简介：教育部高等学校口腔医学专业教学指导委员会受教育部高教司委托，根据《关于组织实施遵义医学院、南京大学、吉林大学、中国医科大学口腔医学专业认证工作的通知》要求，组成以天津医科大学张连云教授、首都医科大学王松灵教授、四川大学周学东教授为组长的认证专家组，分别对遵义医学院、南京大学、中国医科大学、吉林大学口腔医学专业开展认证工作。

简介：目的：探讨骨髓基质干细胞（BMSCs）诱导内皮细胞（ECs）与自体BMSCs低氧条件下联合培养对BMSCs成骨能力的影响。方法：体外分离培养兔BMSCs并向ECs诱导培养,用CD34免疫细胞化学染色鉴定内皮细胞表型;实验分组为BMSCs常氧成骨诱导培养组,BMSCs低氧成骨诱导培养组,BMSCs＋ECs常氧成骨诱导联合培养组,BMSCs＋ECs低氧成骨诱导联合培养组,持续培养7d,前6d应用PNPP法每天固定时间测定碱性磷酸酶（ALP）活性并作统计学分析;茜素红染色观察第7d矿化结节形成情况。低氧组为1.0%O2浓度。采用SPSS11.0软件包对数据进行方差分析和q检验。结果：BMSCs在一定诱导条件下可诱导为ECs,CD34免疫细胞化学染色为阳性;统计学分析表明,BMSCs＋ECs低氧成骨诱导联合培养组的ALP活性表达显著高于其他3组（P〈0.05）。只有BMSCs＋ECs低氧成骨诱导联合培养组有钙化结节形成,茜素红染色呈橘红色。结论：在一定时间内,由BMSCs诱导来源的ECs与自体BM-SCs低氧条件下联合培养,BMSCs的成骨活性可显著提高。

简介：目的：初步比较人牙周膜干细胞（humanperiodontalligamentstemcell,PDLSC）在牙根不同发育阶段时的增殖能力和成牙/成骨能力的差异,为组织工程化牙齿的种子细胞来源提供一定的实验基础。方法：分别分离培养来自人根尖孔未闭合及根尖孔完全闭合牙齿的PDLSC,通过MTT法检测其增殖能力,碱性磷酸酶（alkalinephosphatase,ALP）试剂盒法检测其ALP活性,茜素红染色法检测两者的体外矿化能力,Westernblot检测其牙本质基质蛋白1（dentinmatrixprotein1,DMP1）、牙本质涎蛋白（dentinsialoprotein,DSP）、核心结合因子（runt-relatedtranscriptionfactor2,RUNX2）和骨细胞特异性转录因子（osterix,OSX）的蛋白表达情况。结果：来自人根尖孔未闭合牙的PDLSC的增殖活性、ALP活性和矿化能力、DMP1、RUNX2、DSP和OSX蛋白的表达量均高于根尖孔完全闭合牙的PDLSC,差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论：PDLSC的增殖和成牙/成骨能力随着牙根发育阶段的不同而变化,随着牙根发育的完全,PDLSC的增殖能力和成牙/成骨能力均下降,这种影响可能是由于牙根不同发育阶段牙根周围微环境的变化而导致的。

简介：目的比较成年大鼠冠、根部牙髓分别接种于肾被膜下的成牙能力。方法无菌条件下分离8周龄SD大鼠切牙牙髓，将冠部与根部牙髓锐分离，分别植入大鼠。肾被膜下，2周后进行组织学观察。结果冠部牙髓形成了包含釉质样组织和牙本质-牙髓复合体的牙齿样结构，与正常牙齿相似。而根部牙髓则形成了骨样牙本质结构。结论成年大鼠牙髓依然具有独立的牙齿发育的能力，冠髓和根髓的成牙能力不尽相同。

简介：目的：评价TTB视觉比色机械训练系统对受试者比色能力的影响.方法：使用TTB系统对102名受试者进行每周1次、共3周的视觉比色训练,记录每次TTB训练的成绩及时间,计算每次TTB测试的比色效率值.在训练前后均随机选29色Vita3D-Master比色板的5个色标进行比色测试,计算比色平均色差及单项色彩因素选择正确率,做为培训前、后比色能力测试成绩.结果：TTB测试比色效率逐渐提高,三次测试效率之间的差异均有统计学意义（P＜0.01）；培训后比色能力测试中所选色片与目标色片的平均色差小于培训前比色平均色差,差异有统计学意义（P＜0.01）.经培训后受试学生对单项色彩因素选择正确率均高于培训前水平,差异有统计学意义（P＜0.01）.结论：视觉比色机械培训可提高受试者的色彩识别能力.

