简介：摘要近年来在骆驼和护士鲨等动物的体内发现了一种重链抗体。重链抗体和普通的抗体相比缺少轻链，仅有可变区，但依然保留了抗原结合能力。通过基因工程改造重链抗体形成的单域抗体不仅保留了分子量小、物理稳定性高、容易表达等特性优点，而且亲和力高、不易聚集，被广泛应用于科研和临床诊断。

简介：载脂蛋白（APO）B主要分布在人体血液中的的低密度脂蛋白（LDL）和极低密度脂蛋白（VLDL）中，约占LDL蛋白质的95％～99％，其主要功能是参与脂质转运和被细胞膜上的LDL受体识别。研究证明，apoB与动脉粥样硬化（AS）的发生有着密切的关系。近年来，多数医院已开展了测定人体血液中apoB含量来判定AS的危险程度。而国内所用的试剂盒均为多克隆抗体，这给临床测定结果的准确性和特异性带来了一定的差异。为此国内许多研究单位拟想通过基因重组技术，将apoB单抗细胞株通过逆转录、构建使其表达apoB单链抗体。

简介：摘要单链抗体具有分子量小，免疫原性低，组织穿透力强，特异性强等优点，通过重组DNA技术将单链抗体（singlechainantibodyfragment,scFv）基因与其他效应蛋白基因融合在一起，经表达后可以得到具有scFv特性和所融合的效应蛋白活性的scFv融合蛋白。这种融合蛋白已应用于许多领域的研究中，并已显示出较高的价值。本文就scFv融合蛋白的研究和应用做一综述。

简介：摘要 : 副溶血弧菌是一种革兰氏阴性细菌，主要通过水产品和伤口等途径感染人类和水生生物，导致人和水生动物发生疾病。不耐热溶血毒素 TLH是副溶血弧菌的一个重要溶血素，对其抗体分子研究具有极其重要的意义。本文以抗副溶血弧菌 TLH 的 scFv 为出发点，对其基因序列进行了生物信息学分析，为进一步研究 scFv 与 TLH 相互作用提供一定理论基础。

简介：应用Pharmacia公司的重组噬菌体抗体系统,从经过人交联纤维蛋白特异抗原D二聚体（DD）免疫过的鼠脾细胞mRNA中构建出组合单链抗体（ScFv）cDNA文库。文库cDNA克隆到噬菌粒载体pCANTAB5E,转化大肠杆菌TG1,得到2.5×105个氨苄抗性菌落。通过噬菌体表面呈现,用DD对表达的重组噬菌体单链抗体文库进行三轮亲和富集获得一株特异抗DD的噬菌体单链抗体（ScFvA11）。经Phage-ELISA鉴定,呈现在噬菌体表面的ScFvA11与DD结合的ELISA阳性滴度小于107tfu/ml,而与人纤维蛋白原结合的ELISA滴度大于1010tfu/ml,两者相差1000倍以上。表明ScFvA11具有较好的DD结合特异性。经序列分析,ScFvA11cDNA全长729bp,其中Vh基因354bp,编码118个氨基酸;Vl基因327bp,编码108个氨基酸;Vh与Vl之间为（Gly4Ser）315个氨基酸连接肽。

简介：产生免疫原性的残基都是位于蛋白表面的暴露残基,为了消除鼠抗体对人的免疫原性,利用表面再塑方法对本室克隆的鼠抗人纤维蛋白抗体单链Fv片断进行了人源化分子设计。首先确定了鼠及人Fv表面残基,在此基础上分析了鼠与人Fv间表面残基的差异,将有差异的鼠表面残基换成人的。提出了残基最高频率人源化及最相似链人源化两种人源化方案。人源化后鼠抗人纤维蛋白抗体单链Fv的结构经Profile-3D验证是合理的,置换的表面残基溶液可及性未变,且未影响CDRs的结构,应不会影响与纤维蛋白的亲和力,为鼠抗体人源化实验研究奠定了基础。

简介：目的构建表达抗人红细胞血型A抗原50A杂交瘤细胞的单链抗体(SeFv)。方法应用重组噬菌体抗体技术，从50A杂交瘤细胞中分离、构建单链抗体基因，并将其克隆入噬粒pCANTAB5E中，转化E．coliXL-Blue，辅助噬菌体援救构建50A噬菌体单链抗体库；采用完整红细胞亲和富集法淘选阳性重组噬菌体，鉴定重组噬菌体并进行序列测定分析；免疫印迹试验检测重组单链抗体的特异性抗原活动。结果用M13KO7援救XL—Blue转化菌中的pCANTABSE重组噬菌体，得到滴度为4×10^9pfu／ml噬菌体单链抗体库；免疫印迹试验证实表达产物保留了亲本单抗对人红细胞血型A抗原的特异性亲和力。结论成功构建50AMcAb单链噬菌体抗体库，为进一步研制高特异性、高亲和力的基因工程原核血型检定抗体试剂奠定了基础。

