简介：摘要目的分析轮状病毒G2P[4]型2020BJ株的近似全基因组进化特征。方法运用逆转录－聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)进行轮状病毒基因组扩增，将扩增产物测序，对所得序列进行系统进化和同源性分析。结果获得人轮状病毒G2P[4]型2020BJ株近似全长的11个节段核酸序列，序列分析表明其为G2-P[4]-I2-R2-C2-M2-A2-N2-T2-E2-H2基因型(DS-1-Like)；进化分析表明与日本、印度、孟加拉及意大利等国家毒株亲缘关系较近；亲缘关系较近的毒株间抗原表位的氨基酸存在差异。结论与2020BJ亲缘关系较近的5株G2P[4]型轮状病毒VP7和VP4的抗原表位的氨基酸存在差异，可能导致流行特征不同，应加强轮状病毒监测。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA（lncRNA）SNHG6对宫颈癌SiHa细胞增殖和放疗敏感性的影响及其潜在的作用机制。方法检测lncRNA SNHG6、miR-485-3p在宫颈癌组织、癌旁组织、SiHa细胞及X线照射的SiHa细胞中的表达。分析lncRNA SNHG6与miR-485-3p之间的关系。过表达或敲降SNHG6、miR-485-3p后，MTT、Transwell迁移实验和流式细胞仪检测细胞增殖能力、侵袭数目和凋亡率。分析miR-485-3p对Wnt/β-catenin通路的影响以及XAV939对SiHa细胞增殖及放疗敏感性的影响。结果lncRNA SNHG6在宫颈癌组织和SiHa细胞中高表达，在X线照射的SiHa细胞中低表达，miR-485-3p在宫颈癌组织和SiHa细胞中低表达，在X线照射的SiHa细胞中高表达。lncRNA SNHG6靶向miR-485-3p。下调lncRNA SNHG6表达抑制了细胞增殖和侵袭，增强了其对X线的放疗敏感性，而miR-485-3p抑制剂转染细胞后则起到相反作用。上调lncRNA SNHG6通过miR-485-3p促进了SiHa细胞的增殖与侵袭，降低了放疗敏感性。下调miR-485-3p激活了Wnt/β-catenin通路，促进了SiHa的细胞增殖和侵袭，降低了其对X线的放疗敏感性。结论过表达lncRNA SNHG6靶向miR-485-3p激活Wnt/β-catenin通路调控SiHa细胞的增殖及其放疗敏感性。

简介：摘要目的研究p53基因突变和Numb蛋白表达与结直肠癌患者临床病理因素及预后的关系。方法采用PCR及DNA测序分析60例结直肠癌组织中p53基因突变状况，Western blot检测Numb蛋白的表达，分析p53基因突变状态与Numb蛋白表达水平的相关性；在体外对结肠癌细胞系HCT116（+）和HCT116（-）分别采用基因过表达及RNA干扰，用流式细胞术检测p53基因突变与Numb蛋白表达对结肠癌细胞周期的影响。结果60例结直肠癌组织中31例存在p53基因突变，突变率为52%，外显子（E）5、6、7、8的突变次数分别为5、6、12、11例次。Numb蛋白在p53基因突变组表达水平显著低于非突变组（P=0.009）。Numb蛋白低表达患者的预后比高表达患者的差（P=0.015），其表达水平与结直肠癌的分化程度、淋巴结转移、TNM分期密切相关（均P<0.05）。在两种细胞中转入Numb后其细胞周期均出现G2-M期阻滞，增殖受到抑制，DAPT则具有G1-S期阻滞，二者无明显协同作用。结论结肠癌中p53基因突变状态与Numb蛋白表达密切相关，并影响细胞增殖周期及预后。