简介：目的研究低氧对人牙周膜细胞（PDLC）的碱性磷酸酶（ALP）活性及成骨相关基因表达的影响.方法采用组织块法体外分离培养人PDLC;取第3～5代细胞分别在常氧和低氧条件下培养后检测其ALP活性;并通过荧光定量聚合酶链反应（PCR）观察低氧处理后人PDLC中成骨相关基因的表达变化.结果低氧12、24、36、48h组ALP活性均比常氧组高;其中低氧48h组与常氧组相比明显升高,差异有统计学意义（P＜0.05）;低氧48h组ALPmRNA表达比常氧组高,差异具有统计学意义（P＜0.05）;4个时间点低氧组骨钙蛋白（OCN）mRNA表达均比常氧组高,且差异有统计学意义（12、36h：P＜0.05;24、48h：P＜0.01）.结论低氧增强人PDLC的ALP活性,上调ALPmRNA和OCNmRNA的表达,促进人PDLC向成骨细胞分化,同时促进成骨细胞的矿化,提示低氧环境对人PDLC的骨向分化功能产生一定的影响.

简介：细胞培养是生物学实验的基础,而在传统的平面培养方式中,细胞形态和生物学特性都发生了一定改变.旋转式细胞培养系统（rotarycellculturesystem,RCCS）通过反应器的不断旋转,模拟微重力环境,从而在普通实验室内,实现体外细胞三维培养模型的建立,在干细胞培养方面,也有独特的优势.进一步利用旋转式细胞培养系统,将为细胞培养提供新的思路.

简介：目的：观察卵巢去势1个月对大鼠切牙牙髓组织中成牙、成骨指标的影响。方法：将10只成年雌性SD大鼠（8周龄）随机分为假手术组及卵巢去势组，每组各5只；在全麻下，将去势组大鼠双侧卵巢摘除，假手术组行相同切口，保留卵巢；1个月后，处死大鼠，分离牙髓组织，通过实时定量RT-PCR及Westernblot方法检测两组大鼠牙髓组织中成牙、成骨相关指标的表达。结果：去势组牙髓组织中，Runt相关转录因子2（Runt-relatedtranscriptionfactor2,RUNX2）、骨细胞特异性转录因子（0s-terix，OSX）、骨钙素（Osteocalcin，OCN）、牙本质涎蛋白（dentinsialoprotein，DSP）、牙本质涎磷蛋白（dentinsialophosphoprolein，DSPP）的基因和／或蛋白表达等成牙及成骨指标均较假手术组牙髓低，而碱性磷酸酶（alkalinephosphatase，ALP）的表达无明显改变。结论：卵巢去势1个月可以明显降低大鼠切牙牙髓组织中成牙、成骨指标的表达，提示卵巢去势下调了牙髓细胞的成牙及成骨能力。

简介：2007年6月9日上午，教育部高等学校口腔医学专业教学指导委员会2007年度国家级精品课程评审推荐会在华西口腔医学院召开，来自国内9所高校的委员及代表参加了会议，四川大学副校长孙卫国教授出席会议并作了讲话。

简介：目的：体外培养Beagle犬脂肪基质干细胞（dogadipose-derivedstromalcells，dADSCs），定向诱导分化为脂肪、成骨细胞，为口腔组织工程提供种子细胞。方法：取Beagle犬皮下脂肪组织，剪碎，经Ⅰ型胶原酶消化培养犬脂肪基质干细胞，取第3代细胞鉴定其来源及干细胞标记并向脂肪、成骨细胞诱导分化。结果：该细胞波形丝蛋白表达阳性，角蛋白表达阴性，CD44表达阳性；成脂诱导后，经油红O染色可见细胞内脂滴的积累；成骨诱导后，ALP、钙结节、骨钙素、Ⅰ型胶原均阳性表达。结论：Beagle犬脂肪组织中存在着具有能分化为脂肪、成骨细胞的脂肪基质干细胞，此脂肪基质干细胞可作为口腔组织工程种子细胞来源。

简介：近年来，全国各大高等医学院校针对长学制医学教育的特点，从教育观念、培养目标、课程设置、教学内容和教学方法等方面都进行了改革。但是众所周知，医学长学制课程设置单一、老化，自然科学课程太多，而人文社科方面课程相对太少，造成整体上学生人文素养水平相对较差，

