简介:目的研究神经管畸形(NTDs)胚胎脑组织和皮肤组织DNA总体甲基化以及错配修复基因启动子区甲基化水平。方法在山西省吕梁地区以医院为基础进行病例-对照研究。从县级医院及妇幼保健院收集经B超诊断为NTDs的胎儿标本,同时收集非病理性引产、无畸形和发育迟缓的胎儿作为正常对照组。运用甲基化定量试剂盒测定脑组织和皮肤组织的DNA总体甲基化水平,甲基化特异性多连接依赖性探针扩增试剂盒检测7个错配修复基因(MLH1,MSH2,MSH6,MSH3,MLH3,PMS2和MGMT)启动子区甲基化水平。结果共有65例NTDs胚胎,48例对照胚胎进入研究。①NTDs组的脑组织DNA总体甲基化水平显著低于对照组(5.3%vs6.5%,P〈0.001),DNA总体低甲基化显著增加了NTDs发生风险(OR=4.98,95%CI:1.42-17.53)。皮肤组织DNA总体甲基化水平在两组间差异无统计学意义(13.3%vs13.1%,P〉0.05);②NTDs和对照组的MSH6启动子(MSH6-301:2.5%vs3.7%,P〈0.05)和PMS2启动子(PMS2-328:5.7%vs6.7%;PMS2-142:2.0%vs2.7%,P〈0.05)的甲基化水平存在显著差异。结论DNA总体低甲基化、错配修复基因启动子区的异常甲基化修饰与NTDs发生有关。
简介:摘要目的系统评价XRCC1Arg399Gln和OGG1Ser326Cys多态性与年龄相关性白内障发病风险的相关性。方法计算机检索PubMed、EMBASE、Cochrane图书馆、中国知网、万方、维普数据库,搜集有关XRCC1Arg399Gln和OGG1Ser326Cys多态性与年龄相关性白内障发病风险相关性的文章,由2位评价者独立进行文献检索、纳入排除、资料提取和质量评价,选择比值比(oddsratio,OR)作为预后效应量,采用RevMan5.3软件进行Meta分析。结果最终纳入10篇文献,均为病例对照研究,其中病例人群2716例,对照人群2721例。Meta分析结果显示XRCC1Arg399Gln多态性与年龄相关性白内障发病风险无关联,OGG1Ser326Cys多态性与年龄相关性白内障存在显著相关(等位基因遗传模型OR=1.40,95%CI1.09-1.79,P=0.008;显性遗传模型OR=1.58,95%CI1.07-2.35,P=0.02;隐性遗传模型OR=1.50,95%CI1.17-1.91,P=0.001;加行遗传模型OR=1.92,95%CI1.18-3.14,P=0.009);同时,OGG1Ser326Cys多态性与年龄相关性白内障在中国人群中也存在显著关联(等位基因遗传模型OR=1.35,95%CI1.03-1.76,P=0.03;显性遗传模型OR=1.49,95%CI1.00-2.21,P=0.05;隐性遗传模型OR=1.47,95%CI1.12-1.95,P=0.006;加行遗传模型OR=1.79,95%CI1.08-2.97,P=0.02)。结论OGG1Ser326Cys多态性与年龄相关性白内障发病风险存在显著相关性。
简介:摘要目的观察微小RNA(miRNA,miR)-182通过靶向特定富含AT碱基DNA序列结合蛋白2(SATB2)基因对结直肠癌细胞增殖迁移的作用,探讨其对SATB2/烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(nox4)通路的调节机制。方法对数期生长人结肠癌细胞(HT-29)细胞,采用脂质体转染法将si-miR-182、Control-si转至HT-29细胞,分别设为Si-miR-182组、N-miR-182组,另取不做任何处理细胞为对照组。测定3组细胞中miR-182基因表达、增殖和迁移、SATB2、nox4、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)mRNA和蛋白表达。重复计量资料比较采用重复测量方差分析,两两样本比较采用LSD-t检验。