简介：摘要目的探讨miR-20a-5p、赖氨酸脱甲基酶6B(KDM6B)在骨肉瘤组织中的表达及miR-20a-5p靶向KDM6B对骨肉瘤细胞增殖、迁移、侵袭及肿瘤生长的影响。方法收集2017年1月至2019年3月在中国医科大学附属第一医院接受治疗的20例骨肉瘤患者的临床病理标本和癌旁组织，采用实时定量PCR(qRT-PCR)检测组织中miR-20a-5p及KDM6B mRNA表达水平。将骨肉瘤MG63细胞分为空白对照组、mimic NC组、miR-20a-5p mimic组和NC＋空载体组、miR-20a-5p＋空载体组、miR-20a-5p＋KDM6B组，采用qRT-PCR检测各组细胞miR-20a-5p和KDM6B mRNA表达水平，蛋白质印迹法检测KDM6B蛋白的表达水平，CCK-8法、细胞划痕实验和Transwell侵袭实验检测细胞增殖、迁移和侵袭能力。按照随机数字表法将裸鼠分为NC＋空载体组、miR-20a-5p＋空载体组和miR-20a-5p＋KDM6B组，每组各5只，采用裸鼠移植瘤模型检测肿瘤细胞的生长能力。结果骨肉瘤组织中miR-20a-5p mRNA相对表达量为0.55±0.27，癌旁组织为1.22±0.28，差异具有统计学意义(t＝7.701，P<0.001)；骨肉瘤组织中KDM6B mRNA相对表达量为1.66±0.19，癌旁组织为1.00±0.15，差异具有统计学意义(t＝12.219，P<0.001)。转染miR-20a-5p后，KDM6B mRNA和蛋白表达水平均随miR-20a-5p表达水平的升高而降低。转染miR-20a-5p 48 h后，空白对照组、mimic NC组、miR-20a-5p mimic组细胞增殖能力分别为0.83±0.04、0.81±0.03、0.52±0.01(F＝89.655，P<0.001)，与空白对照组、mimic NC组相比，miR-20a-5p mimic组均受到明显抑制(均P<0.001)；NC＋空载体组、miR-20a-5p＋空载体组、miR-20a-5p＋KDM6B组细胞增殖能力分别为0.83±0.05、0.52±0.01、0.67±0.05(F＝43.919，P<0.001)，与NC＋空载体组相比，miR-20a-5p＋空载体组受到明显抑制(P<0.001)，与miR-20a-5p＋空载体组相比，miR-20a-5p＋KDM6B组显著增强(P<0.001)。空白对照组、mimic NC组、miR-20a-5p mimic组划痕愈合率分别为(32.51±2.73)%、(30.26±3.22)%、(13.52±1.77)%(F＝46.314，P<0.001)，与空白对照组、mimic NC组相比，miR-20a-5p mimic组均显著降低(均P<0.001)；NC＋空载体组、miR-20a-5p＋空载体组、miR-20a-5p＋KDM6B组划痕愈合率分别为(31.34±3.11)%、(12.15±1.64)%、(28.93±2.89)%(F＝47.511，P<0.001)，与NC＋空载体组相比，miR-20a-5p＋空载体组显著降低(P<0.001)，与miR-20a-5p＋空载体组相比，miR-20a-5p＋KDM6B组显著增强(P＝0.001)。空白对照组、mimic NC组、miR-20a-5p mimic组穿膜细胞数分别为114±16、108±11和42±6(F＝36.282，P<0.001)，与空白对照组、mimic NC组相比，miR-20a-5p mimic组均显著减少(均P<0.001)；NC＋空载体组、miR-20a-5p＋空载体组、miR-20a-5p＋KDM6B组穿膜细胞数分别为143±11、39±4、139±12(F＝112.120，P<0.001)，与NC＋空载体组相比，miR-20a-5p＋空载体组显著减少(P<0.001)，与miR-20a-5p＋空载体组相比，miR-20a-5p＋KDM6B组显著增多(P<0.001)。NC＋空载体组、miR-20a-5p＋空载体组、miR-20a-5p＋KDM6B组小鼠第21天肿瘤体积分别为(1 667.50±250.40)mm3、(129.20±21.00)mm3、(775.41±77.51)mm3，差异具有统计学意义(F＝77.651，P<0.001)；3组小鼠肿瘤重量分别为(1.35±0.18)g、(0.12±0.01)g、(0.61±0.03)g，差异具有统计学意义(F＝104.191，P<0.001)。结论miR-20a-5p在骨肉瘤组织中表达显著下降，KDM6B在骨肉瘤组织中表达显著升高，过表达miR-20a-5p可能通过靶向降低KDM6B的表达来抑制骨肉瘤细胞的增殖、迁移、侵袭及肿瘤生长能力。

