简介:摘要越来越多研究表明内质网应激介导β细胞功能障碍参与了糖尿病的发生及发展过程。内质网应激(EndoplasmicreticulusstressERS)信号通路参与维持胰岛β细胞内质网稳态,适度的ERS对有利于细胞内环境恢复,但过久或太强的ERS可引起内质网稳态失去平衡,进而导致胰岛β细胞死亡或自身免疫性反应,引起糖尿病。减少内质网应激可能会成为治疗糖尿病的一个靶点。本文就ERS与各型糖尿病之间关系作一综述。
简介:由于大麦和麦芽中存在的内潭性氧化还原酶的作用,使内源性多酚、不饱和脂类等物质被氧化,导致成品啤酒风味稳定性和非生物稳定性的降低。酶促氧化反应可发生在不同的酿造阶段,包括发芽、焙爆和糖化等环节。五种主要的内源性氧化还原酶中,超氧化物歧化酶是最为重要的抗氧化酶,可防止超氧阴离子自由基的危害;而过氧化氢酶可催化具有活性的H2O2生成如,由此构成了清除活性氧的初级抗氧化酶体系。过氧化物酶和多酚氧化酶分别在H2O2和O2存在的情况下,可催化内源性酚类底物生成具有活性的醌类物质,所产生的次级氧化产物可改变啤酒的品质。脂肪酸氧化酶可氧化不饱和脂肪酸生成可挥发性的醛类物质,是导致啤酒风味老化的关键酶。酶促氧化的结果在成品啤酒上主要表现为老化异昧的出现、形成混浊、苦味和收敛性的改变,以及色泽的加深等。本文综述了这五种酶的基本性质,在制麦和糖化过程中的变化及其影响,并探讨了对啤酒酿造的影响。
简介:肝药酶CYP即细胞色素P450氧化酶(CYP450),属于单加氧酶(monooxygenase),也称肝微粒体混合功能氧化酶,多位于内质网和线粒体内膜上,参与药物、致癌物、类固醇激素和脂肪酸等多种内、外源性物质代谢。肝药酶CYP氧化还原酶(POR)是所有肝微粒体酶的唯一电子供体,通过还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotidephosphate,NADPH)将电子传递给CYP450酶,CYP450酶得到电子后再与底物发生氧化还原反应,从而发挥代谢活性。
简介:摘要目的探讨妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)患者胎盘ERp29、MPO的表达量变化。方法选取2016年1月-2019年1月在我院住院分娩的80例ICP孕产妇作为ICP组,选取同期在我院因胎位不正及社会因素等原因选择剖宫产的80例正常孕产妇作为对照组,对两组血清TBA、AST、ALT水平及胎盘组织ERp29、MPO表达情况进行对比分析。结果ICP组血清TBA、AST及ALT水平均显著高于对照组(P<0.05),胎盘组织ERp29表达阳性率及蛋白表达量显著高于对照组(P<0.05),胎盘组织MPO表达阳性率及蛋白表达量显著低于对照组(P<0.05)。结论ERp29、MPO参与ICP的发生发展,可能成为该病治疗的新靶点。
简介:目的探讨法舒地尔对于HK-2细胞氧化应激和内质网应激的影响。方法体外培养人肾近曲小管细胞,分为对照组、高糖组和法舒地尔组。对照组细胞采用正常浓度葡萄糖培养,高糖组采用高浓度葡萄糖培养,法舒地尔组细胞同时采用高糖和不同浓度法舒地尔处理。细胞活性和凋亡水平分别采用噻唑蓝(MTT)和DNA断端末端标记(TUNEL)试剂盒检测。采用活性氧(ROS)试剂盒,RealtimePCR和Westernblot检测ROS含量和基因表达水平。结果与对照组相比,高浓度葡萄糖可以引起HK-2细胞活力降低,凋亡率升高,而法舒地尔则可以促进细胞活力,降低凋亡率,呈现浓度梯度依赖性(P<0.05)。高浓度葡萄糖显著提升ROS含量,法舒地尔的浓度则与ROS的产量呈负相关(P<0.05)。高糖处理促进p47phox和Nox4表达水平升高,法舒地尔则能够逆转这一过程,且呈现浓度依赖性(P<0.05)。高糖组GRP78和Chop的表达水平均显著上升,而Bcl-2的表达水平显著下降(P<0.05)。法舒地尔能够抑制GRP78和Chop表达,并促进Bcl-2的表达水平,且有浓度依赖性(P<0.05)。结论法舒地尔可能通过参与调控细胞氧化应激和内质网应激发挥细胞保护作用。
