简介:摘要目的探究FASN与p97在骨肉瘤组织中的表达与远处转移的相关性。方法选取骨肉瘤组织标本,并根据免疫组化SP法对FASN与p97的表达情况进行检测,选择23例骨软骨瘤作对照。结果骨肉瘤中FASN阳性表达率61.29%高于骨软骨瘤组织中的30.43%;骨肉瘤中p97阳性表达率67.74%高于(骨软骨瘤组织的21.74%;FASN与p97蛋白在骨肉瘤组织中的表达具有相关性。远处转移骨肉瘤患者中FASN、p97蛋白阳性表达率86.67%、86.67%,均高于没有远处转移的51.06%、61.70%(P均<0.05)。结论在骨肉瘤组织中FASN与p97表达较显著,二者有相关性,和骨肉瘤的出现与远处转移具有相关性。
简介:摘要目的研究长链非编码RNA(lncRNA) FOXD2-AS1在骨肉瘤组织及细胞株中的表达及对细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的作用与机制。方法采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测36例骨肉瘤组织与癌旁组织中FOXD2-AS1的表达量并分析其表达与临床特征的关系。检测FOXD2-AS1在骨肉瘤细胞株(MG63,Saos-2,U2-OS,143B)和人成骨细胞株(hFOB1.19)的表达,并选取两种高表达的细胞株敲降其表达,通过细胞计数试剂盒(CCK-8)实验、膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙锭(PI)流式细胞术、Transwell实验检测增殖、凋亡、侵袭和迁移,并通过RNA结合蛋白免疫沉淀(RNA-IP)、蛋白质印迹法(Western blot)和ChIP检测FOXD2-AS1对EZH2和p21的影响。结果FOXD2-AS1在骨肉瘤组织中的表达高于癌旁组织(t=17.900,P<0.01);并且在体积大、TNM分期高的骨肉瘤组织中表达量更显著(χ2=4.208、9.257,P<0.01)。FOXD2-AS1在骨肉瘤细胞株中的表达量均高于人成骨细胞株(t=14.540、9.970、5.890,P<0.01),尤其是在MG63和Saos-2细胞株中,敲降FOXD2-AS1的表达能够抑制增殖(P<0.05)、促进凋亡(P<0.01)和抑制侵袭和迁移(P<0.01)。RNA-IP、Western blot和ChIP结果显示FOXD2-AS1与EZH2互作,敲降FOXD2-AS1降低了EZH2和H3K27me3与p21启动子区的分子结合。结论FOXD2-AS1能够提示临床预后不良,促进骨肉瘤细胞的恶性生物学行为,其机制可能是通过与EZH2互作,从而抑制p21的表达实现的。
简介:摘要目的探讨微小RNA-940(miR-940)对迁移和侵袭增强因子1(MIEN1)的作用,对人骨肉瘤细胞MG63的迁移和侵袭等能力的影响。方法根据对MG63(武汉大学中南医院医学科学研究中心)的转染处理,将其分为miR-940模拟物(mimics)组、控制(control)对照组、miR-940抑制剂(inhibitor)组和空白(Blank)对照组。分析武汉大学中南医院骨科通过手术切除的12例骨肉瘤病理组织,采用世界卫生组织(WHO)病理分级标准进行良恶性分级,Ⅰ级5例,Ⅱ级3例,Ⅲ级4例。采用免疫组织化学分析MIEN1与肿瘤恶性程度的相关性。体外培养人骨肉瘤细胞MG63及正常成骨细胞hFOB1.19,实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-940及MIEN1表达水平,蛋白质印迹法(Western blot)检验MIEN1蛋白表达。对MG63细胞分组转染miR-940模拟物(mimics)、控制(control)对照、抑制剂(inhibitor)和空白对照,48 h后采用实时荧光定量PCR检验miR-940,Western blot检验MIEN1蛋白表达。划痕实验评估转染后细胞的迁移能力。Transwell侵袭实验评价转染后细胞的侵袭能力。采用两样本t检验,多样本方差分析,Pearson相关性分析。结果MIEN1在不同恶性程度的骨肉瘤中的表达水平,与恶性程度呈正相关(r=0.832,P<0.05)。