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  • 简介:产生免疫原性的残基都是位于蛋白表面的暴露残基,为了消除鼠抗体对人的免疫原性,利用表面再塑方法对本室克隆的鼠抗人纤维蛋白抗体链Fv片断进行了人源化分子设计。首先确定了鼠及人Fv表面残基,在此基础上分析了鼠与人Fv间表面残基的差异,将有差异的鼠表面残基换成人的。提出了残基最高频率人源化及最相似链人源化两种人源化方案。人源化后鼠抗人纤维蛋白抗体链Fv的结构经Profile-3D验证是合理的,置换的表面残基溶液可及性未变,且未影响CDRs的结构,应不会影响与纤维蛋白的亲和力,为鼠抗体人源化实验研究奠定了基础。

  • 标签: 单克隆抗体 人源化 表面再塑 分子设计
  • 简介:应用Pharmacia公司的重组噬菌体抗体系统,从经过人交联纤维蛋白特异抗原D二聚体(DD)免疫过的鼠脾细胞mRNA中构建出组合链抗体(ScFv)cDNA文库。文库cDNA克隆到噬菌粒载体pCANTAB5E,转化大肠杆菌TG1,得到2.5×105个氨苄抗性菌落。通过噬菌体表面呈现,用DD对表达的重组噬菌体链抗体文库进行三轮亲和富集获得一株特异抗DD的噬菌体链抗体(ScFvA11)。经Phage-ELISA鉴定,呈现在噬菌体表面的ScFvA11与DD结合的ELISA阳性滴度小于107tfu/ml,而与人纤维蛋白原结合的ELISA滴度大于1010tfu/ml,两者相差1000倍以上。表明ScFvA11具有较好的DD结合特异性。经序列分析,ScFvA11cDNA全长729bp,其中Vh基因354bp,编码118个氨基酸;Vl基因327bp,编码108个氨基酸;Vh与Vl之间为(Gly4Ser)315个氨基酸连接肽。

  • 标签: 单链抗体 噬菌体抗体库 纤维蛋白 D二聚体
  • 简介:用Biosym公司开发的计算机辅助分子设计系统模建了鼠抗人纤维蛋白抗体Fv片断的三维结构。Fv是由重链可变区(Vh)和轻链可变区(Vl)两个结构域组成的具有抗原结合能力的最小抗体片断。先分别模建了Vh和Vl两个结构域,然后搭建出Fv片断的整体三维结构,并对模建的结构进行了分子力学和动力学优化。对结构的合理性验证显示模建结构是合理的。本研究为鼠抗人纤维蛋白抗体Fv片断的人源化的分子设计打下了基础。

  • 标签: 计算机辅助分子设计 同源模建 抗体Fv片断
  • 简介:人工合成了芋螺毒素SO3的基因片段,通过链延伸方法获得了SO3的全长基因.在此基础上,将SO3基因插入到含抗大鼠转铁蛋白受体的链抗体基因的pTIG-Trx表达载体中,构建含抗大鼠转铁蛋白受体链抗体和SO3融合基因的重组表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)和Origmia(DE3)/DsbC并得到了表达,该融合蛋白主要以包涵体形式存在.为进一步研究芋螺毒素SO3跨血脑屏障转运和治疗作用奠定了基础.

  • 标签: 转铁蛋白受体 单链抗体 芋螺毒素SO3 血脑屏障 大鼠 融合蛋白
  • 简介:新课改为高中语文教学提出了新的要求,要求提倡高中语文学生自主学习能力的培养,因此,作为教师一定要充分调动学生的学习积极性和能力,让学生学会主动的探究语文知识,提高自己的综合素质,挖掘自身的潜能,让学生在不知不觉中获得分析问题解决问题的能力,获得更强的自主学习能力,对于快节奏的高中学习而言,如果每一个知识都要老师的讲解,那么语文学习将会十分艰难,所以,笔者现针对高中语文自主学习能力的提高和培养提出了以下意见建议.

  • 标签: 高中语文 自主学习 能力培养 方法探究
  • 简介:新的课程标准当中明确提出了'生物课程最重要的不是让学生多记住一个细胞结构,而是知道科学家如何解决现实生活中的问题,这将是学生终身受益的。'显然,按照过去'以教学为主,学生被动学习'的教学方法,是无法根本实现这样的教学目标的。随着新课程改革的推进,'科学探究'一词出现的频率几乎是最高的,倡导探究性学习,培养科学思维的品质对人的终身发展至关重要。因此,改变学生的学习方式,探究性学习是实现学习方式突破的主要途径。

  • 标签: 探究性学习 科学探究 培养学生 学习方式 新课程改革 课程标准
  • 简介:小组合作学习制度在班级管理中的运用过程中,是需要多种方式去实施,在实际情况下,尽快的调整管理的方法,小组合作学习的动力核心是竞争,小组合作学习的方法之所以先进并且能够促进班级管理,在于调动了学生的学习积极性,提高竞争意识,学生在小组中要展开竞争,然后小组之间要竞争,最后演变到班级竞争,从而实现良好班风的形成.

  • 标签: 班级管理 小组合作学习 竞争
  • 简介:在高中化学学习的过程中,有很多同学都会存在这样的问题,对于化学中的现象与问题,我们都有一定的认知与了解,但是在具体实践或者是考试应用上,却难以做出很好地解答.本文就从化学学科自身的特征以及学生的认知认知风格等方面来进行分析,希望能够是这种让学生“懂而不会”状况得到有效地解决.

  • 标签: 高中化学 认知 学习困难
  • 简介:生物是初中阶段重要的基础课程,是教学的重点.研究表明,初中生物教学实践中,注重学生学习兴趣的激发,往往可获得事半功倍的教学效果.鉴于此,本文对初中生物教学中如何激发学生的学习兴趣进行探讨,以供参考.

  • 标签: 初中生物 教学 学习兴趣
  • 简介:本文结合生物教学围绕课本转的理念,分析了目前生物概念过于抽象,阻碍学生理解,教师教学缺乏创新等导致学生兴趣缺失的原因,本文提出要以实验、演示或事实导入新课,激发求知欲,要加强演示实验、分组实验,培养学生的观察能力、动手能力和思维能力,要讲究教学语言艺术,加强理论联系实际,要在课堂教学过程中,妙用简笔画,提高学生的注意力。

  • 标签: 初中生物 学习兴趣 缺失原因 对策
  • 简介:近年来,随着我国教育改革的全面推进,对高中教学质量的要求也越来越高,尤其是生物教学,这在一定程度上给高中生物教学带来了新的挑战.因此,本文在探讨了高中生物教学中开展探究性学习存在的问题之后,提出具体的解决对策,以期为高中生物教学有效性的提高提供一定帮助.

  • 标签: 高中生物 探究性学习 困难 对策
  • 简介:职业生涯规划教育的首要功能就是让学生初步掌握职业类型、气质类型、人职匹配理论的基础上,进行心理测试、引导学生了解自己的性格、兴趣、能力、气质等个性特征,并客观分析环境,对自我做正确定位。学生对自己了解的越多,其自我塑造的愿望就越强烈、计划也就越具体,学习动力就越强,有利于培养学生良好的学习心理。

  • 标签: 职业生涯规划 学习心理 相关性