简介：摘要目的探讨荧光定量聚合酶链式反应(QF-PCR)在快速产前诊断中的临床应用价值。方法应用QF-PCR技术对2018年5月7日至2019年5月7日于扬州市妇幼保健院产前诊断中心行产前诊断的1 190例产前羊水样本进行13、18、21、X及Y的非整倍体产前诊断并与核型分析结果对比。结果1 190例羊水QF-PCR共诊断出33例各种染色体异常，包括21-三体20例；18-三体4例及性染色体异常9例。结论作为常见的快速诊断方法，QF-PCR诊断结果快速、准确，但还不能完全代替传统的核型分析。

简介：

简介：摘要目的探讨荧光定量聚合酶链式反应联合检测性传播疾病病原微生物的临床价值。方法选取来我院妇科、皮肤科和泌尿外科等就诊的疑有性传播疾病患者100例作为研究对象，用实时定量PCR（FQ-PCR）方法，对淋球菌（NG）、解脲支原体（UU）、人乳头瘤病毒（HPV）6/11型以及16/18型四种性传播疾病病原微生物进行定量检测，并与定性PCR结果比较。结果100例标本均对四种性传播疾病病原微生物进行FQ-PCR检测，结果按感染率从高到低依次排列为UU（36.00%）、HPV6/11（23.00%）、HPV16/18（13.00%）和TP（10.00%）；随机抽取50例标本，并对其分别进行FQ-PCR与PCR检测，结果显示两种检测方法之间对于四种性传播疾病病原微生物的阳性率并无明显差异（P>0.05）。结论临床上利用荧光定量聚合酶链式反应联合检测性传播疾病病原微生物具有快速便捷以及高效的优点，对监测、预防和控制以及预后评估等方面都具有较高的临床价值，值得广泛推广应用。

简介：摘要DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解旋成单链，在DNA聚合酶的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子拷贝。在实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，加入设计引物，DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。随着科学技术以及经济的发展，微生物的检验准确性在临床和生活健康以及饮食上都有着不可忽视的作用。本研究主要通过对聚合酶链式反应进行介绍，针对其特点深入研究其在微生物检验中的应用。

简介：建立免疫磁珠分离(ImmunomagneticSeparation,简称“IMS”)联合荧光定量聚合酶链式反应PCR(PolymeraseChainReaction,简称“PCR”)快速检测阪崎肠杆菌的方法。制备以生物素介导偶联的链霉亲和素免疫磁珠,优化偶联和捕获条件。合成阪崎肠杆菌ITS(InternalTranscribedSpacer简称“ITS”)靶基因序列的引物和探针,同时构建内参质粒(InternalAmplificationControl,简称“IAC”),建立能够实时监控反应过程的荧光定量PCR反应体系。在1mL体系中添加粒径为80nm的链霉亲和素免疫磁珠0.3mg,孵育30min,可获得80.5%以上的捕获效率。建立的基于内参的荧光PCR体系针对质粒检测时,Ct值(Cyclethreshold,简称“Ct值”)与模板拷贝数有着良好的线性关系(R2=0.998),IMS-PCR检测体系对阪崎肠杆菌菌液的检测灵敏度为33.3CFU/mL,可在3h内完成。针对4株阪崎肠杆菌标准菌株和5株非阪崎肠杆菌菌株的检测也显示出较好的特异性和稳定性,人工模拟样品的检测结果与采用国标法检测的结果完全一致,可用于快速检测样品中的阪崎肠杆菌和疾病预防。

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简介：摘要目的建立一种灵敏、特异的实时荧光定量TaqMan反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)，用于快速、准确地检测西藏环状病毒(Tibet orbivirus, TIBOV)。方法收集GenBank数据库中全部TIBOV基因序列，利用Clustal X 2.1软件进行比对，根据分析结果选择TIBOV VP4基因保守区域设计特异性引物、探针；以体外转录的RNA为标准品，建立检测TIBOV的TaqMan RT-PCR方法，绘制荧光定量标准曲线；对该方法的特异性、灵敏度、重复性进行评价。结果引物与探针具有良好的特异性，对多种虫媒病毒无交叉反应。检测反应灵敏度为1.0×102拷贝/反应，在1.0×102～8拷贝/反应模板范围内具有良好的扩增曲线，同一样品重复检测循环阈值(Ct)的变异系数均小于1.5%。对西藏自治区、云南省、湖南省和广东省采集的蚊虫样本进行筛查，结果均为阴性。TIBOV模拟样本检出率为100%。结论该方法灵敏度高、特异性强，可用于TIBOV的常规监测。

简介：摘要本文主要是聚合酶链式反应（PCR技术）进行了相关概述，然后就该技术在微生物检测中的具体应用进行了分析，最后提出了该技术在实际应用过程中所存在的问题以及具体的解决方式，希望能够以此来进一步提高聚合酶链式反应在微生物检测中的价值。