骨肉瘤细胞MG63比正常成骨细胞的miR-940表达水平更低(4.37±0.61比12.41±1.05),差异有统计学意义(t=11.464,P<0.01),而MIEN1表达水平更高(21.01±1.01比5.49±0.38),差异有统计学意义(t=-24.954,P<0.01),Western blot结果显示miR-940与MIEN1的表达水平呈负相关(r=-0.914,P<0.01)。转染后,模拟物组miR-940水平高于控制对照及空白对照组,而抑制剂组则低于对照组(51.16±4.27比4.19±0.47比4.36±0.29比1.18±0.15),差异有统计学意义(F=372.327,P<0.01),Western blot结果表明MIEN1的蛋白表达水平为模拟物组比对照组表达降低77.89%(t=3.174,P<0.05),而抑制剂组比对照组表达增高141.78%(t=-4.318,P<0.05)。划痕实验证实迁移能力miR-940模拟物组低于控制对照和空白对照组,而抑制剂组则高于对照组(27.48±0.28比51.05±2.65比50.86±0.88比74.58±1.00),差异有统计学意义(F=1252.615,P<0.01)。在MG63细胞侵袭能力方面,miR-940模拟物组能力相较于控制对照和空白对照组降低,而抑制剂组高于对照组(58.20±5.26比79.40±6.19比79.80±5.36比101.40±6.07),差异有统计学意义(F=47.313,P<0.05)。结论MIEN1与骨肉瘤的恶性程度呈现正相关,miR-940在转录后,调控MIEN1表达水平,抑制骨肉瘤细胞MG63的迁移和侵袭。
简介:目的探讨长链非编码RNA在骨肉瘤中的作用及机制。方法选取10对骨肉瘤组织标本,利用qRT-PCR方法检测SNHG11在骨肉瘤中的表达水平;采用CCK-8实验检测SNHG11对骨肉瘤细胞增殖能力的影响;通过流式细胞术证明SNHG11对骨肉瘤细胞周期的调控作用;最后,利用westernblot筛选SNHG11可以调控的信号通路。结果与癌旁组织相比,SNHG11在骨肉瘤组织中高表达(采用配对样本t检验,n=10,t=3.16,P<0.01);沉默骨肉瘤细胞中SNHG11的表达,细胞增殖能力明显下降[scramble组第1天,(0.69±0.03),第6天(2.11±0.19);siRNA1组,第1天(0.72±0.03),第6天(1.41±0.15);siRNA2组,第1天(0.67±0.07),第6天(1.53±0.28);siRNA-1,P<0.01;siRNA-2,P<0.01],而过表达SNHG11,结果相反[NC组第1天(0.25±0.04),第7天(1.83±0.16),SNHG11组第1天(0.27±0.03),第7天(2.55±0.23),P<0.01];SNHG11可以通过诱导骨肉瘤细胞周期进展促进细胞增殖,并且其可以通过激活Wnt信号通路加速骨肉瘤细胞的增殖。结论SNHG11在骨肉瘤组织中高表达,其可以通过激活Wnt信号通路促进骨肉瘤细胞的增殖。
简介:摘要目的观察骨肉瘤中环状RNA circ_0052012表达和沉默环状RNA circ_0052012表达对骨肉瘤细胞增殖和侵袭的影响。方法实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)方法检测2017年10月至2018年12月郑州大学第一附属医院确诊的31对骨肉瘤标本癌组织和癌旁正常组织circ_0052012表达水平。使用针对circ_0052012的小干扰RNA(siRNA)转染骨肉瘤细胞系MG63,将体外培养的MG63细胞分为空白组(未转染)、阴性对照组(转染阴性对照si-NC)和沉默组(转染si-circ)。采用细胞增殖实验和Transwell实验,检测沉默RNA circ_0052012表达对MG63细胞增殖和侵袭的影响。采用生物信息学方法预测circ_0052012与微小RNA(miRNA,miR)-7的结合位点,利用双荧光素酶报告实验、RT-qPCR技术和Pearson相关分析,验证circ_0052012对miR-7的靶向调控作用及其在骨肉瘤中表达水平的相关性。两组间数据比较采用t检验,多组间数据比较采用单因素方差分析(ANOVA)。结果骨肉瘤组织中circ_0052012的表达水平显著高于对应癌旁正常组织,差异有统计学意义(2.452±1.061比1.007±0.644,t=10.180,P<0.01),且circ_0052012表达水平与骨肉瘤TNM分期、远处转移呈明显正相关(P<0.05)。