简介：目的了解肺炎衣原体(TWAR)与心脏病的相关性，多方面探讨冠心病的发病因素。方法采用聚合酶链反应(PCR)法，对冠心病100例，高血压病40例，心肌疾病40例，心律失常40例，正常对照60例，血清TWARDNA进行检测。结果不同组别间TWAR阳性率的差别有高度显著性(χ2＝30.52，P＜0.05)，其中冠心病占31.0%，心肌疾病占32.5%，高血压7.5%，心律失常12.5%，正常对照1.67%，提示冠心病和心肌疾病TWAR阳性率较高。结论冠心病、心肌疾病TWAR阳性检出率比高血压，无临床心脏病证据的心律失常和正常对照组高，提示TWAR是引起冠心病和心肌疾病的原因之一。

简介：目的：利用TaqMan实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ—RT—PCR)检测强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞白细胞介素-2受体α(IL-2Rα)mRNA的表达水平，并进行疾病的活动性相关分析。方法：用PrimerExpressv2．0软件，根据GenBank提供的序列，在人IL-2RαmRNA的第2和第3外显子之间设计一对引物和一条TaqMan探针。提取总RNA，加入已优化的一步法FQ—RT—PCR反应体系，扩增产物经凝胶电泳后切胶回收，并与pUCm—T载体连接。制备好的重组质粒转化感受态细胞进行克隆。经测序分析确定为特异性片段后，用T7RNA聚合酶转录为cRNA，作为FQ—RT—PCR系列浓度标准品。评价FQ—RT—PCR检测IL-2RαmRNA的特异性、线性、精密度和探针稳定性等。定量测定HLA—B27阳性活动组与阴性非活动组强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞IL-2RαmRNA基因的表达水平，结合血浆可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)浓度，探讨与炎症活动的相互关系。结果：成功构建了cRNA标准品。该方法的线性范围为7～107cells／ml，其批内CV8．4％，批间CV9．6％；扩增产物克隆的双向测序结果经BLAST比较、分析，证实为IL-2RαmRNA特异性片段。对各30例HLA—B27阳性与阴性的强直性脊柱炎的测定表明：与正常人对照组结果比较，HLA—B27阳性组与HLA—B27阴性组IL-2RαmRNA和sIL-2R都有明显增加(P<0．01)。IL-2RαmRNA对炎症活动评价的灵敏度为96．7％。结论：FQ—RT—PCR具有灵敏、特异、结果重复性好等优点；IL-2RαmRNA与sIL-2R比较更能反映强直性脊柱炎患者的免疫状态，可能为免疫药物的疗效评价和药物筛选提供基因表达水平上的信息。

简介：摘要本文主要是聚合酶链式反应（PCR技术）进行了相关概述，然后就该技术在微生物检测中的具体应用进行了分析，最后提出了该技术在实际应用过程中所存在的问题以及具体的解决方式，希望能够以此来进一步提高聚合酶链式反应在微生物检测中的价值。

简介：摘要目的分析聚合酶链对肝硬化患者腹水细菌DNA的检测效果。方法选择细菌通用引物，引入到16SrRNA基因保守区，本次研究中，选择48例腹水样本，对样本行PCR扩增处理和阳性阴性对照实验。分析实验结果。结果在分析48例标本时，在15例标本中获得了370bpDNA片段，进过检测，阳性率为31.25%。而阴性和空白对照标本则并未体现出特异性。在PCR扩增后，可以检测出10pgDNA。结论在肝硬化腹水患者的检测中，采用聚合酶链技术，可以达到特异性和敏感性的需求，便于检测患者的细菌情况，具有较高的临床诊断价值。

简介：摘要目的对急性胰腺炎患者行联合检验血清淀粉酶、脂肪酶与C反应蛋白的早期诊断价值进行研究及判定。方法选取本院收治的30例急性胰腺炎患者作为本次的研究对象，收治时间为2016年2月至2017年1月期间，将其作为研究组，并选取同期收治的30例健康体检者作为对照组，并对比其血清淀粉酶、脂肪酶及C反应蛋白水平。结果研究组急性胰腺炎患者经检测的血清淀粉酶浓度为（665.46±61.99）U/L，脂肪酶浓度为（1411.97±125.97）U/L，C反应蛋白浓度为（44.31±12.08）mg/L，均高于对照组，P＜0.05。结论对急性胰腺炎患者行联合检验血清淀粉酶、脂肪酶与C反应蛋白的早期诊断价值显著，值得在临床中推广实施。

