简介:摘要:目的:探究分析对结核分枝杆菌耐药性的线性探针技术快速检测临床应用;方法:对 260株结核分枝杆菌菌株进行线性探针技术检测,金标准选择比例药敏试验法,对比探针技术检测与比例药敏试验结果的符合情况,以评价线性探针检测技术的准确性和临床应用效果;结果:采用线性探针检测,异烟肼的敏感性为 96.9%,特异性为 95.8%,阳性预测值为 94.6%,阴性预测值为 93.8%,采用比例法共检出耐多药 92例,而采用线性检出耐多药 90例,两者符合率为 97.8%,敏感度为 98.9%,特异性为 100%,阳性预测值为 100%,阴性预测值为 100%,比较两种检测方式差异无统计学意义( X2=0.000 P=1.012);结论:采用线性探针技术检测利福平、异烟肼的耐药性与比例法的一致性较高,操作更加简单,敏感性、特异性高,可以推广应用;
简介:摘要目的分析结核分枝杆菌感染诊断技术在艾滋病合并TB感染诊断中的应用疗效。方法分析125例艾滋病合并TB感染患者,记录在临床上经常用到的影像学、组织病理学诊断结果、TB感染实验室和CD4+T淋巴细胞计数。结果125例患者当中,肺结核并肺外结核有43例,肺外结核有58例,临床表现为肺结核24例。其CD4+T淋巴细胞计数依次是(56.2±45.8)、(36.56±34.78)、(43.16±50.3)/l。结论在CD4+T淋巴计数比较低的艾滋病合并TB感染者的诊断中,-干扰素释放试验、支气管镜检查、组织病理检查受CD4+T淋巴计数高低影响比较小,运用综合诊断技术可以使诊断水平不断提高。
简介:摘要目的探究PE_PGRS60蛋白在结核分枝杆菌感染致病中的潜在作用机制。方法用克隆并纯化的PE_PGRS60蛋白刺激RAW264.7小鼠巨噬细胞,qRT-PCR和Western blot检测环氧合酶2(cyclooxygenase 2, COX2) mRNA和蛋白质表达。筛选可能调控COX2表达的信号通路,并用ELISA检测PE_PGRS60诱导的炎性细胞因子表达,乳酸脱氢酶试验和碘化丙啶(PI)染色,流式细胞术观察细胞死亡情况。Western blot检测活动性肺结核患者的外周血单个核细胞(PBMC)中COX2表达情况。结果克隆纯化的结核分枝杆菌PE_PGRS60蛋白促进RAW264.7细胞中COX2的显著表达,并活化了MAPK家族的3个主要成员即细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinase, ERK)、p38和c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase, JNK),但只有JNK的抑制剂JNK-IN-7可阻断PE_PGRS60诱导的COX2上调。后续研究发现,COX2在活动性肺结核患者PBMC中的表达也升高。COX2抑制剂塞来昔布可有效阻断PE_PGRS60诱导的炎症因子IL-1β、TNF-α和IL-6表达,并促进巨噬细胞死亡。结论PE_PGRS60可通过激活JNK/COX2信号轴,促进巨噬细胞释放炎症因子,在COX2的阻止下仍有部分巨噬细胞发生死亡。
简介:摘要目的评价结核分枝杆菌PstS1和HspX蛋白的体液和细胞免疫反应性,为结核病免疫学诊断和疫苗候选抗原的筛选提供参考。方法利用分子克隆表达和Ni2+亲和层析技术纯化获得重组目的蛋白PstS1和HspX。收集健康志愿者和结核分枝杆菌感染志愿者血液样本及其背景流行病学资料,以重组PstS1和HspX蛋白作为抗原,进行酶联免疫吸附试验(ELISA)和酶联免疫斑点试验(ELISPOT)分别检测特异性IgG抗体和分泌IFN-γ的抗原特异性T淋巴细胞。对数据进行统计学分析,评价重组PstS1和HspX蛋白的体液和细胞免疫反应性。结果重组PstS1和HspX蛋白均能特异性刺激结核分枝杆菌感染者体内较多的效应T细胞分泌IFN-γ,结核分枝杆菌感染组与健康对照组的检测结果差异有统计学意义(P<0.01);重组PstS1和HspX蛋白作为ELISPOT诊断抗原的特异度和灵敏度分别为92.11%(35/38)和65.96%(31/47),68.42%(26/38)和91.49%(43/47)。重组PstS1和HspX蛋白也具有一定的体液免疫反应性,但仅HspX蛋白特异性抗体水平在结核分枝杆菌感染组与健康对照组间的差异有统计学意义(P<0.05)。结论重组PstS1和HspX蛋白均具有较好的细胞免疫反应性,属于细胞免疫优势抗原。两者均具有较好的细胞免疫诊断性能,同时也是较好的潜在抗结核疫苗候选抗原。
