简介:在仙客来"紫色火焰"的体细胞胚胎发生方面,相对于愈伤组织培养,悬浮培养既能减少保持培养所需的劳动力,又能为培养物提供快速的生长条件,因而具很大的优势。当悬浮系转移到生物发生器上时,胚胎的生长和分化都能得到控制,从而使自动化培养成为可能。无论是来自于同一植物的未受粉胚珠体细胞的非胚胎发生还是胚胎发生的愈伤组织,都用来作为长期悬浮培养的接种物,悬浮系可稳定地在此条件下生长一年以上。影响悬浮培养的关键因素有:初始培养密度、愈伤组织的发育阶段,继代次数及继代时稀释的倍数等。胚胎发生和非胚胎发生的悬浮培养生长曲线已从该实验获得。第一次试验中两种悬浮系在生物发生器中都成功地产生了胚细胞,将200-500um悬浮液涂在无激素的培养基上后,可观察到高频率的球形体细胞胚出现在培养基上,同时,这些胚可大量培养成为正常的植株,因为在由愈伤组织和悬浮培养获得的体细胞胚上,可观察到大量的根产生,现在,11个悬浮培养系可培养出大约9万个植株,这也仅仅是发挥了胚胎发生悬浮培养潜能的很小一部分。
简介:采用固定后剥离卵膜后拍照的方法,在平均水温1.61℃下系统观察了黑龙江流域江鳕(LotaIotaLinnaeus)的胚胎发育。根据发育特征,将江鳕整个胚胎发育过程分六个大的发育阶段。黑龙江流域江鳕受精卵为淡黄色,近似圆球形,具有微粘性,比重略大于水,内部紧靠卵膜分布大量的脂肪滴,吸水膨胀后卵径为1.01±0.11mm,在平均水温为1.61℃水温条件下受精卵至破膜共历时1746h,需4106.98℃.h,进一步细分为21个发育时期。将黑龙江流域江鳕和新疆额尔齐斯河流域江鳕的胚胎发育过程进行了对比分析,为黑龙江流域江鳕的人工养殖和自然资源的复壮提供了基础资料。
简介:采用0.01MPBS等渗液配制的浓度为70%的乙醇固定液对虹鳟活体胚胎进行固定,并以蒸馏水配制的浓度为70%乙醇固定液作为对照,探讨用于流式细胞术分析的胚胎组织单细胞悬液制备方法。实验结果表明:PBS-乙醇和蒸馏水-乙醇固定液均可获得分散良好的单细胞悬液,但蒸馏水-乙醇固定液制备的胚胎细胞悬液中细胞数量相对较少,细胞碎片明显增多,流式细胞仪检测G0/G1峰较宽。而PBS-乙醇固定液制备的细胞悬液,细胞形态完整、背景较干净,细胞粘连少,几乎没有细胞碎片,流式上机检测各参数值较理想;以PBS-乙醇固定液制备2n虹鳟胚胎单细胞悬液作为材料检测,其结果与以红细胞为对照的样品检测DNA相对含量结果相一致,均为50AU。本研究表明利用PBS-乙醇固定液制备鱼类胚胎组织单细胞悬液方法是可行的。
简介:用鉴别液J1、J2与Bouin’s液固定剥膜比较方法,测定了虹鳟(Oncorhynchusmykiss)不同发育期胚胎的受精率。结果表明:用鉴别液J1处理后测得的二细胞期、四细胞期、八细胞期、桑葚期、高囊胚期、原肠中期胚胎的受精率分别为53.21%、77.89%、82.00%、88.2%、87.71%和81.43%;用鉴别液J2处理测得的受精率分别为51.64%、77.86%、81.43%、89.07%、87.50%和81.86%。二者与Bouin’s液固定剥膜后测定的受精率差异不显著(P〉0.05),说明这两种鉴别液均可用于生产中测定受精率。在不同的发育时期,鉴别的准确性有所不同,细胞分裂期的准确性远低于桑葚期至囊胚期,这可能是由于胚胎发育不同步和早期胚胎细胞较少所致,因此,鉴别虹鳟鱼卵的受精率最好在桑葚期和囊胚期之间(12~24℃.d)的时间点。
简介:2016年4月1日—4月19日,在水温12~14℃下采用催产、人工授精和室内孵化方式获得暂养的野生新疆裸重唇鱼Gymnodiptychusdybowskii受精卵和仔鱼,观察其胚胎发育和早期仔鱼的形态特征。结果显示:新疆裸重唇鱼成熟鱼卵为亮黄色或橙色,卵径(2.2±0.28)mm,受精约35min后卵周隙达到最大,卵径2.90~3.40mm,卵黄约占卵体积的3/5。整个发育过程可分为受精卵、卵裂期、囊胚期、原肠胚期、神经胚期和器官形成期6个阶段。在水温(16±2)℃下,胚胎发育积温为2359h·℃,187h仔鱼上浮。研究结果表明,新疆裸重唇鱼的胚胎发育特征与新疆地区其他几种裂腹鱼类存在一定差异。
简介:随着我国人民生活水平的不断提高,乳品市场的快速增长带动了奶牛养殖业的快速发展。但目前我国奶业进一步发展还存在一些重大制约因素,其中,高产良种奶牛的缺乏成为影响我国奶业发展的瓶颈。奶牛是单胎动物,自然状态下1头母牛1年1胎,且雌雄性别比各占五成,终生只能提供3~4头有效后代(母牛)。故国内现有良种奶牛种群扩繁受到很大限制,从国外大批引进良种奶牛需要大量外汇,同时受到隔离场数量不足及进口国牛源、质量的限制。因此,应用胚胎生物工程技术,利用产学研多方合作,建立优质奶牛高效繁殖平台,快速扩充繁殖高产奶牛群是整体提高奶牛生产竞争力的有效手段。