简介：摘要目的探讨circBANP对结直肠癌细胞和裸鼠皮下移植瘤放射敏感性的影响及潜在分子机制。方法选取2018年1月至2019年1月于河南省人民医院手术切除的20例结直肠癌患者的癌及癌旁正常黏膜组织，建立放射抵抗结直肠癌细胞LoVo/R，采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测circBANP和miR-338-3p的表达，克隆形成实验检测细胞的放射敏感性，四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞活力，Western blot检测细胞中自噬相关蛋白LC3和p62的表达，免疫荧光法检测细胞中微管相关蛋白轻链3(LC3)的荧光强度。通过Circular RNA Interactome网站预测circBANP的下游微小RNA(miRNA)，采用双荧光素酶报告基因实验进一步验证。建立LoVo/R细胞的裸鼠移植瘤模型，观察circBANP对放射后移植瘤生长的影响。结果结直肠癌组织中circBANP和miR-338-3p的表达水平分别为3.21+0.29和0.47+0.04，较癌旁组织(分别为1.00+0.07和1.00+0.05)显著升高(均P<0.05)。成功建立了放射抵抗结直肠癌细胞LoVo/R，其circBANP表达水平为3.21±0.34，高于LoVo细胞(1.00±0.07，P<0.05)，miR-338-3p表达水平为0.33±0.04,低于LoVo细胞(1.00±0.08，P<0.05)。4 Gy照射后，与沉默对照组比较，沉默circBANP组LoVo/R细胞活力降低[分别为(34±4)%和(62±6)%，P<0.05]，细胞存活分数亦降低(分别为0.07±0.02和0.27±0.04，P<0.05)，放射增敏比为1.843。放射诱导后，LoVo/R细胞中LC3Ⅱ/Ⅰ表达增加，p62表达降低，细胞发生自噬。自噬抑制剂氯喹可逆转放射对LoVo/R细胞中LC3Ⅱ/Ⅰ表达的诱导和p62表达的抑制作用，促进放射对LoVo/R细胞活力和存活的抑制，其放射增敏比为1.780。4 Gy照射后，与沉默对照组比较，沉默circBANP组LoVo/R细胞中LC3相对荧光强度降低(分别为0.11±0.01和1.00±0.12，P<0.05)，LC3-Ⅱ/Ⅰ表达水平降低(分别为1.25±0.13和3.84±0.39，P<0.05)，p62表达增加(分别为2.76±0.29和1.00±0.08，P<0.05)。经Circular RNA Interactome网站预测、双荧光素酶报告基因实验证实，miR-338-3p是circBANP的靶基因。抑制miR-338-3p后，沉默circBANP+anti-miR-338-3p+4 Gy组LoVo/R细胞的LC3相对荧光强度增高(分别为7.32±0.72和1.00±0.09，P<0.05)，LC3-Ⅱ/Ⅰ表达水平增高(分别为4.13±0.43和2.31±0.23，P<0.05)，p62表达水平降低(分别为0.34±0.03和1.00±0.11，P<0.05)，放射增敏比为0.596。裸鼠皮下移植瘤实验显示，沉默circBANP组接种后第13、16、19、22、25、28和31天的肿瘤体积和肿瘤重量均低于沉默对照组(均P<0.05)，沉默circBANP+anti-miR-338-3p组接种后第13、16、19、22、25、28和31天的肿瘤体积和肿瘤重量高于circBANP+anti-miR-NC组(均P<0.05)。结论circBANP可通过调控miR-338-3p表达调控结直肠癌细胞的放射敏感性，影响裸鼠移植瘤的生长，circBANP可能是增强结直肠癌放射敏感性的潜在靶点。