简介:摘要分析比较临床1例重症肺炎患者痰标本培养出的平滑型脓肿分枝杆菌(MabS)和粗糙型脓肿分枝杆菌(MabR),并进行药敏试验研究,为临床诊断治疗提供科学依据。对MabS和MabR进行菌体形态观察、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)和16S rRNA基因序列测序比对,构建系统发育进化树进行同源性分析,并采用比例法和肉汤法进行体外药敏试验。MabS和MabR菌落形态不同,MALDI-TOF MS分析MabR有223个蛋白峰,MabS有147个蛋白峰。16s RNA基因测序MabS为1 397 bp,MabR为1 402 bp,药敏试验显示二者对抗结核药几乎耐药,对绝大部分抗菌药物敏感。MabS和MabR对抗结核治疗药物普遍耐药,而对抗菌药物几乎敏感,联合使用抗菌药物治疗有较好的疗效,可供临床参考。
简介:摘要非结核分枝杆菌感染的发病率和患病率在全球均呈现上升趋势,其中鸟分枝杆菌复合群肺病(MAC肺病)是常见的类型之一。MAC肺病病程长,治疗困难,是分枝杆菌治疗的难点。该病唯一有循证证据的治疗药物为大环内酯类,但存在时间长、易耐药等问题。本文将对MAC肺病指南标准治疗方案和最新治疗药物以及患者预后的相关研究进展进行综述,初步评价含大环内酯类药物的用药方案对MAC肺病的治疗效果,并以患者治疗转归为出发点,提出MAC肺病患者在治疗上需要重点关注的问题。
简介:摘要目的应用Meta分析方法评价北京基因型结核分枝杆菌与耐部分一线抗结核药结核病的相关性。方法应用RevMan5.0软件分析纳入的15个独立研究。结果北京基因型结核分枝杆菌与异烟肼耐药、利福平耐药、乙胺丁醇耐药及MDR的合并OR值及其置信区间分别为1.83(95%CI1.22~2.72)、3.05(95%CI1.98~4.69)、2.12(95%CI1.29~3.49)及3.01(95%CI1.85~4.91)。结论北京基因型结核分枝杆菌与异烟肼耐药、利福平耐药、乙胺丁醇耐药及MDR存在相关性,与链霉素耐药的相关性有待进一步研究。
简介:摘要目的研究结核分枝杆菌Rv0446c的抗原表位及其免疫原性,为结核病的免疫诊断技术及疫苗研发提供候选抗原及表位。方法利用生物信息学软件TE-predict和IEDB的T细胞表位预测软件对结核分枝杆菌抗原Rv0446c进行T细胞表位预测,用ELISPOT实验检测表位在2019年1月到2020年12月期间来自佛山市第四人民医院和福州肺科医院的结核病患者(50例)、肺部疾病患者(39例)及健康志愿者(55例)中的免疫反应性。将60只6周龄BALB/c小鼠随机分成10组,每组6只,分别采用PBS、血蓝蛋白(KLH)、高剂量结核分枝杆菌抗原Ag85B(50 μg/只)、低剂量Ag85B(20 μg/只)、高计量P120、低剂量P120、高计量P121、低剂量P121、高剂量P123、低剂量P123(P120、P121、P123高剂量为100 μg/只、低剂量为50 μg/只)多肽对其皮下免疫,每只小鼠免疫3次,每次间隔2周,末次免疫后4周,应用ELISA方法检测各组小鼠脾细胞产生的IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10细胞因子水平。结果预测的7条表位多肽中,ELISPOT试验筛选出4条阳性T细胞表位多肽P120、P121、P122、P123,在结核病患者中检测灵敏度和特异度分别为30.0%、18.0%、6.0%、22.0%和96.8%、98.9%、100%、96.8%。与对照PBS组和KLH组比较,P120多肽能刺激小鼠产生较高水平的IFN-γ、IL-4、IL-10,P121多肽刺激小鼠产生较高水平的IFN-γ和IL-4(均P<0.05),P123多肽刺激小鼠产生较高水平的IFN-γ(均P<0.05)。P120、P121、P123多肽刺激小鼠产生的IL-2的水平高于PBS组低于Ag85B-L组和Ag85B-H组(均P<0.05),但与KLH组差异无统计学意义(均P>0.05)。结论Rv0446c蛋白及其T细胞表位具有较好的免疫原性及免疫反应性,能刺激机体产生强烈的细胞免疫应答,可用于结核病的临床诊断技术研究和新型结核亚单位疫苗的构建。
