简介:目的:利用Adeasy-1系统,构建并鉴定CARP基因重组腺病毒载体.方法:PCR扩增含有CARP全长cDNA的片段,经测序验证无误后,亚克隆至pAdTrack-CMV穿梭质粒,再与pAdEasy-1质粒在大肠杆菌BJ5183中进行同源重组产生腺病毒载体质粒.经过抗性筛选以及酶切鉴定得到阳性的重组质粒,再在293细胞中进行包装扩增,利用Adeasy系统上的绿色荧光蛋白标签鉴定病毒表达.结果:测序证实PCR产物为CARP全长cDNA;抗性筛选及酶切鉴定均表明重组腺病毒载体构建成功;转染293细胞3天后可见绿色荧光,回收病毒可以重复感染293细胞,证明病毒包装成功.
简介:摘要目的对儿童腺病毒肺炎患儿的采用相应的护理措施,探究患儿的护理效果。方法选取60例在我院接受治疗的儿童腺病毒肺炎患儿,选取时间为2016年4月-2019年4月期间。在给予患儿药物治疗的同时,给予相应的护理干预措施,将两组患儿护理前护理后的家长情绪变化情况进行评价。结果护理后患儿家属焦虑评分(43.21±2.63)分低于护理前(P<0.05),护理后患儿家属抑郁评分(41.25±2.32)低于护理前(P<0.05)。结论针对儿童腺病毒肺炎患儿采用相应的护理干预措施,其可以改善患者家属的情绪状态,同时促使患儿积极配合治疗,采用相应的临床护理干预措施具有较高的价值。
简介:摘要目的总结儿童腺病毒(HAdVs)肺炎的临床特点。方法对2017年1月至2019年8月深圳市儿童医院收治的541例HAdVs肺炎患儿的临床表现、实验室检查、影像学特点和诊治情况进行回顾性研究。结果儿童HAdVs肺炎有逐年增高趋势,541例HAdVs肺炎患儿中男327例,女214例,年龄中位数为2岁7个月,6岁以下占89.3%(483/541例)。98.3%(532/541例)的患儿有咳嗽,其次是发热(93.7%,507/541例)、气促(36.6%,198/541例)和喘息(32.5%,176/541例)。13.3%(72/541例)患儿有基础疾病,重症HAdVs肺炎占33.8%(183/541例),最常见的肺内并发症为胸腔积液(18.6%,101/541例)和呼吸衰竭(7.0%,38/541例)。在混合感染病例中,最常见的病原体为肺炎支原体(46.9%,254/541例)和细菌(21.6%,117/541例)。98.5%(533/541例)的患儿好转出院,1.5%(8/541例)的患儿死亡或自动出院。惊厥[P=0.026,OR=7.312(95%CI:1.267~42.191)]及细菌混合感染[P=0.030,OR=2.724(95%CI:1.101~6.741)]与重症HAdVs肺炎的发生具有独立相关性。结论HAdVs肺炎在学龄前期儿童多见,主要以高热及咳嗽为首发症状就诊,气促及喘息在病程中较常见,约1/3的患儿会发展成重症肺炎,惊厥及细菌混合感染与重症肺炎的发生有密切相关性。
简介:摘要目的探讨儿童重症腺病毒肺炎的危险因素。方法抽取2019年1月至12月于厦门市儿童医院住院治疗的腺病毒肺炎患儿190例,其中轻症147例,重症43例。重症腺病毒肺炎危险因素行单因素卡方检验及多因素Logistic分析。结果190例腺病毒肺炎患儿中,轻症者与重症者年龄(≤2岁)、喘息、合并真菌感染、合并其他病毒感染、贫血、肝功能损害、心肌损害、肺不张、胸腔积液、气胸、气道狭窄、闭塞性细支气管炎比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic分析显示,心肌损害95%CI 1.638~39.611,P=0.01;肺不张95%CI1.192~29.524,P=0.03。结论肺不张及心肌损害为重症腺病毒肺炎的独立危险因素。
简介:摘要目的探讨儿童腺病毒(ADV)感染相关肺脓肿的临床特点。方法回顾性分析2019年1月至12月广州市妇女儿童医疗中心诊治的5例ADV肺炎相关肺脓肿患儿的一般资料、临床特点、辅助检查及治疗和随访情况。结果5例患儿年龄为4~12个月,平均8.6个月;临床表现均有发热,以高热为主,热峰均达39 ℃以上,有咳嗽、咳痰,伴或不伴气促,伴或不伴胸腔积液;CT均提示肺实质病变,出现多个大小不等囊状影、液平囊状影、厚壁空洞等组织坏死影像,部分患儿有胸腔积液形成;病原学检查ADV-PCR或ADV-IgM阳性;血常规提示白细胞、中性粒细胞绝对值升高或正常、血小板升高,C反应蛋白升高或正常,乳酸脱氢酶升高;3例术后病理结果均提示肺脓肿形成,正规治疗后康复出院,预后良好。结论ADV感染相关肺脓肿属临床少见并发症,具体发病机制尚不明确,对于ADV感染患儿常规治疗后症状未见明显好转者应高度怀疑合并肺脓肿可能,积极行胸部CT检查以明确诊断,经过正规治疗,大多预后良好。
简介:目的构建人survivin基因shRNA重组腺病毒载体,为缺氧性肺动脉高压(Hypoxicpulmonaryhypertension,HPH)的基因治疗研究提供实验基础。方法构建survivin-siRNA表达质粒,测序鉴定正确后,将survivin-siRNA表达质粒与含有腺病毒右臂的骨架质粒pBHGE3共转染至人293A细胞,包装成腺病毒Ad-survivin并扩增,TCID50法测定病毒滴度。将人肺动脉平滑肌细胞缺氧培养24h,并将细胞分为空白对照组(Con组),阴性对照组(Ad-LacZ组),不同Adsurvivin序列的干扰组(sh1组、sh2组、sh3组)。Ad-survivin感染缺氧人肺动脉平滑肌细胞,Westernblot检测survivin蛋白,验证重组腺病毒干扰效果。结果(1)将shRNA片段与pAd-U6-CMV连接后的质粒进行测序,结果提示目的基因片段插入成功;(2)TCID50法测定病毒Ad-survivin-shRNA1、Ad-survivin-shRNA2和Ad-survivin-shRNA3的滴度分别是1×1010,1.2×1010,1×1010;(3)sh2组缺氧人肺动脉平滑肌细胞内survivin蛋白表达明显低于其他4组(P〈0.05)。结论本研究成功构建人survivin腺病毒载体,为研究survivin基因在缺氧性肺动脉高压中的作用提供了实验基础。