简介：实时荧光定量PCR技术将光谱技术融合于传统PCR技术上,通过荧光信号积累实时监测PCR进程,实现核酸定量,具有特异性强、敏感性高、定量精准、自动化程度高等优点,被广泛运用于分子生物学等领域。本文结合近几年的研究成果,对实时荧光定量PCR技术的原理、检测方法、引物设计以及在家禽遗传育种的应用和存在的问题等进行了综述。

简介：摘要探讨乙型肝炎血清标志物和乙型肝炎病毒DNA量之间的关系，分析荧光定量PCR在乙型肝炎检测中的作用。HBVDNA定量是目前诊断乙型肝炎、判断病毒复制和评价患者肝脏病变、预后及药物疗效的重要指标之一，但在指导诊疗时仍需结合血清标记物、肝损害指标乃至HBV基因分型。方法PCR核酸探针杂交法、RELISA、竞争定量PCR、实时荧光定量PCR，本文综述定量检测HBVDNA意义及PCR检测方法。结论实时荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒DNA是反映HBV复制水平的可靠指标，有助于疾病的诊断及预后判断。

简介：摘要目的探讨实时荧光定量PCR对蕲蛇样品真伪鉴别的准确性。方法采用实时荧光定量PCR法从蕲蛇正品、混伪品中提取DNA,进行引物扩增，并通过Cq值和扩增曲线对样品真伪进行判断。结果3批蕲蛇正品的Cq值均低于30，曲线有明显的指数增长期；2批混伪品无Cq值，曲线为一直线。结论本方法鉴别蕲蛇操作简单，准确率高，重现性好，可行有效。

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简介：摘要目的探究荧光实时定量PCR法检测流感病毒核酸的质控结果。方法选取自2009年1月至2009年12月在我省流感病例900例，采用实时荧光定量PCR对流感病毒核酸进行检测，观察检测阳性率和阳性样本的类型。结果2009年1～12月流行期采集流感样病例900例，流感病毒核酸检测呈阳性247例，阳性率为27.44%；其中，甲型H1N1共215例，甲型H3流感12例，甲通20例。结论荧光实时定量PCR法检测流感病毒核酸科学有效，能够满足临床对流感病毒核酸快速、准确检测的需要，对其结果进行质量控制，能够最大限度保证结果的准确性，可临床进一步推广。

简介：摘要目的评价实时荧光定量PCR检测HPV-DNA在宫颈癌筛查中应用价值。方法2015年1月～2015年12月，对我中心经病理组织学诊断宫颈疾病女性500例开展实时荧光定量PCR检测HPV-DNA水平。结果y（Ct）=-3.3236lgx＋34.713，R2=0.9986，批内、批间、日间重复性检测CV均在合格范围内；不同病理类型HR-HPV阳性率差异具有统计学意义（=56.416，P＜0.05）；不同类型HR-HPV阳性者拷贝数分布差异无统计学意义（μ=11.495，P=0.063＞0.05）。结论实时荧光定量PCR检测HPV-DNA可作为宫颈癌筛查方法，筛查早期CIN病变。

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简介：摘要目的检测实时荧光定量PCR法快速检测甲型流感病毒方法学性能，评价其临床意义。方法从准确度、精密度、特异度、抗干扰能力等方面评价实时荧光定量PCR技术检测甲型流感病毒的性能。结果经检验与免疫荧光法比较准确度为100%；精密度为98.15%；与临床症状相似的几种病毒或细菌均未见交叉反应；常见的干扰物如血液、唾液、鼻分泌物未发现对检测结果产生影响。结论实时荧光定量PCR技术检测甲型流感病毒的性能可靠。

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简介：目的建立以TaqMan探针实时荧光PCR技术为基础的核苷酸结合寡聚化结构域样受体3（Nucleotide-bindingoligomerizationdomain,LeucinerichRepeatandPyrindomaincontaining,NLRP3）基因单核苷酸多态性（Singlenucleotidepolymorphism,SNP）检测方法。方法以20份健康人血液样本为对象,选择NLRP3基因的两个SNP位点（rs3806265和rs35829419）,针对每个位点分别设计1对PCR引物和2条TaqMan探针,进行实时荧光PCR扩增,对SNP位点进行分型。用常规PCR和基因测序的方法对TaqMan探针实时荧光PCR分型的结果进行验证。结果用建立的TaqMan探针实时荧光PCR分型法对20份样本进行检测,其中rs3806265位点发现TT基因型3份,TC基因型8份,CC基因型9份;rs35829419位点发现CC基因型20份,无AC和AA基因型。分型结果与常规PCR及基因测序分型方法完全一致。结论基于TaqMan探针技术的实时荧光PCR方法简单、快速,可实现对NLRP3基因位点的分型检测。