结果Si-miR-182组miR-182基因相对表达量(0.35±0.05)低于对照组(1.24±0.26)和N-miR-182组(1.20±0.25),差异均有统计学意义(t=7.517、7.455,P<0.05);Si-miR-182组培养24、48、72 h MTT试验吸光度(A)值均低于对照组和N-miR-182组,差异均有统计学意义(24 h:t=2.667、2.664;48 h:t=4.559、4.524;72 h:t=7.257、6.981;P<0.05);与培养24 h比较,3组培养48、72 h MTT试验A值均升高(48 h:t=5.507、5.092、3.741;72 h:t=11.330、10.637、9.229;P<0.05),且72 h MTT试验A值高于48 h,差异均有统计学意义(t=7.411、6.941、5.214,P<0.05)。Si-miR-182组细胞迁移率[(53.90±3.19)%]低于对照组[(81.66±5.92)%]和N-miR-182组[(80.35±5.40)%],差异均有统计学意义(t=9.231、9.430,P<0.05);Si-miR-182组细胞SATB2、E-cadherin mRNA和蛋白相对表达量高于对照组和N-miR-182组(SATB2:t=10.930、11.158;E-cadherin:t=9.288、9.369;P<0.05),nox4、Vimentin mRNA和蛋白相对表达量低于对照组和N-miR-182组,差异均有统计学意义(nox4:t=8.955、7.590;Vimentin:t=6.543、6.644;P<0.05)。结论沉默miR-182基因可显著抑制结直肠癌细胞增殖及迁移能力,可能通过激活SATB2、E-cadherin的表达、抑制nox4、Vimentin的表达、参与SATB2/nox4通路共同调控。
简介:从不肥沃的夫妇的28个男搭挡镇定的精液样品被划分成三相等的aliquots并且与三准备了选择媒介,例如PureSperm吗?(Nidacon,Gothenburg,瑞典),Sil选择加?(Fertipro,Beernem,比利时)并且SpermGrad?(Vitrolife,Gothenburg,瑞典)。在精液参数的吝啬的百分比的差别被重复措施分析估计。精子DNA的关联损坏刻痕结束标记,由终端deoxynucleotidyltransferasedUTP测量了(TUNEL)试金,并且鱼精朊缺乏测量了由与精子参数染色的chromomycinA3(CMA3),被皮尔森的关联决定。在有所有三媒介的准备以后,精子集中减少了(P<0.05)当有正常形态学的精子的百分比增加了时(P<0.05)。精子活动性,快速的活动性和进步能动集中(PMC)的百分比增加了(P<0.05)为每这些参数,PureSperm准备给了最好的结果(P<0.05)。DNA损坏的百分比在PureSperm和Sil选择正准备减少了(17.9%和31.3%,分别地P<0.05)并且在SpermGrad准备增加了(56.3%,P<0.05)。鱼精朊缺乏也在所有三种媒介减少了,59.3%,47.7%和40.3%为PureSperm,Sil选择加和SpermGrad准备,分别地(P<0.05)。损坏DNA的精子的百分比否定地与精子活动性,快速的活动性和PMC的百分比被相关,但是断然与静态的活动性被相关(P<0.05)。这比较学习和关联分析表明PureSperm准备与最好的活动性和鱼精朊缺乏的最低百分比产出精子。Sil选择正准备与DNA损坏的最低数量产出精子。SpermGrad准备与正常形态学有精子的一个高百分比,而且与DNA损坏有精子的最高的百分比。精子DNA损坏与精子活动性,快速的活动性,静态的活动性和PMC的百分比被相关。
简介:摘要目的孕产妇各种血清学标志的乳汁HBV-DNA与血清HBV-DNA相关性的探讨,从而正确指导乙肝产妇产后母乳喂养。方法HBV血清标志物检测采用时间分辨免疫荧光分析法,采用荧光定量PCR法(FQ-PCR)检测血清及乳汁中HBV-DNA含量情况。结果68例乙肝阳性产妇大三阳组的血清与乳汁HBV-DNA阳性检出率为100%,二者HBV-DNA含量为最高,小三阳组HBV-DNA阳性率分别为88.7%和90.0%,两组血清HBV-DNA含量分别为7.50×107和4.34×105copy/ml,乳汁HBV-DNA分别为7.14×107和4.56×105。结论乙肝产妇产后能不能母乳喂养与产后产妇血清和初乳中HBV-DNA情况有关,根据检测结果决定喂养方式,以保证分娩婴儿的安全哺乳环境。