简介：摘要目的探讨miR-196a-5p、miR-105-5p在良、恶性肺结节患者血清中的表达水平差异及其在恶性肺结节中的诊断价值。方法分析癌症基因组图谱(TCGA)数据库中肺腺癌、肺鳞状细胞癌癌组织以及癌旁组织miRNA表达水平，筛选癌组织与癌旁组织相比表达水平差异明显的miRNA作为目的miRNA。选取2019年6月至2020年7月在山东省潍坊市人民医院就诊的72例肺结节患者。使用qRT-PCR法检测肺结节患者血清中目的miRNA的表达水平，使用受试者工作特征(ROC)曲线比较目的miRNA与肿瘤标志物Cyfra21-1、NSE、CEA在恶性肺结节中的诊断价值。结果经筛选确定的目的miRNA为miR-196a-5p、miR-105-5p。纳入良性肺结节组患者26例，恶性肺结节组患者46例。良、恶性结节组血清miR-196a-5p水平[M(P25，P75)]分别为0.63(0.09，2.15)、1.93(0.93，4.97)，miR-105-5p水平分别为2.03(0.54，7.95)、10.65(5.94，18.39)。与良性肺结节组相比，恶性肺结节组血清miR-196a-5p、miR-105-5p水平升高，差异具有统计学意义(Z＝-3.083，P＝0.002；Z＝-4.092，P<0.001)。良、恶性结节组血清Cyfra21-1水平分别为2.48(1.84，3.78)、2.20(1.47，3.32)μg/L；NSE水平分别为15.58(12.45，18.95)、14.43(12.07，17.87)μg/L；CEA水平分别为1.16(0.55，2.11)、1.17(0.61，1.68)μg/L。良、恶性肺结节组血清Cyfra21-1、NSE、CEA水平差异均不具有统计学意义(Z＝-1.161，P＝0.246；Z＝-0.305，P＝0.761；Z＝-0.271，P＝0.786)。联合miR-196a-5p、miR-105-5p在诊断恶性肺结节中的曲线下面积(AUC)为0.762，敏感性为89.1%，特异性为61.5%，高于联合肿瘤标志物Cyfra21-1、NSE、CEA在诊断恶性肺结节中的价值(AUC为0.591，敏感性为58.7%，特异性为64.5%)。结论联合血清miR-196a-5p、miR-105-5p可辅助诊断恶性肺结节，具有较高的诊断价值。

简介：摘要目的探讨术前检测前列腺癌患者血清miR-148a-3p及miR-139-5p表达水平对预测术后复发转移的价值。方法选择2016年10月至2019年10月平煤神马医疗集团总医院收治的120例前列腺癌患者作为研究对象。按照在随访期内是否出现复发转移分为复发转移组(47例)与术后未复发转移组(73例)。比较两组患者血清miR-148a-3p及miR-139-5p表达水平；分析术后复发转移患者血清miR-148a-3p及miR-139-5p的表达水平与临床病理学特征之间的关系；分析血清miR-148a-3p及miR-139-5p水平在预测前列腺癌术后复发转移的受试者工作特征曲线图。结果术后复发转移组血清miR-148a-3p及miR-139-5p相对表达水平均高于术后未复发转移组(P均<0.05)。术后复发转移患者血清miR-148a-3p及miR-139-5p表达水平与肿瘤TNM分期、Gleason评分均具有显著的相关性(P均<0.05)。miR-148a-3p及miR-139-5p两项指标绘制受试者工作特征曲线分析结果表明，两项指标曲线下面积差异均有统计学意义(P均<0.01)。miR-148a-3p表达水平取4.45 ng/ml时的敏感度为91.5%，特异度为83.2%；miR-139-5p表达水平取7.34 ng/ml时的敏感度为73.5%，特异度为79.2%。结论术后复发转移前列腺癌患者术前血清miR-148a-3p及miR-139-5p相对表达水平显著上升，且与TNM分期、Gleason评分呈正相关，二者在预测前列腺癌术后复发转移中的敏感度及特异度均较好，对临床评估前列腺癌患者预后状况具有一定的价值。