简介：摘要目的探讨circBANP对结直肠癌细胞和裸鼠皮下移植瘤放射敏感性的影响及潜在分子机制。方法选取2018年1月至2019年1月于河南省人民医院手术切除的20例结直肠癌患者的癌及癌旁正常黏膜组织，建立放射抵抗结直肠癌细胞LoVo/R，采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测circBANP和miR-338-3p的表达，克隆形成实验检测细胞的放射敏感性，四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞活力，Western blot检测细胞中自噬相关蛋白LC3和p62的表达，免疫荧光法检测细胞中微管相关蛋白轻链3(LC3)的荧光强度。通过Circular RNA Interactome网站预测circBANP的下游微小RNA(miRNA)，采用双荧光素酶报告基因实验进一步验证。建立LoVo/R细胞的裸鼠移植瘤模型，观察circBANP对放射后移植瘤生长的影响。结果结直肠癌组织中circBANP和miR-338-3p的表达水平分别为3.21+0.29和0.47+0.04，较癌旁组织(分别为1.00+0.07和1.00+0.05)显著升高(均P<0.05)。成功建立了放射抵抗结直肠癌细胞LoVo/R，其circBANP表达水平为3.21±0.34，高于LoVo细胞(1.00±0.07，P<0.05)，miR-338-3p表达水平为0.33±0.04,低于LoVo细胞(1.00±0.08，P<0.05)。4 Gy照射后，与沉默对照组比较，沉默circBANP组LoVo/R细胞活力降低[分别为(34±4)%和(62±6)%，P<0.05]，细胞存活分数亦降低(分别为0.07±0.02和0.27±0.04，P<0.05)，放射增敏比为1.843。放射诱导后，LoVo/R细胞中LC3Ⅱ/Ⅰ表达增加，p62表达降低，细胞发生自噬。自噬抑制剂氯喹可逆转放射对LoVo/R细胞中LC3Ⅱ/Ⅰ表达的诱导和p62表达的抑制作用，促进放射对LoVo/R细胞活力和存活的抑制，其放射增敏比为1.780。4 Gy照射后，与沉默对照组比较，沉默circBANP组LoVo/R细胞中LC3相对荧光强度降低(分别为0.11±0.01和1.00±0.12，P<0.05)，LC3-Ⅱ/Ⅰ表达水平降低(分别为1.25±0.13和3.84±0.39，P<0.05)，p62表达增加(分别为2.76±0.29和1.00±0.08，P<0.05)。经Circular RNA Interactome网站预测、双荧光素酶报告基因实验证实，miR-338-3p是circBANP的靶基因。抑制miR-338-3p后，沉默circBANP+anti-miR-338-3p+4 Gy组LoVo/R细胞的LC3相对荧光强度增高(分别为7.32±0.72和1.00±0.09，P<0.05)，LC3-Ⅱ/Ⅰ表达水平增高(分别为4.13±0.43和2.31±0.23，P<0.05)，p62表达水平降低(分别为0.34±0.03和1.00±0.11，P<0.05)，放射增敏比为0.596。裸鼠皮下移植瘤实验显示，沉默circBANP组接种后第13、16、19、22、25、28和31天的肿瘤体积和肿瘤重量均低于沉默对照组(均P<0.05)，沉默circBANP+anti-miR-338-3p组接种后第13、16、19、22、25、28和31天的肿瘤体积和肿瘤重量高于circBANP+anti-miR-NC组(均P<0.05)。结论circBANP可通过调控miR-338-3p表达调控结直肠癌细胞的放射敏感性，影响裸鼠移植瘤的生长，circBANP可能是增强结直肠癌放射敏感性的潜在靶点。

简介：无

简介：摘 要 宁德站改工程施工中大胆采用常规大型工程设备，并对该部分设备进行适当的专业化改造，与以往的拨接施工相比，大大地缩减了拨接作业人员数量，提高了工效，摒弃传统拨接施工中的人海战术，在有限的封锁时间内赢得了更多的工作时间和节约了成本，保质保量的达到开通条件。

