简介:EB病毒(EBV)与多种人类肿瘤,如Burkitt淋巴瘤以及鼻咽癌、胃癌等上皮性肿瘤相关。病毒编码的潜伏膜蛋白2A(LMP2A)存在于部分EBV相关胃癌(EBVaGC)中,与肿瘤发生、发展密切相关。目的:应用慢病毒介导的RNA干扰(RNAi)技术抑制LMP2A基因表达,探讨下调LMP2A对EBVaGC细胞体外生长的影响。方法:构建慢病毒载体pGCSIL-LMP2A-shRNA-LV和阴性对照载体并转染EBVaGC细胞株GT38,以real-timePCR和蛋白质印迹法检测慢病毒载体的抑制效率,CCK-8实验、克隆形成实验和流式细胞术检测GT38细胞的细胞生长、细胞周期和细胞凋亡。结果:GT38细胞转染LMP2A-shRNA-LV后,LMP2AmRNA和蛋白表达分别下调65.4%和50.8%,进而导致细胞体外增殖受抑,克隆形成能力降低,G0/G1期细胞比例增加,细胞凋亡率增高,与转染阴性对照慢病毒载体和未予转染慢病毒的GT38细胞相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:慢病毒介导的RNAi技术能高效抑制LMP2A基因表达,进而抑制EBVaGC细胞的体外生长,诱导G0/G1期阻滞,促进细胞凋亡。LMP2A可作为EBVaGC基因治疗的潜在靶点。
简介:1983年,离开亲手创办三年的《散文》月刊,我回到书稿编辑室。说'回到'有些牵强,《散文》月刊创办之前,百花文艺出版社还没有复牌,我所在的文艺组隶属于天津人民出版社,这个建制随着'百花'复社已经取消了。百花文艺出版社成立于1958年。'文革'前,出版社和杂志社都是各自独立的,分工很严格。比如天津的《新港》文学月刊,由市文联主办,出版社单纯出书,没有哪家出版社自己办刊物。出版社按照书稿的类别,分为若干编辑室,组成一个
简介:目的构建并观察靶向β-连环蛋白(β-catenin)的shRNA慢病毒对儿童髓母细胞瘤(MB)细胞株生物学行为的影响。方法①设计靶向β-catenin的shRNA1、2、3和阴性对照(NC),分别插入pCH-CMV-MCS-EF1-copGFP质粒中,通过慢病毒包装后获得相应的重组慢病毒。②培养儿童MB细胞株DOAY并分为Lentivirus(LV)-shRNA1、2、3、NC组和空白对照组(Blank),前4组感染相应的重组慢病毒,Blank组未感染病毒,感染72h后在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白(GFP)表达,通过RT-PCR和WesternBlot检测各组细胞中β-catenin的表达情况,选取对β-catenin抑制效果最佳的LV-shRNA,用嘌呤霉素分别筛选稳定感染该LV-shRNA和LV-NC的DOAY细胞系。③设3组,LV-shRNA组和LV-NC组为筛选得到的稳定感染的细胞系,Blank组为未感染病毒的细胞,采用MTT法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Transwell实验检测细胞侵袭能力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力。结果①LV-shRNA1、2、3组β-catenin的mRNA和蛋白表达均低于LV-NC组和Blank组,LV-shRNA1组低于LV-shRNA2、3组,差异均有统计学意义(P<0.05),以4μg·mL-1嘌呤霉素筛选得到稳定表达LV-shRNA1和LV-NC的DOAY细胞株。②与LV-NC和Blank组比较,LV-shRNA1组MTT实验第12、24、36、48、72h时的OD值较低,细胞总凋亡率较高,穿膜细胞数目较少,细胞迁移距离较短,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论慢病毒介导shRNA抑制β-catenin后,能显著抑制DOAY细胞的增殖能力,降低其侵袭和迁移能力,促进其凋亡。
简介:摘要目的探讨肛瘘手术失败的原因以及降低手术失败概率的措施,最大限度的避免病人再次接受手术。方法以我院收治的肛瘘病人60例作为本次研究主体,所选取的病人均在我院接受肛瘘手术,对其临床资料实施回顾性的分析与研究,同时针对肛瘘复发的因素实施有针对性的总结和研究,寻找可能出现的发病因素,提出有针对性的解决措施最大限度的避免再次复发。结果导致肛瘘手术失败的主要因素是手术之后内口处理不合理以及瘘管处理不够彻底,分别占41.67%(25/60),21.67%(13/60),上述两种因素都有的为23.33%(14/60),另外因为异物残留诱发的有1.67%(1/60),手术之后引流补偿而导致失败的有6.67%(4/60)。结论导致肛瘘手术失败的原因有很多,其中内口的处理不当为主要因素,所以手术实施过程中以及手术结束之后有针对性的处理对提升手术成功率有非常积极的意义。
简介:小华向班主任请假说:'我被KS病毒感染了,想请假三天。'班主任问:'这病毒没听说过啊,严重吗?会不会传染?'小华说:'很严重,但这病毒只有学生会感染。'班主任感到很惊讶,问:'KS到底是什么病毒?'小华小声地说:'考试。'