简介：摘要目的观察培门冬酶（PEG-ASP）应用于初治急性淋巴白血病患者（ALL）中，并对其不良反应发生进行分析。方法随机选取本院自2014年12月至2016年12月间诊断为急性淋巴细胞白血病（BCR-ABL阴性）的80例成人患者作为研究对象，并根据诱导化疗中培门冬酶的用药次数将其分为培门冬酶1次组（n=40）与培门冬酶2次组（n=40），对预后差组患者应用2次培门冬酶，对预后好组患者应用1次培门冬酶，观察并记录化疗后疗效，以及治疗期间培门冬酶的不良反应发生及严重程度。结果经VDCLP化疗后，两组疗效无显著差异（P>0.05），且所有患者均未出现较为严重的不良反应发生。结论在诱导化疗ALL患者的VDCLP方案之中，应用1次与2次培门冬酶治疗患者均具有治疗效果，但应用2次培门冬酶不良反应较为明显。

简介：目的：用荧光定量聚合酶链反应（FQ－PCR）法准确地定是检验血清中乙型肝炎病毒（HBV）的数量和免疫指标，以指导临床。方法：采用HBV－DVAFQ－PCR诊断试剂盒，以一种完全闭管式的PCR和荧光探针杂交技术组合所产生的实时检验定量PCR方法，检测了58例临床血清标本。结果：经FQ－PCR检测，9例HBV的HBsAg、HBeAg、HBcAg、HBcAb都阳性标本，其HBV－DNA的阳性率为100％，平均HBV－DNA拷贝数为2．0×10^8/ml；16例HBsAg、HBeAb、HBcAb都阳性的标本，其阳性率为62．5％（10例），平均拷贝数为5．2×10^5/ml，而常规PCR只有33％的阳性率；7例HBsAb、HBeAb、HBcAb都阳性的标本，其阳性率为14．3％（1例），平均拷贝数为4．7×10^3ml。结论：HBV－DNA的FQ－PCR检测较常规PCR更具有较高的灵敏度和特异性，且定量准确，结果可靠，能够避免PCR后处理导致物假阳性污染，可以真实反映HBV的感染和低复制状态，对于乙型肝炎的临床诊断，治病方案的选择和疗效观察有较大的指导意义。

简介：注射用胰激肽原酶又称血管舒缓素或激肽释放酶,为白色或类白色冻干块状物。临床主要用于微循环障碍性疾病如糖尿病引起的肾病、周围神经病、视网膜病、缺血性脑血管病,也可用于高血压病的辅助治疗[1]。我科主要用于各种视网膜病

简介：摘要目的探讨酶联免疫反应加速仪与立式洗板机在酶联免疫吸附试验（ELISA）用于检测丙型肝炎抗体中的应用。方法选取我院2017年4月-2017年5月丙型肝炎患者血清38例，分别用四种组合（温箱孵育加手工洗板、温箱孵育加立式洗板机洗板、酶联免疫反应加速仪加手工洗板、酶联免疫反应加速仪加立式洗板机洗板）方法检测其丙型肝炎抗体。其中，对照组采用温箱孵育加手工洗板的传统方法进行检测，观察组则分别采用其他三种方法进行检测，最后计算出S/CO值，并对结果进行比较分析。结果酶免反应加速仪加立式洗板机洗板和温箱孵育加手工洗板检测的结果，差异有统计学意义（P<0.05），而温箱孵育加立式洗板机洗板、酶免反应加速仪加手工洗板和温箱孵育加手工洗板检测的结果，差异均无统计学意义（P>0.05）。结论在HCV-Ab检测过程中，可使用温箱孵育加手工洗板、温箱孵育加立式洗板机洗板、酶免反应加速仪孵育加手工洗板三种组合方法，不推荐酶联免疫反应加速仪与立式洗板机同时使用。

简介：摘要目的探究C-反应蛋白、降钙素原、心肌酶的联合检测在新生儿高胆红素血症中的诊断价值。方法择取2015年11月到2017年11月期间我院新生儿科收治的400例新生儿高胆红素血症患者，设其为研究组；择取同期于我院进行体检的400例健康新生儿，设其为对照组。为两组研究对象进行C-反应蛋白、降钙素原、心肌酶的检测并对比检测结果。结果研究组的C-反应蛋白、降钙素原检测结果均高于对照组，同时其心肌酶指标的浓度均高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论新生儿高胆红素血症患者的C-反应蛋白、降钙素原、心肌酶检测结果均高于健康新生儿，通过这几项指标的联合检测可以实现对高胆红素血症的筛查。