在骨肉瘤细胞系MG63中,培养24、48、72 h后,circ_0052012沉默组细胞的增殖(0.297±0.012、0.607±0.074、0.797±0.067)均明显低于空白对照组(0.407±0.035、0.820±0.070、1.287±0.050)和阴性对照组(0.383±0.012、0.853±0.064、1.240±0.092),差异有统计学意义(24 h,t=-5.154、-9.192,P<0.01;48 h,t=-3.635、-4.391,P<0.05;72 h,t=-10.170、-6.778,P<0.01)。沉默组细胞的侵袭能力(39.400±6.066)也明显低于空白对照组(132.600±8.620)和阴性对照组(126.000±10.950),差异有统计学意义(t=-19.770、-15.460,P<0.01)。双荧光素酶报告实验证实circ_0052012与miR-7靶向结合,且在骨肉瘤组织中的表达呈明显负相关(r=-0.661,P<0.05)。通过抑制miR-7,可部分逆转沉默circ_0052012对MG63细胞增殖和侵袭的抑制作用。结论在骨肉瘤细胞中,沉默circ_0052012可通过上调miR-7表达,抑制细胞的增殖和侵袭。
简介:摘要骨肉瘤(OS)是一种最常见的原发性恶性骨肿瘤,主要好发于青少年。因其易转移和化疗耐药的特点,其治疗当前仍是医学界的难题,所以关于其发病机制的探索也是目前研究的热点。环状RNA(circRNA)属于一类内生性表达的非编码RNA(ncRNA),其特征是具有共价闭环结构。它的特殊结构-3’-5’共价环允许它在正常的真核细胞和癌细胞中执行一些特殊的功能。最近,越来越多的证据支持circRNA在骨肉瘤的肿瘤发生、进展、侵袭和转移中发挥关键作用。本文章综述了circRNA的特性和生物发生的最新研究,重点阐述了circRNA在骨肉瘤发生发展中的调控功能,拟为骨肉瘤的早期诊断、临床治疗和预后监测提供新的思路。
简介:摘要目的探讨肺微结节在骨肉瘤患者中的发生率、进展率以及进展为肺转移的肺微结节特征。方法使用PubMed、Embase、Web of Science和Cochrane Library数据库对2000年1月1日至2022年9月1日发表的文献进行检索,采用改良Newcastle-Ottawa量表评估文献质量,回顾骨肉瘤肺微结节的发生率、进展率及发生进展的危险因素的文献,7篇文献纳入Meta分析,证据等级均为Ⅲ级、高质量研究。分析文献中肺部微结节在骨肉瘤患者中的发生率、进展率以及进展性肺微结节特征等。结果骨肉瘤肺微结节的发生率为36.0%[95%CI(14.6%,57.3%)]。骨肉瘤肺微结节进展为肺转移的比例为52.5%[95%CI(37.7%,67.2%)]。相对大的肺微结节(直径≥5 mm)发生进展的风险显著增加,HR=2.40[95%CI(1.06,5.42,P=0.035)]。肺微结节的进展在其数量、成分和边界方面的差异无统计学意义(P>0.05)。结论肺微结节在骨肉瘤患者中十分常见,其进展为肺转移的比例高。肺微结节进展与多种因素相关,除考虑其影像学特点外,还需结合患者的临床特点对肺微结节作出早期诊断。
简介:摘要目的研究与分析骨肉瘤的x线、CT、MRI的诊断价值。方法本文采取回顾性分析的方法对来我院进行检查的患有骨肉瘤的患者41例(2016年9月—2017年9月),所有患者均采取x线、CT以及MRI等影像学检查,观察三种检查方法的临床诊断率。结果骨肉瘤的基本影像表现为骨膜反应、骨质破坏、软组织脓肿以及瘤骨等,三种检查方法在瘤骨、骨质破坏以及软组织脓肿等方面的影像表现无明显差异,不具有统计学意义(P>0.05),但是三组见擦汗方法在骨膜反应、Codman三角诊断方面具有明显差异,具有统计学意义(P<0.05)。结论三种影像学检查方法对于骨肉瘤的检查均表现出较高的诊断价值,在临床上常使用X线检查对骨肉瘤患者进行诊断,而CT检查对于骨肉瘤的骨质破坏以及微小瘤骨检查等方面的诊断价值较高,MRI检查具有较高的分辨率,对于骨肉瘤的肿瘤浸润范围以及周围组织等方面的诊断价值较高。三种检查方式联合使用,可以提高诊断价值以及准确率。
简介:摘要p53基因是一种常见的抑癌基因,它几乎参与了人类所有肿瘤的生物学过程。骨肉瘤是一种最常见的骨原发恶性肿瘤,p53基因改变是骨肉瘤发生发展过程中的一个重要事件,并影响着化疗效果和预后。现就p53基因在骨肉瘤中的研究做一综述。