简介：摘要目的观察miR-3074-5p及其靶基因p27在子痫前期胎盘组织中的表达情况，初步探讨miR-3074-5p/p27分子途径在子痫前期病理过程中的作用。方法收集2017年9月至2018年3月期间在天津医科大学第二医院产科行剖宫产手术的子痫前期患者（子痫前期组，16例）和相同孕周非子痫前期的剖宫产产妇（对照组，9例）的胎盘组织，通过实时定量PCR、免疫组织化学（immunohistochemistry，IHC）和Western blotting检测，比较两组胎盘组织中miR-3074-5p以及p27、细胞周期蛋白D1（cyclin D1，CCND1）和细胞周期蛋白依赖性激酶2（cyclin dependent kinase 2，CDK2）等蛋白的表达水平。应用双荧光素酶基因报告系统，验证miR-3074-5p对p27 mRNA的靶向抑制作用；通过RNA干扰技术，敲低人绒毛外滋养细胞系HTR-8/SVneo中p27蛋白的表达水平，观察p27表达下调对细胞生理活性的影响。结果与对照组相比，子痫前期组胎盘组织中miR-3074-5p（P=0.034）与CCND1蛋白的表达量都显著下调（P=0.031），而p27蛋白的表达量则显著上调（P=0.010）；IHC结果显示，p27和CCND1蛋白主要表达于合体滋养层细胞中。双荧光素酶报告系统检测结果证实，miR-3074-5p能与p27 mRNA的3’UTR序列结合而抑制其表达；敲低HTR-8/SVneo细胞中p27的表达水平后，细胞的增殖（P=0.014）和侵袭（P=0.045）活性都显著增强。结论miR-3074-5p可能通过直接靶向抑制p27的表达而参与调控人绒毛外滋养层细胞的生理活性，进而影响胎盘发育及功能；胎盘组织中miR-3074-5p的异常低表达可能通过诱导p27的表达而参与子痫前期的病理过程。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)AC068768.1对肾癌细胞周期和增殖能力的影响及分子机制。方法采用实时定量聚合酶链反应(qPCR)检测AC068768.1在肾癌细胞系中的表达情况。以AC068768.1表达最低的OS-RC-2细胞为转染对象，设转染阴性对照质粒的OS-RC-2为对照组，转染AC068768.1质粒为AC068768.1组。qPCR检测转染OS-RC-2细胞中AC068768.1的表达。通过流式细胞术和四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)增殖实验检测AC068768.1对OS-RC-2细胞周期和增殖能力的影响。生物信息学方法预测AC068768.1可能结合的微小RNA(miRNA)。qPCR检测miRNA及下游基因mRNA的表达，Western blotting法检测下游基因蛋白的表达。计量资料以均数±标准差(Mean±SD)表示，组间比较采用独立样本t检验，多组间比较采用单因素方差分析。结果与正常肾小管上皮细胞相比，AC068768.1在肾癌细胞系中的表达显著降低，差异明显具有统计学意义(P<0.01)。AC068768.1组OS-RC-2细胞AC068768.1的表达显著高于对照组，差异明显具有统计学意义(P<0.01)。上调AC068768.1表达可抑制肾癌细胞周期(P<0.05)和增殖能力(P<0.05)。miR-21-5p可能是AC068768.1的功能性靶基因。上调AC068768.1可明显抑制miR-21-5p表达(P<0.01)，促进金属蛋白酶组织抑制因子3(TIMP3)基因表达(P<0.01)。结论AC068768.1通过调节miR-21-5p表达，促进TIMP3基因表达，进而抑制肾癌OS-RC-2细胞周期和增殖能力。

简介：【摘要】目的：探讨miR-25-5p在胃癌患者中的表达及其对胃癌细胞作用研究。方法：选取我院收治的胃癌患者38例为研究组，选取同期院内体检的健康人员38例为对照组，采用实时荧光定量聚合酶链反应分析miR-29a在两组研究对象外周血当中的表达，另外，将胃癌患者分为Ⅰ-Ⅳ期，分析各期胃癌患者miR-25-5p的表达情况。结果：研究组患者的miR-25-5p表达均显著高于对照组，同时Ⅳ期患者的miR-25-5p表达显著高于Ⅲ期以及Ⅰ-Ⅱ期患者，Ⅲ期患者显著高于Ⅰ-Ⅱ期患者(P＜0.05)；结论：胃癌患者外周当中miR-25-5p的表达显著上升，并且同胃癌患者病情等级存在正相关，对于临床诊断以及预后评估有重要参考意义。

简介：摘要目的探讨miR-124-3p和miR-506-3p在蛋白C(protein C，PROC)降低中的作用及机制。方法将PROC 3'-UTR野生型(PROCwt)和PROC 3'-UTR突变型(PROCmut)克隆构建到含萤火虫荧光素酶报告质粒中(Luc-PROCwt和Luc-PROCmut)，利用双荧光素酶报告体系检测相对荧光素酶酶活性，明确miR-124-3p和miR-506-3p与PROC的靶基因关系及其紧密性。将miR-124-3p mimics和miR-506-3p mimics及其抑制基因(inhibitor)分别转染至HL-7702细胞，检测对照组(NC)、miR-506-3p组、miR-124-3p组、miR-506-3p抑制组和miR-124-3p抑制组的细胞增殖率，PROC mRNA表达水平，PROC、COX-2、Bcl-2和Bax蛋白表达水平和细胞凋亡水平，并采用单因素和双因素方差分析比较各组间的差异。结果双荧光素酶报告体系检测显示，NC＋Luc-PROCwt组、miR-506-3p＋Luc-PROCwt组、miR-124-3p＋Luc-PROCwt组、NC＋Luc-PROCmut组、miR-506-3p＋Luc-PROCmut组和miR-124-3p＋Luc-PROCmut组荧光素酶活性分别为6.98±0.07、2.01±0.05、2.67±0.06、8.13±0.26、6.91±0.14和8.41±0.13。与NC＋Luc-PROCwt组相比，miR-506-3p＋Luc-PROCwt组与miR-124-3p＋Luc-PROCwt组的荧光素酶活性均明显降低，差异均有统计学意义(P均<0.01)；与NC＋Luc-PROCmut组相比，miR-506-3p＋Luc-PROCmut组荧光素酶活性明显降低，miR-124-3p＋Luc-PROCmut组荧光素酶活性明显升高，组间比较，差异亦均有统计学意义(P<0.01和P＝0.018 1)。CCK-8检测显示，NC组、miR-506-3p组、miR-124-3p组、miR-506-3p抑制组和miR-124-3p抑制组96 h时细胞增殖率分别为0.506±0.016、0.323±0.021、0.329±0.011、0.570±0.007和0.562±0.007。与NC组相比，miR-506-3p组和miR-124-3p组细胞增殖率均有所下降，组间差异均有统计学意义(P均<0.01)；miR-506-3p抑制组和miR-124-3p抑制组细胞增殖率均有所上升，组间差异亦均有统计学意义(P均<0.01)。RT-PCR检测显示，NC组、miR-506-3p组、miR-124-3p组、miR-506-3p抑制组和miR-124-3p抑制组PROC mRNA表达量分别为1.00±0.08、0.31±0.09、0.34±0.04、1.73±0.28和1.75±0.36。与NC组相比，miR-506-3p组和miR-124-3p组PROC mRNA表达水平均明显降低，组间差异均有统计学意义(P＝0.002 6和0.003 2)；miR-506-3p抑制组和miR-124-3p抑制组PROC mRNA表达水平均明显上升，组间差异亦均有统计学意义(P＝0.001 8和0.001 6)。Western-blot检测显示，与NC组相比，miR-506-3p组与miR-124-3p组PROC与Bcl-2蛋白表达水平下调，COX-2和Bax蛋白表达水平上调；miR-506-3p抑制组和miR-124-3p抑制组PROC与Bcl-2蛋白表达水平上调，COX-2和Bax蛋白表达水平下调。Annexin V-FITC/PI检测显示，NC组、miR-506-3p组、miR-124-3p组、miR-506-3p抑制组和miR-124-3p抑制组细胞凋亡率分别为(10.27±0.57)%、(21.50±1.44)%、(13.52±0.40)%、(1.12±0.08)%和(7.63±0.40)%。与NC组相比，miR-506-3p组和miR-124-3p组细胞凋亡率均明显升高，组间差异均有统计学意义(P均<0.01)；miR-506-3p抑制组和miR-124-3p抑制组细胞凋亡率均明显降低，组间差异亦均有统计学意义(P均<0.01)。结论PROC是miR-506-3p和miR-124-3p的靶基因，miR-506-3p和miR-124-3p可能通过抑制肝细胞增殖、促进肝细胞凋亡和抑制PROC mRNA表达引发PROC蛋白表达水平降低。

