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简介：摘要目的探讨肾细胞癌(RCC)血清p53、转生长因子-β1(TGF-β1)、血管内皮生长因子(VEGF)表达水平和病理分期的相关性分析。方法选取2018年1月至2019年12月期间在空军军医大学唐都医院确诊的RCC患者101例，患者于清晨空腹抽取外周静脉血5 mL，采用酶联免疫吸附法测定血清p53、TGF-β1、VEGF表达水平。结果随着病理学分级的提高，血清中p53和VEGF水平指标显著升高，差异有统计学意义(P<0.05)，病理学分级Ⅰ级的TGF-β1水平较Ⅲ级低，差异有统计学意义(P<0.05)；随着临床分期的提高，血清中p53、TGF-β1、VEGF水平指标均显著升高，差异有统计学意义(P<0.05)；经Pearson检验发现，RCC患者病理学分级与血清中p53、VEGF表达水平均呈正相关(P<0.05)，临床分期与血清中p53、TGF-β1、VEGF表达水平均呈正相关(P<0.05)。结论p53、VEGF在RCC患者血清中的水平表达与病理学分级和临床分期均呈正相关，p53、VEGF可作为判断RCC的预后指标。

简介：摘要目的探讨miR-424-5p对宫颈癌放射敏感性的影响及作用机制。方法RT-qPCR检测miR-424-5p在宫颈癌组织和Hela细胞中表达；流式细胞术检测Hela细胞凋亡率；CCK-8检测Hela细胞增殖活性；蛋白印迹法检测Hela细胞中蛋白表达水平。结果相较于正常组织和细胞，宫颈癌组织和Hela细胞中miR-424-5p表达量降低(1.03∶0.88，P<0.01；1.00∶0.75，P<0.001)。过表达miR-424-5p会抑制经放射处理后Hela细胞增殖活性(P<0.01)，同时增加放射处理后Hela细胞凋亡率(24.82%∶49.94%，P<0.001)。过表达miR-424-5p会抑制HMGA1表达(1.01∶0.63，P<0.01)，miR-424-5p会直接作用HMGA1进而影响宫颈癌放射敏感性。结论miR-424-5p通过直接靶向HMGA1提高宫颈癌放射敏感性。

简介：摘要目的探讨谷胱甘肽S-转移酶P1(GSTP1)对小鼠路易斯肺癌细胞放射敏感性的调控作用。方法使用shRNA干扰表达慢病毒和阴性对照病毒分别感染路易斯肺癌(LLC)细胞，并筛选出稳转株；应用RT-PCR和蛋白免疫印迹(WB)法检测LLC细胞GSTP1 mRNA和蛋白质表达水平，验证敲低效果；使用细胞增殖检测(CCK-8)法检测照射后细胞活力；使用克隆形成实验检测照射后细胞克隆形成能力；使用流式细胞术检测照射后细胞的凋亡水平。构建荷瘤小鼠并进行照射，检测照射后肿瘤体积变化；TUNEL染色检测照射后肿瘤细胞凋亡水平；免疫荧光检测照射后肿瘤内CD4+CD8+T细胞数量。结果RT-PCR和WB结果显示shRNA慢病毒干扰后，GSTP1的mRNA和蛋白表达水平均明显下降。下调GSTP1能降低照射后细胞活力及克隆形成能力，并提高照射后细胞凋亡率。GSTP1敲低组荷瘤小鼠照射后肿瘤体积明显小于对照组，而肿瘤凋亡水平高于对照组，肿瘤内浸润CD4+CD8+T细胞数量亦高于对照组。结论下调GSTP1能够显著增加LLC细胞的放射敏感性，并增加肿瘤组织中淋巴细胞的浸润。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA（lncRNA）CDKN2B-AS1靶向miR-98-5p对肺癌A549细胞增殖、侵袭的影响。方法体外培养肺癌A549细胞，分为对照组、pcDNA组（转染pcDNA）、CDKN2B-AS1组（转染pcDNA CDKN2B-AS1）和双转染组（转染pcDNA CDKN2B-AS1、pcDNA miR-98-5p）。检测A549细胞中CD-KN2B-AS1、miR-98-5p表达及PCNA、MMP-9蛋白表达，检测A549细胞活性、克隆数、克隆形成率、侵袭细胞数。