简介:摘要目的检测p53和DNA损伤调控基因1(PDRG1)在结直肠癌细胞中的表达,探讨PDRG1在结直肠癌细胞增殖、侵袭及迁移过程中的作用及其机制。方法实时定量反转录聚合酶链反应法(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测结肠癌(SW620)和正常结肠(NCM460)2种细胞中PDRG1 mRNA及蛋白的表达。转染PDRG1过表达载体和小干扰RNA(siRNA)感染序列至SW620细胞,实验分为3组,过表达转染组,阴性转染对照组,抑制组。Western blot检测PDRG1、锌指蛋白转录因子1(Snail1)、上皮型钙黏附蛋白(E-Cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)蛋白的表达。细胞计数试剂盒(CCK-8),Transwell小室检测细胞增殖、迁移及侵袭能力。检测转染Snail1 siRNA感染序列对过表达PDRG1 SW620的影响。计数数据采用χ2检验或者Fisher′s精确检验,采用t检验比较各组间差异。结果PDRG1 mRNA和蛋白在SW620的相对表达量分别为1.853±0.118、1.563±0.064,明显高于NCM460中的1.00±0.00、1.00±0.00(t=12.51、15.08,P<0.01)。SW620细胞转染PDRG1过表达载体后mRNA和蛋白的相对表达量较对照组(t=20.073、16.842,P<0.01)明显升高,转染72 h后细胞增殖水平高于对照组(t=4.857,P<0.01),侵袭和迁移细胞数122.3±18.1、174.6±13.2,较对照组99.5±16.2、110.5±12.2明显增加(t=2.956、11.271,P<0.01)。Snail1、Vimentin的表达明显升高(t=9.756、10.950,P<0.01),E-Cadherin的表达明显降低(t=-6.060,P<0.01)。SW620细胞转染PDRG1 siRNA后mRNA和蛋白的表达较对照组明显降低(t=8.072、12.704,P<0.01),转染48、72 h后增殖水平低于对照组(t=5.557、-4.782,P<0.01),侵袭和迁移细胞数(30.8±8.6、37.5±8.9),较对照组(117.6±12.8、126.9±11.9)明显降低(t=-17.734、-18.873,P<0.01)。Snail1、Vimentin蛋白的表达明显降低(t=-7.588、-7.187,P<0.01),E-Cadherin的表达明显升高(t=13.239,P<0.01)。转染Snail1 siRNA感染序列逆转了PDRG1调节的上皮-间充质化(EMT)过程和细胞迁移和侵袭。结论PDRG1可通过调控Snail1的表达来影响EMT过程,从而促进肿瘤细胞的增殖,侵袭和迁移。
简介:摘要胚胎染色体异常是导致妊娠失败的主要原因之一,行胚胎植入前遗传学检测(preimplantation genetic testing,PGT),选择整倍体胚胎移植,可显著提高胚胎种植率和持续妊娠率。但由于PGT技术对胚胎的侵入性和技术的复杂性,限制了其在临床的广泛应用,开发一种安全、快速、经济的胚胎基因组检测方法将是生殖领域的一大进步。近年来,随着游离基因组DNA在胚胎培养液和囊胚腔液中的发现,许多学者开始探讨胚胎游离DNA在PGT中的适用性,然而目前的研究结果缺乏一致性结论。本文总结了胚胎培养液和囊胚腔液中基因组DNA在PGT领域的研究进展,并讨论其当前的局限性以及应用前景。
简介:摘要目的探讨多巴胺受体D2(DRD2)基因启动子区CpG岛DNA甲基化水平与持续性姿势-知觉性头晕(PPPD)发病的关系。方法对自2017年1月至6月在烟台市烟台山医院神经内科确诊的43例PPPD患者(试验组)于收治时采集血样,对同期收治的未予选择性5-羟色胺再摄取抑制剂(SSRI)类或5-羟色胺和去甲肾上腺素再摄取抑制剂(SNRI)类药物治疗的、且随访3个月以上头晕症状未再发而排除PPPD诊断的45例急性前庭外周性眩晕患者(对照组)于随访时采集血样,应用重亚硫酸盐测序法进行DRD2基因启动子区CpG岛甲基化水平的检测并比较2组间的差异。结果试验组DRD2基因启动子区CpG岛的甲基化阳性率(58.1%)明显高于对照组(15.6%),CpG岛位点甲基化率(0.15±0.18)明显高于对照组(0.04±0.10),差异均有统计学意义(P< 0.05)。结论PPPD发病可能与患者DRD2基因启动子区CpG岛DNA甲基化水平增高有关。