简介：摘要目的观察微小RNA（microRNA，miR）-6886-5p对LIM和SH3蛋白1（LIM and SH3 protein 1，LASP1）表达的调控作用及对胃癌细胞增殖和迁移的影响。方法2019年10月至2021年1月，使用实时定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）检测胃癌细胞株和正常胃黏膜上皮细胞中miR-6886-5p表达。以表达最低的细胞为实验对象，分为miR-6886-5p组（转染miR-6886-5p）和对照组（转染miR-NC）。使用淋巴细胞增殖检测（MTS）法和划痕愈合实验分别检测miR-6886-5p对胃癌细胞增殖和迁移能力的影响。使用生物信息学软件microRNA.org及双荧光素酶报告基因实验预测和验证miR-6886-5p的靶基因。使用qRT-PCR和Western blot检测miR-6886-5p对靶基因表达的调控作用。结果与正常胃黏膜上皮细胞（GES-1）相比，胃癌细胞株miR-6886-5p表达明显下降（P＜0.05），表达最低的细胞是HS-746T细胞（P＜0.01）。对照组和miR-6886-5p组HS-746T细胞中miR-6886-5p表达分别为（1.17±0.40）和（9.48±1.10），差异有统计学意义（P＜0.01）。与对照组相比，miR-6886-5p组细胞的增殖能力明显降低（P＜0.05），迁移能力明显降低（P＜0.01）。miR-6886-5p可能与LASP1基因的信使RNA（mRNA）存在结合位点。miR-6886-5p可靶向结合LASP1 mRNA（P＜0.05）。与对照组相比，miR-6886-5p组LASP1基因表达明显下降（P＜0.01）。结论miR-6886-5p在胃癌细胞株中呈低表达，miR-6886-5p能够通过调控LASP1基因表达，降低胃癌HS-746T细胞增殖和迁移能力。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)HAGLR通过靶基因微小RNA(miR)-93-5p调控胃癌细胞增殖和迁移的分子机制。方法采用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测胃癌细胞株(HS-746T、BGC823、SGC7901、MGC803)和正常胃黏膜上皮细胞(GES-1)中HAGLR的表达水平。选择HAGLR表达最低的细胞株分别转染阴性对照质粒(阴性对照组)和HAGLR高表达质粒(HAGLR组)。分别采用MTS法和划痕愈合实验检测转染后细胞的增殖情况和迁移能力。生物信息学软件miRcode数据库预测HAGLR的靶基因，双荧光素酶报告基因实验验证HAGLR与靶基因的结合。qRT-PCR检测HAGLR靶基因的表达。Western blot检测Hippo信号通路的表达。采用SPSS 21.0软件进行统计分析，组间比较应用t检验，多组间比较应用单因素方差分析。结果与GES-1细胞相比，胃癌细胞株HAGLR的表达水平均降低(均P<0.05)，HAGLR表达最低的细胞株是SGC7901细胞(P<0.01)。HAGLR组和阴性对照组SGC7901细胞中HAGLR表达分别为1.03±0.13和9.75±1.10，阴性对照组HAGLR的表达水平明显低于HAGLR组(t＝7.87，P<0.01)。与阴性对照组比较，HAGLR组SGC7901细胞的吸光度值明显降低(P<0.05)，划痕愈合率明显减少(P<0.01)。miRcode数据库显示HAGLR与miR-93-5p存在互补结合位点。双荧光素酶报告基因实验显示HAGLR可互补结合miR-93-5p(P<0.01)。与阴性对照组比较，HAGLR组SGC7901细胞中miR-93-5p表达明显降低(P<0.01)，Hippo信号通路蛋白表达明显降低(均P<0.01)。结论HAGLR在胃癌细胞株中呈低表达，HAGLR通过靶向负调控miR-93-5p抑制胃癌SGC7901细胞的增殖和迁移能力。