结果与pcDNA组相比，CDKN2B-AS1组A549细胞中CDKN2B-AS1表达水平[（2.14±0.14）vs （1.03±0.10）]、各时间点的细胞OD值、细胞克隆数[（314.60±18.13）个比（220.08±12.46）个]、克隆形成率[（85.81±3.06）% vs （60.03±2.85）%]、侵袭细胞数[（233.30±18.98）个vs （140.84±12.30）个]及细胞中PCNA[（0.78±0.08）vs （0.48±0.07）]、MMP-9蛋白表达[（0.75±0.06）vs （0.38±0.06）]水平显著升高（均P<0.05），miR-98-5p表达水平[（0.23±0.03）vs （0.99±0.09）]显著降低（P<0.05）；与CDKN2B-AS1组相比，双转染组A549细胞中CD-KN2B-AS1表达水平差异无统计学意义（P>0.05），miR-98-5p表达水平显著升高（P<0.05），各时间点的细胞OD值、细胞克隆数、克隆形成率、侵袭细胞数及细胞中PCNA、MMP-9蛋白表达水平均显著降低（P<0.05）。结论lncRNA CDKN2B-AS1通过靶向抑制miR-98-5p表达对肺癌A549细胞增殖、侵袭具有促进作用。

简介：摘要目的研究微RNA-873-5p(miR-873-5p)靶向调控电压依赖性阴离子通道1(VDAC1)对大鼠癫痫样神经细胞的影响及作用机制。方法通过无镁培养基诱导构建大鼠癫痫样海马神经细胞模型，将大鼠神经细胞分为对照组、模型组、miR-con组及miR-873-5p组。对照组采用正常培养大鼠神经细胞；模型组采用低镁细胞外液培养大鼠神经细胞；miR-con组采用低镁细胞外液培养大鼠神经细胞并转染miR-con；miR-873-5p组采用低镁细胞外液培养大鼠神经细胞并转染miR-873-5p。采用荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测各组神经细胞miR-873-5p及VDAC1 mRNA表达；采用Western blot技术检测神经细胞中VDAC1、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、活化的含半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved caspase-3)含量；采用DCFH-DA荧光探针检测神经细胞活性氧(ROS)水平；采用硫代巴比妥酸法检测神经细胞丙二醛(MDA)含量；采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测神经细胞谷胱甘肽(GSH)含量；采用流式细胞术检测各组神经细胞凋亡情况；采用双荧光素酶报告基因法验证miR-873-5p对VDAC1的靶向调控作用。结果与对照组比较，模型组神经细胞中miR-873-5p表达显著降低(P<0.05)，VDAC1表达显著升高(P<0.05)，Bcl-2表达下调(P<0.05)，Bax及Cleaved caspase-3表达上调(P<0.05)，GSH及MDA含量显著降低(P<0.05)，而ROS水平显著升高(P<0.05)，细胞凋亡率显著升高(P<0.05)；与miR-con组比较，miR-873-5p组神经细胞中Bcl-2表达明显上调(P<0.05)，Bax及Cleaved caspase-3表达明显下调(P<0.05)，GSH及MDA含量显著升高(P<0.05)，ROS水平显著降低(P<0.05)，细胞凋亡率明显降低(P<0.05)；双荧光素酶报告基因实验表明miR-873-5p能抑制VDAC1表达(P<0.05)。结论miR-873-5p能通过负向调控靶基因VDAC1表达而减少神经细胞凋亡，同时还能抑制神经细胞氧化应激反应，对受损神经细胞具有保护作用。