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简介：摘要荧光定量PCR检测方法具有灵敏度高、精确度高、检测范围宽、重复性好优势，本文就其方法对水体中的微囊藻进行检测。

简介：目的：探讨荧光定量PCR仪检测疟原虫的应用价值。方法：选取我省出入境单位收集到的已经镜检法证实为恶性疟疾的全血样本32例、镜检为阴性的全血样本13例作为研究对象，所有样本中均提取DNA并加入RT-PCR检测试剂进行荧光定量PCR仪检测，观察分析检测结果。结果：荧光定量PCR仪检测结果显示：恶性疟疾全血样本23例、间日疟疾全血样本11例，阴性全血样本11例，诊断符合率95.6%。复检结果显示：2例标本通过PCR扩增、序列对照，发现其测序结果与公布的疟原虫序列一致，确定均含有疟原虫。结论：荧光定量PCR仪检测疟原虫的应用价值高，能够敏感、可靠的检出疟原虫DNA。

简介：根据转基因抗除草剂玉米DAS-40278-9外源基因的旁侧序列,采用ABIPrimerExpress3.0设计引物和TaqMan探针,建立转基因抗除草剂玉米DAS-40278-9品系特异实时荧光定量PCR检测方法。采用该检测方法对DAS-40278-9玉米含量为1%（质量分数）的标准样品进行检测,结果显示,采用建立的方法获得的标准曲线,通过斜率、相关系数、扩增效率判断是可靠的,待测样品的定量检测结果为1.024%,非常接近真实值。本试验表明建立的转基因抗除草剂玉米DAS-40278-9品系特异定量PCR检测方法的特异性好,灵敏度和准确度高,值得推广应用。

简介：摘要目的本文就荧光定量PCR技术在临床微生物检测中的应用价值进行分析与探究。方法选择我市第一人民医院2014年5月—2016年7月期间收治的住院患者100例，其后对所有患者的临床标本予以回顾性分析，所有患者均接受荧光定量PCR技术，最后对微生物检测结果进行总结。结果通过对本组患者的临床标本回顾性分析可知，脓液标本中5株为金黄色葡萄球菌，大便标本中24株沙门氏菌，1株为O157H7，10株为副溶血性弧菌。结论在临床微生物检测中应用荧光定量PCR技术，具有较高的灵敏度和特异性，因此该检测手段可以在临床上更进一步的实践与应用。

简介：摘要目的探讨荧光定量PCR检测乙肝DNA分析前质量控制措施。方法选取本院收治的25例乙肝两对半检测确诊为乙肝大三阳患者的血液,每个患者的血液平均分为A、B、C、D组，A组即刻测定，B组室温放置2天测定，C组4℃放置7天测定，D组溶血即刻测定，比较不同的储存时间、温度以及标本是否溶血对乙肝病毒DNA进行荧光定量测量结果的影响。结果未溶血标本与溶血标本相比以及不同储存时间和温度相比，差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论标本溶血、储存时间以及温度对荧光定量PCR检测乙肝大三阳血清标本DNA的结果无影响。

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简介：摘要目的研究实时PCR探针熔解曲线技术在检查耐多药结核的临床应用方法，并与传统的结核菌培养及药敏试验作对比分析，从而得出其应用价值评价。方法回顾性分析我科2012年1月至2016年4月收治的50例耐多药结核病人的药敏检查结果。51例病人均做了实时PCR探针熔解曲线技术的药敏试验，其中11例病人还同时作了传统的结核菌培养及药敏试验。以结核菌培养及药敏试验作为金标准，并对两种检查方法作对比分析，得出其应用价值评价。结果耐INH、RFP、EMB、SM、OFX共12例，耐INH、RFP共21例，耐INH、RFP、EMB共15例、单耐INH者2例，单耐RFP者1例。11例作两种检测方法的药敏结果符合率为97.22%。结论实时PCR探针熔解曲线技术可快速、灵敏、特异检测结核耐药。

简介：摘要目的分析探讨荧光定量PCR技术在α地中海贫血基因筛查与诊断中的实际应用。方法选择2014年1月-2014年12月之间来我院进行α地中海贫血基因筛查诊断的800例孕妇作为观察对象，使用荧光定量PCR技术进行筛查。对其中得到的阳性标本使用传统基因诊断方式测定；同时通过血红蛋白电泳法筛查800例孕妇是否存在α地中海贫血。结果800例孕妇中有13例为α地中海贫血基因携带者，检出率为1.63%；这13例的基因分型分别为13例为缺失型、0例为突变型；应用传统经检测方法对孕妇进行筛查，得到与荧光定量PCR技术相同的结果；应用血红蛋白毛细管电泳技术得到的α地中海贫血孕妇有4例，检出率为0.5%。结论应用荧光定量PCR技术对育龄期的孕妇进行α地中海贫血筛查的结果可靠，对于预防缺陷新生儿的出生具有非常重要的意义。

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