简介：目的:探讨微柱凝胶抗人球蛋白法(MGT-AGT)替代Coombs试验检测IgG抗体的敏感性和对临床患者血液标本直接抗人球蛋白试验(DAT)阳性检出率。方法:采用MGT-AGT法对不同浓度的DAT阳性标本或IgG抗D致敏红细胞及IgG游离抗D抗体进行实验比较,并用MGT-AGT法、凝聚胺试验(MPT)和Coombs试验,对81例临床患者的血液标本DAT阳性检出率进行了比较。结果:对于DAT阳性标本或IgG抗D致敏的红细胞的检测,MGT-AGT法在1:128稀释时可以检出,MPT法在1:32稀释时可以检出,Coombs试验在1:32稀释时可以检出。对于IgG游离抗D抗体的检测,MGT-AGT法在1:32稀释时可以检出,MPT法在1:16稀释时可以检出,Coombs试验在1:16稀释时可以检出。对于81例临床患者血液标本DAT阳性的检出率,MGT-AGT法为:免疫性溶血性贫血患者87.8%,新生儿溶血病患者68.2%,系统性红斑狼疮患者55.5%;MPT法分别为75.6%、54.5%和33.3%;Coombs试验分别为78.1%、54.5%和11.1%,MGT-AGT法的敏感性高于MPT法和Coombs试验(P<0.01)。结论:MGT-AGT法检测DAT阳性标本、IgG抗D致敏的红细胞、IgG游离抗D抗体的敏感性和对临床患者血液标本DAT阳性的检出率均高于MPT法和传统的Coombs试验。

简介：目的：对细菌内毒素运用凝胶定性法和动态浊度定量法的检查进行比较。为血站提供在原辅材料内毒素检测时更适合的方法。方法：用鲎试剂凝胶定性法分别做灵敏度复核、干扰试验、供试品的检测,方法用药典规定的生物制品细菌内毒素试验规程。动态浊度定量法分别做标准曲线检验试剂的灵敏度、回收率判断干扰试验、供试品的检测,方法药典规定仪器试验。结果：动态浊度定量法结果易保存,在临界状态下,更容易进行结果的判断。结论：血站在进行细菌内毒素检测时,最好选用定量法。

简介：近年来,核酸检测技术在我国得到逐步的推广和应用[1-4],并已成为血液筛查实验室的重要试验手段,但因其灵敏度高的特点,同时实验室也容易导致污染,笔者结合工作中实验室污染发生和处理案例,探讨核酸实验室污染的监测和处理策略供大家参考。

简介：目的：探讨用法国Sebia公司Capillarys2全自动毛细管电泳（CZE）对血红蛋白定性与定量分析的准确性。方法：采集205例广东地区成人EDTA-K2抗凝血2ml,分别采用高效液相色谱法（HPLC）和capillarys方法各自测定血红蛋白含量。结果：两种方法测定HbA2的准确度,在205例样本中,CZE测定有93%的测定结果与HPLC测定值的百分差异在±20%范围内,与95%相比较,P值为0.1944,差异无统计学意义。其中CZE测得的HbA2异常21例,HbF增高5例,HbA2＋HbF同时增高12例;用HPLC对这205例样本进行复检对照,结果基本一致。检测出HbH7例,HbE7例,HbNewYork5例,HbG-thailand3例,HbBart＇s3例,HbS2例。但是,对于HbA2的定量,用CZE测得的水平高于HPLC。同时,我们观察到CZE较HPLC对HbH和HbBart＇s的检测更为敏感。结论：HPLC和CZE都能能够分离和量化出HbA2和HbF异常增高,是一种快速、准确、可靠的筛查地中海海贫血实验方法,但是两者在鉴定异常血红蛋白时存在区别。

简介：目的：评价输血管理在ISO15189实验室认可中的作用。方法：回顾性分析中山市博爱医院检验科2008年1—12月的输血情况。结果：2008年全院用血量5742人次,与去年同比增长23.1%。全血用量减少40%,冰冻血小板用量增长103.8%,血浆用量增长92.30%,悬浮红细胞增长19.10%。结论：加强临床用血的监控,有助合理用血,有利于ISO15189实验室认可。