简介：用Biosym公司开发的计算机辅助分子设计系统模建了鼠抗人纤维蛋白抗体Fv片断的三维结构。Fv是由重链可变区(Vh)和轻链可变区(Vl)两个结构域组成的具有抗原结合能力的最小抗体片断。先分别模建了Vh和Vl两个结构域,然后搭建出Fv片断的整体三维结构,并对模建的结构进行了分子力学和动力学优化。对结构的合理性验证显示模建结构是合理的。本研究为鼠抗人纤维蛋白抗体Fv片断的人源化的分子设计打下了基础。

简介：

简介：摘要用PCR-LiPA可简便、快速、灵敏、特异地检测出一部分结核分支杆菌耐药株的rpoB、katG、rpsL、rrs、embB基因突变，可作为临床结核分支杆菌耐药性的辅助诊断手段。

简介：摘要近年来，多种单基因肾结石病被认知，单基因肾结石病可引发肾结石、肾钙质沉积、肾外脏器表现以及肾功能不全甚至肾衰竭；随着基因检测技术的进步，该类疾病的诊断也更快捷有效。同时，随着基因治疗技术的进步，基因编辑等技术将有可能改变单基因肾结石病的现有治疗方式。现就单基因肾结石病的种类、基因型和表型特征及治疗方法进行阐述。

简介：摘要单基因肾结石病虽在临床较为少见，但其逐年增加的发病率及对患者身心健康的影响足以引起重视。目前单基因肾结石病的治疗尚停留于药物及手术层面，本文以原发性高草酸尿症基因治疗的进展为切入点，对单基因肾结石病在病因学层面的治疗进行论述，以期推动更多基因治疗层面的研究和尝试，推动基因治疗方式和药物的研发与探索，推动单基因肾结石病精准化及个体的治疗模式的完善，进而提升该病的诊疗水平。

简介：摘要陈万金及其同事指出，单基因神经疾病是研究其他神经系统疾病机制及治疗的重要窗口。

简介：摘要目的融合穿梭肽和狂犬病单链抗体，优化在大肠杆菌中的表达条件，获得具有中和活性的重组穿梭肽-单链抗体。方法重新编码SO57抗体序列，在N端融合Arg12的穿梭肽，构建pET22(b)-rSO57表达载体，在大肠杆菌中重组表达。在菌体生长密度OD600、诱导时间、诱导温度和诱导剂浓度条件进行优化，获得较高的表达效果。使用固定化金属螯合层析对重组蛋白进行纯化，测定了重组单链抗体的相对亲和力，通过rSO57/CVS-11混合感染细胞和快速荧光灶抑制实验(rapid fluorescent focus inhibition test，RFFIT)，验证重组单链抗体的中和作用。结果rSO57构建成功，在BL21(de3)中诱导表达，最优表达条件为菌体密度OD600在0.8时，使用0.4 mmol/ml的IPTG诱导，16 ℃下诱导24 h，rSO57以可溶形式表达，表达量占到了菌体可溶性蛋白的19.8%。层析纯化后，获得了纯度为84%的重组rSO57。ELISA实验显示，rSO57的相对亲和力系数Ka＝4.3×105。当rSO57与CVS-11混合时，随着稀释的增加，细胞的感染率上升，表明重组抗体具有中和狂犬病病毒的能力。使用RFFIT进行测定，50 μg的rSO57相当于2.17IU的狂犬病中和血清。结论本实验重组表达了融合穿梭肽的重组单链抗体rSO57，且可以中和狂犬病病毒，以期制备可以用于狂犬病治疗的特异性和靶向性的抗病毒药物载体。