简介：摘要目的探讨慢病毒介导微小RNA(miR)-31-5p过表达对兔自身免疫性干眼模型外周血辅助性T细胞17(Th17)的免疫调控作用。方法构建miR-31-5p重组慢病毒载体。包装miR-31-5p过表达及其对照慢病毒，进行浓缩和滴度测定。建立兔自身免疫性干眼模型，并分离模型兔外周血单个核细胞(PBMC)，分别感染miR-31-5p及阴性对照慢病毒颗粒作为miR-31-5p过表达组和对照组，采用实时荧光定量PCR法检测miR-31-5p的表达水平。将2个组PBMC与经γ射线照射后的泪腺上皮细胞共培养，采用实时荧光定量PCR法检测2个组PBMC中Th17细胞特异性转录因子维甲酸相关孤儿核受体C(RORC)、标志性细胞因子白细胞介素-17(IL-17)及Th17细胞极化相关细胞因子IL-1β、IL-6和IL-23的mRNA表达水平；采用Western blot法检测PBMC中IL-17的蛋白表达水平。结果通过测序验证，成功构建miR-31-5p重组慢病毒载体。包装并浓缩miR-31-5p过表达和对照慢病毒颗粒，滴度测定结果分别为3.82×107 TU/ml和3.50×107 TU/ml，满足后续实验需求。实时荧光定量PCR结果显示，miR-31-5p过表达组miR-31-5p相对表达量较对照组显著升高，差异有统计学意义(t＝－9.696，P<0.001)。在兔泪腺上皮细胞与PBMC共培养体系中，miR-31-5p过表达组PBMC中的RORC、IL-17 mRNA相对表达量分别为0.33±0.03和0.28±0.09，明显低于对照组的1.00±0.00和1.00±0.00，差异均有统计学意义(t＝46.256、13.810，均P<0.05)。Western blot检测结果显示，miR-31-5p过表达组PBMC中IL-17蛋白相对表达量较对照组明显降低，差异有统计学意义(t＝4.977，P＝0.008)。实时荧光定量PCR结果显示，miR-31-5p过表达组PBMC中IL-6、IL-23和IL-1β mRNA相对表达量较对照组显著下降，差异均有统计学意义(t＝220.076、6.641、13.271，均P<0.05)。结论miR-31-5p过表达可能通过下调免疫微环境中IL-6、IL-23、IL-1β等细胞因子的表达负向调控Th17细胞免疫反应。

简介：摘要目的评价小鼠神经细胞氧糖剥夺-复糖复氧时微小RNA-93-5p(miR-93-5p)与线粒体融合蛋白2(Mfn2)的关系。方法体外培养小鼠神经母细胞瘤细胞至对数生长期。实验Ⅰ　采用随机数字表法将细胞分为5组(n＝20)：对照组(C组)、氧糖剥夺-复糖复氧组(OGD/R组)、miR-93-5p抑制剂组(I组)、siRNA-Mfn2+miR-93-5p抑制剂组(siMfn2+I组)和miR-93-5p阴性对照组(NC组)。氧糖剥夺：在低糖平衡盐溶液、37 ℃ 5%CO2-95%N2的环境中培养3 h，复糖复氧：在正常培养基、37 ℃ 5%CO2-95%空气中复氧24 h。I组、siMfn2+I组与NC组在模型制备前48 h分别转染miR-93-5p抑制剂、miR-93-5p抑制剂+siRNA-Mfn2及阴性对照miRNA。采用CCK-8法检测细胞活力，流式细胞术检测细胞凋亡率，qRT-PCR法检测miR-93-5p、Mfn2 mRNA表达水平，Western blot法检测Mfn2表达水平。实验Ⅱ　构建野生型(WT)-Mfn2和突变型(MUT)-Mfn2质粒，并分别与miR-93-5p模拟物和miR-93-5p空白对照(miR-93-5p NC)载体转染至神经母细胞瘤细胞，转染48 h后，采用随机数字表法将细胞分为4组(n＝5)：miR-93-5p NC-WT-Mfn2共转染组、miR-93-5p模拟物-WT-Mfn2共转染组、miR-93-5p NC-MUT-Mfn2共转染组和miR-93-5p模拟物-MUT-Mfn2共转染组。采用双荧光素酶实验检测荧光素酶活性。结果实验Ⅰ　与C组比较，其余各组细胞活力降低，细胞凋亡率升高，miR-93-5p表达上调，Mfn2及其mRNA表达下调(P<0.05)；与OGD/R组或NC组比较，I组细胞活力升高，细胞凋亡率降低，miR-93-5p表达下调，Mfn2及其mRNA表达上调(P<0.05)；与I组比较，siMfn2+I组细胞活力降低，细胞凋亡率升高，Mfn2及其mRNA表达下调(P<0.05)。实验Ⅱ　与miR-93-5p NC-WT-Mfn2共转染组比较，miR-93-5p模拟物-WT-Mfn2共转染组荧光素酶活性降低(P<0.05)；与miR-93-5p NC-MUT-Mfn2共转染组比较，miR-93-5p模拟物-MUT-Mfn2共转染组荧光素酶活性差异无统计学意义(P>0.05)。结论miR-93-5p表达上调，进而靶向下调Mfn2表达，可能是小鼠神经细胞氧糖剥夺-复糖复氧损伤的机制。