简介：摘要目的探讨miR-199a-5p对宫颈癌CaSki细胞放射敏感性的影响及潜在机制。方法体外培养宫颈癌CaSki细胞。采用脂质体Lipofectamine 2000将miR-199a-5p模拟物(miR-199a-5p mimics)转染至宫颈癌CaSki细胞，记为miR-199a-5p组，以转染模拟物对照(mimics control)的CaSki细胞为阴性对照(NC组)，以未转染的CaSki细胞为空白对照(Control组)，各组细胞经X射线照射后，采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组细胞中miR-199a-5p的表达量，通过克隆形成实验和流式细胞凋亡实验检测miR-199a-5p对CaSki细胞放射敏感性和凋亡的影响，使用生物信息学软件预测miR-199a-5p的靶基因，通过双荧光素酶报告基因实验和蛋白免疫印迹(Western blot)验证miR-199a-5p和甲状腺激素受体相互作用因子4(TRIP4)的靶向关系。结果转染miR-199a-5p mimics后，miR-199a-5p组中miR-199a-5p的表达量显著高于Control组(P<0.05)，经X射线照射后，miR-199a-5p过表达更明显(P<0.05)；过表达miR-199a-5p降低CaSki细胞克隆形成能力(P<0.05)，促进CaSki细胞的凋亡；且过表达miR-199a-5p能够进一步降低放射后细胞的克隆形成，并促进放射后细胞凋亡(P<0.05)；双荧光素酶报告基因实验和Western blot证实了miR-199a-5p能够靶向负调控TRIP4。结论miR-199a-5p可通过靶向负调控TRIP4的表达提高宫颈癌CaSki细胞的放射敏感性。

简介：摘要目的探讨miR-199a-5p对宫颈癌CaSki细胞放射敏感性的影响及潜在机制。方法体外培养宫颈癌CaSki细胞。采用脂质体Lipofectamine 2000将miR-199a-5p模拟物(miR-199a-5p mimics)转染至宫颈癌CaSki细胞，记为miR-199a-5p组，以转染模拟物对照(mimics control)的CaSki细胞为阴性对照(NC组)，以未转染的CaSki细胞为空白对照(Control组)，各组细胞经X射线照射后，采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组细胞中miR-199a-5p的表达量，通过克隆形成实验和流式细胞凋亡实验检测miR-199a-5p对CaSki细胞放射敏感性和凋亡的影响，使用生物信息学软件预测miR-199a-5p的靶基因，通过双荧光素酶报告基因实验和蛋白免疫印迹(Western blot)验证miR-199a-5p和甲状腺激素受体相互作用因子4(TRIP4)的靶向关系。结果转染miR-199a-5p mimics后，miR-199a-5p组中miR-199a-5p的表达量显著高于Control组(P<0.05)，经X射线照射后，miR-199a-5p过表达更明显(P<0.05)；过表达miR-199a-5p降低CaSki细胞克隆形成能力(P<0.05)，促进CaSki细胞的凋亡；且过表达miR-199a-5p能够进一步降低放射后细胞的克隆形成，并促进放射后细胞凋亡(P<0.05)；双荧光素酶报告基因实验和Western blot证实了miR-199a-5p能够靶向负调控TRIP4。结论miR-199a-5p可通过靶向负调控TRIP4的表达提高宫颈癌CaSki细胞的放射敏感性。

简介：摘要目的探讨血清miR-214-5p水平预测儿童心脏手术后并发急性肾损伤(acute kidney injury，AKI)的价值。方法选取2015年1月至2019年12月海口市妇幼保健院收治的先天性心脏病行体外循环手术患儿102例，按是否并发AKI分为AKI组(n＝28)和非AKI组(n＝74)，检测两组术后3 h血清miR-214-5p、血肌酐(serum creatinine，Scr)、胱抑素C(cystatin C，Cys-C)及肾损伤分子-1(kidney injury molecule-1，KIM-1)水平。分析儿童心脏手术后并发AKI的危险因素，及miR-214-5p、Scr、Cys-C和KIM-1预测儿童心脏手术后并发AKI的价值。结果AKI组与非AKI组相比，血清miR-214-5p[(3.14±1.36)比(0.95±0.47)]、Scr[(490.35±93.62)μmol/L比(108.26±22.40)μmol/L]、Cys-C[(3.27±0.85)mg/L比(0.86±0.24)mg/L]及KIM-1[(26.83±8.70)μg/L比(6.42±1.18)μg/L]水平明显升高，差异均有统计学意义(P均<0.05)。多因素Logistic回归分析显示，血清miR-214-5p、Scr、Cys-C及KIM-1水平升高是儿童心脏手术后并发AKI的独立危险因素(OR＝2.518，P<0.001；OR＝1.630，P＝0.035；OR＝1.974，P<0.001；OR＝2.902，P<0.001)。ROC曲线分析显示，miR-214-5p、Scr、Cys-C及KIM-1 4项联合预测AKI的曲线下面积(0.958，95%CI：0.905～0.996)最大，其敏感度为98.5%，特异度为86.3%。结论血清miR-214-5p水平在儿童心脏手术后并发AKI患儿中明显升高，是AKI发生的独立危险因素，联合Scr、Cys-C及KIM-1 3项指标可较好地预测AKI发生。

