简介：目的体外培养并鉴定神经干细胞,为相关实验研究奠定基础.方法分离SD大鼠胎鼠的间脑,加入神经生长因子EGF和bFGF在神经干细胞条件培养基中克隆培养.用免疫细胞化学方法鉴定分离的神经干细胞.结果分离培养的细胞具有不断增殖的能力,表达神经巢蛋白(nestin),并能经过诱导分化为神经元和神经胶质细胞.结论成功建立了神经干细胞的分离培养方法,可用于进一步的实验研究.

简介：目的研究改良体外小胶质细胞分离培养的方法及效果。传统法存在动物用量大、成本高且细胞培养时间长等局限。方法结合消化试剂组合和手摇震荡法培养分离小胶质细胞;同时采用Iba-1免疫荧光法进行细胞鉴定和纯度分析,台盼蓝染料法进行活力检测以及脂多糖刺激比较不同状态的小胶质细胞。结果改良法可在4d内稳定获得小胶质细胞>1.0×10^6个/60mm培养皿,纯度≥98%,活力>98%,较传统法在动物用量、总成本和培养时间分别减少了2、3.2、1.5倍。结论改良法可减少动物用量、降低成本,缩短细胞培养时间;为研究小胶质细胞的生物学功能和中枢神经系统疾病机制建立了一种稳定、简便、高效的细胞模型。

简介：分离性障碍是一类由精神因素引起的,以部分或完全丧失了对过去的记忆、身份意识、感觉以及身体运动控制四个方面的正常整合为特征的一类精神障碍。患者通常有表演性人格特征,且受暗示性高。本文介绍1例以昏睡为主要表现的分离性障碍病例,并且通过低阻抗意念导入疗法中暗示,对比领悟技术治疗,得到良好疗效。

简介：目的从正常成人脑海马分离鉴定多潜能神经前体细胞并探讨体外培养条件.方法材料取自8例非神经系统疾病的死亡者.分离正常成人脑海马细胞,在培养基中添加生长因子体外培养.通过细胞培养成球和BrdU染色鉴定培养细胞的增殖能力.利用免疫细胞化学三标染色来鉴定分化神经细胞的表型.结果从正常人海马分离的细胞培养2周时,开始增殖成簇,致一个月时,形成细胞球,这些细胞能与BrdU结合,并能在体外分化成神经系统不同谱系的细胞.结论与在啮齿类动物和猴的研究中结果一致,从正常成人脑海马区分离的细胞是多潜能神经前体细胞.

简介：近年研究表明,热休克蛋白70(hsp70)与神经系统疾病密切相关,正常脑组织中hsp70mRNA及蛋白质含量极少,当脑组织受到损伤后,受损细胞内的变性蛋白即可诱导hsp70mRNA的表达.hsp70表达根据损伤程度和细胞耐受损伤程度不同,在各细胞间的转录和翻译水平也不同.因此在许多肿瘤组织中,热休克蛋白都呈高表达[1].

简介：目的探索脐带间充质干细胞（MSCs）的分离培养及将其诱导分化为多巴胺能神经元的方法。方法分离脐带间充质组织，Ⅳ型胶原酶消化分离脐带MSCs．原代培养于含10％FBS的DMEM／F12培养基中，观察细胞形态并应用流式细胞仪检测细胞表面标志物和细胞周期，CCK8法绘制细胞生长曲线；采用二步法诱导分化P3代脐带MSCs，培养3、6、9d后终止诱导，应用免疫荧光染色和Westernblotting检测分化后细胞酪氨酸羟化酶（TH）、神经元特异性烯醇化酶ⅢSE）的表达。结果分离培养的脐带MSCs形态呈相对均一的成纤维样细胞，平行排列或旋涡状生长。P3代细胞CD29、CD44、CD73、CD90、CDl05、CDl66表达阳性，而CD34、CD45、CDl9、CD31、HLA—DR表达阴性。对数生长期细胞倍增时间为48h，处于GO～G1期细胞占91．13％；诱导分化后细胞多数为两级．形态与神经元相似．免疫荧光染色检测结果显示诱导9d时细胞NSE、TH染色阳性率分别为19．5％和8．9％，Westonblotting检测结果显示诱导6d时细胞NSE表达明显，TH仅有弱表达，诱导9d时TH、NSE均表达明显。结论脐带间充质组织中能分离出MSCs，且能分化成多巴胺能神经元。

简介：德尔菲法（Delphimethod）是在20世纪40年代由赫尔姆和达尔克首创，经过戈尔登和兰德公司进一步发展而来。该方法是一种由专家匿名发表意见的方式，对某个研究问题，通过多轮，反复地征询、归纳、修改各专家的意见，最后汇成基本一致的看法，作为预测的结果的研究方法。

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简介：简易定位器制作及定位方法自1999年,我们应用自制的简易定位器及YL-1型一次性颅内血肿穿刺针治疗颅内血肿及脓肿840例，均准确定位一将废弃的5F造影用导引导丝50-60cm，剪成8-11根长5cm的小段，间隔0．5cm排成栅栏状，连接在一根宽5cm．长60cm的钕紧带上，即制成简易定位器（图1）。

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简介：由科学出版社出版的译著《梅欧医院神经科检查法》已经出版。该书是世界著名的美国《梅欧医院神经科检查手册》（第七版），由多位著名临床学者编写。该书提供了一套完整的神经科临床检查和实验室辅助检查方法，其中对一般书籍很少描述的神经眼科学、神经心理学、每块肌肉的检查方法、婴幼儿的神经系统检查和睡眠障碍的检查等均有详细的描述。