简介:为探讨丙烯腈(acrylonitrile,ACN)诱导的大鼠肝脏氧化损伤对内质网应激(endoplasmicreticulumstress,ERS)信号通路的影响,我们将50只SPF级成年雄性SD大鼠按体重随机分为5组,每组10只。各组分别以12.5、25.0、50.0mg·kg^-1ACN灌胃染毒,N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)干预组先用300.0mg·kg^-1NAC灌胃30min后再灌50.0mg·kg^-1ACN,对照组以0.5mL·(100g)^-1的玉米油灌胃,1次·天^-1,6天·周^-1,共计13周。染毒结束后,检测肝脏组织氧化还原酶活力及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,GRP78、CHOP及caspase-12mRNA及蛋白表达水平。结果显示:低、中ACN组大鼠肝脏GSH含量显著低于对照组(P〈0.05);低ACN组大鼠肝脏GSH-Px活力、SOD活力及MDA含量均显著高于对照组(P〈0.05);中、高ACN组大鼠肝脏CAT活力明显低于对照组(P〈0.05)。NAC干预后可逆转ACN诱导的大鼠肝脏GSH含量、MDA含量及SOD活力的变化。RT-PCR结果显示,高ACN组大鼠肝脏GRP78、CHOP、caspase-12mRNA表达水平与对照组比较均升高(P〈0.05)。NAC干预后,CHOP、caspase-12mRNA表达水平与高ACN组比较均降低(P〈0.05)。WesternBlot结果显示,高ACN组大鼠肝脏GRP78、CHOP、caspase-12蛋白表达水平与对照组比较均升高(P〈0.05),NAC干预后可逆转以上作用。结果表明,ACN慢性染毒对大鼠肝脏的氧化损伤可激活ERS信号通路,NAC可减轻氧化损伤的程度而阻断ERS信号通路,这可能是ACN产生肝脏毒性的机制之一。
简介:摘要目的观察含有WW结构域的氧化还原酶(WWOX)对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法收集南阳市中心医院2015年8月到2019年8月经手术切除的189例胃癌组织和癌旁组织作为研究对象,采用免疫组织化学分析WWOX蛋白的表达水平。采用过表达WWOX和对照质粒的慢病毒感染胃癌细胞SGC-7901,建立稳定细胞株,分为WWOX组和对照组。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)分析两组细胞的增殖情况;采用Transwell分析两组细胞的迁移和侵袭水平。采用蛋白质印迹法(Western blot)分析两组细胞的细胞核增殖抗原(Ki-67)、黏着斑激酶(FAK)、基质金属蛋白酶(MMP)-2和迁移侵袭抑制蛋白(MIIP)蛋白的表达水平。计量数据比较采用t检验。结果胃癌组织中WWOX蛋白水平(89.33±7.12)较癌旁组织WWOX蛋白水平(190.32±13.09)明显下降,差异有统计学意义(t=3.142,P<0.05)。WWOX组细胞增殖(0.91±0.39)较对照组细胞增殖(1.79±0.51)显著下降,差异均有统计学意义(t=2.901,P<0.05)。WWOX组细胞EdU阳性率[(39.78±5.44)%]较对照组细胞EdU阳性率[(87.51±7.01)%]显著下降,差异均有统计学意义(t=3.182,P<0.05)。WWOX组迁移和侵袭细胞数量[(55.19±4.11)、(34.11±3.71)个]较对照组细胞迁移数量[(103.49±5.10)、(83.16±4.81)个]明显下降,差异有统计学意义(t=2.710、2.372,P<0.05)。与对照组细胞Ki-67、FAK和MMP-2表达水平(1.21±0.15、0.83±0.11和1.28±0.20)比较,WWOX组细胞Ki-67、FAK、MMP-2和MIIP蛋白表达水平(0.69±0.12、0.31±0.09和0.71±0.15)明显下降,差异有统计学意义(t=2.900、2.515,P<0.05;t=2.879,P<0.05)。结论WWOX蛋白在胃癌组织中低表达,通过抑制细胞、迁移和侵袭起抑癌基因的作用。
简介:摘要 目的 研究异甘草酸镁对内质网应激诱导小鼠肝损伤的保护作用,为临床患者使用提供依据。 方法 腹腔注射给予异甘草酸镁进行肝脏预保护,单次体内灌胃衣霉素(1mg/kg)建立小鼠内质网应激性急性肝损伤模型。取组织称重,计算肝脏、脾脏及胸腺等脏器指数;ELISA法检测血清中谷丙氨酸转换酶、谷草氨基酸转换酶及肝匀浆中谷胱甘肽过氧化物酶、丙二醛和超氧化物歧化酶含量;HE染色观察肝组织病理改变;免疫组化法检测肝组织中GRP78/Bip蛋白表达水平。 结果 异甘草酸镁能减少肝脏肿大及肝脏组织炎性细胞浸润,改善病变范围与程度;降低肝损伤小鼠血清中谷丙氨酸转换酶、谷草氨基酸转换酶水平及肝组织匀浆中丙二醛含量,提高肝组织匀浆中谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶含量;抑制肝组织中GRP78/Bip蛋白的表达。 结论 异甘草酸镁可能是通过抗氧化作用保护内质网应激诱导的小鼠急性肝损伤。