简介：摘要目的探讨miR-145-5p对胶质细胞源性神经营养因子受体（glial cell-derived neurotrophic factor receptor，GFR）α1表达的调控及其与先天性巨结肠（Hirschsprung's disease，HSCR）的关系。方法选择2016年3月至2018年6月湖南省儿童医院新生儿外科收治的HSCR患儿巨结肠根治术后痉挛段结肠组织为HSCR组，同期新生儿坏死性小肠结肠炎（necrotizing enterocolitis，NEC）患儿手术切除坏死肠段两端正常结肠组织为NEC组作为对照，进行前瞻性研究。采用实时定量聚合酶链反应检测两组结肠组织内miR-145-5p及GFRα1表达水平，荧光素酶活性实验检测GFRα1与miR-145-5p的关系；采用实时定量聚合酶链反应及蛋白免疫印迹检测SH-SY5Y细胞转染miR-145-5p模拟物后miR-145-5p及GFRα1表达水平，CCK8法检测转染后SH-SY5Y细胞活力。结果HSCR组24例，NEC组18例。HSCR组miR-145-5p mRNA水平明显高于NEC组［（5.62±2.04）比（1.11±0.48）］，GFRα1 mRNA水平明显低于NEC组［（0.39±0.18）比（1.00±0.37）］，差异有统计学意义（P<0.01），且miR-145-5p表达水平与GFRα1表达水平成负相关（r=-0.676，P<0.01）。荧光素酶活性实验证实GFRα1为miR-145-5p的靶基因。SH-SY5Y细胞转染miR-145-5p模拟物后GFRα1的表达水平明显降低（P<0.01），SH-SY5Y细胞活力下降。结论GFRα1是miR-145-5p的靶基因，HSCR患儿病变结肠组织中GFRα1低表达可能与miR-145-5p高表达有关。

简介：摘要目的观察芍药内酯苷(AF)对白细胞介素(IL)-1β诱导软骨细胞损伤的保护作用，并探讨机制是否与调控微小RNA(miR)-149-5p/Wnt1诱导信号通路蛋白1(WISP1)通路有关。方法分离培养远交群(SD)大鼠膝关节软骨细胞，采用10 μg/L的IL-1β建立软骨细胞损伤模型。根据处理方法不同将软骨细胞分为对照(Con)、IL-1β、IL-1β+AF-L、IL-1β+AF-M、IL-1β+AF-H、IL-1β+miR-NC、IL-1β+miR-149-5p、IL-1β+si-NC、IL-1β+si-WISP1、IL-1β+AF+anti-miR-NC、IL-1β+AF+anti-miR-149-5p组。酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞上清中IL-6、干扰素-γ(IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量；流式细胞术和蛋白质印记(Western blot)用于分析细胞凋亡和WISP1蛋白表达；实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-149-5p和WISP1 mRNA表达。双荧光素酶报告实验和Western blot验证miR-149-5p对WISP1的靶向作用。两组间比较采用独立样本t检验，多组间比较采用单因素方差分析和SNK-q检验。结果IL-1β组软骨细胞上清液中IL-6(6.11±0.61比2.54±0.25，q＝26.072，P<0.05)、IFN-γ(53.62±5.33比8.14±0.82，q＝44.989，P<0.05)和TNF-α含量(29.54±2.71比4.21±0.42，q＝44.463，P<0.05)高于Con组，细胞凋亡率(28.65±2.71比8.23±0.81，q＝33.622，P<0.05)、WISP1表达(0.92±0.08比0.45±0.04，q＝22.873，P<0.05)高于Con组，miR-149-5p表达(0.44±0.04比1.00±0.05，q＝30.571，P<0.05)低于Con组。