简介：摘要目的探讨荧光定量PCR技术检测结核杆菌的方法及应用。方法建立检测结核杆菌的荧光定量PCR技术，并与培养法、涂片镜检法进行效果对比。结果本方法检测结核杆菌具有较高的特异性、敏感性和重复性。对120例结核标本进行检查，荧光定量PCR法阳性率高达52.50%，培养法涂阳性率达24.17%，片镜检法阳性率达15.00%。结论相对于传统的结核杆菌检查方法，荧光定量PCR技术具有高特异性，高敏感性等优势，对于结核病的诊断具有重要意义，值得临床推广应用。

简介：摘要目的探讨肠道致病菌PCR检测及应用价值。方法研究大肠杆菌、普通变形杆菌、副溶血性弧菌、单核细胞增生李斯特菌4种肠道致病菌，通过PCR法检测，分析PCR检测在肠道致病菌检测中的作用。结果多重PCR方法可扩增致病菌目的基因片段，具有较强特异性，可检测随意接种3个细菌。结论多重PCR可快速、准确检测大肠杆菌、普通变形杆菌、副溶血性弧菌、单核细胞增生李斯特菌4种肠道致病菌，值得推广应用。

简介：摘要目的研讨血浆脂蛋白磷脂酶A2和高敏C反应蛋白与急性脑梗死相关性。方法选取83例急性脑梗死作为研究对象，根据病情严重程度，分为轻度、中度和重度3组；另选35例健康体检者作为对照组；对比观察组与对照组，轻度、中度与重度组的血浆脂蛋白磷脂酶A2和高敏C反应蛋白水平，采用Pearson相关性分析变量间的关系。结果观察组血浆脂蛋白磷脂酶A2和高敏C反应蛋白水平均高于对照组，差异显著（P＜0.05）；轻度、中度和重度组间的血浆脂蛋白磷脂酶A2和高敏C反应蛋白水平差异显著（P＜0.05），血浆脂蛋白磷脂酶A2和高敏C反应蛋白水平随着急性脑梗死严重程度增大而提高；血浆脂蛋白磷脂酶A2和高敏C反应蛋白与急性脑梗死严重程度呈正相关（r=0.541，0.493，P＜0.05）。结论急性脑梗死患者存在高水平的血浆脂蛋白磷脂酶A2和高敏C反应蛋白，且与病情严重程度呈正相关，通过监测血浆脂蛋白磷脂酶A2和高敏C反应蛋白水平，对于指导治疗、评估预后、疗效均具有积极作用。

简介：目的鉴定血清乳酸脱氢酶（LDH；EC1.1.1.27)同工酶检测中出现的第6条带“LDH6”蛋白性质，探讨其活性升高时的临床意义。方法将正常人肝组织匀浆，肝癌组织匀浆与血清作琼脂糖凝胶电泳分离，提纯“LDH6”，聚丙烯酰胺凝胶电泳检测其相对分子质量。再经免疫印迹验证其抗原性。并检测37例患者中LDH6活性占LDH总活性有百分比。结果肝级织匀浆，肝癌组织匀浆的“LDH6”与血清“LDH6”为同一物质，为醇脱氢酶同工酶Ⅱ（alcoholedhydro-genase,LDH:EC1.1.1.1)，相对分子质量为80kD，34例ADH活性≥LDH总活性7.9%的病人一周内即死亡，死亡率达91.9%(34/37)。结论LDH6即为ADH，ADH活性在血清中上升可能是一种新的“濒亡标志物”。

