简介:【摘要】目的 利用实时荧光定量PCR针对乙肝DNA开展检测,分析为检测结果产生影响的各方面因素。 方法 此次研究针对300例病例,且全部确诊为乙型肝炎病毒感染,收治开始和结束时间分别为2021年3月、2022年2月,对患者血液标本开展采集,利用实时荧光定量PCR对其进行检测,分析检测结果。 结果 300例标本中,实时荧光定量PCR诊断乙肝DNA准确260例,占比86.67%;漏诊误诊40例,占比13.33%。实时荧光定量PCR诊断准确率和临床诊断无较大差异(P<0.05)。 结论 在针对乙肝DNA进行检测的过程中,使用实时荧光定量PCR可以产生较高的价值,但是可能会出现误诊等情况,所以需要进行综合预防。
简介:【摘要】近年来,随着植物基因工程技术在农业生产行业中得到越来越广泛的应用,更多的带有改良育种特性基因的新型转基因育种品种也随之在世界范围内进行了广泛种植栽培,所以随之而来的就是转基因食品迅猛地发展,与转基因农业产品规模的商业化比较更引发了人们对农产品质量安全问题的忧虑。为了能确保转基因商品管理检测制度建设的进一步顺利推行,那么建立一个迅速、正确、高通量度的定量管理检验制度手段已十分必要。该文着重阐述了实时荧光定量PCR技术及在转基因食品定量检测过程中的运用,同时展望了建立质粒标准分子的技术来进行对较高转基因植物产品的定性检验。
简介:【摘要】目的:探究实时荧光PCR检测乙肝病毒DNA的临床意义。方法:本次研究选取我院2021年3月-2022年3月收治的乙型肝炎患者180例作为研究目标,所有患者均进行标准的abbot 药盒检测,其中大三阳100例,小三阳80例。所有患者入院后都采集空腹静脉血,然后采用全自动化学发光技术测定和荧光PCR技术测定,对两种检测技术检测乙肝类型的阳性检出率进行对比。结果:荧光PCR测定组大三阳、小三阳的阳性检出率均高全自动化学发光技术测定组P<0.05,差异存在统计学意义。结论:实时荧光PCR检测乙肝病毒DNA的临床意义较高,可以准确诊断出乙肝类型,为临床诊断提供有效依据,值得推广。
简介:【摘要】目的:分析在临床诊断中实施乙型肝炎病毒DNA实时荧光定量PCR检测的应用价值。方法:将本院2020年2月~2022年6月期间收治的64例乙型肝炎病毒患者作为本次研究对象(其中HBsAg(+)、HBeAg(+)、抗-HBc(+)患者25例,HBsAg(+)、抗-HBe(+)、抗-HBc(+)患者23例,HBsAg(+)、抗-HBc(+)患者16例),对所有患者分别实施PCR检验HBV-DNA检验(研究组)及ELISA检验(参照组),比较两种检验技术的诊断价值。结果:两组检验诊断后对比的各项指标的差异较为显著(P<0.05),统计学有意义。结论:在临床检验乙型肝炎病毒的过程中实施DNA实时荧光定量PCR检测的特异性、敏感度较高,能准确真实的反映HBV在体内的复制程度,为患者治疗方案的制定提供可靠的参考依据。
简介:摘要:本文旨在介绍荧光定量PCR技术,并详细说明了其使用前的准备工作、操作流程和注意事项,为广大动物实验爱好者提供参考。
简介:摘要:本文旨在介绍荧光定量PCR技术,并详细说明了其使用前的准备工作、操作流程和注意事项,为广大动物实验爱好者提供参考。
简介:【摘要】目的:探究荧光定量PCR技术在临床微生物检测中的应用效果。方法:选取我院2021年5月~2022年5月收治的100例住院患者作为研究对象,采集患者的临床标本,并对其进行荧光定量PCR技术检测,分析对微生物检测结果。结果:50份粪便标本中,检测出沙门氏菌有29例,占比58.00%。肠出血大肠杆菌有2例,占比4.00%,溶血性杆菌8例,占比16.00%;在脓液液标本的50份中,金黄色的葡萄杆菌有8例,占比16.00%。选取沙门氏菌、肠出血大肠杆菌、溶血性弧菌和金黄色葡萄球菌阳性的各4株,检测特异性,结果为特异性100%, 没有假阴性和假阳性检测。结论:在临床微生物检测中实施荧光定量PCR技术干预可提高检测结果准确性,具有较高的灵敏度与特异性,值得推广实施。