简介：摘要目的探讨lncRNA HOTAIR对胶质瘤U87R细胞和移植瘤放射敏感性影响及潜在作用机制。方法将阴性对照质粒、沉默HOTAIR质粒、过表达miR-NC质粒、过表达miR-17-5p质粒分别转染到U87R细胞中，记为沉默对照组、沉默HOTAIR组、过表达miR-NC组、过表达miR-17-5p组；以上各组细胞分别用4Gy照射，记为沉默对照＋4Gy组、沉默HOTAIR＋4Gy组、过表达miR-NC＋4Gy组、过表达miR-17-5p＋4Gy组；将沉默HOTAIR质粒分别与抑制表达miR-NC质粒、抑制表达miR-17-5p质粒共转染到U87R细胞中，记为沉默HOTAIR＋抑制miR-NC组、沉默HOTAIR＋抑制miR-17-5p组，转染均用脂质体法。采用qRT-PCR检测miR-17-5p和HOTAIR的表达；细胞克隆形成实验检测瘤细胞放射敏感性影响；流式细胞术检测细胞凋亡；双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。结果HOTAIR在放射抵抗的细胞中高表达；沉默HOTAIR和过表达miR-17-5p可增加U87R细胞放射敏感性且促进放射照射诱导的凋亡。HOTAIR可靶向调节miR-17-5p表达，抑制miR-17-5p逆转了沉默HOTAIR对U87R细胞放射增敏和促进放射诱导的凋亡。结论沉默lncRNA HOTAIR对胶质瘤细胞具有放射增敏和促放射诱导的凋亡作用，其机制可能与调控miR-17-5p有关。

简介：摘要目的探讨miR-424-5p对宫颈癌放射敏感性的影响及作用机制。方法RT-qPCR检测miR-424-5p在宫颈癌组织和Hela细胞中表达；流式细胞术检测Hela细胞凋亡率；CCK-8检测Hela细胞增殖活性；蛋白印迹法检测Hela细胞中蛋白表达水平。结果相较于正常组织和细胞，宫颈癌组织和Hela细胞中miR-424-5p表达量降低(1.03∶0.88，P<0.01；1.00∶0.75，P<0.001)。过表达miR-424-5p会抑制经放射处理后Hela细胞增殖活性(P<0.01)，同时增加放射处理后Hela细胞凋亡率(24.82%∶49.94%，P<0.001)。过表达miR-424-5p会抑制HMGA1表达(1.01∶0.63，P<0.01)，miR-424-5p会直接作用HMGA1进而影响宫颈癌放射敏感性。结论miR-424-5p通过直接靶向HMGA1提高宫颈癌放射敏感性。

简介：摘要目的探讨血清miR-214-5p水平预测儿童心脏手术后并发急性肾损伤(acute kidney injury，AKI)的价值。方法选取2015年1月至2019年12月海口市妇幼保健院收治的先天性心脏病行体外循环手术患儿102例，按是否并发AKI分为AKI组(n＝28)和非AKI组(n＝74)，检测两组术后3 h血清miR-214-5p、血肌酐(serum creatinine，Scr)、胱抑素C(cystatin C，Cys-C)及肾损伤分子-1(kidney injury molecule-1，KIM-1)水平。分析儿童心脏手术后并发AKI的危险因素，及miR-214-5p、Scr、Cys-C和KIM-1预测儿童心脏手术后并发AKI的价值。结果AKI组与非AKI组相比，血清miR-214-5p[(3.14±1.36)比(0.95±0.47)]、Scr[(490.35±93.62)μmol/L比(108.26±22.40)μmol/L]、Cys-C[(3.27±0.85)mg/L比(0.86±0.24)mg/L]及KIM-1[(26.83±8.70)μg/L比(6.42±1.18)μg/L]水平明显升高，差异均有统计学意义(P均<0.05)。多因素Logistic回归分析显示，血清miR-214-5p、Scr、Cys-C及KIM-1水平升高是儿童心脏手术后并发AKI的独立危险因素(OR＝2.518，P<0.001；OR＝1.630，P＝0.035；OR＝1.974，P<0.001；OR＝2.902，P<0.001)。ROC曲线分析显示，miR-214-5p、Scr、Cys-C及KIM-1 4项联合预测AKI的曲线下面积(0.958，95%CI：0.905～0.996)最大，其敏感度为98.5%，特异度为86.3%。结论血清miR-214-5p水平在儿童心脏手术后并发AKI患儿中明显升高，是AKI发生的独立危险因素，联合Scr、Cys-C及KIM-1 3项指标可较好地预测AKI发生。