IL-1β+AF-L、IL-1β+AF-M、IL-1β+AF-H组软骨细胞上清液中IL-6(5.03±0.49、3.95±0.31、2.86±0.27比6.11±0.61，q＝7.887、14.775、23.735，P<0.05)、IFN-γ(37.19±3.21、24.58±2.44、13.54±1.32比53.62±5.33，q＝16.063、28.391、39.184，P<0.05)和TNF-α(21.65±2.17、12.64±1.28、6.95±0.63，q＝14.014、30.017、40.123，P<0.05)含量低于IL-1β组，细胞凋亡率(22.47±2.23、16.98±1.54、10.54±1.12比28.65±2.71，q＝10.175、19.215、29.818，P<0.05)、WISP1表达(0.78±0.07、0.66±0.06、0.53±0.05比0.92±0.08，q＝6.813、12.653、18.980，P<0.05)低于IL-1β组，miR-149-5p表达高于IL-1β组。IL-1β+miR-149-5p组软骨细胞上清液中IL-6(3.21±0.31比6.19±0.61，t＝13.065，P<0.05)、IFN-γ(16.47±1.68比54.23±5.33，t＝20.270)和TNF-α含量(9.36±0.94比28.46±2.81，t＝19.338，P<0.05)低于IL-1β+miR-NC组，细胞凋亡率(12.33±1.25比29.65±2.41，t＝19.139，P<0.05)低于IL-1β+miR-NC组。IL-1β+si-WISP1组软骨细胞上清液中IL-6(3.41±0.34比6.22±0.58，t＝12.539，P<0.05)、IFN-γ(17.23±1.72比55.12±5.41，t＝20.023，P<0.05)和TNF-α(10.33±1.08比27.65±2.74，t＝17.642，P<0.05)含量显著低于IL-1β+si-NC组，细胞凋亡率(13.54±1.47比28.61±2.73，t＝11.678，P<0.05)低于IL-1β+si-NC组。miR-149-5p与WISP1直接结合。IL-1β+AF+anti-miR-149-5p组软骨细胞上清液中IL-6(5.84±0.58比2.71±0.26，q＝20.382，P<0.05)、IFN-γ(46.22±4.31比13.98±1.37，q＝27.042，P<0.05)和TNF-α(25.32±2.51比6.77±0.67，q＝29.011，P<0.05)含量高于IL-1β+AF+anti-miR-NC组，细胞凋亡率(21.41±2.33比9.68±0.96，q＝17.964，P<0.05)高于IL-1β+AF+anti-miR-NC组。结论芍药内酯苷通过调控miR-149-5p/WISP1通路对IL-1β诱导的软骨细胞损伤具有保护作用。

简介：摘要目的探讨依托咪酯对脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）诱导心肌细胞炎症、凋亡的影响及其可能作用机制。方法将体外培养的大鼠心肌细胞H9c2采用随机数字表法分为5组（每组3个复孔，每组实验重复3次）：正常对照组（Con组）、脂多糖组（LPS组）、脂多糖+20 μmol/L依托咪酯组（E-L组）、脂多糖+50 μmol/L依托咪酯组（E-M组）、脂多糖+100 μmol/L依托咪酯组（E-H组）。Con组正常培养，LPS组加入含浓度1 mg/L LPS的杜氏改良培养基（dulbecco's modified eagle medium, DMEM）培养24 h，E-L组、E-M组、E-H组分别使用不同浓度（20、50、100 μmol/L）依托咪酯与1 mg/L LPS的DMEM培养液培养24 h。再次选取正常培养的心肌细胞采用随机数字表法分为两组（每组3个复孔，每组实验重复3次）：脂多糖+100 μmol/L依托咪酯+anti-微RNA（microRNA, miR）-NC组（anti-miR-NC组）和脂多糖+100 μmol/L依托咪酯+anti-miR-214-3p组（anti-miR-214-3p组）。