简介:摘要目的探讨多色流式细胞术(MFC)监测微小残留病变(MRD)在 CD19嵌合抗原受体T细胞(CD19-CAR-T 细胞)治疗后桥接异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)治疗难治、复发急性B淋巴细胞白血病(r/r B-ALL)患者过程中的意义和价值。方法收集2019年1月至7月河北燕达陆道培医院收治的r/r B-ALL患者37例,年龄15(6,19)岁,其中男24例,女13例,均为经CD19-CAR-T细胞免疫治疗桥接allo-HSCT治疗的患者。采用多色流式细胞技术以胞浆CD79a抗体设B细胞门监测患者在CART治疗前第0天、治疗后第15天、第28天及移植后骨髓、脑脊液样本、组织样本的MRD值评估肿瘤细胞残存以及肿瘤累及位置,监测CD19阳性B细胞在移植前恢复情况及CD19阳性B细胞恢复距离CAR-T细胞回输天数评估CAR-T细胞实际杀伤效果,同时进行患者各时间点外周血CAR-T细胞计数等。采用Kaplan-Meier法及Log-rank检验分析单因素累积生存差异。结果(1)37例患者中8例死亡,29例存活。5例患者移植后复发,其中复发患者4例死亡,1例存活。(2)死亡组患者在CAR-T细胞免疫治疗后到桥接移植前MFC-MRD阴性缓解率为5/8,低于存活组28/29(χ2=7.540,P=0.006);回输第15天阴性缓解率为3/8,低于存活组24/29(χ2=6.512,P=0.011);回输第28天阴性缓解率为3/8,低于存活组26/29(χ2=10.065,P=0.002)。而死亡组伴髓外MFC-MRD阳性肿瘤浸润率为(7/8)高于存活组(14/29)(χ2=3.931,P=0.047)。CAR-T细胞免疫治疗后,死亡组CD19阳性细胞恢复时间即CAR-T细胞可对CD19阳性细胞杀伤时间42.00(30.00,49.00)d短于生存组55.00(41.50,73.50)d(Z=0.022,P=0.020)。结论利用多色流式细胞术检测B-ALL患者微小残留病变发现,在CD19-CAR-T细胞免疫治疗后到桥接allo-HSCT前、回输第15天、回输第28天等时间点,阳性结果均提示预后不良。这一结果为临床进行对症治疗提供一定指导意义。
简介:摘要本研究旨在构建基于核酸滚环扩增(RCA)的简便快速、超灵敏的光学生物传感技术,并将其运用于结核杆菌耐药相关基因的多重检测。本研究在2020年2月至2021年5月期间,于陆军军医大学第一附属医院检验科,针对异烟肼、利福平和链霉素耐药的高频基因突变位点katG315(AGC➝ACC)、rpoB531(CAC➝TAC)和rpsL43(AAG➝AGG),分别设计锁式探针(padlock probe,PLP)、引物和捕获探针,构建了基于磁珠的固相RCA恒温扩增反应体系,并进行了实验参数的优化。通过多色荧光探针(Cy3/Cy5/ROX)对RCA产物精准捕获与信号放大,实现了对3种突变基因的单管多重检测。进一步对该方法的灵敏度、特异性与线性范围等分析性能进行验证,结果显示同一反应体系中katG315的响应范围为1.0 pmol/L至0.1 nmol/L,rpoB531和rpsL43的响应范围为1.0 pmol/L至50.0 pmol/L和1.0 pmol/L至20.0 pmol/L,且该方法具有较好的特异度与灵敏度,在混合靶标中可精确识别单碱基突变,最低检出限低至1.0 pmol/L;在模拟血清样本的回收实验中,回收率可达95.0%~105.2%。综上,本研究构建的恒温扩增型多重检测方法可快速实现3种耐药突变位点的单管多重检测,该技术成本低廉、简便快速、不依赖大型设备,为病原体耐药基因检测提供了一种新的分析方法。
简介:摘要嵌合抗原受体(CAR)-T细胞免疫治疗已成为肿瘤领域新的免疫治疗明星治疗技术,2017年至今已经有5款CAR-T细胞产品获批上市。CAR-T细胞免疫治疗的基础研究与临床实践良性、快速、高效的互动也发现并解决了很多新的科学问题,大大拓展了多参数流式细胞术(MFC)的应用领域。MFC贯穿了CAR-T细胞制备、改进和功能评价、质量控制、体内存续、临床疗效和毒副作用评估监测全过程。CAR-T细胞高精度的靶向治疗所带来的新的临床问题,对流式细胞术从业人员采用MFC进行肿瘤准确免疫分型和微小残留病监测提出新的挑战,同时也提出了不同疾病阶段,全面评估机体精细免疫功能状态的需求。靶向治疗时代,实验室和临床的及时沟通交流,对于获取正确MFC检测结果、辅助临床个体化诊疗尤为重要。
简介:内容摘要:“践行红色教育、传承红色基因”是学校培育学生社会主义核心价值观的重要内容与必要途径。近年来,我们学校利用地处百色革命老区的区域资源优势,通过爱国主义教育基地和当地的英雄人物对学生开展红色教育,扎实推进红色教育的全员化、常态化。让红色文化进学生生活,入学生头脑,让学生在重温革命传统过程中,不断汲取精神养分,进一步传承红色基因,砥砺理想信念,赓续红色血脉。
简介:摘要:本文从专利统计角度分析了该项技术所处的生命周期,并介绍了从库尔特计数器的诞生到各时期重点技术,包括脉冲分析判据、液力聚焦、细胞电泳技术、微流控技术、激光检测技术融入等,这些技术使流式细胞计数检测实现了轻小化,自动化,智能化,目前多面技术融合高精度流式细胞计数器及搭载自动识别分析系统的流式细胞计数器已成为新的研究热点方向。
简介:【摘要】绘本,不仅是文学的艺术,更是图画的艺术,视觉的艺术。绘本中优美的线条、巧妙的构图、丰富的色彩、多变的造型,带给幼儿强烈的视觉冲击。奇妙的绘本给幼儿打开了一扇窗,也给幼儿打开了一个心灵花园的美丽世界。在美术创作活动中,幼儿的作品只是活动的痕迹,而过程才是真正的教育实施,在过程中实现教育目的,是老师的根本追求。在实践中,我们发现以绘本为载体开展的美术活动,更容易引起儿童的共鸣,激发他们创作的兴趣。
简介:摘要:标本是帮助研究者更好研究与了解生物的重要工具,现有的浸制标本制作技术虽然能做到固定生物样本形态特征,但传统保存液福尔马林及酒精的使用会导致标本褪色,失去重要生物信息。本文介绍了几种保色原理,保色方法,及相关处理技术,拟为更好的保存生物标本探索方法。