简介：行动学习（ActionLearning）是以教学问题为线索、以学生行动为基础、以小组成员的经验和支持为依托、以创造性思维能力为条件的一种学习方法。在行动学习中,学生自己生成并建构新的知识,又在行动中检验,再建构已有的知识。所以行动学习教学方法应该是护理专业培养学生核心胜任力的一种形式，是学生通过行动学习主动构建、不断超越自我、实现自我的过程。

简介：目的对四血管阻塞法(4-VO)建立大鼠全脑缺血模型进行改良,以提高模型的可靠性.方法以微型磨钻,扩大第一颈椎上之翼孔,充分暴露其中穿行的椎动脉,显微镜直视下电凝阻断;夹闭双侧颈总动脉以出现静息脑电波为判定大鼠已达全脑缺血的标准对4-VO法建立大鼠全脑缺血模型进行改良.全脑缺血15min后行再灌注,7d后以海马CA1区神经元出现大部分死亡作为判定模型成功的标准,对两种建模方法进行评定.结果4-VO法制作大鼠全脑缺血再灌注模型,大鼠存活7d的存活率为90%(27/30),改良4-VO法制作大鼠全脑缺血再灌注模型,大鼠存活率为86.7%(26/30),二者无明显差异(P>0.05);4-VO法制作大鼠全脑缺血再灌注模型其成功率仅为70%(21/30),改良4-VO法制作大鼠全脑缺血再灌注模型,成功率为86.7%(26/30),明显高于4-VO法.结论改良4-VO法可明显提高模型制作的可靠性和成功率

简介：目的检测胶质瘤细胞中阿霉素(ADM)的含量,探讨抗P-糖蛋白(P-GP)单克隆抗体对细胞耐药性的逆转效果.方法将胶质瘤细胞分为敏感组、耐药组、耐药+抗P-GP单抗组及空白对照组,采用高效液相色谱(HPLC)法测定细胞中ADM含量.色谱条件为LiChrosorbC18柱(250mm×4.6mm,10μm);流动相为甲醇乙腈0.01mol*L-1磷酸二氢胺冰醋酸(5022280.5);流速为1ml*min-1;激发波长为495nm,发射波长为560nm.结果测得细胞内ADM浓度在0.1～1.0mg*L-1范围内呈线性关系,相关系数为0.9983.ADM在各种细胞中的浓度分别为空白对照组(0.496±0.015)mg*L-1,敏感组(0.533±0.029)mg*L-1,耐药组(0.502±0.075)mg*L-1,耐药+抗P-GP单抗组(0.577±0.086)mg*L-1.结论HPLC法是一种简便而准确地检测细胞中ADM的方法.结果表明,与正常对照组相比,耐药的胶质瘤细胞中ADM浓度降低,加抗P-GP单抗逆转后的细胞中ADM浓度升高,提示抗P-GP单抗的确对胶质瘤细胞的耐药性有逆转作用.

简介：目的报道一种新的雪旺细胞提纯方法一改良冷喷注法，并与其他2种方法进行对比，评价其优缺点。方法分离新生6d的Wistar大鼠双侧坐骨神经，双酶消化法分离雪旺细胞，用S-100免疫细胞化学染色方法对雪旺细胞进行鉴定。将收集到的细胞分为3组，分别应用冷喷注法、改良冷喷注法和酶消化法对细胞进行纯化，计算纯化后的细胞纯度，流式细胞仪测定细胞活性。结果改良冷喷注法提纯出的雪旺细胞，纯度和细胞活性与冷喷注法比较差异无统计学意义（P〉0．05），但二者均高于酶消化组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论改良冷喷注法提纯雪旺细胞的优点是操作简便，获得雪旺细胞纯度高且不影响细胞活性，缺点是对操作者实验操作技术和经验要求相对较高，初学者不易掌握。

简介：除了对患者的危险性和住院等行使同意的“决策能力”评估外，精神卫生法对未来司法精神病学领域的重要影响还包括对医疗决定争议的鉴定，以及监狱精神卫生服务。我们以目前全国人大审议中的《精神卫生法（草案）》（以下简称《草案》）相关规定为例加以梳理。

简介：老年性失眠是临床常见的老年性疾病之一,元阳亏损是老年性失眠的重要原因。元阳由元气化生,可以温煦卫气,元阳亏损可影响卫气的运行,进而出现失眠;元阳亦可以温养心神,心神内守,夜寐则安。王平教授认为老年阳虚失眠当以培补元阳为主,辅以培补元气之品和和安神之类。

简介：目的探讨硬脑膜补丁修补法在预防颅脑手术后脑脊液漏中的临床效果。方法2013年6月至2016年6月采用硬脑膜补丁修补法修补缺损硬脑膜32例，同期常规修补方式修补缺损硬脑膜25例。结果硬脑膜补丁修补法的32例中，1例（3.1%）术后出现脑脊液漏；常规修补法的25例中，6例（24.0%）术后出现脑脊液漏。两种方法术后脑脊液漏发生率有统计学差异（P<0.05）。54例随访3~36个月，均无脑脊液漏发生；失访3例。结论硬脑膜补丁修补法在预防术后脑脊液漏方面优于常规修补法。

简介：目的探讨穿梭缝合硬脑膜悬吊法在颅骨修补术中的应用价值。方法回顾性分析62例采用数字化三维塑形钛网修补治疗颅骨缺损病人的临床资料。其中24例采用普通硬脑膜悬吊法（普通组），38例采用穿梭缝合硬脑膜悬吊法（穿梭组）。比较2组的手术时间、住院时间和并发症的差异。结果普通组的手术时间、住院时间明显长于穿梭组（均P〈0．05），并发症发生率显著高于穿梭组（P〈0．05）。结论穿梭缝合硬脑膜悬吊法能够缩短手术时间和住院时间，降低手术并发症的发生，值得临床应用。