anti-miR-NC组和anti-miR-214-3p组分别将anti-miR-NC和anti-miR-214-3p转染至心肌细胞，加入含有100 μmol/L依托咪酯与1 mg/L LPS的DMEM培养液培养24 h。ELISA法检测TNF-α、IL-6、IL-1β水平，流式细胞术检测细胞凋亡率，实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR, qRT-PCR）检测miR-214-3p与转导素β1X连锁受体蛋白质1（transducin β-like 1X related protein 1, TBL1XR1）的表达量，双荧光素酶报告实验验证miR-214-3p与TBL1XR1的靶向调控关系，Western blot法检测TBL1XR1、B淋巴细胞瘤-2（B-cell lymphoma-2, Bcl-2）相关蛋白（Bcl-2-associated X protein, Bax）、Bcl-2的表达量。结果与Con组比较，LPS组TNF-α、IL-6、IL-1β、Bax水平以及细胞凋亡率、TBL1XR1 mRNA表达升高（P<0.05），Bcl-2蛋白水平和miR-214-3p表达降低（P<0.05）；与LPS组比较，E-L组、E-M组、E-H组TNF-α、IL-6、IL-1β、Bax水平以及细胞凋亡率、TBL1XR1 mRNA表达呈剂量依赖性降低（P<0.05），Bcl-2蛋白水平和miR-214-3p表达呈剂量依赖性升高（P<0.05）；E-L组、E-M组、E-H组两两比较差异有统计学意义（P<0.05）。miR-214-3p可负向调控TBL1XR1的表达（P<0.05）。与anti-miR-NC组比较，anti-miR-214-3p组TNF-α、IL-6、IL-1β、Bax水平以及细胞凋亡率升高（P<0.05），Bcl-2蛋白水平降低（P<0.05）。结论依托咪酯可通过调控miR-214-3p/TBL1XR1分子轴从而抑制LPS诱导的心肌细胞炎症及凋亡。

简介：摘要目的探讨左西孟旦（levosimendan，Levo）对冠状动脉微栓塞（coronary microembolization, CME）后心肌损伤和LOX-1/p38 MAPK信号通路的影响。方法采用随机数字表法将24只巴马小型猪随机分为假手术组（Sham组）、CME组、CME+左西孟旦预治疗+对照腺相关病毒转染组（CME+Levo+NC组）及CME+左西孟旦预治疗+ LOX-1过表达腺相关病毒转染组（CME+Levo+LOX-1组），每组6只。经冠脉介入法于前降支注射栓塞微球构建CME模型；Sham组则注射等量生理盐水代替。CME+Levo+NC组和CME+Levo+LOX-1组于造模前2周分别转染对照病毒和LOX-1过表达病毒，并均于造模前24 h开始持续静滴左西孟旦。心脏超声检测心功能指标；苏木精-伊红（HE）染色和苏木精碱性复红-苦味酸（HBFP）染色分别用于观察心肌组织病理改变和心肌微梗死区域；酶联免疫吸附测定（ELISA）用于检测血清肌钙蛋白I（cTnI）；脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（TUNLE）检测心肌细胞凋亡率；免疫荧光观察心肌组织LOX-1、Bcl-2、Bax、Caspase-3 p12和p-p38 MAPK蛋白表达情况。多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验。以P<0.05为差异有统计学意义。