简介：目的：探讨红细胞抗原浓度对固相法ABO血型正定型及Rh（D）血型鉴定的影响。方法：随机选取健康成人O型Rh（D）阴性和AB型Rh（D）阳性个体各5例,采集静脉血3~5ml置于EDTA抗凝管中,将O型和AB型血液配制成不同高低浓度的红细胞悬液,并用固相法进行ABO血型正定型及Rh（D）血型鉴定,同时以10%浓度的红细胞浓度作为对照参考,观察假阳性和假阴性出现的情况及假性结果出现时的红细胞抗原浓度。结果：红细胞抗原浓度超过25%易出现假阳性;红细胞抗原浓度低于2%易出现假阴性;低浓度红细胞抗原对抗B、抗D的影响更明显;高浓度红细胞抗原对抗A的影响更明显。结论：红细胞浓度对对固相法ABO血型正定型及Rh（D）血型鉴定有影响,且高、低浓度对不同单克隆抗体结合抗原的能力影响不尽相同。

简介：目的:用微柱凝胶实验(MGT)检测受血者血清中不规则抗体阳性率,预防和减少临床溶血性输血反应发生率。方法:采用MGT技术对需要输血者血清进行不规则抗体筛查,初筛抗体阳性标本采用MGT技术使用上海市血液中心提供的1～10号谱细胞鉴定不规则抗体特异性,2者相符为抗体阳性。结果:MGT技术检测申请输血患者5692例,检出特异性抗体6例,全部为Rh抗体。阳性率为1.05‰,其中抗D2例,抗E2例,抗Ce1例,抗cE1例。结论:MGT技术检测受血者免疫性不规则抗体灵敏度高,结果准确可靠,可以有效预防ABO以外抗体引起溶血性输血反应的发生。MGT技术可以常规用于受血者不规则抗体筛查。

简介：目的：探索应用免疫磁珠法富集母体外周血DNA并预测其胎儿RHD血型。方法：采集96例来自武汉大学中南医院产前诊断确诊为RHD阴性孕妇外周血,使用免疫磁珠法和血液DNA提取试剂盒（QIAgeneDNA法）抽提母体外周血DNA用以提取胎儿DNA。通过测定母体血浆中的SRY和STR来证实是否获得胎儿DNA,同时使用荧光定量PCR（RQ-PCR）扩增胎儿RHD基因外显子7,预测胎儿RHD血型。结果：通过免疫磁珠法,胎儿DNA的总提取量提高了1.8倍。配对四格表2检验结果显示免疫磁珠法在准确度方面与QIAgeneDNA法相较,妊娠早期（≤14周）2种方法差异有统计学意义（P〈0.05）,而妊娠中晚期（〉14周）2种方法差异无统计学意义。另外,使用免疫磁珠法提取DNA预测胎儿RHD血型时,有86例结果与胎儿RHD血清学方法鉴定一致,使胎儿RHD血型预测的准确率高达89.6%。结论：使用免疫磁珠法提取胎儿DNA不仅能够改善胎儿DNA的总提取量,同时还可以提高妊娠早期胎儿RHD血型预测的准确率,为RHD血型不合导致的新生儿溶血病的早期诊断和治疗提供更好的试验基础。

简介：目的:用全自动微孔法代替传统方法检测梅毒抗体,并对改进法进行对比分析和评价。方法:用全自动酶免分析仪法与传统甲苯胺红卡片试验(TRUST)法对比检测了75例梅毒患者和1061份献血员的血清,不符合者用螺旋体血球凝集试验(TPHA)法验证。对18000份献血员标本用改进的方法检测,并与传统方法对比,用TPHA法验证。结果:改进方法与传统方法相比,75例梅毒患者血清均呈阳性结果,但改进方法比传统法的凝集颗粒大而均匀,更易判读。在1061份献血员血清中,用改进的方法检出2份阳性血清,并经TPHA证实,用传统方法则判为可疑血清。用改进方法在18000份献血员的血清中的7份标本呈阳性,TPHA方法亦为阳性,而传统方法3例呈阳性;2例可疑,2例阴性。结论:改进的全自动微孔板法比传统方法具有敏感性高、特异性好、自动化程度高、易于标准化等优点,适合献血员筛查和临床大批量梅毒患者标本的检验。