简介：摘要目的观察微小RNA（microRNA，miR）-6886-5p对LIM和SH3蛋白1（LIM and SH3 protein 1，LASP1）表达的调控作用及对胃癌细胞增殖和迁移的影响。方法2019年10月至2021年1月，使用实时定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）检测胃癌细胞株和正常胃黏膜上皮细胞中miR-6886-5p表达。以表达最低的细胞为实验对象，分为miR-6886-5p组（转染miR-6886-5p）和对照组（转染miR-NC）。使用淋巴细胞增殖检测（MTS）法和划痕愈合实验分别检测miR-6886-5p对胃癌细胞增殖和迁移能力的影响。使用生物信息学软件microRNA.org及双荧光素酶报告基因实验预测和验证miR-6886-5p的靶基因。使用qRT-PCR和Western blot检测miR-6886-5p对靶基因表达的调控作用。结果与正常胃黏膜上皮细胞（GES-1）相比，胃癌细胞株miR-6886-5p表达明显下降（P＜0.05），表达最低的细胞是HS-746T细胞（P＜0.01）。对照组和miR-6886-5p组HS-746T细胞中miR-6886-5p表达分别为（1.17±0.40）和（9.48±1.10），差异有统计学意义（P＜0.01）。与对照组相比，miR-6886-5p组细胞的增殖能力明显降低（P＜0.05），迁移能力明显降低（P＜0.01）。miR-6886-5p可能与LASP1基因的信使RNA（mRNA）存在结合位点。miR-6886-5p可靶向结合LASP1 mRNA（P＜0.05）。与对照组相比，miR-6886-5p组LASP1基因表达明显下降（P＜0.01）。结论miR-6886-5p在胃癌细胞株中呈低表达，miR-6886-5p能够通过调控LASP1基因表达，降低胃癌HS-746T细胞增殖和迁移能力。

简介：摘要目的探讨miR-485-5p对顺铂耐药卵巢癌细胞的影响及其机制。方法RT-qPCR检测人正常卵巢上皮细胞株（IOSE-80）及卵巢癌细胞株（A2780、SKOV3、OVCAR3、OVCA433）中miR-485-5p的表达。构建顺铂（DDP）耐药卵巢癌细胞并检测miR-485-5p与EGFR的表达。CCK8法检测各组细胞增殖能力，流式细胞术测定细胞凋亡。结果相对于IOSE-80细胞，各卵巢癌细胞株中miR-485-5p的表达显著下降，EGFR表达上升（均P<0.05）。SKOV3/DDP细胞株（0.17±0.02）中miR-485-5p表达较SKOV3细胞（0.32±0.04）进一步下降（t=5.81, P=0.004）。而SKOV3/DDP细胞中EGFR表达则较SKVO3进一步上升（P<0.05）。SKOV3/DDP细胞转染miR-485-5p mimic能抑制细胞增殖活力、诱导细胞凋亡，转染miR-485-5p inhibitor则相反（均P<0.05）。SKOV3/DDP细胞转染EGFR能促进细胞增殖并抑制细胞凋亡，该作用被miR-485-5p mimic部分抵消。结论miR-485-5p参与调控卵巢癌细胞的顺铂耐药，过表达miR-485-5p能提高卵巢癌化疗敏感性，该作用可能是通过负调控EGFR实现的。