结果⑴与Sham组比较，CME组小型猪左心室射血分数（LVEF） [（69.73±4.79）% vs （47.18±2.33）%，P<0.05]、左心室短轴缩短率（LVFS） [（42.47±2.54）% vs （21.43±1.76）%，P<0.05]、心输出量（CO）[（4.42±0.27）L/min vs （2.57±0.17）L/min，P<0.05]均显著下降，而左心室舒张期末径（LVEDd）[（32.37±1.33）mm vs （41.21±1.86）mm，P<0.05]显著增加，心肌微梗死面积占比[（3.73±0.87）% vs （20.72±2.49）%，P<0.05]显著增加，血清cTnI水平[（51.92±16.62）pg/mL vs （236.80±19.56）pg/mL，P<0.05]显著升高，心肌细胞凋亡率[（1.15±0.47）% vs （14.15±3.24）%，P<0.05]显著升高，心肌组织Bax、Caspase-3 p12、LOX-1和p-p38 MAPK蛋白表达明显上调（均P<0.05），Bcl-2蛋白表达明显下调（P<0.05）。⑵与CME组比较，CME+Levo+NC组小型猪LVEF[（47.18±2.33）% vs （55.48±3.92）%，P<0.05]、LVFS[（21.43±1.76）% vs （32.02±1.75）%，P<0.05]、CO[（2.57±0.17）L/min vs （3.45±0.25）L/min，P<0.05]均显著升高，而LVEDd[（41.21±1.86）mm vs （36.78±1.56）mm，P<0.05]显著下降，心肌微梗死面积占比[（20.72±2.49）% vs（11.63±3.12）%，P<0.05]显著减小，血清cTnI水平[（236.80±19.56）pg/mL vs （157.40±15.13）pg/mL，P<0.05]显著降低，心肌细胞凋亡率[（14.15±3.24）% vs （8.33±1.28）%，P<0.05]显著下降，心肌组织Bax、Caspase-3 p12、LOX-1和p-p38 MAPK蛋白表达明显下调（均P<0.05），Bcl-2蛋白表达明显上调（P<0.05）。⑶与CME+Levo+NC组比较，CME+Levo+LOX-1组小型猪LVEF[（55.48±3.92）% vs（48.52±1.69）%，P<0.05]、LVFS[（32.02±1.75）% vs （23.80±2.51）%，P<0.05]、CO[（3.45±0.25）L/min vs （4.25±0.23）L/min，P<0.05]均显著降低，而LVEDd[（36.78±1.56）mm vs （41.12±1.57）mm，P<0.05]显著增加，心肌微梗死面积占比[（11.63±3.12）% vs （18.93±1.58）%，P<0.05]显著增加，血清cTnI水平[（157.40±15.13）pg/mL vs （244.40±15.97）pg/mL，P<0.05]显著升高，心肌细胞凋亡率[（8.33±1.28）% vs （12.28±1.93）%，P<0.05]显著增加，心肌组织Bax、Caspase-3 p12、LOX-1和p-p38 MAPK蛋白表达明显上调（均P<0.05），Bcl-2蛋白表达明显下调（P<0.05）。结论左西孟旦可通过抑制LOX-1/p38 MAPK信号通路介导的心肌细胞凋亡而减轻CME后心肌损伤。

简介：摘要目的探讨微小RNA(miR)-454-3p在结直肠癌细胞增殖和侵袭中的作用及其可能分子学机制。方法选取2019年6月1日至2019年8月31日于郑州大学第一附属医院原发性结直肠癌的患者19例肿瘤组织及其对应的癌旁组织标本。应用应用荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测样本中miR-454-3p的表达水平。通过细胞计数试剂盒(CCK-8)和Transwell实验评估结直肠癌细胞系CW-2、SW620细胞增殖和迁移侵袭能力。双荧光素酶报告基因验证miR-454-3p对下游靶基因BUB1蛋白的调控作用。组间采用配对样本t检验。结果与邻近正常组织比较，肿瘤组织中miR-454-3p表达上调(P<0.01)，通过CCK-8测定miR-454-3p-inhibitor细胞的增殖，发现其显著低于miR-454-3p-NC组细胞(P<0.05)。transwell实验表明，与对照细胞比较，转染miR-454-3p-inhibitor的CW-2、SW620细胞迁移更慢，侵袭性更小。双荧光素酶报告分析。结果显示，miR-454-3p模拟和BUB1-wt共转染组的荧光素酶活性相对低于BUB1-wt和NC共转染组，而BUB1-mut组没有观察到显著变化(P<0.01)。此外，RIP分析表明，与RIPIgG比较，转染miR-454-3p模拟物导致RIP-BUB1中BUB1的显著上调(P<0.01)。qRT-PCR实验表明结直肠组织中BUB1和miR-454-3p表达呈正相关(P<0.01)。结论miR-454-3p可通过靶向抑制BUB1基因的表达促进结直肠癌细胞的增殖和侵袭。