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简介：目的建立不同水源中GⅡ型诺如病毒(NoVGⅡ)实时荧光逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测方法,对某市疾病预防控制中心送检的10份疑似引起诺如病毒中毒的水样进行NoVGⅡ检测。方法以瓶装水、河水和生活污水为研究对象,采用硝酸纤维素膜-聚乙二醇(PEG)沉淀法富集病毒,对取样体积、病毒洗脱条件、PEG终浓度及PEG沉淀条件等进行了优化,提取病毒RNA、建立实时荧光RT-PCR检测方法;通过外加MS2计算方法的回收率,评价所建方法对水样中诺如病毒的回收效果。结果建立的方法对瓶装水、河水和生活污水中NoVGⅡ的平均回收率分别为(60.1±8.0)%、(22.0±6.5)%和(35.7±8.1)%,10份送检水样中3份检出NoVGⅡ。结论建立的实时荧光RT-PCR方法适用于瓶装水、河水和生活污水中NoVGⅡ的检测,饮用水被NoVGⅡ是引发某市人员中毒的原因之一。

简介：摘要目的对聚合酶链反应（FQ-PCR）检测乙型肝炎病毒进行分析，了解其临床应用价值。方法用中山医科大学达安基因诊断中心设计的HBV-FQ-PCR试剂盒对101份临床血清标本同时进行PCR荧光定量和ELISA肝炎标志物检测，对检测结果进行分析。结果经过FQ-PCR检测，24份HbsAgHbeAgHbcAb都阳性的标本，其血清HBV-DNA也全部阳性，HBV-DNA拷贝数范围在1.4×105-7.0×109/ml之间；32份HbsAgHbeAbHbcAb都阳性的标本，阳性率为46.9%，HBV-DNA拷贝数范围在0-8.1×107/ml之间；14份HbsAb阳性的标本，阳性率为7.1%，HBV-DNA拷贝数范围在0-5.0×104/ml之间；18份全阴性的标本，阳性率为5.6%,HBV-DNA拷贝数范围在0-4.9×105/ml之间。结论FQ-PCR定量检测HBV-DNA灵敏度，特异性较高，能基本反映乙肝病毒在体内的真实复制情况，具有较高的临床应用价值。

简介：<正>以完全闭管式的PCR和荧光探针技术相结合的实时检测定量PCR方法对110例病毒性肝炎患者血清HBVDNA进行检测。结果:HBeAg阳性/抗HBe阴性患者HBVDNA拷贝数与HBeAg阴性/抗HBe阳性患者或HBeAg阴性/抗HBe阴性患者的拷贝数比较差异有显著性(P<0.05),而后二者比较差异无显著性(P>0.05);HBVDNA拷贝数与肝实质损害指标血清谷丙转氨酶/谷草转

简介：这个读dao,这个读chuan。王大光指着手机屏上的"氘"和"氚"两个字给儿子王加文说。儿子的脑袋汗津津的,他伸出手去撸了一把,自己的手便有些黏兮兮的,心下突然有些焦躁。儿子又问,爸爸,什么是链式反应?王大光记得在百度上查到过链式反应的含义:事件结果包含有事件发生条件的反应。虽然只是简单的一句话,可是要解释给还在上小学三年级的儿子听就有些费劲

简介：目的：建立实时定量检测口腔内变形链球菌的实时定量聚合酶螺旋反应（PSR）方法。方法：针对变形链球菌的gtfB基因设计4套引物，通过实时浊度法和显色法两种方法判断结果。结果：从4套引物中筛选出最佳引物，并确定最佳温度为65％；进一步实验表明采用最佳引物能特异性地检测变形链球菌，与13种其他病原核酸无交叉反应，敏感性达10拷贝／μL。结论：建立了实时定量检测变形链球菌的PSR方法，该方法具有简单快速、特异性强、敏感性高的特点，为实时定量检测变形链球菌提供了新技术。

简介：【摘 要】目的：探究实时荧光定量聚合酶链反应法检测肺结核患者痰标本价值的对照。 方法： 选取 2017 年 1 月到 2018 年 1 月我院确诊的肺结核疾病的患者 35 例作为研究对象，全部患者均行实时荧光定量 PCR 法检查、痰涂片抗酸染色和培养法检测，对照三种检测方式的诊断准确率。 结果 ：实时荧光定量 PCR 法肺结核疾病诊断准确率显著高于痰涂片抗酸染色和培养法检测，统计学意义存在（ P ＜ 0.05 ）。 结论：实时荧光定量聚合酶链反应法检测肺结核患者痰标本 具有较高的应用价值，能够显示出痰标本中的结核杆菌数量变化情况，能够对病情起到监控作用，值得在临床。