简介：目的：分析ELISA法检测HIV抗体的室内质控,总结失控原因,加强实验室管理,保证检验结果准确可靠。方法：运用L-J质控图,结合Westgard多规则质控法,进行室内质控及分析。结果：2013-01-2014-10共检测2033批次,其中警告57次,失控29次,分别占质控总数的2.80%和1.42%。其中随机误差10次,系统误差19次,分别占质控总数的0.49%和0.93%。22个RCV处于9.72%~22.85%,其中21个均处于20.00%以内,1次是22.85%。结论：ELISA法影响因素较多,要严格按照操作规程,加强室内质控,以保证检验结果的准确性。

简介：目的：探讨分析甲苯胺红不加热血清反应素试验（TRUST）、酶联免疫吸附试验（TP—ELIsA）和化学发光法（TP—CMIA）在梅毒实验诊断中的应用价值。方法：收集住院患者输血前检查血清样本8000例，分别用TRUST、TP-ELISA和TP-CMIA进行梅毒抗体的检测，然后进行对比分析。结果：TRUST检出阳性397例，阳性率为4．96％；TP—E1．ISA检出阳性290例，阳性率为3．63％；TP—CMIA检出340例，阳性率为4．25％。TP—cMIA和TP—ELISA两者比较差异有统计学意义（P〈O．05）。结论：TP—cMIA优于TRusT和TP—ELIsA，具有较高的敏感性和特异性，结果观察直观、快速、省时。TP—CMIA能够助于梅毒的准确诊断，适合于常规临床筛查应用，对保障临床输血和手术安全起到积极作用。

简介：目的：建立SYBRGreenⅠ实时荧光PCR定量检测人POT1基因的方法。方法：依据人POT1基因及参照基因TBP基因序列设计引物，以人类乳腺癌细胞系MCF-7总RNA逆转录合成的cDNA为模版，以TBP基因为参照基因，应用SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR检测POT1基因的表达。结果：POT1和TBP基因熔解曲线为单峰，无杂峰及二聚体。POT1基因及参照基因TBP基因扩增效率相同（直线斜率0．0171〈0．1）。POT1基因批内变异与批间变异分别为1.3％和2.1％；TBP基因批内变异与批间变异分别为1．2％和2．6％。结论：建立了SYBRGreenⅠ实时定量检测人类POT1基因的方法，该方法简单快速，经济，灵敏度高，特异性和重复性好，可用于人类POT1基因的定量分析。

简介：目的：使用全自动血型分析仪对批量无偿献血者标本进行血型检测,分析检测结果的可靠性。方法：使用全自动血型分析仪对75765例标本进行血型检测,ABO正反定型不一致而无法定型、O细胞凝集的标本由本站血型研究室进一步用试管法进行正反定型、亚型检测、冷抗体及其它不规则抗体检测,并对RhD初筛为阴性的标本进行RhD阴性确认和C、c、E、e抗原检测及不规则抗体筛查。结果：对75765例标本检测发现ABO正反定型不一致30例（0.04%）,反定型中仅O细胞凝集8例（0.01%）,RhD初筛为阴性348例（0.46%）,血型研究室进一步鉴定结果为亚型22例,冷凝集3例,抗-M6例,抗-Leb2例,其他未确定抗体5例;RhD确认阴性340例,RhD变异型8例。结论：全自动血型分析仪具有全自动化、标准化、网络化等优点,适合大批量标本的检测,检测结果可靠,可以满足血站实验室的工作需求。

简介：目的：了解Dombrock血型Do^a和Do^b基因在汉族人群中的分布。方法：采用PCR—SSP技术对Dombrock血型进行Do^a和Do^b基因分型。结果：248例Dombrock血型Do^a的基因频率为0．0867，Do^b的基因频率为0．9133。结论：248例Dombrock血型Do^a及Do^b的基因频率分别为0．0867和0．9133。PCR—SSP技术可以较好的对Dombrock血型进行DO基因分型。

