aGVHD及感染,1例死于肺部感染;4例无效(26.67%)死亡,死亡原因有GVHD、肺部感染、心力衰竭。总有效率73.33%,总生存率46.67%。该药应用安全,未发现输注相关的毒副作用。结论:抗CD25单克隆抗体对单倍体相合BMT后耐激素的Ⅱ-Ⅳ度aGVHD具有较好的疗效,但总的生存率仍然较低,感染仍然是导致该类患者死亡的主要原因,因此加强环境保护,预防感染极为重要。
简介:慢性淋巴细胞白血病(CLL)是一种恶性淋巴细胞增生性疾病,老年人多发。目前CLL治疗的主要问题是:①治疗完全缓解率低;②CLL伴随免疫系统功能紊乱和治疗药物的骨髓抑制、感染等副作用,高龄患者难以耐受。本研究报告我科成功治疗1例74岁高龄B细胞性慢性淋巴细胞白血病患者。在治疗中采用核苷酸还原酶抑制剂即氟达拉滨,联合抗CD20单克隆抗体方案,按标准治疗剂量给药,并根据患者个体情况调整给药时间,运用泛细胞保护剂氨磷汀进行辅助治疗。结果表明:1个疗程治疗后患者达到完全缓解,外周血的细胞计数和分类恢复正常;继续应用氨磷汀辅助治疗20天,患者贫血得到纠正,血红蛋白量稳定在120g/L以上,化疗药物的副作用和并发症均得到了有效的控制。结论:老年CLL患者化疗过程中,采用氟哒拉滨联合抗CD20单克隆抗体方案,按标准剂量给药,同时根据患者自身情况调整给药次序和给药时间,体现个性化治疗,获得满意疗效;氨磷汀可以有效减轻或克服CLL伴随的免疫系统功能紊乱,以及氟哒拉滨、抗CD20单克隆抗体引起的骨髓抑制、感染、发热等副反应。
简介:摘要:本研究探讨了CHO细胞培养过程中关键工艺参数对抗CD20单克隆抗体生产效率的影响。通过对温度、pH值、溶氧浓度等参数进行系统优化建立了高效的抗体生产工艺,结果表明,温度37°C、pH值7.0-7.2、溶氧浓度30-50%时抗体产量最高,补料策略和细胞密度控制对提高抗体滴度也起到重要作用,本研究为抗CD20单克隆抗体的工业化生产提供了重要参考,对其他治疗性抗体的生产工艺优化也具有指导意义。
简介:载脂蛋白(APO)B主要分布在人体血液中的的低密度脂蛋白(LDL)和极低密度脂蛋白(VLDL)中,约占LDL蛋白质的95%~99%,其主要功能是参与脂质转运和被细胞膜上的LDL受体识别。研究证明,apoB与动脉粥样硬化(AS)的发生有着密切的关系。近年来,多数医院已开展了测定人体血液中apoB含量来判定AS的危险程度。而国内所用的试剂盒均为多克隆抗体,这给临床测定结果的准确性和特异性带来了一定的差异。为此国内许多研究单位拟想通过基因重组技术,将apoB单抗细胞株通过逆转录、构建使其表达apoB单链抗体。
简介:【摘要】目的:研究治疗类风湿性关节炎患者时使用注射用重组人II型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白的临床效果。方法:选取2019年5月-2021年5月在我院接受治疗的38例类风湿性关节炎患者作为研究对象,根据治疗方法的差异将采用传统西药甲氨蝶呤片治疗的19例纳入对照组,将使用重组人II型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白治疗的19例纳入观察组,对比两组患者的治疗有效率以及不良反应(过敏、皮疹、胃肠道反应)发生情况。结果:观察组患者治疗有效率为100.00%,明显高于对照组患者的73.68%,P<0.05;观察组、对照组患者的不良反应发生率分别为15.79%、21.05%,对比差异不显著,P>0.05。结论:治疗类风湿性关节炎患者时使用注射用重组人II型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白的临床效果显著,可在临床中推广应用。
简介:目的:构建并鉴定血管血友病因子裂解酶(ADAMTS13)单克隆抗体,并研究其生物学功能。方法:利用真核表达的重组血浆金属蛋白酶ADAMTS13截断型蛋白(ADAMTS13-T7)纯品免疫BALB/c小鼠,经标准单克隆抗体技术制备单克隆抗体。用ELISA方法鉴定单克隆抗体的特异性;应用免疫印迹技术确定单克隆抗体与全长ADAMTS13的识别能力;观察单克隆抗体对ADAMTS13水解vWF的影响。结果:最终获得6株抗ADAMTS13的单克隆抗体,克隆号分别为1G11、2F11、6G3、9E1、10A8、10B4。经ELISA鉴定,纯化后的单克隆抗体1G11和2F11的效价最高,与截断型ADAMTS13-T7蛋白结合能力比较,明显高于全长ADAMTS13蛋白。Westernblotting结果显示,6个单克隆抗体都能与全长ADAMTS13结合,其中1G11和2F11条带最亮。功能实验表明,在变性条件下1G11和2F11能够明显抑制ADAMTS13水解vWF,并随着单克隆抗体浓度的增加而抑制作用增强。结论:成功获得针对ADAMTS13的单克隆抗体,其中两株为抑制性功能抗体。
简介:【摘要】目的:研究注射用重组人生长激素治疗儿童矮小症的效果。方法:选取2021年12月-2022年12月期间于我院进行治疗的矮小症患儿60例作为研究对象,按照治疗方式的不同将其分为实验组与参考组,每组各30例,给予参考组患儿常规营养支持治疗,给予实验组患儿注射重组人生长激素进行治疗。比较两组患儿治疗后的生长速度、身高标准差分值、成年预测身高以及不良反应发生率。结果:①相较于参考组,实验组患儿的生长速度与成年预测身高明显更高,数据有明显差异(P<0.05)具有统计学意义;②经比较,实验组患儿的不良反应发生率明显低于参考组,数据有明显差异(P<0.05)具有统计学意义。结论:给予矮小症患儿重组生长激素进行治疗,治疗效果良好,值得临床推广。
简介:[摘要 ]: 目的 观察 分析注射用重组人白细胞介素 -2 免疫辅助治疗复治肺结核的临床效果。方法 选择我院 2016 年 9 月 -2019 年 6 月收治的 复治肺结核患者 68 例作为本次的研究对象, 随机将其 分为相同例数的两组: 对照组,研究组,每组各有患者 34 例。对照组患者采 用 2H3R3Z3E3S3/6H3R3E3 抗结核化疗方案治疗,研究 组在此基础上采用联合应用注射用重组人白细胞介素 -2 皮下注射治疗。比较两组患者 病灶吸收情况及空洞变化情况 。 结果 研究组患者病灶吸收情况明显优于对照组,差异有统计学意义( P < 0.05 )。研究组患者空洞变化情况明显优于对照组,差异有统计学意义( P < 0.05 )。 结论 注射用重组人白细胞介素 -2免疫辅助治疗复治肺结核疗效显著,安全可靠,值得临床大力的 推广应用。