简介:目的检测Etheràgo-go1(Eag1)钾离子通道在人卵巢癌中的表达,对人卵巢癌细胞株SKOV3的影响及与卵巢癌患者临床特征的关系。方法用实时定量逆转录-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测卵巢癌细胞SKOV3中Eag1的表达;用噻唑蓝比色法(MTT)检测Eag1钾离子通道抑制剂阿司咪唑(Astemizole)对SKOV3细胞增殖的影响;用流式细胞仪检测阿司咪唑对对SKOV3细周期的影响;用蛋白印迹法(Westernblot)和免疫组织化学的方法检测36例卵巢癌组织中Eag1蛋白的表达并结合临床病例资料进行分析。结果阿司咪唑可明显抑制SKOV3细胞增殖,阻滞细胞周期于G0/G1期。在卵巢癌标本中,Eag1蛋白的阳性表达率明显高于正常卵巢组织。其在不同的临床分期方面差异有统计学意义(P〈0.05)。结论Eag1钾离子通道异常表达于人卵巢癌组织中,并可能成为卵巢癌诊断和治疗的靶点。
简介:目的采用活体成像技术监测稳定高表达荧光素酶报告基因的肿瘤细胞在裸鼠体内生长及转移情况,为肿瘤治疗药物的研发提供新的评价技术和方法。方法采用Lipofectamine2000介导的基因转染方法,将pGL4.17[luc2/neo]载体转染人肝癌细胞株HepG2,经G418抗性筛选及有限稀释法获得稳定高表达荧光素酶的单克隆细胞;采用活体成像的方法检测转染细胞在裸鼠体内的成瘤情况。结果获得了可稳定高表达荧光素酶基因的单克隆细胞株,将单克隆细胞株植入裸鼠皮下。采用活体成像技术准确监测肿瘤细胞体内生长情况。结论采用活体成像技术构建的肿瘤动物模型是拓展肿瘤体内生长、转移及治疗相关研究的理想模型。
简介:目的探究宫颈癌组织TWIST与E-Cadherin的表达水平及其相关性。方法选取2014年7月—2017年6月行全子宫切除术联合盆腔淋巴结清扫术治疗患者的完整宫颈癌标本74例作为宫颈癌组,同期行Leep手术切除或阴道下活检的完整宫颈上皮内瘤变(CIN)标本35例作为CIN组,以及同期因子宫肌瘤行子宫全切术治疗的正常宫颈组织22例作为正常宫颈组。检测TWIST与E-Cadherin蛋白的表达水平,分析其与宫颈癌临床病理特征的关系,并分析TWIST与E-Cadherin表达水平的相关性。结果宫颈癌组的TWIST阳性表达率高于正常宫颈组和CIN组,E-Cadherin阳性表达率低于正常宫颈组和CIN组(P<0.05)。与间质浸润深度<1/2患者比较,间质浸润深度≥1/2患者宫颈癌组织中TWIST的阳性表达率升高,E-Cadherin阳性表达率降低(P<0.05)。与无淋巴结转移患者比较,有淋巴结转移患者宫颈癌组织中TWIST的阳性表达率升高,E-Cadherin阳性表达率降低(P<0.05)。TWIST与E-Cadherin在宫颈癌组织中表达水平呈负相关(r=-0.511,P<0.001)。结论TWIST表达升高与E-Cadherin表达降低可能与宫颈癌的发生发展及浸润转移密切相关,二者可能具有拮抗作用。
简介:目的:观察莫西沙星灌胃给药在肺炎大鼠血液及肺组织中的药代动力学特点。方法:建立肺炎链球菌肺炎大鼠模型,莫西沙星按照42mg·kg-1灌胃给药,采用微透析技术对肺炎大鼠的血液及肺组织同步取样,应用高效液相色谱法测定莫西沙星游离药物浓度,计算药代动力学参数。结果:血液中游离药物浓度Tmax为(1.00±0.00)h,Cmax为(4.83±0.05)mg·L-1,肺组织内Tmax为(0.95±0.10)h,Cmax为(4.84±0.02)mg·L-1。之后两者同步下降,莫西沙星在肺组织内的穿透率为(1.256±0.321)。消除半衰期(t1/2)在血液内为(2.16±0.12)h,肺组织内为(3.27±0.48)h(P〈0.05)。血液及肺组织的AUC(0-inf)分别为(16.94±1.52)mg·h-1·L-1和(18.57±1.17)mg·h-1·L-1(P〈0.05)。分布系数(AUC肺/AUC血液)为(1.216±0.041)。结论:在该剂量条件下,莫西沙星灌胃给药后,在肺炎大鼠肺组织的穿透率高,血液及肺组织内的游离药物浓度较高,远超过了最低抑菌浓度和防耐药突变浓度,可以有效清除肺炎链球菌,获得较好疗效。