简介:摘要目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor γ,PPARγ)/CD36通路在结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)感染巨噬细胞脂质代谢中的作用。方法以THP-1源性巨噬细胞建立感染模型,将实验分为对照组、Mtb组、Mtb+罗格列酮(rosiglitazone,ROZ)组和Mtb+GW9662组。分别采用Western blot和RT-PCR检测巨噬细胞中PPARγ蛋白和基因表达水平;油红O染色法检测细胞内脂质情况;全自动生化分析仪检测细胞培养上清中总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglycerides,TG)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL-C)和高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL-C)浓度;免疫组织化学法检测细胞中CD36表达;CCK-8检测巨噬细胞增殖率。结果Mtb感染显著升高巨噬细胞中PPARγ表达(P<0.001)、促进细胞内脂质聚集及CD36表达,降低细胞培养上清中TC、TG、LDL-C和HDL-C含量(P<0.001)和细胞增殖率(P<0.001)。PPARγ激动剂ROZ可显著增强Mtb感染所致的细胞内脂质聚集及CD36表达、进一步下调细胞培养上清中脂质水平及各细胞增殖率,而PPARγ拮抗剂GW9662则逆转上述作用。结论PPARγ通过影响CD36表达在Mtb感染巨噬细胞脂质代谢中发挥一定作用。
简介:摘要:目的:探究耐多药结核分枝杆菌对利福布汀和利福平的交叉耐药性。方法:从2018年1月~2019年5月期间市疾控中心保存的结核菌株,选择84株耐多药结核分枝杆菌(MTB)为研究对象,检测利福布汀、利福平等对其90%最低抑菌浓度(MIC90)交叉耐药率数据分析。结果:利福布汀和利福平的交叉耐药率为86.90%(73/84)。其中利福布汀的MIC90值为≤16mg/L,中位数为2mg/L;利福平的值为MIC90≥2mg/L,中位数>32mg/L,利福布汀的MIC90值仅为利福平的1/8-1/32。利福布汀和利福平交叉耐药率随利福平的耐药程度加大而上升,低耐利福平组和中耐利福平组的交叉耐药例数分别为0/4和2/4,而高耐利福平组几乎全部交叉耐药(x2=9.14,P
简介:摘要目的通过罗氏固体培养法,对环介导等温扩增技术(LAMP)和实时聚合酶链反应(RT-PCR)检测痰结核分枝杆菌的优劣评价。方法选择临床经罗氏固体培养为阳性痰标本68份,阴性标本68份,分别采用LAMP和RT-PCR方法进行结核分枝杆菌检测结果,两者阳性检出率分别为88.2%.85.3%,两者差异没有统计学意义(P>0.05);培养阳性标本经LAMP、RT—PCR检测结果灵敏度分别为91.2%和82.4%,两者差异没有统计学意义(P>0.05);培养阴性标本经LAMP、RT—PCR检测结果的特异性分别为85.3%和88.2%,两者差异没有统计学意义(P>0.05)。结论LAMP检测法阳性率高于RT-PCR法,但两者之间的差别尚无统计学意义,LAMP具有简单快速、准确,LAMP检测阳性标本灵敏度比RT-PCR好,LAMP检测阴性标本特异性稍低,LAMP具有简单、快速、准确,不需要昂贵的检验设备和严格的实验室设置,更适合基层结核病的实验诊断推广应用。