简介：摘要目的观察结肠癌组织及细胞中miR-30c-5p及Toll样受体4(Toll-like receptor4，TLR4)蛋白表达，探讨其与临床病理特征的关系及意义。方法采用前瞻性研究，选取2016年5月至2017年5月于中国医科大学肿瘤医院手术切除的结肠癌手术标本及配对癌旁正常组织标本30例，采用实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction，qRT-PCR)检测miR-30c-5 mRNA的表达，采用蛋白质印迹(western blot，WC)法检测TLR4蛋白的表达，观察miR-30c-5p mRNA及TLR4蛋白在肿瘤不同TNM分期、分化程度及直径中的表达差异，Pearson Rank法进行miR-30c-5p及TLR4蛋白表达的相关性分析。结果在结肠癌组织中，miR-30c-5p表达(0.311±0.147)低于癌旁正常组织(0.881±0.266)(t＝10.613，P<0.001)。TLR4蛋白在结肠癌组织(0.729±0.274)中表达高于癌旁正常组织(0.361±0.168)(t＝6.310，P<0.001)。miR-30c-5p mRNA在结肠癌细胞株中表达(0.394±0.045、0.435±0.098、0.533±0.092、0.272±0.069)低于正常结肠上皮细胞(1.371±0.101)(t值分别为6.744、6.423、6.865、6.201，P均<0.001)。TLR4蛋白在结肠癌细胞株中表达(1.108±0.169、1.035±0.177、1.114±0.253、1.116±0.157)高于正常结肠上皮细胞(0.358±0.094)(t值分别为5.789、4.799、5.311、5.291，P均<0.001)。Pearson rank相关分析显示，在结肠癌组织中miR-30c-5p及TLR4蛋白表达量呈负相关(r＝-0.487，95%CI：-0.721～-0.154，P<0.01)。miR-30c-5p随着TNM分期升高呈现下降趋势(F＝31.406，P<0.001)，随着肿瘤分化程度下降呈现下降趋势(F＝9.960，P<0.001)，随着肿瘤直径增大呈现下降趋势(F＝10.267，P<0.001)。TLR4随着TNM分期升高呈现上升趋势(F＝37.634，P<0.001)。TLR4随着肿瘤分化程度下降呈现上升趋势(F＝38.027，P<0.001)。TLR4随着肿瘤直径增大呈现上升趋势(F＝20.717，P<0.001)。结论miR-30c-5p在结肠癌中低表达，TLR4在结肠癌中高表达，二者与结肠癌TNM分期及肿瘤体积等恶性临床病理特征具有相关性。

简介：摘要目的探讨AP患者血清miR-148a-3p和miR-551b-5p的表达水平及其临床价值。方法选取2017年1月至2020年9月间儋州市人民医院收治的152例AP患者的临床资料，根据病情严重程度将患者分为MAP组(70例)、MSAP组(40例)和SAP组(42例)，SAP组又根据患者预后情况分成生存组(25例)和死亡组(17例)。另选取50例体检健康者作为对照组。于患者发病当天采集空腹静脉血，采用实时定量PCR法检测各组血清miR-148a-3p和miR-551b-5p表达水平。绘制受试者工作特征曲线(ROC)，计算曲线下面积(AUC)，分析血清miR-148a-3p和miR-551b-5p表达水平对SAP预后判断的价值。采用Pearson法分析SAP患者血清miR-148a-3p与miR-551b-5p表达水平的相关性。结果AP组患者血清miR-148a-3p和miR-551b-5p表达水平均明显高于对照组(3.18±1.27比0.96±0.28，1.94±0.85比0.51±0.12，P值均<0.001)。SAP组血清miR-148a-3p及miR-551b-5p表达水平均明显高于MSAP组、MAP组(4.36±1.70比2.84±1.10、2.50±0.92，2.80±1.04比1.68±0.53、1.42±0.45，P值均<0.001)。死亡组血清miR-148a-3p及miR-551b-5p表达水平均明显高于生存组(5.30±1.95比3.47±1.40，3.62±1.37比2.08±0.91，P值均<0.001)。ROC曲线分析显示，miR-148a-3p与miR-551b-5联合判断SAP预后的AUC值明显高于miR-148a-3p、miR-551b-5p单项指标[0.943(95%CI0.886～0.997)比0.860(95%CI0.797～0.924)、0.822(95%CI0.765～0.880)]，其灵敏度为98.3%，特异度为84.6%。相关分析显示，SAP患者血清miR-148a-3p与miR-551b-5p表达水平呈正相关(r＝0.835，P<0.001)。结论AP患者血清miR-148a-3p及miR-551b-5p表达水平明显升高，两者联合检测对判断SAP患者预后具有较好的价值。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA（lncRNA）CDKN2B-AS1靶向miR-98-5p对肺癌A549细胞增殖、侵袭的影响。方法体外培养肺癌A549细胞，分为对照组、pcDNA组（转染pcDNA）、CDKN2B-AS1组（转染pcDNA CDKN2B-AS1）和双转染组（转染pcDNA CDKN2B-AS1、pcDNA miR-98-5p）。检测A549细胞中CD-KN2B-AS1、miR-98-5p表达及PCNA、MMP-9蛋白表达，检测A549细胞活性、克隆数、克隆形成率、侵袭细胞数。结果与pcDNA组相比，CDKN2B-AS1组A549细胞中CDKN2B-AS1表达水平[（2.14±0.14）vs （1.03±0.10）]、各时间点的细胞OD值、细胞克隆数[（314.60±18.13）个比（220.08±12.46）个]、克隆形成率[（85.81±3.06）% vs （60.03±2.85）%]、侵袭细胞数[（233.30±18.98）个vs （140.84±12.30）个]及细胞中PCNA[（0.78±0.08）vs （0.48±0.07）]、MMP-9蛋白表达[（0.75±0.06）vs （0.38±0.06）]水平显著升高（均P<0.05），miR-98-5p表达水平[（0.23±0.03）vs （0.99±0.09）]显著降低（P<0.05）；与CDKN2B-AS1组相比，双转染组A549细胞中CD-KN2B-AS1表达水平差异无统计学意义（P>0.05），miR-98-5p表达水平显著升高（P<0.05），各时间点的细胞OD值、细胞克隆数、克隆形成率、侵袭细胞数及细胞中PCNA、MMP-9蛋白表达水平均显著降低（P<0.05）。结论lncRNA CDKN2B-AS1通过靶向抑制miR-98-5p表达对肺癌A549细胞增殖、侵袭具有促进作用。