简介：摘要目的探究微小RNA-140-5p(miR-140-5p)通过靶向调控组蛋白去乙酰化酶4(HDAC4)基因表达在胃癌转移中的作用及机制。方法收集2020年4月至2020年10月齐齐哈尔医学院附属第三医院院胃癌患者手术切除癌组织以及癌旁组织(52例)；细胞实验对象为购买人胃正常上皮黏膜细胞系GES-1和胃癌细胞系MGC-803、SGC-7901和HGC-27。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)以及蛋白质印迹法(Western blot)检测胃癌患者肿瘤组织中HDAC4的表达。在线网站Targetscan预测HDAC4上游调控miRNA。双荧光素酶报告实验验证miR-140-5p和HDAC4的靶向关系。胃癌细胞依据不同转染处理分组为si-NC组、si-HDAC4组、mimic-NC组、miR-140-5p mimic组、inhibitor-NC组和miR-140-5p inhibitor组。采用RT-qPCR检测胃癌细胞miR-140-5p的表达，Western blot检测HDAC4蛋白表达。Transwell实验检测细胞迁移和侵袭；流式细胞术检测细胞凋亡，组间比较采用t检验。结果胃癌组织中的HDAC4的mRNA和蛋白表达高于癌旁组织(1.024±0.099比1.512±0.065；0.916±0.160比1.734±0.289，t＝29.71、17.86，均P<0.05)。在胃癌细胞中miR-140-5p与HDAC4存在结合位点，双荧光素酶报告实验验证miR-140-5p结合在HDAC4的3’端非编码区(3’UTR)(0.986±0.050比0.436±0.039，t＝15.02，P<0.05)。胃癌细胞中miR-140-5p表达显著低于正常细胞(1.021±0.054比0.362±0.029，t＝18.62，P<0.05)。miR-140-5p mimic组细胞迁移(180.000±5.890比54.000±3.230，t＝32.49，P<0.05)和侵袭(94.000±5.430比43.000±3.420，t＝13.77，P<0.05)能力显著低于mimic-NC组，而凋亡能力显著高于mimic-NC组(11.250±1.560比30.240±3.550，t＝8.48，P<0.05)；miR-140-5p inhibitor组细胞迁移(192.000±6.000比284.000±8.430，t＝15.37，P<0.05)和侵袭(89.000±5.110比153.000±6.990，t＝12.80，P<0.05)能力显著高于inhibitor-NC组，而凋亡能力显著低于inhibitor-NC组(13.200±1.620比5.350±1.000，t＝7.14，P<0.05)。miR-140-5p mimic+Jagged1/FC组细胞迁移(60.000±3.430比196.000±7.230，t＝29.44，P<0.05)和侵袭(48.000±3.750比97.000±4.890，t＝13.77，P<0.05)能力显著高于miR-140-5p mimic+DMSO组，而细胞凋亡能力显著低于miR-140-5p mimic+DMSO组(28.950±3.240比12.050±1.430，t＝8.27，P<0.05)。结论胃癌细胞的miR-140-5p上调表达可通过抑制HDAC4/Notch信号轴进而抑制胃癌转移进程。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA，LncRNA)淋巴细胞白血病缺失基因1(deleted in lymphocytic leukemia1，DLEU1)对甲状腺癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡等过程的影响，以及其作用机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction，qRT-PCR)检测正常甲状腺细胞Nthy-ori 3-1与甲状腺癌细胞SW579、TPC-1、C64中DLEU1、微小RNA-624-3p(miR-624-3p)的表达水平。分别将si-con(si-con组)、si-DLEU1(si-DLEU1组)、miR-con(miR-con组)、miR-624-3p mimics(miR-624-3p组)、si-DLEU1与anti-miR-con(si-DLEU1+anti-miR-con组)、si-DLEU1与anti -miR-624-3p(si-DLEU1+anti -miR-624-3p组)转染至TPC-1细胞，将未经转染的细胞作为NC组；检测各组细胞活力、细胞凋亡率以及细胞迁移及侵袭能力；双荧光素酶验证DLEU1与miR-624-3p的靶向关系；Western blot检测Ki-67、基质金属蛋白酶2((matrix metalloproteinase-2，MMP2)、Cleaved caspase-3、Wnt、β-catenin表达量。结果与Nthy-ori 3-1组DLEU1相比，甲状腺癌细胞SW579、C643、TPC-1中DLEU1表达水平明显升高，miR-624-3p表达水平明显降低，差异具有统计学意义(F值分别为207.87和68.45，P值均<0.05)；与NC组、si-con组相比，si-DLEU1组细胞活力显著下降，迁移细胞数与侵袭细胞数显著下降，Ki-67、MMP-2、Wnt、β-catenin蛋白相对表达量显著降低，细胞凋亡率显著升高，Cleaved caspase-3蛋白相对表达量显著升高，差异具有统计学意义(F值分别为52.93、354.43、193.75、101.74、86.80、141.66、122.14、307.83、78.49，P值均<0.05)；与NC组、miR-con组相比，miR-624-3p组细胞活力显著下降，迁移细胞数与侵袭细胞数显著下降，Ki-67、MMP-2、Wnt、β-catenin蛋白相对表达量显著降低，细胞凋亡率显著升高，Cleaved caspase-3蛋白相对表达量显著升高，差异具有统计学意义(F值分别为49.63、296.45、220.53、220.82、215.75、65.23、251.20、302.58、348.28，P值均<0.05)；miR-624-3p过表达能显著降低DLEU1野生型质粒的荧光素酶活性(t＝9.55，P<0.05)；与si-DLEU1+anti-miR-con组相比，si-DLEU1+anti-miR-624-3p组细胞活力显著升高，迁移细胞数与侵袭细胞数显著增多，Ki-67、MMP-2、Wnt、β-catenin蛋白相对表达量显著升高，细胞凋亡率显著降低，Cleaved caspase-3蛋白相对表达量显著降低，差异具有统计学意义(t值分别为9.93，15.29、20.18、6.79、4.23、8.02、9.57、11.34、8.67，P值均<0.05)。结论LncRNA DLEU1靶向miR-624-3p促进甲状腺癌细胞增殖、迁移及侵袭，抑制细胞凋亡，其作用机制可能与信号通路Wnt/β-catenin的活化有关。

