简介:摘要目的探讨英夫利西单克隆抗体(IFX)对CD患者肠黏膜屏障的修复作用。方法选择2018年1月至2019年10月于上海市第十人民医院就诊的CD患者382例,均行IFX治疗,另选择103名行结肠镜检查者作为健康对照组。收集CD患者和健康对照者的一般临床资料、空腹血和肠黏膜组织样本,计算BMI,检测血红蛋白、白蛋白、ESR、CRP,以及相关炎症因子TNF-α、γ干扰素、IL-1、IL-2、IL-6、IL-8、IL-10、IL-17A表达水平及其mRNA水平。采用克罗恩病疾病活动指数(CDAI)和克罗恩病简化内镜评分(SES-CD)评价CD患者的疾病活动度。采用蛋白质印迹法分析闭锁蛋白、紧密连接蛋白-1、闭锁小带蛋白-1(ZO-1)和连接黏附分子-A(JAM-A)表达水平。通过透射电子显微镜观察肠黏膜上皮细胞。统计学分析采用t检验。结果CD患者治疗前BMI、血红蛋白、白蛋白水平均低于健康对照组[(18.3±1.8) kg/m2比(20.2±1.2) kg/m2、(95.3±8.4) g/L比(129.2±5.7) g/L、(33.2±5.4) g/L比(50.3±3.2) g/L],差异均有统计学意义(t=3.457、5.342、2.674,P均<0.05)。CD患者治疗后BMI和血红蛋白水平均高于治疗前[(19.5±2.1) kg/m2比(18.3±1.8) kg/m2、(117.2±10.3) g/L比(95.3±8.4) g/L],CRP水平、CDAI评分、SES-CD评分均低于治疗前[(16.3±2.3) mg/L比(47.2±9.3) mg/L、(113.2±12.5)分比(245.2±23.5)分、(5.0±2.1)分比(10.0±4.3)分],差异均有统计学意义(t=2.090、2.339、2.432、6.345、5.234,P均<0.05)。健康对照组促炎因子TNF-α、γ干扰素、IL-2、IL-6、IL-8、IL-17A表达水平及其mRNA水平均低于CD患者治疗前[分别为(1.1±0.4) ng/L比(158.2±38.3) ng/L、(3.2±0.8) ng/L比(28.3±13.4) ng/L、(2.7±1.3) ng/L比(3.3±2.4) ng/L、(5.2±0.3) ng/L比(16.3±7.4) ng/L、(16.3±6.3) ng/L比(18.9±10.2) ng/L、(10.5±2.3) ng/L比(38.5±11.2) ng/L;1.00±0.00比4.68±0.34、7.83±0.32、1.25±0.46、8.36±0.44、2.01±0.89、6.83±0.53],差异均有统计学意义(t=2.345、6.456、3.008、4.009、7.045、10.223,8.345、11.235、1.114、12.334、5.304、5.678;P均<0.05)。CD患者治疗后TNF-α、γ干扰素、IL-2、IL-6、IL-8、IL-17A表达水平及其mRNA水平均低于治疗前[分别为(106.4±29.9) ng/L比(158.2±38.3) ng/L、(25.7±10.8) ng/L比(28.3±13.4) ng/L、(2.9±1.7) ng/L比(3.3±2.4) ng/L、(15.4±4.2) ng/L比(16.3±7.4) ng/L、(17.2±8.7) ng/L比(18.9±10.2) ng/L、(29.9±12.7) ng/L比(38.5±11.2) ng/L,2.45±0.21比4.68±0.34、3.75±0.18比7.83±0.32、1.09±0.22比1.25±0.46、3.78±0.21比8.36±0.44、1.67±0.33比2.01±0.89、2.96±0.11比6.83±0.53],差异均有统计学意义(t=9.345、2.456、2.334、2.090、3.009、8.345,4.567、6.445、2.046、7.774、3.008、8.867;P均<0.05)。蛋白质印迹法结果显示,CD患者治疗前肠黏膜组织中的闭锁蛋白、紧密连接蛋白-1、ZO-1和JAM-A表达水平均低于健康对照组(0.21±0.03比1.00±0.02、0.17±0.07比1.00±0.01、0.16±0.06比1.00±0.04、0.26±0.08比1.03±0.04),CD患者治疗后闭锁蛋白、紧密连接蛋白-1、ZO-1和JAM-A的mRNA水平均高于治疗前(0.77±0.08比0.21±0.03、0.69±0.08比0.17±0.07、0.78±0.09比0.16±0.06、0.72±0.07比0.26±0.08),差异均有统计学意义(t=4.567、6.346、5.557、8.456,9.678、8.671、10.456、7.456;P均<0.05)。结论IFX能有效缓解CD患者病情活动,改善其营养状态,可通过减轻CD患者体内的炎症反应,维持肠上皮紧密连接蛋白的表达,修复CD患者的肠黏膜屏障。