简介：摘要目的探讨miR-122-5p对创伤性脑外伤后小胶质细胞凋亡、极化和炎症反应的影响。方法建立创伤性脑外伤（traumatic brain injury，TBI）小鼠模型和细胞模型。使用TBI小鼠脑匀浆刺激星型胶质细胞产生外泌体，microRNA微阵列分析外泌体中显著改变的microRNA。实时荧光定量PCR检测TBI小鼠模型和TBI细胞模型中miR-122-5p表达。使用TUNEL凋亡染色、免疫荧光共聚焦、蛋白质印迹研究miR-122-5p抑制剂在TBI神经炎症中对小胶质细胞凋亡、小胶质细胞M1/M2表型转化、NLRP3通路及NFκB磷酸化的作用。结果通过microRNA微阵列分析发现有83个下调miRNA（改变2倍以上，P <0.05）,其中miR-122-5p显著下调（P<0.01），miR-122-5p在TBI小鼠及细胞模型中表达显著下降[(1.0±0.00）vs.(0.41±0.15)，P <0.001；[(1.0±0.00）vs.(0.34±0.07)，P<0.001]。TUNEL凋亡检测、免疫荧光染色结果表明抑制miR-122-5p表达，可以显著减轻LPS诱导的小胶质细胞凋亡[(8.03±1.30）vs. (3.17±0.34)，P<0.001]，促进小胶质细胞M1向M2表型转化，即M1表型极化减少[(56.96±13.70）vs. (34.70±3.47)，P =0.002]，M2表型极化增加[(30.46±3.67）vs. (40.74±2.49)，P =0.005]。蛋白质印迹结果表明miR-122-5p抑制剂降低NLRP3炎症小体活化[(0.77±0.10）vs. (0.51±0.11)，P =0.02]，降低NFκB的磷酸化[(0.73±0.08）vs. (0.50±0.07)，P =0.003]。结论miR-122-5p在TBI星形胶质细胞分泌的外泌体及小胶质细胞中表达下调,miR-122-5p抑制剂可以通过抑制TBI后NLRP3炎症小体通路的活化及NFκB的磷酸化，促进小胶质细胞M1向M2表型转化，减少小胶质细胞凋亡，从而减轻TBI后小胶质细胞炎症损伤。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)HAGLR通过靶基因微小RNA(miR)-93-5p调控胃癌细胞增殖和迁移的分子机制。方法采用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测胃癌细胞株(HS-746T、BGC823、SGC7901、MGC803)和正常胃黏膜上皮细胞(GES-1)中HAGLR的表达水平。选择HAGLR表达最低的细胞株分别转染阴性对照质粒(阴性对照组)和HAGLR高表达质粒(HAGLR组)。分别采用MTS法和划痕愈合实验检测转染后细胞的增殖情况和迁移能力。生物信息学软件miRcode数据库预测HAGLR的靶基因，双荧光素酶报告基因实验验证HAGLR与靶基因的结合。qRT-PCR检测HAGLR靶基因的表达。Western blot检测Hippo信号通路的表达。采用SPSS 21.0软件进行统计分析，组间比较应用t检验，多组间比较应用单因素方差分析。结果与GES-1细胞相比，胃癌细胞株HAGLR的表达水平均降低(均P<0.05)，HAGLR表达最低的细胞株是SGC7901细胞(P<0.01)。HAGLR组和阴性对照组SGC7901细胞中HAGLR表达分别为1.03±0.13和9.75±1.10，阴性对照组HAGLR的表达水平明显低于HAGLR组(t＝7.87，P<0.01)。与阴性对照组比较，HAGLR组SGC7901细胞的吸光度值明显降低(P<0.05)，划痕愈合率明显减少(P<0.01)。miRcode数据库显示HAGLR与miR-93-5p存在互补结合位点。双荧光素酶报告基因实验显示HAGLR可互补结合miR-93-5p(P<0.01)。与阴性对照组比较，HAGLR组SGC7901细胞中miR-93-5p表达明显降低(P<0.01)，Hippo信号通路蛋白表达明显降低(均P<0.01)。结论HAGLR在胃癌细胞株中呈低表达，HAGLR通过靶向负调控miR-93-5p抑制胃癌SGC7901细胞的增殖和迁移能力。

