简介:选择毕赤酵母GS115作为表达宿主,对抗菌肽Spinigerinα的突变体Spinigerinα′的基因进行胞外分泌表达,并选用致病性大肠杆菌、致病性的肠炎沙门氏菌、金黄色葡萄球菌作为敏感菌株,采用琼脂空穴扩散法对表达液进行抑菌效果的研究,并将其抑菌效果与突变前的抗菌肽Spinigerinα进行对比。结果表明,抗菌肽Spinigerinα′-1的抑菌活性降低,Spinigerinα′-2抑菌活性稍有增加,Spinigerinα′-3的抑菌活性最强,而Spinigerinα′-4和5酵母表达的蛋白无抑菌活性。为抗菌肽抑菌效果提高的研究奠定重要的基础。
简介:采用pGAPZαA为表达载体,SMD1168毕赤酵母为受体系统,构建分泌型的Brazzein毕赤酵母重组菌。按照毕赤酵母偏爱密码子设计Brazzein基因,共设计4对引物,采用SOE—PCR法合成Brazzein基因,构建克隆载体pUC57-Bra与酵母表达载体pGAPZαA—Bra。将重组质粒线性化,电转导人Pichia.pastorisSMD1168中,用高浓度的Zeocin筛选高拷贝转化子。将重组菌株接种于YPD培养基诱导表达,进行SDS—PAGE分析。成功构建了分泌型的Brazzein毕赤酵母重组菌,SDS—PAGE表明,目标蛋白的相对分子量与理论值一致,诱导72h后的目的蛋白表达量达0.12dE。
简介:了解大学生身体状况、营养认识、饮食习惯、营养素摄入量现状,评估影响营养与健康的因素。采用分专业、按班级整群抽样方法,进行自行设计的饮食营养与健康问卷调查及相关分析。大学生身体状况较差,其中68%正常、15.6%营养不良、16.4%肥胖。虽然营养意识淡薄、对营养知识了解甚少,但普遍具有良好的饮食态度。主要存在饮食习惯不容乐观,进食快、吃零食、到校外就餐、以饮料代替水、不吃早餐等;营养摄入量明显不足,每天喝牛奶吃豆制品的男女生比例不足10%,42%的男生、22.6%的女生不吃水果等问题。大学生饮食营养与健康状况较差,应该加强营养教育,纠正不良饮食习惯,提高膳食科学性、合理性。