简介：摘要目的研究长链非编码RNA(long non-coding RNA，lcnRNA) INK4基因座中反义非编码RNA(antisense noncoding RNA in the INK4 locus，ANRIL)/miR-122-5p轴在高糖诱导足细胞炎症及氧化应激中的作用及机制。方法培养足细胞MPC5细胞株并分为以下五组：低糖组、高糖组、si-NC＋低糖组、si-NC＋高糖组和si-LncRNA ANRIL＋高糖组。检测LncRNA ANRIL、miR-122-5p、核因子-κB(nuclear factor-κB, NF-κB)、NADPH氧化酶4(NADPH oxidase 4, NOX4)的表达水平及白细胞介素(interleukin, IL)-1β、IL-6、瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor -α，TNF-α)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)、8-羟脱氧鸟苷(8-hydroxydeoxyguanosine, 8-OHdG)的含量，验证LncRNA ANRIL与miR-122-5p的靶向作用。结果高糖组MPC5细胞中LncRNA ANRIL的表达水平明显高于低糖组，miR-122-5p的表达水平明显低于低糖组，差异有统计学意义[(1.83±0.24)比(1.00±0.17)，(0.63±0.08)比(1.00±0.13)，t值分别为6.31、5.42，P值均<0.05]。miR-122-5p组MPC5细胞中野生型LncRNA ANRIL报告基因的荧光活力低于miR-NC组[(0.50±0.09)比(0.97±0.15)，t＝5.73，P<0.001)]，突变型LncRNA ANRIL报告基因的荧光活力与miR-NC组比较差异无统计学意义(P>0.05)。si-NC＋高糖组MPC5细胞中LncRNA ANRIL的表达水平明显高于si-NC＋低糖组和si-LncRNA ANRIL＋高糖组，miR-122-5p的表达水平明显低于si-NC＋低糖组和si-LncRNA ANRIL＋高糖组，差异均有统计学意义[(1.89±0.25)比(1.00±0.14)比(0.89±0.12)，(0.58±0.07)比(1.00±0.15)比(0.92±0.12)，F值分别为13.92、14.75，P值均<0.001)]。si-NC＋高糖组培养基中IL-1β、IL-6、TNF-α的含量明显高于si-NC＋低糖组和si-LncRNA ANRIL＋高糖组，差异均有统计学意义[ng/mL：(3.11±0.85)比(1.09±0.21)比(1.46±0.26)，pg/mL：( 91.38±13.27)比(59.39±9.39)比(70.47±11.34)，ng/mL：( 4.49±0.81)比(1.85±0.32)比(2.52±0.45 )，F值分别为15.68、11.38、16.58，P值均<0.001]。si-NC＋高糖组培养基中MDA、8-OHdG的含量明显高于si-NC＋低糖组和si-LncRNA ANRIL＋高糖组，差异均有统计学意义[nmol/L：(9.17±1.52)比(3.28±0.74)比(4.67±0.93)，ng/mL：( 2.74±0.42)比(0.91±0.16)比(1.45±0.29 )，F值分别为18.39、16.58，P值均<0.001]。结论LncRNA ANRIL靶向miR-122-5p并促进高糖诱导足细胞发生炎症及氧化应激反应。