简介：摘要目的通过对脑海绵状血管瘤的一家系研究，了解家族性海绵状血管瘤的临床表现及致病基因突变位点。方法收集2019年4月入住河南科技大学第一附属医院神经内科的脑海绵状血管瘤的一家系的临床资料，根据临床表现、头颅磁共振成像（MRI）平扫+弥散加权成像+磁敏感加权成像表现和Zabramski分型标准诊断为脑海绵状血管瘤1型，对其进行基因测序。结果先证者为58岁女性，以头晕、头痛为主要症状，先证者女儿、儿子无临床症状，先证者孙女临床表现为脑出血、癫痫发作。先证者及其家系成员头颅MRI可见多发海绵状血管瘤，通过基因检测确定此家系为家族性脑海绵状畸形1型，与根据头颅MRI的表现和Zabramski分型结果一致，家族性脑海绵状畸形1型致病基因突变位点为KRIT1基因p.L436fs，目前尚无家族性脑海绵状血管瘤1型的该基因突变位点的完整报告。结论本研究发现了此家系中脑海绵状畸形1型，KRIT1 基因突变位点为p.L436fs，对家族性海绵状血管瘤的临床表现及致病基因突变位点有了更全面的了解。

简介：摘要目的探讨微小RNA(miRNA)-3126-5p抑制靶基因LIM和SH3蛋白1(LIM and SH3 protein 1，LASP1)对结直肠癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法采用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测结直肠癌细胞株(HT-29、HCT116、LoVo、SW480)和正常肠黏膜上皮细胞(HIEC)中miR-3126-5p的表达水平。选择表达水平最低的细胞株作为实验对象，实验分为2组：阴性对照组(转染miR-NC)和miR-3126-5p组(转染miR-3126-5p)，转染48 h后收集各组细胞。qRT-PCR法检测各组细胞miR-3126-5p的表达水平。采用MTS法和划痕愈合实验分别检测各组细胞的增殖水平和迁移能力。采用生物信息学软件microRNA.org和双荧光素酶报告基因实验分别预测和验证miR-3126-5p的靶基因。采用qRT-PCR和Western blot检测各组细胞靶基因的表达水平。计量资料以均数±标准差(Mean±SD)表示，两两组间比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析。结果与正常肠黏膜上皮细胞(HIEC)相比，结直肠癌细胞株miR-3126-5p的表达水平显著降低(P<0.05)，表达水平最低的细胞株是HCT116细胞(P<0.01)。阴性对照组和miR-3126-5p组HCT116细胞中miR-3126-5p的表达分别为(1.05±0.16)和(7.91±1.26)，差异具有统计学意义(t＝5.40, P<0.01)。与阴性对照组相比，miR-3126-5p组HCT116细胞的增殖能力显著降低(P<0.05)，迁移能力显著下降(t＝4.52, P<0.01)。microRNA.org显示miR-3126-5p与LIM和SH3蛋白1(LASP1)基因mRNA存在互补结合位点。miR-3126-5p和LASP1 mRNA能够靶向结合(P<0.01)。与阴性对照组相比，miR-3126-5p组HCT116细胞中LASP1基因表达显著降低(t＝4.56, P<0.01)。结论结直肠癌细胞株中miR-3126-5p呈低表达，miR-3126-5p能够通过抑制靶基因LASP1降低结直肠癌HCT116细胞的增殖和迁移能力。