简介:【摘要】目的:分析实时定量PCR实验室开展强化管理对污染的预防效果。方法:我中心于2020年6月在实时定量PCR实验室开展强化管理,分别于强化管理开展前(2019年6月-2020年5月)、强化管理开展后(2020年6月-2021年5月)对工作人员项目合格率进行对比。结果:强化管理后,工作人员操作流程知晓、污染来源知晓、个人防护措施、手卫生、污物处理、高压消毒锅使用等检查项目合格率均较强化管理前更高,数据差异有统计学意义(P<0.05)。结论:实时定量PCR实验室开展强化管理有助于提高工作人员防范意识,做好污物处理,避免污染发生,值得推广。
简介:摘要:目的:在研究中基于多重实时荧光定量PCR的方法以及相关的技术,来建立一个能够同时对14中高危型人乳头瘤病毒进行检测与分析,来有效地建立一个对癌基因E6/E7mRNA的检测方法。方法:在此次研究中选取我院223例临床样本进行检测与分析,来探究14种高危型人乳头瘤病毒中,不同病毒的E6/E7基因序列,来探究这些基因序列中存在的区域设计特异性,并且结合相对应的反应体系来构建一个高危型人乳头瘤病毒E6/E7mRNA的检测方法与系统。在实验中需要结合这些临床样本来利用温核算扩增技术进行高危型人乳头瘤病毒E6/E7mRNA检测,最终来探究其检测结果与宫颈组织病理学检测结果之间是否存在着一致性。结果:在实验中所建立的检测方法,能够在试验检测中将检测限提升更高的程度,并且对于一些常见低危型HPV中也并没有出现交叉检出的情况,使用多重实时荧光定量PCR方法所检测出的结果与Aptima HPV检测结果是具有较好的一致性,并且多重实时荧光定量PCR法中的敏感性为84.0%,特异性更是高达94.4%阴性预测值比阳性预测值高出更多,高达97.9%,而阳性预测值仅为65.6%。结论:使用多重实时荧光定量PCR法进行检测有着特异性好、稳定性好以及灵敏性高等等优势,能够在为高危型人乳头瘤病毒的患者提供一个更好的诊断方案以及技术平台。
简介:[摘要] 目的 对实时荧光PCR检测HLA-B27基因进行方法学验证,同时分析强直性脊柱炎(AS)组与对照组之间人类白细胞相关抗原B27(HLA-B27)、血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)、抗链球菌溶血素O(ASO)、类风湿因子(RF)及免疫五项等指标检测水平的差异,从而探讨HLA-B27基因在强直性脊柱炎预防、诊断中的临床应用价值。方法 对人类HLA-B27基因检测试剂盒的分析特异性、阳性符合率、最低检出限、检测精密度、提取试剂效率测定、抗干扰能力和对比实验符合率进行性能评价。同时分析2016年10月~2021年4月在普宁市人民医院收治的可疑强直性脊柱炎患者,将符合纳入标准的患者分为强直性脊柱炎组375例和对照组421例,分析两组患者的HLA-B27阳性率和ESR、CRP、ASO及RF和免疫五项检测水平。结果 实时荧光PCR检测HLA-B27基因特异性:100%;阳性符合率:100%;最低检出限:500copies/ml;低浓度标本检测精密度的变异系数:1.05%;提取试剂效率符合要求;一定浓度干扰物对检测结果没有影响;对比实验符合率:100%。AS组HLA-B27阳性率:85.07%;ESR检测结果为(34.04±28.09)mm/h、IgA为(3.28±1.405)g/L、IgG为(14.646±4.10)g/L均高于对照组,差异有统计学意义( P<0.05)。结论 荧光PCR法检测人类HLA-B27基因结果稳定、准确、可靠,满足试剂盒说明书要求,可用于临床上对人类 HLA-B27基因的检测。HLA-B27以及ESR、IgA、IgG检测能够有效提高强直性脊柱炎的阳性率,在强直性脊柱炎的早期筛查、早期诊断具有临床应用价值。