简介：摘要目的探讨血清miR-128-3p在脓毒症并发急性肾损伤(AKI)患儿中的表达及在其预后判断中的价值。方法选取2018年1月至2020年6月本院收治的脓毒症并发AKI患儿120例，根据其28 d的生存情况分为生存组(82例)和死亡组(38例)，检测两组的血清miR-128-3p、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)及肾损伤分子-1(KIM-1)水平。应用多因素logistic回归分析脓毒症并发AKI患儿发生死亡的危险因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-128-3p、NGAL及KIM-1水平判断脓毒症并发AKI患儿死亡的价值。结果死亡组的血清miR-128-3p、NGAL及KIM-1水平均明显高于生存组(均P<0.001)。多因素logistic回归分析显示，血清miR-128-3p、NGAL及KIM-1水平升高是脓毒症并发AKI患儿死亡的独立危险因素(均P<0.001)。ROC曲线分析显示，血清miR-128-3p、NGAL及KIM-1三项联合判断脓毒症并发AKI患儿死亡的ROC曲线下面积(0.950，95%CI：0.894~0.993)最大，其灵敏度为96.2%，特异度为90.4%。结论脓毒症并发AKI患儿的血清miR-128-3p表达水平明显升高，联合NGAL、KIM-1检测有助于判断AKI患儿的预后。

简介：摘要：目的：分析P16和Ki-67免疫组化检测在宫颈上皮内病变病理诊断中的应用价值。方法：研究时间范围在2020年3月~2022年3月，在我院实施宫颈活检的100例患者为研究对象，其活检标本为100份，结果：P16以及Ki67均随着CIN的等级增加而增高。结论：P16和Ki67在一定程度上反映患者宫颈上皮内病变的情况，还可以对其等级进行有效区分，对患者的病变程度进行预测，也为临床治疗提供辅助数据。

简介：【摘要】目的：分析在宫颈上皮内病变病理诊断中P16和Ki-67免疫组化检测的应用价值。方法：纳入对象为在本院开展宫颈活检的患者（n=100），纳节点2019.5~2021.5月收治。回顾、分析患者的相关资料，所有患者均开展P16和Ki-67免疫组化检测，分析P16和Ki-67阳性情况。结果：P16在CINⅠ期、Ⅱ期、Ⅲ期的阳性率分别为49.9%、80.0%、100.0%；Ki-67在CINⅠ期、Ⅱ期、Ⅲ期的阳性率分别为76.3%、80.0%、100.0%。随着CIN分期的增加，P16和Ki-67阳性率也会不断增加（P0.05。结论：将P16和Ki-67免疫组化检测用在宫颈上皮内病变病理诊断中，具有显著的应用作用，其可以提高不同CIN分期的诊断准确性，值得推广。

