简介:摘要:燃料乙醇发酵过程中酿酒酵母细胞活性被高浓度乙醇严重抑制而导致发酵提前终止,生产强度严重降低,因此构建同时具有高耐受性、高发酵性能的菌株一直是发酵工业追求的目标。选取酿酒酵母细胞形态调节关键基因小GTP酶家族成员Rho1,构建易错PCR产物文库,以酿酒酵母S288c为出发菌株采取“富集-自然生长-复筛”的筛选策略,成功筛选得到两株乙醇胁迫耐受性与发酵性能均提高的突变株M2和M5。测序发现突变株过表达的Rho1序列出现了3~5个氨基酸的突变和大片段的缺失突变。以300g/L起始葡萄糖进行乙醇发酵,72h时,M2和M5的乙醇滴度比对照菌株分别提高了19.4%和22.3%,超高浓度乙醇发酵能力显著提高。本研究为利用蛋白定向进化方法改良酵母菌复杂表型提供了新的作用靶点。
简介:摘要:啤酒酵母是一种与人类生活息息相关的微生物,也被称为“发酵酵母”或“发酵酵母”。它是一种重要的啤酒发酵菌种;它是葡萄酒质量的灵魂,对葡萄酒的色泽、香味和口感有很大的影响。酿酒酵母是一种安全、快速繁殖和快速代谢的酵母菌;它的生产过程可以很好地控制,并且可以很方便地进行大规模的培养,而且它的来源非常广泛,可以被广泛地应用到酿造、医药、饲料工业等多个领域。通过对发酵培养条件进行优化,可以让酵母细胞密度得到提升,从而可以提升生产效率,降低生产成本。这为以后的大规模培养,使它能够更好地发挥出它在食品发酵工业中的作用,提供了理论依据,奠定了实践基础。
简介:鉴定合成的或通过高通量随机组合方法获得的潜在功能片段的生物学功能需要一套高效便捷的酵母表达专用载体。酵母表达载体pYES2多克隆位点处不含起始密码子,通过设计含有ATG和EcoRⅠ酶切位点的特异性引物扩增一段Intron,利用In-Fusion重组技术(Clontech)将该片段构建至酵母表达载体pYES2,得到一个含有ATG的重组酵母表达载体pYES2-ATG。为了检测该载体的功能,扩增不含起始密码子的DNA序列nlea,该序列由本实验室设计合成,具有潜在的耐盐功能。构建重组表达载体pYES2-ATG-nlea在酵母中进行功能鉴定。研究结果表明,半乳糖诱导后,含pYES2-ATG-nlea的重组酵母菌株耐盐能力明显高于含pYES2-ATG空质粒的菌株,表明在该载体系统上的添加了起始密码子的nlea成功表达,具有一定的耐盐性,同时也证明改造的载体系统可用于没有起始密码子的编码区序列的功能筛选和鉴定。pYES2-ATG酵母载体系统不影响原始载体基本功能元件的表达,同时能使不含起始密码子编码区序列在酵母中正常表达,在大规模进行多个基因的功能鉴定中具有重要的应用价值。
简介:【摘要】目的:探讨抗酿酒酵母抗体(anti-Saccharomyces cerevisiae antibody ASCA)在复发性阿弗他溃疡(recurrent aphthous ulcer,RAU)诊断中的意义。方法:收集2018年度来我院就诊患者,选取60名(男28,女32)确诊复发性阿弗他溃疡的患者和同期来我院体检的60名(男性30名,女性30名)同龄的健康人为研究对象,采用欧蒙医学诊断有限公司的ASCA-IgA、ASCA-IgG酶联免疫试剂盒分别检测,分析数据。结果:实验组ASCA-IgA阳性患者24人,阳性率38.33%;ASCA-IgG阳性患者21人,阳性率35%;双抗体联合阳性患者31人,阳性率51.7%。对照组阳性患者7人,阳性率为11.67%。结论:抗酿酒酵母抗体对复发性阿弗他溃疡的诊断具有显著临床意义。
简介:摘要耳假丝酵母菌(又名耳念珠菌)是2009年首次在日本发现的一种真菌病原新物种,因其感染具有多重耐药,深部组织侵袭性感染及病死率高的特征,故被称为"超级真菌"。耳假丝酵母菌可能存在基因组多样性,不同国家的分离株都有不同的克隆,因而需要进一步的研究来确定其转化为特定的侵袭性、毒性和耐药性的模式。中国大陆曾报道18例,发现首株(BJCA001)的亲缘关系与印度、巴基斯坦和法国等国家的分离株比较接近,与其他多个国家报道的多重耐药菌株不同。目前使用的传统微生物学鉴定方法难度高,常被误认为是其他酵母菌,特别是希木龙假丝酵母菌。基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪及核糖体基因r DNA-ITS序列鉴定技术,可快速准确鉴定。耳假丝酵母菌感染主要有两种临床形式:定植与侵袭性深部感染。侵袭性深部感染则表现为多种形式,以血流感染(菌血症)最严重,病死率高(30%~72%)。本文就耳假丝酵母菌的特性、鉴定与分类、耐药性、流行与暴发等最新进展作一综述。