简介：目的：探讨高效的原代成年大鼠下颌骨成骨细胞培养方法，为进一步的实验研究奠定基础。方法：将4-6周SD成年大鼠处死并取出下颌骨，剪碎，用改良的酶消组织块培养法培养细胞，通过相差显微镜观察，用碱性磷酸酶染色、骨钙素免疫荧光染色和钙结节染色等方法对所获得的细胞进行鉴定。结果：所培养的细胞具有典型的成骨细胞形态特征，碱性磷酸酶染色、骨钙素染色和钙结节染色均呈阳性。结论：改良的酶消组织块培养法，可获得大量高纯度的下颌骨成骨细胞，所培养的细胞具有典型的成骨细胞形态和功能。

简介：目的：探讨应用GM—CSF、IL-4、TNF—α及肿瘤细胞裂解液体外诱导舌鳞状细胞癌患者外周血来源树突状细胞（DC）的方法。方法：选取10例舌鳞状细胞癌患者和6例健康人，抽取外周血，分离单核细胞，经贴壁获得树突状细胞前体细胞，在体外先后加入GM—CSF、IL-4和肿瘤细胞裂解液、TNF—α诱导培养，获得成熟DC，进行形态学观察，以流式细胞术检测DC标志物表达率。实验中设置舌癌组和健康对照组，肿瘤裂解液诱导组和空白对照组，采用t检验进行统计学分析。结果：经9d诱导培养，细胞数量增加，体积增大，相差显微镜、HE染色和扫描显微镜下均见细胞表面树突状突起，呈典型DC形态。舌癌组DC平均获得率9．9％，与健康组无显著差异（P=0．1287）。舌癌组成熟DC标志物CD83表达率为37．19％，共刺激因子CD40、CD80和MHC分子HLA—DR的表达率分别为51．79％、48．43％和65．82％。与健康组无显著差异（P〉0．05）。肿瘤细胞裂解液诱导组较对照组可获得更高的DC获得率和成熟率，分别为P=0．0186和P=0．0473。结论：舌癌患者外周血来源DC前体细胞经体外诱导培养，可以转变为形态和功能成熟的DC；肿瘤细胞裂解液刺激，有助于提高DC获得率和成熟率。

简介：日趋成熟的成体干细胞体外分离、培养、定向诱导分化和鉴定技术,使牙再生研究取得了显著进展.继牙髓干细胞成功分离培养并用于牙再生研究之后,相继利用牙周膜干细胞、牙囊干细胞、牙乳头干细胞和骨髓间充质干细胞作为牙再生的种子细胞,取得了令人瞩目的成果.本综述从上述种子细胞的分离、培养、鉴定等方面阐述牙再生研究中的干细胞技术.

简介：大鼠牙周膜干细胞的分离、培养方法与人牙周膜干细胞有着不同之处,分离、培养大鼠牙周膜干细胞存在磨牙小、牙周膜组织来源少以及拔牙困难等难点。然而,在基础研究中,大鼠牙周炎模型的建立应用广泛,分离、培养大鼠牙周膜干细胞用以探讨牙周炎致病机制,明确机体内环境改变是否通过影响牙周膜干细胞的生物学性能导致牙周组织破坏严重与修复困难具有重要作用;另一方面,大鼠牙周膜干细胞分离、培养方法建立后,可以尝试从干细胞水平为治疗牙周病与促进牙周组织再生提供可靠的理论依据。因此,综述分离、培养大鼠牙周膜干细胞的可行方法有着十分重要的意义,有十分可观的应用前景。

简介：目的观察糖尿病兔骨髓间充质干细胞（bonearrow-derivedmesenchymalstemcells,BMSCs）以成骨分化为主的生物学特性。方法通过静脉注射水合四氧嘧啶,建立糖尿病模型,以注射等量生理盐水作为对照组。在无菌条件下,局麻后抽取兔髂骨骨髓,获取BMSCs。采用全骨髓贴壁培养法对细胞进行纯化及培养,分别对2组细胞行MTT检测、实时定量PCR检测、碱性磷酸酶（ALP）活性检测,以及ERK、AKT信号通路表达检测。采用SPSS13.0软件包对数据进行单因素方差分析（ANOVA）和SNKposthoc分析。结果与正常组比较,实验组糖尿病兔BMSCs细胞增殖活性、成骨基因表达、ALP活性及成血管基因表达均显著下降（P〈0.05）。结论糖尿病兔BMSCs的增殖活性、成骨分化能力及成血管基因表达能力均受到损害。