简介：摘要目的探讨单泛素化组蛋白H2B（H2Bub）在食管癌组织中的表达及其与预后的相关性。方法选取2010年5月至2015年12月在山西省肿瘤医院行胸段食管癌根治术的患者75例，用免疫组织化学法检测食管癌及癌旁组织H2Bub蛋白的表达水平。分析H2Bub表达水平与患者临床病理特征的关系，采用Kaplan-Meier法分析H2Bub表达水平与生存的关系。结果食管癌及癌旁组织中H2Bub蛋白均阳性表达，但癌组织中无弱阳性表达者，癌旁组织中有弱阳性表达者；癌组织H2Bub强阳性表达率为84.0%（63/75），高于癌旁组织的22.7%（17/75）（χ2=34.68，P<0.001）。同癌旁组织相比，癌组织中64.0%（48/75）H2Bub表达上调，2.7%（2/75）表达下调。癌组织H2Bub较癌旁组织表达上调与患者性别、年龄、肿瘤长径、淋巴结是否转移、T分期均无关（均P>0.05），而低分化癌组织中H2Bub表达上调患者比例低于中分化和高分化癌组织[43.8%（7/16）比66.7%（34/51）、87.5%（7/8），P=0.037]。H2Bub中等阳性（12例）和强阳性（63例）表达的食管癌患者中位总生存时间分别为70个月（95% CI 45~95个月）、68个月（95% CI 54~82个月），差异无统计学意义（P=0.606）；癌组织H2Bub表达较癌旁组织上调的48例患者中，食管癌低分化组（7例）中位总生存时间短于高分化组（7例）及中分化组（34例）[36个月（95% CI 24~37个月）比68个月（95% CI 38~98个月）、68个月（95% CI 44~91个月）]，差异均有统计学意义（均P<0.05）。结论与癌旁组织相比，食管癌组织中H2Bub表达水平上调；低分化食管癌患者H2Bub表达水平上调明显，且预后差。

简介：摘要目的探讨Pixel 2 940 nm铒激光联合维生素B12治疗痤疮凹陷性瘢痕的疗效。方法2017年7月至2019年6月，河南省焦作市第二人民医院烧伤整形外科收治痤疮凹陷性瘢痕患者96例，根据随机数字表法分为两组各48例。对照组用常规磨削方法治疗，观察组用Pixel 2 940 nm铒激光联合维生素B12治疗，比较两组治疗效果、痤疮瘢痕权重评分(ECCA)、皮肤VISIA检测、不良反应。结果对照组治疗有效37例(77.08%)，低于观察组44例(91.67%)，两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。对照组ECCA评分不良反应发生率为18.75%(9/48)，毛孔和紫质两项指标分别为(32.25±8.41)分、(18.24±5.12)分，均高于观察组4.17%(2/48)、(28.24±7.52)分、(15.63±4.34)分；两组比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论Pixel 2 940 nm铒激光联合维生素B12治疗痤疮凹陷性瘢痕的疗效显著，不良反应少、安全性高、值得临床应用。

简介：摘要目的了解2017—2020年无锡市人腺病毒(human adenovirus，HAdV)的基因分型、流行特征及主要流行株的基因变异情况。方法使用实时荧光PCR技术检测2017—2020年哨点医院送检急性呼吸道感染标本，荧光PCR检测阳性标本经细胞分离培养，Hexon基因测序、分析，确定基因型别及变异。结果2017—2020年无锡市HAdV检出情况略有不同，总体在5~7月和11~次年1月份出现2个流行峰。病例主要为幼儿(1~3岁)，阳性标本占比为32.05%(75/234)。临床症状主要为发热占比为65.81%，其次是咳嗽占比为58.12%。检出HAdV有8个型别，分属3个亚属，HAdV-3已成为主要流行株，占比为47.18%(67/142)，其余HAdV-7 13.38%(19/142)，HAdV-55 7.75%(11/142)，HAdV-1 9.15%(13/142)，HAdV-2 9.15%(13/142)，HAdV-5 5.63%(8/142)，HAdV-6 2.11%(3/142)，HAdV-4 5.63%(8/142)。本地流行株HAdV-3与9株国内和国际(KX384958.1-USA)参考株比较，HAdV-3在进化过程中623位、938位出现氨基酸的突变。结论2017—2020年无锡市HAdV在5~7月和11~次年1月出现2个流行峰，病例主要为1~3岁的幼儿，HAdV-3已逐渐成为优势流行株，在压力选择和进化过程中出现2个高频突变位点。