简介:摘要目的明确氟中毒大鼠生殖损伤状态下的氧化应激和内质网应激水平,并观察α-硫辛酸(α-LA)干预后各相关指标的变化,探讨α-LA在氟中毒大鼠生殖损伤中的作用及可能机制。方法将40只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠采用随机数字法分为四组,分别为对照组(0.9%氯化钠);α-LA组(100 mg/kg α-LA);氟化钠(NaF)组(25 mg/kg NaF);NaF和α-LA联合作用组(25 mg/kg NaF+100 mg/kg α-LA)。采用灌胃的方式染毒,染毒8周后,各组分别进行精子质量分析、睾丸氟含量测定及HE染色;TUNEL法检测睾丸组织细胞凋亡;生化法测定氧化应激相关指标;Western印迹检测睾丸组织中GRP78、PERK及CHOP的蛋白表达水平。结果与对照组相比,NaF组的精子密度及精子存活率较低[(5.99±1.45)×106/ml比(10.96±1.83)×106/ml,P<0.01;(33.40±2.71)%比(66.41±3.33)%,P<0.01],精子畸形率较高[(26.43±2.43)%比(11.44±1.55)%,P<0.01)];与NaF组相比,NaF+α-LA组的精子密度及精子存活率较高[(8.47±0.82)×106/ml比(5.99±1.45)×106/ml,P<0.05;(49.97±3.51)%比(33.40±2.71)%,P<0.05],而精子畸形率较低[(22.69±2.39)%比(26.43±2.43)%,P<0.05]。与对照组相比,NaF组的睾丸氟含量较高[(11.14±0.77)μg/g比(5.78±0.28)μg/g,P<0.01]。光学显微镜下可见NaF组的生精细胞间结构较为疏松,生精细胞和成熟精子数量减少,与α-LA联合作用后,生精细胞结构损伤有所改善,管腔脱落细胞减少。TUNEL检测发现,NaF组的凋亡指数较高[(61.32±7.14)%比(6.99±2.17)%,P<0.01];与NaF组相比,NaF+α-LA组细胞凋亡指数较低[(45.96±5.31)%比(61.32±7.14)%,P<0.01]。氧化应激水平检测发现,与对照组相比,NaF组的丙二醛(MDA)较高[(5.46±0.30)nmol/mgprot比(3. 24±0.58)nmol/mgprot,P<0.01],超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)较低[(6.04±0.71)U/mgprot比(7.19±0.52)U/mgprot,P<0.01;(23.67±0.99)U/mgprot比(26.91±1.67)U/mgprot,P<0.01];与NaF组相比,NaF+α-LA组MDA较低[(4.66±0.70)nmol/mgprot比(5.46±0.30)nmol/mgprot,P<0.05],GSH-Px较高[(25.90±1.93)U/mgprot比(23.67±0.99)U/mgprot,P<0.05]。内质网应激水平检测发现,与对照组相比,NaF组的GRP78、PERK和CHOP蛋白表达水平明显上调(0.79±0.05比0.45±0.09,P<0.01;0.71±0.04比0.40±0.05,P<0.01;0.79±0.09比0.19±0.08,P<0.01),与NaF组相比,α-LA抑制了NaF介导的GRP78和CHOP蛋白表达上调(0.46±0.06比0.79±0.05,P<0.01;0.52±0.09比0.79±0.09,P<0.01)。结论α-LA可通过抑制氧化-内质网应激信号通路,对氟中毒大鼠生殖损伤起到一定的保护作用。
简介:原花青素是黑果枸杞中一类重要的植化产物,但其生物合成机制仍不清楚。本研究利用黑果枸杞EST数据库,克隆了无色花色素还原酶基因(LrLAR)和花青素还原酶基因(LrANR)。PCR结果表明,LrLAR和LrANR分别由333个氨基酸残基、338个氨基酸残基组成的蛋白编码。进化分析表明,相应蛋白LrLAR、LrANR分别聚类于L4R和ANR族。实时定量PCR结果表明,从果实未成熟时期到变色期,LrLAR、LrANR的表达量均急剧上升,但在随后的发育时期中逐渐下降;与在果实中相比,在嫩叶、成熟叶、茎、根中,两基因的表达量极低。植化分析发现,果实中总原花青素含量高于嫩叶、成熟叶、茎、根中的含量,并且在果实成熟过程中呈现先增加后基本趋于稳定的趋势。本研究将为揭示黑果枸杞原花青素生物合成机制及促进其工程改良奠定基础。