简介：目的研究不同强度的磁性附着体静磁场对成骨细胞矿化能力的影响。方法对体外培养的SD大鼠成骨细胞分别进行12.5、125、250mT的静磁场加载1、3、5、7d,考马斯亮篮法测定碱性磷酸酶（ALP）活性;静磁场加载21d后,茜素红S钙染法检测矿化结节并计数。结果静磁场加载1d后,各磁场处理组和对照组相比,ALP活性无明显差异（P〉0.05）。静磁场加载3d后,125mT和250mT磁场组ALP活性和对照组差异有统计学意义（P〈0.05）;静磁场加载5、7d后,各磁场组ALP活性与对照组差异有统计学意义（P〈0.01）,而且125mT和250mT磁场组ALP活性高于12.5mT磁场组。静磁场加载21d后,各磁场组矿化结节计数高于对照组。结论在本实验条件下,磁性附着体静磁场可以促进成骨细胞的ALP活性和矿化能力。

简介：目的：研究层粘连蛋白（laminin，LN）对鼠颌下腺细胞（ratsubmandibularglandcells，RSGCs）生长及分泌功能的影响。方法：取对数生长期的第2代大鼠颌下腺细胞用于实验，按加入不同浓度LN分4组（0、5．0、25．0和50．0mg／L）进行培养，相差显微镜的观察，绘制生长曲线，MTT比色法、自动生化分析仪检测LN对细胞增殖及淀粉酶分泌功能的影响。结果：培养的RSGCs免疫组化鉴定CK8．13、S-100蛋白染色呈阳性，波形丝蛋白染色呈阴性。培养72h后MTT法检测5．0-50．0mg／LLN组细胞吸光度A值与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。培养96h后检测培养液中淀粉酶的含量，各浓度组与对照组相比差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：LN能促进RSGCs的黏附和增殖并保持RSGCs的正常分泌功能。

简介：目的：建立和评价人牙龈成纤维细胞原代培养方法,并观察其生物学特性。方法：分别用组织块法、2种改良酶消组织块法培养人牙龈成纤维细胞（HGF）,用形态学、免疫荧光鉴定细胞来源。通过活细胞观察,MTT比色实验研究细胞体外生物特性。比较3种培养方法培养HGF的效果。结果：细胞抗波形丝蛋白染色阳性,抗角蛋白染色阴性,符合人牙龈成纤维细胞的形态学特征和生物学特性。组织块法、改良酶消组织块法（翻瓶法）、改良酶消组织块法（盖玻片法）的细胞培养成功率分别为26.7%、54%、60%。组织块法和2种改良酶消组织块法间的成功率差异有显著性（P〈0.01）,2种改良酶消组织块法间的成功率差异无显著性（P〉0.05）。结论：本实验建立的细胞系为人牙龈成纤维细胞。2种改良酶消化组织块法可显著提高人牙龈成纤维细胞原代培养成功率。

简介：目的：探讨过表达多能相关转录因子Nanog对人牙髓细胞增殖及多向分化能力的影响。方法构建过表达Nanog的慢病毒载体质粒pSIN-EF2-Nanog-IRES-GFP-puro，采用psPAX和pMD2.G慢病毒包装系统转入293T细胞进行病毒液的生产和收取，转染生长良好的第3代人牙髓细胞，构建稳定过表达Nanog的人牙髓细胞株，以空载体转染的细胞为对照组，对细胞进行成脂及成牙本质诱导。采用BrdU法检测细胞的增殖情况，检测多能性转录因子Oct4和Sox2的表达，以及细胞成脂、成牙本质分化能力。采用单因素方差分析数据。结果成功构建Nanog过表达的人牙髓细胞株；BrdU法检测结果显示，Nanog过表达组比对照组细胞增殖能力强（F=90.421，P=0.000）。过表达组Oct4、Sox2mRNA和蛋白表达水平明显高于对照组（FOct4mRNA=71.649，POct4mRNA=0.000；FSox2mRNA=106.278，PSox2mRNA=0.000；FOct4蛋白=41.632，POct4蛋白=0.002；FSox2蛋白=38.962，PSox2蛋白=0.002）。在矿化诱导条件下，Nanog过表达组DSPP、DMP1和OCN表达量、矿化结节产生量高于对照组（FDSPP=15.261，PDSPP＜0.05；FDMP1=16.235，PDMP1＜0.05；FOCN=17.019，POCN＜0.05）；成脂诱导21d后，Nanog过表达组LPL和PPARγ2表达量及脂质产生高于对照组（FLPL=15.542，PLPL＜0.05；FPPARγ2=10.437，PPPARγ2＜0.05）。结论过表达Nanog能提高人牙髓细胞增殖能力，促进多能性转录因子Oct4、Sox2的表达，增强细胞多向分化能力。