简介：摘要目的探讨血清miR-224-5p在PDAC中的表达及其对胰腺癌早期临床诊断的意义。方法选取青岛市市立医院2018年8月至2020年4月间收治的40例PDAC患者(11例早期PDAC，29例中晚期PDAC)、21例慢性胰腺炎患者和40名健康志愿者为研究对象，应用qRT-PCR方法检测各组血清miR-224-5p水平，分析其与临床病理参数之间的相关性。绘制miR-224-5p、CA19-9及miR-224-5p联合CA19-9检测的受试者工作特征曲线(ROC)，计算诊断的灵敏度和特异度。结果早期PDAC组、中晚期PDAC组、慢性胰腺炎组和健康对照组血清miR-224-5p水平分别为3.21(2.01，4.60)、4.70(3.50，8.26)、1.72(1.02，2.78)、1.38(0.89，2.11)，中晚期PDAC组血清miR-224-5p水平显著高于早期PDAC组，早期PDAC组又显著高于慢性胰腺炎组和健康对照组，差异有统计学意义(P值均<0.05)。血清miR-224-5p联合CA19-9、miR-224-5p、CA19-9检测对PDAC的诊断灵敏度依次为95.0%、85.0%、67.5%，特异度依次70.0%、82.5%、87.5%；对早期PDAC的诊断灵敏度依次为90.9%、72.7%、63.6%，特异度依次为72.5%、85.0%、87.5%。血清miR-224-5p联合CA19-9诊断PDAC的灵敏度最高。PDAC患者血清miR-224-5p水平与肿瘤TNM分期、淋巴结转移和远处转移相关(P值均<0.05)。结论PDAC患者血清miR-224-5p表达水平明显上调，且与肿瘤TNM分期、淋巴结和远处转移密切相关。血清miR-224-5p及其与CA19-9联合诊断早期PDAC的灵敏度高于单纯CA19-9，可作为早期筛查PDAC潜在的较敏感的生物学标志物。

简介：摘要目的探索miR-18a过表达和抑制表达对人鼻咽癌细胞株CNE1和CNE2放疗敏感性的影响及可能的机制。方法采用miR-18a过表达质粒miR-18a模拟物和抑制表达质粒miR-18a遏制物及空白对照质粒转染人鼻咽癌细胞株CNE1和CNE2细胞，实时荧光定量反转录聚合酶链反应（qRT-PCR）和蛋白免疫印迹法（WB）检测其对毛细血管扩张性共济失调症突变（ataxia telangiectasia mutated，ATM）基因和蛋白表达的影响。构建miR-18a过表达和抑制表达的人鼻咽癌细胞CNE1和CNE2细胞株。四甲基偶氮唑蓝（MTT）检测miR-18a过表达和抑制表达联合放疗处理前后对人鼻咽癌细胞株生长的影响，流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期，克隆形成实验检测细胞放疗敏感性，吖啶橙染色结合WB检测细胞自噬水平及自噬相关蛋白表达。采用SPSS 16.0软件进行统计学分析，2组间均数比较采用独立样本t检验。结果100、200 nmol/L miR-18a模拟物转染CNE1和CNE2细胞48 h后，与对照组相比，ATM mRNA表达受到显著抑制（CNE1相对表达量为0.174±0.139和0.003±0.001，t值为9.939和19 470.783；CNE2：相对表达量为0.024±0.008和0.019±0.012，t值为270.230和137.746，P值均<0.001），72 h后，ATM蛋白水平显著下降；100、200 nmol/L miR-18a遏制物转染48 h后，CNE1细胞中ATM转录显著增加（CNE1相对表达量为9.419±2.495和2.500±1.063，t值为-4.427和-41.241，P值均<0.05）；CNE2细胞中ATM转录亦显著增加（相对表达量为7.210±0.171和115.875±15.805，t值为-62.789和-12.589，P值均<0.05），72 h后，ATM蛋白水平增高。miR-18a过表达的CNE1和CNE2细胞放疗后与CNE1和CNE2细胞单纯放疗相比，细胞增殖受到明显抑制（P值均<0.05）；稳定抑制miR-18a表达与单纯放疗相比，细胞增殖能力增加（P值均<0.01）。100 nmol/L miR-18a模拟物转染联合放疗组与单纯放疗组相比，CNE1细胞凋亡率增加［（22.9±2.1）%比（16.3±1.0）%，t=-4.870，P<0.01］。稳定过表达miR-18a联合放疗与单纯放疗相比，G1期和G2/M期的细胞比例显著减少［（20.2±3.0）%比（29.8±4.4）%，t=3.119；（21.5±0.9）%比（33.4±3.1）%，t=6.410，P值均<0.05］，S期的细胞比例显著增加［（56.7±4.9）%比（36.8±6.4）%，t=-4.246，P<0.05］。稳定过表达miR-18a的CNE1细胞与对照细胞相比，放疗后克隆形成能力下降、自噬溶酶体数量增加、自噬相关LC3表达增加（P值均<0.05），p62没有明显变化。结论miR-18a过表达可以增强人鼻咽癌细胞放疗敏感性，其机制与其抑制ATM表达，去除G1/S，G2/M期阻滞，诱导细胞自噬和凋亡有关。