简介：摘要目的分析西北地区肝型肝豆状核变性(Wilson’s disease，WD)患儿的临床特征与ATP7B基因变异情况。方法回顾分析75例肝型WD患儿的临床及ATP7B基因变异的特点。结果75例患儿中，症状前患儿4例，表现为单纯转氨酶升高者59例，急慢性肝病者12例；ATP7B基因纯合变异9例，复合杂合变异64例，杂合变异2例；共检测出49个变异，高发变异位点为c.2333G>T(p.Arg778Leu)、c.2621C>T(p.Ala874Val)及c.2975C>T(Pro992Leu)，等位基因频率分别为28.7%、12.7%及9.3%；检出了c.1908dupC(p.Asn637Glnfs*118)、c.4179_4180insC(p.Pro1394Profs*15)、c.1604A>G(p.Glu535Gly)、c.2278C>T(p.Pro760Ser)、c.3008C>A(p.Ala1003Glu)及c.3532A>C(p.Thr1178Pro)6个新变异，除c.1604A>G(p.Glu535Gly)为临床意义不明确变异外，余均为可能致病性变异。儿童肝型WD的基因型-表型间无明显相关性。结论西北地区肝型WD患儿常见ATP7B变异类型为c.2333G>T(p.Arg778Leu)、c.2621C>T(p.Ala874Val)及c.2975C>T(p.Pro992Leu)，基因型-表型间无明显相关性。

简介：摘要本文报道了1例糖原累积病Ⅰa型患者，病程中出现双下肢麻木无力、步态不稳、双足踩棉花感，检查提示周围神经病变，病因考虑维生素B12缺乏性周围神经病变，经过甲钴胺治疗后症状逐渐缓解。提示对于周围神经病变患者，应当将维生素B12缺乏作为鉴别诊断之一。糖原累积病Ⅰa型是一种罕见的常染色体隐性遗传性疾病，患者常采用以生玉米淀粉为基础的饮食治疗，应当合理膳食，注意保证维生素和微量元素的均衡摄入，积极预防维生素B12缺乏等情况的发生。

简介：摘要目的探讨多黏菌素B联合替加环素治疗泛耐药肺炎克雷伯菌（PDR-KP）所致肺炎的临床疗效及安全性。方法回顾性分析2018年9月至2021年8月北京朝阳中西医结合急诊抢救中心神经重症医学科收治的因PDR-KP所致肺炎而使用多黏菌素B联合替加环素治疗的71例患者临床资料，根据治疗前、治疗第7天、治疗结束时患者临床症状及实验室等指标变化，评估多黏菌素B联合替加环素治疗的临床总有效率、细菌清除率和安全性。结果71例患者的治疗时间为8~14 d，均数为11 d。多黏菌素B联合替加环素治疗后，大部分患者的症状、体征、实验室检查及胸部CT检查结果显著改善。治疗第7天，有37例患者临床治疗有效，总有效率为52.1%（37/71）；有41例获得细菌学清除，细菌清除率为57.7%（41/71）。治疗结束时，有51例患者临床治疗有效，总有效率为71.8%（51/71）；56例获得细菌学清除，细菌清除率为78.9%（56/71）。与治疗第7天相比，治疗结束时患者的总有效率和细菌清除率均明显升高，差异均具有统计学意义（χ2=5.86、7.32，P=0.016、0.007）。治疗期间有39.4%（28/71）的患者出现皮肤色素沉着。结论多黏菌素B联合替加环素可尝试作为PDR-KP所致肺炎的治疗选择，但尚需要更可靠的临床证据。