简介：临床检验水平关系到医疗质量，临床检验标准化和规范化管理是目前我国医院亟待解决的问题之一。为加强湖北省医疗机构临床实验室的标准化建设，湖北省临床检验中心根据省卫生厅制定的标准，对81所临床实验室标准化管理实施情况进行了调查考核，现将有关情况分析如下。

简介：目的：建立并改良磁珠提取基因DNA的方法,以应用于HLA常规测序分型。方法：使用磁珠法自动提取系统从全血中提取基因组DNA,利用DNA定量仪测定DNA浓度与纯度,利用测序仪对PCR扩增产物进行测序及相关的分析软件进行HLA分型结果分析。比较改良前后DNA浓度与纯度、HLA分型结果成功率、信噪比及测序胶图的反应格局。结果：改良后96份DNA浓度的均一性、纯度均优于改良前;32份HLA分型结果中HLA-A、B位点成功率改良后高于改良前,差异有统计学意义（P〈0.01）;改良后32人份HLA-B第二外显子信噪比（N/S）合格率均高于改良前,差异有统计学意义（P〈0.01）;改良后32份分型胶图反应格局均优于改良前。结论：改良磁珠提取DNA法能稳定、可靠地应用于HLA测序分型,具有快速、高通量化的特点和广泛的应用前景。

简介：目的：了解国产ELISA间接法试剂和双抗原夹心法的检测效能,探讨确证结果用于试剂选择,灰区范围设置的理论和依据。方法：采用重组免疫印迹试验（RIBA）对ELISA方法检测有反应性及灰区的44份标本进行检测。结果：3个厂家的抗-HCV有反应性标本经RIBA实验确证后,假阳性率分别为70.6%、44.1%、2.9%,灰区标本15例,未确认阳性检出。结论：为确保血液质量,血筛实验室应选择灵敏度和特异性双优的试剂,以有效提高抗-HCV有反应性标本的检出率。在献血者管理中,参考确证结果用于献血者反馈,特别是长期固定献血者,对单试剂反应者经6个月以上的屏蔽期可以重新参加检测确认,合适献血的可进入归队献血程序。

简介：目的：评价一种直接从标本中快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的实时荧光PCR方法。方法：临床送检标本中筛选出46份金黄色葡萄球菌阳性的标本,进行实时荧光聚合酶链反应（PCR）检测,并与全自动细菌鉴定仪（VITEK-2Compact）/头孢西丁纸片扩散法进行比较,评价实时荧光PCR方法的敏感性及特异性。结果：VITEK-2Compact分离出金黄色葡萄球菌46株,其中MRSA12株,与头孢西丁纸片扩散法结果一致。实时荧光PCR法检测出金黄色葡萄球菌46株,其中MRSA13株,敏感性及特异性分别为100%（95%CI,75.75,100）,97.06%（95%CI,85.08,99.48）。2种方法有很好的一致性[Kappa=0.945（95%CI,0.839,1.000）]。结论：实时荧光PCR法是一种能从标本中直接检测MRSA的快速,敏感的方法。

简介：目的：为了评价微柱凝胶技术（MGCT）检测抗-D效价。方法：用MGCT和试管抗球蛋白实验（TCT）同时检测38例孕妇血清抗-D效价。结果：MGCT检测抗-D效价高于TCT2～6滴度（平均提高3～4个滴度），MGCT检测抗-D效价灵敏度显著高于TCT，差异有统计学意义（P〈O．01）结论：MGCT法检测抗-D效价是一种灵敏度较高的方法。

简介：目的：探讨玻璃珠柱凝集法在临床应用中鉴定血型的准确性。方法：用全自动血型及配血分析系统和传统试管法分别对我院住院患者22919例抗凝样本进行血型鉴定并比较检测结果的符合率。结果：两种方法的检测结果一致，全自动血型及配血分析系统鉴定血型的准确率达到100％，鉴定结果中Rh（D）阴性为70例，阴性率为0．3％，且鉴定出1例弱D。结论：全自动血型及配血分析系统将血型鉴定从加样到判读整个过程实现了标准化和自动化，能消除许多人为因素造成的错误判定，为安全输血提供了保障。