简介：摘要3P模式是常见的基础设施经营方式，在基础设施投资需求、建设需求日益增加，但财政资金相对不足的情况下，发展民营部门、社会资本与政府共同合作的3P模式不但能够节约财政资金，加快发展基础设施及提供更好的公共服务，同时可以让民营部门进入社会公共服务的供给领域，并从中获取市场优势、组织优势。近年来，3P模式在交通基础设施的建设、经营工作中发挥了重要作用，本文结合实例探讨了高速公路的3P模式与实践经验。

简介：AbstractPurpose:The pathogenesis of gastrinomas is largely unknown, and there is a lack of reliable genetic determinants that are useful to distinguish malignant and benign forms of this tumor or predict the prognosis of patients with this disease. Loss of heterozygosity (LOH) on chromosome 3p is reported to occur in pancreatic neuroendocrine tumors (PNETs) as well as in non-PNETs and its presence is reported to correlate with tumor prognosis in non-endocrine tumors. However, little data are available from prospective studies on gastrinomas.Experimental design:We assessed occurrence of 3p LOH in 24 gastrinomas and correlated its presence with tumor biological behavior and other clinicopathological features of gastrinomas.Results:Either 3p LOH or microsatellite instability involving 3p occurred in 11 of 24 tumors (46%). Seven (29%) gastrinomas had 3p LOH. Of the 7 gastrinomas with 3p LOH, 5 (71%) had 3p12 LOH with the marker D3S2406, which was the shortest region of highest overlap (SRO). Chromosome 3p LOH was not associated with aggressive biological behavior of gastrinomas or with poor prognosis of patients with gastrinoma. Similarly, 3p12 LOH (SRO) was not correlated with aggressive growth of tumors and/or liver metastases.Conclusion:Gastrinomas have a relative high frequency of 3p12 LOH suggesting this area may harbor putative tumor suppressor gene(s), which may play a role in the tumorigenesis, but not aggressiveness, of a subset of these tumors.

简介：通过介绍中铁建柳州勘察设计院在中国石油广西石化（钦州）1000万t／a炼油工程专用线项目设计施工总承包投标中，运用P3项目管理软件编制、优化设计施工计划的成功案例，提出了运用P3软件编制铁路建设项目计划，应采取的编制计划框架、统计计划信息、优化总体计划、检查总体计划等4个方法步骤。

简介：概述在对项目当前执行状况进行分析以及对项目成本发展趋势进行预测时，项目经理经常会遇到一些非常困惑的问题：如何评价项目当前的执行情况？未来项目到底能不能实现盈利？由于变更的大量出现，造成项目目标经常需要做出调整（比如预算变更，工期调整等），所以在进行绩效评估时，到底以何种指标作为评价的依据非常重要。

简介：用DFT方法在B3LYP/6-311++G**基组水平上研究了氧原子和CHF2自由基反应.计算了全部物种的结构、振动频率和不同驻点的能量,它的结果和实验值吻合.指认了反应物、中间体、过渡态和产物的振动模式,它们之间联系和变化进一步解释了反应的机理和电子转移的过程.通过分析,也确认了反应的主要通道和次要通道,提供了研究反应机理的又一个新的有用的理论方法.