简介：摘要H2O2刺激原代肝细胞构建细胞衰老模型，采用p53 siRNA、早衰蛋白（progerin）siRNA或胰岛素样生长因子（IGF）-1腺病毒载体转染原代肝细胞，检测β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数及p53、progerin的表达。结果显示，p53 siRNA和progerin siRNA敲低p53和progerin的表达，肝细胞衰老减轻；转染IGF-1腺病毒载体至原代肝细胞过表达IGF-1，β-半乳糖苷酶阳性细胞数减少，细胞核中p53和progerin表达下调、细胞质中p53表达上调；p53与progerin共沉淀及共定位于肝细胞核区减少。过表达IGF-1可通过抑制p53核转位，减少核内p53-progerin相互作用，减轻肝细胞衰老。

简介：摘要目的评价脊髓P2Y1嘌呤受体(P2Y1R)在瑞芬太尼诱发切口痛大鼠痛觉过敏形成中的作用及其与脊髓NMDA受体(NR)1和NR2B功能的关系。方法鞘内置管成功的健康成年雄性SD大鼠48只，10~12周龄，体重250~280 g，采用随机数字表法分为6组(n＝8)：对照组(C组)、P2Y1R拮抗剂MRS2179组(M组)、瑞芬太尼组(R组)、瑞芬太尼+MRS2179组(R+M组)、切口痛+瑞芬太尼组(I+R组)和切口痛+瑞芬太尼+MRS2179组(I+R+M组)。C组鞘内注射生理盐水10 μl，10 min后经尾静脉输注生理盐水0.1 ml·kg-1·min-1 60 min；M组鞘内注射MRS2179 0.6 nmol/kg，10 min后经尾静脉输注生理盐水0.1 ml·kg-1·min-1 60 min；R组鞘内注射生理盐水10 μl，10 min后经尾静脉输注瑞芬太尼1 μg·kg-1·min-1 60 min；R+M组鞘内注射MRS2179 0.6 nmol/kg，10 min后经尾静脉输注瑞芬太尼1 μg·kg-1·min-1 60 min；I+R组鞘内注射生理盐水10 μl，10 min后经尾静脉输注瑞芬太尼1 μg·kg-1·min-1 60 min，瑞芬太尼输注开始后10 min制备切口痛模型；I+R+M组鞘内注射MRS2179 0.6 nmol/kg，10 min后经尾静脉输注瑞芬太尼1 μg·kg-1·min-1 60 min，瑞芬太尼输注开始后10 min制备切口痛模型。分别于输注瑞芬太尼或生理盐水前24 h、输注停止后2、6、24和48 h时测定机械缩足反应阈(MWT)、热缩足潜伏期(TWL)和冷板抬足次数。最后一次痛阈测定结束后处死大鼠，取脊髓L4-6节段，采用Western blot法检测脊髓P2Y1R、磷酸化NR1(p-NR1)、NR1、磷酸化NR2B(p-NR2B)和NR2B表达，并计算p-NR1/NR1比值及p-NR2B/NR2B比值，采用RT-PCR法检测P2Y1R、NR1和NR2B的mRNA表达。结果与C组比较，R组MWT降低，TWL缩短，冷板抬足次数增加，脊髓P2Y1R及其mRNA、NR1及其mRNA、p-NR1、NR2B及其mRNA、p-NR2B表达上调，p-NR1/NR1比值和p-NR2B/NR2B比值升高(P<0.01)。与R组比较，R+M组MWT增加，TWL延长，冷板抬足次数减少，脊髓P2Y1R、p-NR1、NR1及其mRNA、p-NR2B、NR2B及其mRNA表达下调，p-NR1/NR1比值和p-NR2B/NR2B比值降低(P<0.05或0.01)；与I+R组比较，I+R+M组MWT增加，TWL延长，冷板抬足次数减少，脊髓P2Y1R、p-NR1、NR1及其mRNA、p-NR2B、NR2B及其mRNA表达下调，p-NR1/NR1比值和p-NR2B/NR2B比值降低(P<0.01)。结论脊髓P2Y1R可增强NR1和NR2B功能，该作用可能参与了瑞芬太尼诱发切口痛大鼠痛觉过敏的形成。

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