简介：目的：建立一种灵敏度高、特异性好、精密度高、操作简便的荧光实时定量PCR技术，对临床标本中的TTVDNA进行定量检测。方法：设计针对TTV基因保守序列非转录区(UTR)的一对引物和一条荧光基团双标记探针。将PCR扩增所得的产物片段与PUCm—T载体连接并进行克隆，提取重组质粒以极限稀释法进行定量，作为定量检测的标准品。通过对重组质粒的测序来验证方法的特异性。通过与套式PCR—ELISA方法阳性检出率的比较，显示本方法学的高灵敏度。在临床研究中，通过对36例丙肝患者及123例不同血清标志物阳性的乙肝患者，166例健康体检者血清中TTVDNA的定量检测，评估TTVDNA在不同人群中检出阳性率的差异显著性。此外还观察了乙肝患者不同血清ALT水平组别TTVDNA阳性检出率的差别。结果：本方法检测TTV—DNA的灵敏度高于基于ORFl的普通套式PCR—ELISA方法，重组质粒测序结果显示方法有很好的特异性；通过重组质粒标本梯度稀释检测显示该方法的线性范围为10^2-7拷贝／ml；批间CV为13．2—16．0％，批内CV为6．5．0—11．3％。健康体检者、丙肝患者、乙肝患者三组人群的血清TTVDNA定量结果分别为10^4.11±0.97、10^3.91±1.07、10^3.89±0.99拷贝／ml；三组人群TTVDNA阳性检出率无差异显著性；且乙肝患者(TTVDNA+)血清ALT水平与TTVDNA载量无相关显著性(P>0．1)；乙肝患者血清ALT异常与正常两组TTVDNA阳性检出率无差异显著性(P>0．1)。结论：本方法操作简单、灵敏度高、特异性好、结果数据化，适合于临床实验室进行临床标本的TTV—DNA定量检测。

简介：目的探讨血清，胆汁中淀粉酶和淀粉酶活性在胆道疾患中改变机理及其临床意义。方法采用Beck-manCX7生化分析仪分别检测胆管结石，急性胆囊炎，胆囊结石，胆管囊肿，胆管癌患者血淀粉酶，同工酶和部分患者胆汁中淀粉酶活性。结果各组病例的血清，胆汁淀粉酶及同工酶活性水平以x±s计均高于正常对照组。有显著意义（P<0.01)。48%胆道疾病患者在症状发作期血清淀粉酶及工酶活性增高，胆汁淀粉酶活性增高明显，尤其是胆管囊肿，急性胰腺炎组P-AMY/T-AMY比值明显高于胆道疾病组。有显著性差异（P<0.01)。结论P-AMY/T-AMY比值是诊断急笥胰腺炎的较好指标。

简介：

简介：目的：建立灵敏、准确、特异、试剂稳定的碳酸酐酶自动生化分析法测定发锌。方法：头发灰化后溶于0．1mol／LHCl，测定前先用0．01mol／LNaOH稀释并中和酸，测定时待分析液中锌离子复活脱辅基的碳酸酐酶，以醋酸对硝基酚作为酶促反应底物进行测定。结果：线性范围达61．2μmol／L，回收率95．2％～104．9％，批内和批间变异系数分别小于2．1与2．8％，与原子吸收分光光度法(Y)比较具有良好的相关性，Y=0．971X+0．095，r=0．994。发样中Cu2^+、Fe2^+、Mn2^+各25μmol／g、Co2^+1．25μmol／g对本法测定锌均无影响。用本法测定56例健康成人，其发锌参考范围(X±2s)：1．16～3．04μmol／。结论：该法具有特异、准确、灵敏、试剂稳定等优点，适合于生化分析仪检测发锌。

简介：目的：建立SYBRGreenI实时RT-PCR快速检测呼吸道合胞病毒（respiratorysyncytialvirus，RSV）A、B亚型的方法。方法：根据RSVG蛋白编码基因的核苷酸序列设计三条引物，其中P1为RSV通用引物，P2、P3分别为A、B亚型特异性引物。使用SYBRGreenI荧光染料结合熔解曲线分析进行检测，根据产物特征性熔解温度（meltingtemperaturesTm）鉴别RSVA、B亚型。结果：本法对RSVLong株（A亚型）和CHl8375株（B亚型）进行检测，其Tm值分别为84．06和89．06℃；与常见呼吸道病毒间无交叉反应；48例临床标本中检出RSV阳性29例，其中A亚型占72．4％（21／29），B亚型占27．6％（8／29）。结论：SYBRGreenI实时RT-PCR结合熔解曲线分析检测RSV亚型具有快速、简便、特异等特点，可对临床标本直接分型。

简介：目的应用实时荧光定量PCR技术对健康人粪便内乳酸杆菌进行定量分析,建立乳酸杆菌的实时荧光定量PCR检测方法。方法依据乳酸杆菌16SrDNA序列设计属特异性引物,应用荧光定量PCR技术检测乳酸杆菌的16SrDNA,对粪便中的乳酸杆菌进行定量检测和分析,并和用传统方法所获得的结果进行比较。结果结果显示荧光定量PCR检测乳酸杆菌和传统方法检测乳酸杆菌之间无统计学差异（P〉0.05）。结论荧光定量PCR技术比传统方法特异性高、敏感性强,临床上可用此方法对患者肠道乳酸杆菌进行定量分析。