简介：目的探讨高脂血、溶血标本对荧光定量聚合酶链反应（PCR）测定低水平HBV-DNA检测结果的影响。方法对收治的100例三酰甘油（TG）正常（TG≤1.46mmol/L）、实时荧光定量PCR测定为（4.0-9.0）×10^3IU/mL的乙型肝炎患者采集血清标本,进行即刻检测,另外选择100份乙肝五项全阴且测不出HBV-DNA的高TG标本和100份乙肝五项全阴且测不出HBV-DNA的全血标本分别制备成高脂血、溶血血清标本,同时进行高脂血和非高脂血、溶血血清和非溶血血清的HBV-DNA荧光定量PCR检测,并进行配对t检验。结果高脂血和非高脂血、溶血血清和非溶血血清的HBV-DNA水平差异有统计学意义（P〈0.05）。结论高脂血、溶血标本低水平HBV-DNA荧光定量PCR定量检测结果较空腹采集即刻检测的结果降低。

简介：摘要目的探讨荧光定量聚合酶链反应结合传统方法检测泌尿生殖道支原体感染的临床价值。方法对我院皮肤科、泌尿外科、妇科就诊患者的泌尿生殖道标本115例行荧光定量聚合酶链反应、液体培养法检测，分析比较结果。结果通过对同种标本的2种方法结果的比较，检测阳性率的差异没有统计学意义；FQ—PCR呈阳性的标本，液体培养法均呈阳性；而液体培养法呈阳性的标本，FQ—PCR可能为阴性，考虑原因主要是液体培养时间过长，标本被污染，导致假阳性。结论液体培养法可作为泌尿生殖道支原体感染的初筛检查，结合FQ—PCR检测能提供准确的诊断，2者阳性的基础上结合液体培养法的药敏试验，能为临床治疗提供有价值的用药方案。

简介：【摘要】目的：研究乙型肝炎患者乙肝病毒检验中使用实时荧光定量聚合酶链反应的作用。方法：选择25例乙型肝炎患者进行研究，为研究组，另外同期选择25例HBV早期感染者作为对照，为对照组。均选择于2022年3月至2023年2月，均在乙肝病毒检验中使用实时荧光定量聚合酶链反应，对比数据差异。结果：在入院时，两组HBV DNA表达水平有明显差异，研究组高，P＜0.05；单独分析研究组数据发现，治疗后3、6、9个月的HBV DNA表达水平有统计学差异，P＜0.05；均低于治疗前，P＜0.05。单独分析研究组数据还发现，治疗9个月的HBV DNA变异率最高，对比其他时间段（治疗前、治疗后3个月），P＜0.05。结论：乙型肝炎患者乙肝病毒检验中使用实时荧光定量聚合酶链反应的作用积极。

简介：【摘要】目的  探讨荧光定量聚合酶链反应联合抗酸染色用于肾结核组织病理诊断的价值。方法  收集60份肾切除术后组织标本，其中肾结核病25份（阳性），非结核肾病35份，阴性。通过荧光定量聚合酶链反应联合抗酸染色技术对各标本结核分枝杆菌病原体进行检测。结果  65例患者中，抗酸染色阳性率15.38%（10/65），荧光PCR阳性率33.85%（22/65）。抗酸染色检测结核分枝杆菌敏感性、特异性分别为40.00%（10/25）、100％（35/35）。荧光定量PCR检测结核分枝杆菌敏感性、特异性分别为88.00%（22/25）、100％（35/35），二者敏感性对比差异显著（p＜0.05）。结论  荧光定量聚合酶链反应联合抗酸染色能进一步提高对肾结核组织中结核分枝杆菌的检出率，具有敏感性好，特异性强的优势。

简介：摘要目的应用微阵列比较基因组杂交（Array-CGH）联合荧光定量聚合酶链反应（QF-PCR）检测分析自然流产组织，探索该联合检测手段的特点与应用，进而为自然流产发生的遗传学因素提供参考。方法采集2016年7月至2019年9月就诊于大连市妇女儿童医疗中心的345例自然流产患者的流产组织，并采用Array-CGH联合QF-PCR技术进行遗传变异情况检测，分析其检测结果。结果QF-PCR技术共检测出染色体数目异常213例，Array-CGH技术补充检出染色体结构异常24例，综合遗传学异常检出率达到68.7%（237/345），并检测出本地区常见流产组织染色体异常类型。高龄孕妇（≥ 35岁）与非高龄组（<35岁）、孕早期孕妇（<10周）与非孕早期组（≥ 10周）流产组织染色体异常发生率比较显著增高[84.43%（141/167）比53.93%（96/178）、59.42%（205/284）比9.28%（32/61）]，差异有统计学意义（P<0.01）。结论Array-CGH联合QF-PCR技术分析全面准确，互为补充。部分染色体异常在流产组织中较为常见，需重点检测分析。应对高龄孕产妇开展及时的产前遗传咨询与监测，对孕早期发生的流产警惕遗传学因素。