简介:摘要目的探究对结核分枝杆菌利福平耐药相关基因rpoB突变以PCR-反向点杂交法检测的效果。方法设计结核分歧杆菌rpoB基因引物,采用PCR-反向点杂交法对40例结核杆菌临床菌株耐药性进行检测,对照由DNA测序法检测的标准结核分歧杆菌(H37Rv)rpoB基因,确定rpoB基因的变异情况,对PCR-反向点杂交法的灵敏度和准确性作出评价。结果40株临床菌株中有11株利福平敏感株的基因序列与对照的H37Rv相同,剩下的29株耐药株中检测到变异基因27株,其特异性为100%,阳性率为93.1%。结论rpoB基因本身高度保守,但由于rpoB基因突变导致结核分枝杆菌对利福平耐药。本研究使用PCR-反向点杂交法针对rpoB基因高突变区设计引物,此方法快速、简便、准确,能有效监测临床标本中结核分枝杆菌,对临床早期诊治结核病有极大帮助。
简介:目的:探讨高分辨率熔解曲线分析(Highresolutionmelting,HRM)技术检测结核分枝杆菌耐药突变位点的可行性。方法:对218株结核分枝杆菌进行利福平(RFP)和异烟肼(INH)的药物敏感性测定,并进行耐药基因位点的PCR扩增和测序,同时采用HRM方法检测RFP和INH耐药基因位点情况,分析HRM的敏感性和特异性。结果:218株结核分枝杆菌药敏试验结果显示,有106株(48.6%)对RFP耐药,100株(45.9%)对INH耐药,81株(37.4%)对RFP和INH均耐药。测序发现,101株(46.3%)存在RFP耐药基因的突变,107株(49.1%)存在INH耐药基因的突变。HRM检测结果显示,100株(45.9%)存在RFP耐药基因的突变,103株(47.2%)存在INH耐药基因的突变。分别以药敏试验和测序结果为标准,HRM检测RFP耐药的敏感性为94.3%(100/106)和99.0%(100/101);特异性为97.3%(109/112)和100%(117/117);INH耐药的敏感性为97.0%(97/100)和98.1%(103/105);特异性为97.3%(109/112)和100%(113/113)。结论:HRM快速检测结核分枝杆菌耐药具有较高的特异性和灵敏度,能够满足临床需求。
简介:摘要目的探究分子线性探针技术应用于临床肺结核/耐药肺结核患者快速诊断可行性及可靠性。方法收集成都市龙泉驿区临床疑似肺结核病患者痰标本,对比分析传统比例法药敏试验和线性探针技术对异烟肼(INH)、利福平(RFP)耐药检测效能。结果传统比例法药敏实验检测出103份结核分枝杆菌核酸检测阳性标本异烟肼(INH)耐药14例(13.59%),利福平(RFP)耐药5例(4.85%)、耐多药肺结核(MDR-TB)41例(39.81%);线性探针技术检测出103份结核分枝杆菌核酸检测阳性标本异烟肼(INH)耐药13例(12.62%),利福平(RFP)耐药6例(5.83%)、耐多药肺结核(MDR-TB)41例(39.81%),两种检测方法差异无统计学意义。结论线性探针方法适用于临床肺结核患者异烟肼、利福平耐药快速检测。
简介:目的:比较并评价涂片抗酸染色法(涂片法)、L-J培养法和基因芯片法在分枝杆菌检测中的应用价值。方法:对241例需查抗酸杆菌的临床标本,采用涂片法、L-J培养法和基因芯片法检测分枝杆菌,3种方法检测结果存在分歧的标本再进行DNA测序,以培养鉴定结果阳性或DNA测序得到分枝杆菌序列为确诊标准。结果:241例标本,涂片法、L-J培养法和基因芯片法的检测阳性率依次为18.7%、12.0%、15.8%,经卡方检验三者阳性率的差异没有统计学意义(P〉0.05);检测灵敏度依次为85.4%、70.7%、93.0%,经卡方检验三种方法的灵敏度总体来说有差别(χ2=7.24,P〈0.05),涂片法与L-J培养法以及涂片法与基因芯片法的灵敏度差异没有统计学差异,基因芯片法的灵敏度高于涂片法(χ2=6.61,P〈0.05);检测特异性依次为95.6%、100.0%、100.0%。38例基因芯片检测阳性患者中有28例为结核分枝杆菌,10例为非结核分枝杆菌。结论:与涂片法及培养法相比较,基因芯片法能够鉴别分枝杆菌菌种,同时具有快速、可靠、准确度高的特点,在分枝杆菌感染的早期诊断和抗菌治疗上具有重要的临床价值。
简介:摘要目的对依赖利福平结核杆菌治疗肺结核的临床效果及特点进行分析探讨。方法选取新疆库尔勒市第一人民医院2015年7月至2016年1月收治的100例患有肺结核疾病的患者作为本次研究的对象,所有患者的基本资料与诊断结果均接受回顾性分析法进行分析,并以表格的形式将结果统计出来。结果通过影像观察,多数患者的肺部双侧都有结核,而且两侧都存在不同程度的病变,只有极个别的患者是单侧结合和单侧病变。从影像中可以观察到普遍患者的病情都处于严重的状态,推测跟患者的年龄有着直接的关系。患者对利福平存在较强的依赖性。结论对利福平结核杆菌依赖的患者需要早确诊、早治疗,并在医护人员的指导下按时服用药物,可达到较好的治疗效果,有效控制病情发展。
简介:摘要目的探讨肺结核合并糖尿病复治住院患者结核菌耐药性特征。方法采用液体培养基Middlebrook7H9培养基干粉(德国公司产品)购自BD公司;快速培养仪做痰结核菌耐药性及药敏试验。结果收集2013年1月至2015年12月我科肺结核住院首次复治患者痰培养阳性并有明确药物敏感试验结果的患者,共1088例。S,H,R,Z,E耐药率分别为27.9%,30.1%,13.7%和7.4%和5.2%。同时耐异烟肼加(R,Z,E,S)及链霉素加(H,R,Z,E)任何一种首次复治肺结核合并糖尿病患者的耐药性患者占31.8%,耐三种及三种以上的广泛耐药的首次复治肺结核合并糖尿病患者耐药率为11.1%。结论首次复治肺结核患者中合并糖尿病的耐药性明显高于单纯复治肺结核患者。无论单独耐一种药还是耐二种及三种以上耐多药首次复治肺结核合并糖尿病患者的耐药率高于单纯首次复治肺结核患者,无论是否合并有糖尿病首次复治肺结核患者的耐药顺序从高到低依次归纳为H、S、R、Z、E。发现耐二种及三种以上耐多药发生率低于单独耐一种药。
简介:摘要目的对82例结核杆菌痰培养阳性耐药菌株进行5种抗结核药物的耐药基因检测。方法采用PCR-反向斑点杂交技术来检测耐药结核患者的痰标本临床分离株和耐药结核患者痰标本直接进行基因的突变检测。结果对20例结核患者耐药菌株进行了5种药物的敏感实验,耐药高发种类以SM、RFP、INH为主,耐多药结核病(MDR-TB)的发生率也很高。结论应用PCR-反向斑点杂交技术可快速检测结核分支杆菌对异烟肼(INH)、吡嗪酰胺(PZA)、链霉素(SM)、乙胺丁醇(EMB)、利福平(RFP)的耐药性,及时检测出结核突变菌株能为临床快速的治疗提供有效的治疗依据,是患者进一步治疗以及控制耐药结核病的重要手段。