简介：如果图G有一个生成子图使得这个生成子图的每一个分支都是3个点的路，则称G有P3-因子．本文证明了对任何一个2-边连通图G，只要G的边数能被3整除，则G的线图就有P3-因子。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA（lncRNA）C9ORF139靶向微小RNA（miR）-24-3P/TAOK1调控急性髓系白血病（AML）细胞增殖的作用和机制。方法AML细胞株（人急性早幼粒白血病细胞株HL-60以及人单核白血病细胞株THP-1）购自中国科学院，分为4组：A组为阴性对照（siNC）组，B组为干扰C9ORF139（siC9ORF139）组，C组为siC9ORF139+miR-24-3P抑制剂组，D组为miR-24-3P+TAOK1过表达（oe-TAOK1）组。采用实时荧光定量逆转录（qRT）-PCR检测4组AML细胞株HL-60、THP-1中的表达水平。细胞计数试剂盒-8（CCK8）法检测细胞增殖，流式细胞仪分析细胞的凋亡情况，Transwell实验检测4组细胞的迁移、侵袭能力，Western印迹法检测p-丝氨酸/苏氨酸激酶（p-raf）、p-丝裂原活化蛋白激酶（p-MEK）、p-细胞外调节蛋白激酶（p-ERK）表达。构建荧光素酶报告基因质粒，验证C9ORF139、miR-24-3P、TAOK1的结合能力。裸鼠皮下肿瘤细胞接种分为HL-60（A组）和HL-60（B组）。结果敲减细胞中C9ORF139基因并培养120 h后，在HL-60及THP-1细胞中，B组细胞增殖能力（0.62±0.02、0.82±0.02）、迁移能力（0.22±0.03、0.05±0.01）、侵袭能力（0.20±0.02、0.13±0.03）均低于A组（1.30±0.02、1.83±0.07；0.99±0.02、0.99±0.02；1.00±0.01、1.00±0.01）（均P<0.05）。共转染miR-24-3抑制剂后，细胞增殖能力、迁移能力、侵袭能力均高于B组（均P<0.05）。共转染miR-24-3P与oe-TAOK1质粒后，细胞增殖能力、迁移能力、侵袭能力均高于B组（均P<0.05）。当干扰细胞中C9ORF139基因后，与A组凋亡水平（0.31±0.27、2.49±0.33）相比，B组（28.56±8.07、17.74±1.91）均较高（均P<0.05）；当共转染miR-24-3P抑制剂后，C组细胞凋亡水平（2.34±0.09、3.06±0.06）均低于B组（均P<0.05）；在共转染miR-24-3P与oe-TAOK1质粒组中，D组细胞凋亡水平（2.16±1.29、4.80±0.37）均低于B组（均P<0.05）。在HL-60、THP-1细胞中，当C9ORF139未突变时，miR-24-3P组荧光素酶活性均低于miR-NC组（均P<0.05）。当C9ORF139序列中与miR-24-3P结合位点突变后，miR-24-3P组荧光素酶活性与miR-NC组差异无统计学意义（P>0.05）。当TAOK1未突变时，miR-24-3P组荧光素酶活性低于miR-NC组（P<0.05）；当TAOK1序列中与miR-24-3P结合位点突变后，miR-24-3P组荧光素酶活性与miR-NC组差异无统计学意义（P>0.05）。当干扰HL-60细胞中C9ORF139基因并培养72 h后，B组Raf、MEK及ERK分子磷酸化表达水平均低于A组（均P<0.05）。第14天，A组肿瘤体积高于B组［（284.49±57.61）比（125.70±18.64）mm3，P=0.017］。HL-60 A组肿瘤重量高于B组［（847.80±159.36）比（408.40±113.16）mg，P=0.001］。结论lncRNA C9ORF139通过调控miR-24-3P上调TAOK1促进AML细胞的增殖、侵袭、迁移，C9ORF139表达具有促进AML裸鼠皮下肿瘤生长的作用。