简介:本研究建立并验证了一种快速且灵敏的液质联用方法,用于测定小鼠血浆和脑组织中沙奎那韦的浓度,并将其应用于初步筛选实验,以评价黄酮类化合物对沙奎那韦脑内分布影响的作用。血浆和脑组织中的沙奎那韦和内标利托那韦通过液-液萃取的方式进行提取,色谱分离过程使用C18反相色谱柱(150mm×2.1mm,5.0μm)。质谱检测过程使用三重四极杆串联质谱,以电喷雾正离子模式、质谱多反应监测技术对沙奎那韦和内标进行检测。血浆中测定标准曲线的线性范围为0.1至10ng/mL,其最低浓度为定量下限。方法日间日内精密度为7.5%–12.1%,准确度介于90.5%与107.2%之间。脑组织中测定标准曲线的线性范围为0.1至10ng/g,其最低浓度为定量下限。方法日间日内精密度为7.3%–11.9%,准确度介于90.8%与107.4%之间。该方法成功应用于初步筛选实验,评价了19种黄酮类化合物对沙奎那韦脑内分布影响的作用,结果显示biochaninA能够最大程度促进沙奎那韦的脑内分布。
简介:[摘 要] 目的 研究达格列净对糖尿病大鼠肾组织Toll样受体4(TLR4) 表达的影响。方法 57只雄性SD大鼠,分为实验组(n=48)和正常对照组(n=9)。实验组大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)50 mg/kg建糖尿病大鼠模型,正常对照组注射等剂量无菌枸橼酸钠缓冲液。建模成功的45只大鼠随机分为5组,每组9只:达格列净5 mg/(kg·d),达格列净10 mg/(kg·d)组,达格列净5 mg/(kg·d)联合TLR4特异性抑制剂Eritoran 5 mg/(kg·d),达格列净10 mg/(kg·d)联合TLR4特异性抑制剂Eritoran 5 mg/(kg·d),未干预组。达格列净采用灌胃的方法给药,对照组组给予等量生理盐水灌胃。联合应用Toll样受体4(TLR4)特异性抑制剂Eritoran组于第5周给予腹腔注射Eritoran 5 mg/(kg·d),连续[1]周。于第8周末各组大鼠留24 h尿液测量尿微量白蛋白,采用Western blot法检测肾组织中TLR4表达水平。心尖部取血2 mL,测空腹血糖、血CRP。免疫组织化学染色检测各组大鼠肾组织中TLR4及过氧化物酶体增殖增殖物激活受体γ(PPARγ)的表达。结果 与对照组相比,实验组大鼠 24 h 尿微量蛋白、血 CRP 含量显著增高;肾组织 TLR4的表达明显增加,治疗前与治疗后比较存在差异(P < 0.05);与未干预组相比:各干预组大鼠 24 h 尿微量白蛋白、血 CRP含量下降,肾组织 TLR4的表达亦减弱,比较存在差异(P < 0.05);10 mg/(kg·d)吡格列酮组与5 mg/(kg·d)达格列净比较,肾组织 TLR4的表达减弱,前后比较存在差异(P < 0.05);10 mg/(kg·d)达格列净联合5 mg/(kg·d)Eritoran组与5 mg/(kg·d)吡格列酮联合5 mg/(kg·d)Eritoran组比较,肾组织 TLR4的表达均明显减弱,但无统计学差异(P > 0.05)。结论 吡格列酮下调糖尿病大鼠肾脏组织 TLR4 表达,调节促炎和抗炎之间平衡,发挥抗炎作用;