简介：摘要目的探讨重组卡介苗(BCG)的抗膀胱癌作用，评估膀胱内灌注重组BCG对大鼠生存的影响。方法构建稳定表达白细胞介素(IL)-15和Ag85B的重组BCG菌株(BCG-IL-15-Ag85B)，建立大鼠膀胱癌模型，分为BCG-IL-15-Ag85B灌注组，BCG灌注组和磷酸盐缓冲液(PBS)灌注组。观察并记录各组大鼠的生存情况，测量各组大鼠肿瘤的体积，以评估抗肿瘤效果；流式细胞术检测不同组别膀胱组织内嗜中性粒细胞和淋巴细胞的水平，荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测不同组别中巨噬细胞炎症蛋白1α(MIP1α)和MIP2 mRNA的表达水平。组间比较采用独立样本t检验。结果成功构建可表达IL-15融合蛋白的重组BCG，BCG-IL-15-Ag85B可显著延长荷瘤大鼠的生存时间以及抑制肿瘤的生长。BCG-IL-15-Ag85B灌注组(607.33±18.45)的中性粒细胞数目明显高于BCG灌注组(405.00±24.64)和PBS灌注组(204.67±20.55)，差异有统计学意义(t＝11.386，P<0.05)；BCG-IL-15-Ag85B灌注组(114.67±15.82)的淋巴细胞数目明显高于BCG灌注组(50.00±10.00)和PBS灌注组(17.67±2.52)，差异有统计学意义(t＝5.984，P<0.05)。BCG-IL-15-Ag85B灌注组(2.78±0.57)的MIP1α mRNA的表达水平明显高于BCG灌注组(1.76±0.13)和PBS灌注组(1.00±0.06)，差异有统计学意义(t＝5.327，P<0.05)。BCG-IL-15-Ag85B灌注组(2.96±0.62)的MIP2 mRNA的表达水平明显高于BCG灌注组(1.88±0.16)和PBS灌注组(1.00±0.07)，差异有统计学意义(t＝5.674，P<0.05)。结论膀胱内灌注BCG-IL-15-Ag85B增强了膀胱组织的免疫应答，提高了抗肿瘤效果，为膀胱癌的临床治疗提供新思路和新策略。

简介：摘要目的评价瞬时受体电位香草酸1(TRPV1)/核因子-κB (NF-κB)信号通路在右美托咪定减轻大鼠呼吸机相关性肺损伤(VILI)中的作用。方法清洁级健康雄性SD大鼠100只，体重270~320 g，4~5月龄，采用随机数字表法分为5组(n＝20)：对照组(C组)、VILI组(V组)、AMG9810组(A组)、右美托咪定组(D组)和右美托咪定＋RTX组(DR组)。采用潮气量40 ml/kg机械通气4 h的方法制备VILI模型。A组机械通气前1 h腹腔注射TRPV1抑制剂AMG9810 30 mg/kg；D组与DR组机械通气前经20 min静脉输注右美托咪定5.0 μg/kg，机械通气期间以5.0 μg·kg-1·h-1的速率静脉输注；DR组机械通气前连续3 d每天腹腔注射TRPV1激动剂RTX 70 μg/kg。机械通气4 h时，检测支气管肺泡灌洗液(BALF)IL-1β、TNF-α和IL-6浓度，测定氧合指数(OI)和肺湿重/干重(W/D)比值，观察肺组织病理学结果，行肺损伤评分。Western blot法检测肺组织TRPV1和NF-κB的表达，RT-PCR法检测TRPV1 mRNA和NF-κB mRNA的表达。结果与C组比较，V组BALF IL-1β、TNF-α和IL-6浓度升高，OI降低，W/D比值和肺损伤评分升高，TRPV1、NF-κB及其mRNA表达上调(P<0.05)；与V组比较，A组、D组、DR组BALF IL-1β、TNF-α和IL-6浓度降低，OI升高，W/D比值和肺损伤评分降低，TRPV1、NF-κB及其mRNA表达下调(P<0.05)；与D组比较，DR组BALF IL-1β、TNF-α和IL-6浓度升高，OI降低，W/D比值和肺损伤评分升高，TRPV1、NF-κB及其mRNA表达上调(P<0.05)。结论右美托咪定减轻大鼠VILI的部分机制与抑制TRPV1/NF-κB信号通路激活，抑制肺组织炎症反应有关。

简介：摘要弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma，DLBCL)是我国常见的成人非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin lymphoma，NHL)之一，随着以利妥昔单抗为基础的联合化疗方案的应用，使患者的缓解率及生存期有了明显的改善，但对于复发/难治性DLBCL患者而言则获益不佳，且预后较差。近些年，应用嵌合抗原受体T细胞免疫疗法(chimeric antigen receptor T-cell immunotherapy，CAR-T)治疗淋巴瘤，改善了淋巴瘤患者的生存状况，为CAR-T治疗复发/难治性DLBCL奠定基础。文章就CAR-T疗法在复发/难治性DLBCL中的研究进展进行概述。