简介：摘要目的分析单基因肾结石病患儿的基因型特点。方法回顾性分析2016年1月至2020年12月在首都医科大学附属北京友谊医院诊治的56例单基因肾结石病患儿临床资料和基因检测结果，所有患儿均为全外显子测序诊断，分析患儿基因型特点。结果56例单基因肾结石病患儿中男39例、女17例，平均年龄4岁（5个月~14岁），共发现11种基因存在突变，包括常染色体隐性遗传基因7种，X连锁隐性遗传基因1种，显性和隐性遗传基因3种，其中HOGA1基因突变最为常见（16例，28.6%），其次为AGXT基因（15例，26.8%），SLC3A1基因（6例，10.7%），SLC7A9基因（5例，8.9%）和GRHPR基因（5例，8.9%）。突变类型包括无义突变、移码突变和剪切位点突变等，新发突变14个。AGXT、GRHPR和HOGA1等基因具有突变热点或热点区域，分别为c.815-816insGA和c.33dupC突变、c.864_865delTG突变和c.834-834+1突变区域；SLC3A1和SLC7A9基因有9种新发突变，但未发现突变热点或热点区域。结论儿童单基因肾结石病多为常染色体隐性遗传，致病基因中以HOGA1、AGXT、SLC3A1、SLC7A9和GRHPR等基因突变多见；AGXT、GRHPR和HOGA1等基因具有突变热点或热点区域，且突变可能具有种族差异性。

简介：广东的小阳在台资厂上班5年了，感觉替别人打工就是没前途，还整天忙得晕头转向，工资也不多。后来他到了深圳，准备自己创业．可是选项目的时候头都大了，整天东奔西跑或上网．最后无意间在逛街的时候发现一种小东西一一姓名链。当时觉得新颖就买了一串，两个字15元，怎么这么贵？店主说这个独特．拿货贵云云，他也没太在意。

简介：摘要：遗传和变异知识是高中生物里分量相当重的知识，不但是高考热点，也是老师和同学们都非常关注的热点知识。主要内容：单基因遗传病的概念，形成因素和特征；多基因遗传病的概念，形成因素和特征。随着生物科学的逐渐发展，有关这方面的知识也会不断更新。关键词：单基因多基因遗传病在高中生物教科书里，遗传和变异知识是分量相当重的知识，不但是高考热点，也是老师和同学们都非常关注的热点知识。在多年的教学中，我查阅了大量的有关遗传病的的生物学知识，现结合自己的教学经验和理解对单基因遗传病和多基因遗传病的相关生物学知识阐述如下，仅供大家参考......

简介：摘要随着基因测序在遗传性疾病精准诊断中的应用和发展，迄今发现430种不同的基因缺陷均可导致单基因免疫性疾病。虽造血干细胞移植或基因治疗已成为部分单基因免疫性疾病根治手段，但免疫调节药物治疗仍是多数单基因免疫性疾病的首选方案。免疫调节药物的合理应用仍是此类疾病的临床难点，本文将联合常见单基因免疫性疾病的临床特征和免疫学发病机制阐述此类疾病的靶向药物治疗进展。

简介：比较双链腺相关病毒（Double－strandedadeno－associatedvirus，dsAAV）及单链AAV（Single－strandedadeno－associatedvirus，ssAAV）介导Exendin－4分泌表达效率。应用基因工程方法构建dsAAV／pSSHG／Exendin－4，与重组ssAAV比较转染NIH3T3细胞效率及转染后细胞上清Exendin－4浓度，免疫组化检测Exendin－4表达。经限制性内切酶及测序证实载体构建成功，测定重组dsAAVpSSHG／Exendin－4滴度为2．5＆#215;1011pfu，较重组ssAA滴度高（2．5×109pfu）；dsAAV／pSSHG／GFP转染NIH3T3细胞表达绿色荧光强；ELISA法检测感染重组dsAAV的NIH3T3细胞上清中Exendin－4的浓度为181．1±8．75pmol／ml，较重组ssAAV分泌浓度（133．81±8．09pmol／ml）升高（P＜0．05）；重组dsAAV及ssAAV转染NIH3T3细胞Exendin－4表达均为阳性。重组dsAAV可分泌表达Exendin－4并较ssAAV具有更高效转染能力，为研究Exendin－4功能及应用于临床打下基础。

简介：人工合成了芋螺毒素SO3的基因片段,通过链延伸方法获得了SO3的全长基因.在此基础上,将SO3基因插入到含抗大鼠转铁蛋白受体的单链抗体基因的pTIG-Trx表达载体中,构建含抗大鼠转铁蛋白受体单链抗体和SO3融合基因的重组表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)和Origmia(DE3)/DsbC并得到了表达,该融合蛋白主要以包涵体形式存在.为进一步研究芋螺毒素SO3跨血脑屏障转运和治疗作用奠定了基础.