简介：摘要目的研究微RNA-873-5p(miR-873-5p)靶向调控电压依赖性阴离子通道1(VDAC1)对大鼠癫痫样神经细胞的影响及作用机制。方法通过无镁培养基诱导构建大鼠癫痫样海马神经细胞模型，将大鼠神经细胞分为对照组、模型组、miR-con组及miR-873-5p组。对照组采用正常培养大鼠神经细胞；模型组采用低镁细胞外液培养大鼠神经细胞；miR-con组采用低镁细胞外液培养大鼠神经细胞并转染miR-con；miR-873-5p组采用低镁细胞外液培养大鼠神经细胞并转染miR-873-5p。采用荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测各组神经细胞miR-873-5p及VDAC1 mRNA表达；采用Western blot技术检测神经细胞中VDAC1、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、活化的含半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved caspase-3)含量；采用DCFH-DA荧光探针检测神经细胞活性氧(ROS)水平；采用硫代巴比妥酸法检测神经细胞丙二醛(MDA)含量；采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测神经细胞谷胱甘肽(GSH)含量；采用流式细胞术检测各组神经细胞凋亡情况；采用双荧光素酶报告基因法验证miR-873-5p对VDAC1的靶向调控作用。结果与对照组比较，模型组神经细胞中miR-873-5p表达显著降低(P<0.05)，VDAC1表达显著升高(P<0.05)，Bcl-2表达下调(P<0.05)，Bax及Cleaved caspase-3表达上调(P<0.05)，GSH及MDA含量显著降低(P<0.05)，而ROS水平显著升高(P<0.05)，细胞凋亡率显著升高(P<0.05)；与miR-con组比较，miR-873-5p组神经细胞中Bcl-2表达明显上调(P<0.05)，Bax及Cleaved caspase-3表达明显下调(P<0.05)，GSH及MDA含量显著升高(P<0.05)，ROS水平显著降低(P<0.05)，细胞凋亡率明显降低(P<0.05)；双荧光素酶报告基因实验表明miR-873-5p能抑制VDAC1表达(P<0.05)。结论miR-873-5p能通过负向调控靶基因VDAC1表达而减少神经细胞凋亡，同时还能抑制神经细胞氧化应激反应，对受损神经细胞具有保护作用。

简介：摘要目的探讨miR-145-5p对胶质细胞源性神经营养因子受体（glial cell-derived neurotrophic factor receptor，GFR）α1表达的调控及其与先天性巨结肠（Hirschsprung's disease，HSCR）的关系。方法选择2016年3月至2018年6月湖南省儿童医院新生儿外科收治的HSCR患儿巨结肠根治术后痉挛段结肠组织为HSCR组，同期新生儿坏死性小肠结肠炎（necrotizing enterocolitis，NEC）患儿手术切除坏死肠段两端正常结肠组织为NEC组作为对照，进行前瞻性研究。采用实时定量聚合酶链反应检测两组结肠组织内miR-145-5p及GFRα1表达水平，荧光素酶活性实验检测GFRα1与miR-145-5p的关系；采用实时定量聚合酶链反应及蛋白免疫印迹检测SH-SY5Y细胞转染miR-145-5p模拟物后miR-145-5p及GFRα1表达水平，CCK8法检测转染后SH-SY5Y细胞活力。结果HSCR组24例，NEC组18例。HSCR组miR-145-5p mRNA水平明显高于NEC组［（5.62±2.04）比（1.11±0.48）］，GFRα1 mRNA水平明显低于NEC组［（0.39±0.18）比（1.00±0.37）］，差异有统计学意义（P<0.01），且miR-145-5p表达水平与GFRα1表达水平成负相关（r=-0.676，P<0.01）。荧光素酶活性实验证实GFRα1为miR-145-5p的靶基因。SH-SY5Y细胞转染miR-145-5p模拟物后GFRα1的表达水平明显降低（P<0.01），SH-SY5Y细胞活力下降。结论GFRα1是miR-145-5p的靶基因，HSCR患儿病变结肠组织中GFRα1低表达可能与miR-145-5p高表达有关。