简介:摘要:目的 比较不同类型肝病患者应用荧光定量PCR法检查血清HBV-DNA的临床结果。方法 选取2020年4月~2021年8月我院收治的276例肝病患者作为研究对象,其中慢性乙型肝炎213例、乙肝后肝硬化37例、原发性肝癌26例;应用荧光定量PCR检测各组的HBV-DNA,应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测乙肝病毒的血清免疫标志物HBeAg,比较检测结果。结果 肝硬化、原发性肝癌患者的PCR水平明显低于慢性乙型肝炎患者;HBeAg阳性组的HBV-DNA阳性率显著高于HBeAg阴性组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 荧光定量PCR检测肝病患者的血清HBV-DNA,能够直观反映出患者体内的病毒携带以及病毒复制情况,从而为临床评估病情提供依据,值得推广。
简介:【摘要】目的 探讨荧光聚合酶链反应(PCR)探针溶解曲线法在老年肺结核患者耐药性检测中的价值。方法 收集老年肺结核患者痰标本55份,经菌种鉴定分离133株(例)菌株作为研究对象。对其采用PCR探针溶解曲线法、表型药敏试验,分析对利福平、异烟肼、喹诺酮、卡那霉素的耐药性。对比PCR探针溶解曲线法、表型药敏试验两种检测方法耐药性检测结果的一致性,采用kappa值评价。结果 PCR探针溶解曲线法、表型药敏试验结果显示在利福平、异烟肼、喹诺酮、卡那霉素中一致性均较好,kappa值分别为0.76、0.81、0.84、0.80。结论 PCR探针溶解曲线法在肺结核患者耐药性的检测中具有较高价值,基本与表型药敏试验结果相当。
简介:摘要目的利用Y型引物和荧光定量RT-PCR技术建立一种用于登革病毒(dengus virus, DENV)快速分型的四重荧光定量RT-PCR检测方法。方法用DENV四种分型体外转录RNA对该方法的灵敏度、特异性进行评价及用临床样本进行验证。结果DENVⅠ型、Ⅱ型、Ⅲ型和Ⅳ型最低检出限分别为5.01反应/PCR、6.16拷贝/反应、6.35拷贝/反应、6.39拷贝/反应,与单重实时荧光定量RT-PCR比,最低检测限无明显变化;且与其他病毒无交叉反应,临床标本的阳性一致率和阴性一致率均为100%。结论本研究建立的Y型引物四重荧光定量RT-PCR方法可有效避免不同DENV分型间的交叉反应,同时具有良好的灵敏度和特异性,可用于相关临床标本的DENV快速分型检测。
简介:摘要目的建立针对发热伴血小板减少综合征病毒(severe fever with thrombocytopenia syndrome virus,SFTSV)、登革病毒(dengue virus, DENV)、汉滩病毒(hantaan virus,HTNV)三种常见病毒性出血热病毒的现场应急快速检测方法。方法基于传统的TaqMan荧光探针技术,利用国产快速一步法RT-PCR试剂盒,结合magnetic induction cycler (Mic) qPCR仪,建立三种常见病毒性出血热病毒的快速荧光定量RT-PCR检测方法。利用三种病毒体外转录RNA及模拟样本、其他相关病毒临床样本及健康人血标本进行灵敏度、特异性、重复性验证。结果相较于传统的实时荧光定量RT-PCR方法,此方法所需时间大大缩短,可在35 min内完成检测。SFTSV、DENV、HTNV的最低检出限均小于100拷贝/PCR,与模拟对照样本及其他病毒临床样本无交叉反应,模拟阳性样本验证均可检出,且各组验证结果的Ct值变异系数均小于4%。结论本研究建立的快速荧光定量RT-PCR检测方法具有良好的灵敏性、特异性和重复性。对于现场应急检测和媒介生物标本筛查具有一定的应用前景。