简介：摘要目的探究miR-769-3p在膀胱癌组织中的表达水平，通过下调膀胱癌J82细胞中miR-769-3p表达水平，观察沉默miR-769-3p对J82细胞迁移能力和细胞周期的影响。方法采用OncomiR数据库分析miR-769-3p在膀胱癌组织和癌旁组织中的表达差异。通过Lipofectamine 2000转染试剂转染J82细胞，分为si-miR-769-3p组(转染miR-769-3p小分子干扰片段)和对照组(转染无意义序列)。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测转染后miR-769-3p相对表达水平。通过细胞划痕实验和流式细胞仪检测比较两组J82细胞迁移能力和细胞周期的差异性。采用生物信息学软件MicroRNAdb预测miR-769-3p的靶基因。双荧光素酶报告基因实验验证miR-769-3p与靶基因的互补结合。qRT-PCR和Western blotting分别检测miR-769-3p的靶基因表达水平。计量资料以均数±标准差(±s)表示，两组间比较采用t检验。结果与癌旁组织相比，miR-769-3p在膀胱癌组织中表达显著升高，差异具有统计学意义(P<0.01)。si-miR-769-3p组miR-769-3p相对表达水平(1.02±0.16)明显低于对照组(4.50±0.60)，差异具有统计学意义(P<0.01)。si-miR-769-3p组细胞迁移率[(26.67±3.98)%]明显低于对照组[(61.86±4.70)%]，差异具有统计学意义(P<0.01)。si-miR-769-3p组处于G0~G1期的细胞比例[(57.66±5.74)%]显著多于对照组[(31.26±3.24)%]，差异具有统计学意义(P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验证实内皮素3(EDN3)是miR-769-3p的靶基因。对照组和si-miR-769-3p组J82细胞中EDN3 mRNA相对表达水平为1.99±0.66和6.98±0.76，与对照组比较，si-miR-769-3p组EDN3 mRNA相对表达水平明显高于对照组，差异具有统计学意义(P<0.01)。结论低表达miR-769-3p可以通过促进EDN3基因表达抑制膀胱癌J82细胞迁移能力，阻滞J82细胞周期。

简介：目的探讨miR-139-5p对鼻咽癌顺铂（DDP）耐药细胞DDP敏感性的影响及其相关作用机制.方法培养鼻咽癌DDP耐药细胞株HNE1/DDP,分为miR-139-5p组、阴性对照组、DDP组和空白对照组,miR-139-5p组转染miR-139-5p类似物,阴性对照组转染阴性对照序列,DDP组和空白对照组不做转染处理.转染后miR-139-5p组、阴性对照组和DDP组均加入20μmol/LDDP,空白对照组加入培养基,溴化吡啶（PI）单染后流式细胞术检测各组HNE1/DDP细胞凋亡率.采用Westernblot检测HNE1/DDP细胞miR-139-5p组、阴性对照组和空白对照组磷酸肌醇3-激酶（PI3K）、磷酸化（p）-PI3K、蛋白激酶B（Akt）、p-Akt及趋化因子受体4（CXCR4）蛋白的相对表达水平.采用实时荧光定量PCR（qPCR）检测miR-139-5p组、阴性对照组和空白对照组CXCR4mRNA的表达水平.结果空白对照组、DDP组、阴性对照组和miR-139-5p组HNE1/DDP细胞凋亡率分别是6.26％±1.19％、22.43％±3.88％、23.87％±3.21％和40.87％±4.04％,DDP组、阴性对照组和miR-139-5p组细胞凋亡率均高于空白对照组,miR-139-5p组细胞凋亡率高于DDP组和阴性对照组,差异均有统计学意义（P值均〈0.05）.Westernblot检测显示,miR-139-5p组p-Akt、p-PI3K、PI3K及CXCR4蛋白的相对表达量均低于空白对照组和阴性对照组,差异均有统计学意义（P值均〈0.01）.实时荧光定量PCR检测结果显示,miR-139-5p组中HNE1/DDP细胞CXCR4的mRNA相对表达水平低于空白对照组和阴性对照组,差异均有统计学意义（P值均〈0.01）.结论转染miR-139-5p可提高鼻咽癌耐药细胞株HNE1/DDP对DDP的敏感性,其作用机制可能与抑制CXCR4的表达进而调控其下游PI3K/Akt信号通路的活化有关.

简介：通过对2004年3月16～18日这一次寒潮天气过程的分析,以提高在类似天气形势下寒潮天气预报的能力.