简介:摘要目的制备靶向CD30单克隆抗体(简称单抗)64Cu-1,4,7-三氮杂环壬烷-1,4,7-三乙酸(NOTA)-CD30,无创性可视化评价淋巴瘤CD30的表达。方法通过Western blot评价5种淋巴瘤细胞株(Karpas299、Raji、Daudi、Ramos和U266)中CD30的表达水平。选择高和低表达CD30的细胞株行流式细胞术评估抗CD30单抗特异性结合能力。取NSG小鼠13只构建CD30阳性和阴性皮下荷瘤鼠模型。标记获得64Cu-NOTA-CD30,以64Cu-NOTA-免疫球蛋白(Ig)G为对照探针。经尾静脉注射2种探针后2、24和48 h行microPET显像及生物分布分析。采用重复测量方差分析及Bonferroni法进行数据比较。结果Karpas299细胞呈CD30高表达,Raji细胞呈CD30低表达。流式细胞术示抗CD30单抗与Karpas299细胞特异性结合。64Cu-NOTA-CD30与64Cu-NOTA-IgG的放化纯均>95%。在microPET显像中,Karpas299肿瘤64Cu-NOTA-CD30摄取随时间延长逐渐升高,2、24和48 h分别为(11.46±0.58)、(17.60±1.16)与(19.46±0.99)每克组织百分注射剂量率(%ID/g);48 h时与本底对比度良好,肿瘤与心(血液)比值为2.20±0.22。48 h时,64Cu-NOTA-CD30在Karpas299肿瘤的摄取高于其在Raji肿瘤[(6.10±1.03) %ID/g]及64Cu-NOTA-IgG在Karpas299肿瘤的摄取[(5.12±0.89) %ID/g],差异均有统计学意义(F=290.99,t值:19.65和22.25,均P<0.001)。64Cu-NOTA-CD30与64Cu-NOTA-IgG在各组心、肝的摄取随时间延长逐渐降低。48 h体外生物分布结果与活体microPET显像基本一致。结论64Cu-NOTA-CD30能在活体水平无创性可视化评价淋巴瘤CD30的表达及分布情况,有望应用于靶向CD30免疫治疗的受益群体筛选及疗效评价。
简介:摘要目的为有效治疗非霍奇金淋巴瘤患者,临床探究CHOP方案联合利妥昔单克隆抗体的疗效。方法选取我院2014年5月~2015年6月期间96例经诊断为非霍奇金淋巴瘤的老年患者,随机分为单一组48例、联合组48例,单一组采用CHOP方案,联合组采用利妥昔单克隆抗体联合CHOP方案,观察两组疗效以及不良反应情况。结果治疗后联合组临床效率、不良反应发生率为95.8%、8.3%,单一组依次为83.3%、18.8%,联合组较单一组疗效好、不良反应少,P<0.05。结论临床治疗非霍奇金淋巴瘤老年患者采用CHOP方案联合利妥昔单克隆抗体,可有效提高治疗效果,不良反应少、用药安全性高。
简介:摘要目的系统评价抗降钙素基因相关肽及其受体单克隆抗体(monoclonal antibodies to calcitonin gene-related peptide and its receptor, CGRP-mAbs)预防性治疗偏头痛的有效性和安全性。方法计算机检索美国国立医学图书馆生物医学信息检索系统PubMed、Embase、Cochrane在线图书馆、中国知网中国知识基础设施工程(CNKI)、万方数据库、维普数据库(VIP)以查找CGRP-mAbs预防性治疗偏头痛的随机对照试验(randomized controlled trials,RCTs),使用Cochrane Collaboration提供的Review Manager 5.3进行质量评价,采用StataMP14进行荟萃分析。结果共纳入13项RCTs,涉及6 218例成年偏头痛患者(试验组2 679例,对照组3 539例)。荟萃分析结果示:与安慰剂组相比,CGRP-mAbs预防性治疗成人偏头痛减少了每月偏头痛发作天数[标准均数差(SMD)=-0.35;95% CI-0.4~-0.3];CGRP-mAbs增加了每月发作天数减少≥50%的应答率[相对危险度(RR)=1.65,95%CI1.54~1.76];CGRP-mAbs减少了每月应用特异性药物的天数(SMD=-0.38;95%CI -0.43~-0.32);CGRP-mAbs的不良反应与对照组差异无统计学意义(RR=1.06,95%CI 1.01~1.10)。结论CGRP-mAbs可安全有效地预防性治疗偏头痛。
简介:摘要目的以HER2荧光原位杂交(FISH)检测作为参照,使用免疫组织化学(IHC)法比较2种抗体对胆囊腺癌HER2蛋白检测效能。方法建立一组包含108例胆囊浸润性腺癌的高产组织芯片,用2种抗HER2抗体(克隆号4B5和A0485)在其相对应平台检测HER2蛋白表达,FISH方法检测HER2基因扩增。用ROC曲线计算IHC灵敏度、特异度及准确度,Kappa系数分析一致性,McNemar检验比较各组间检出率差异。结果HER2基因扩增病例为23例(21.3%)。4B5抗体的表达结果(3+、2+、0/1+)为12、13、83例。IHC 3+检出HER2基因扩增的灵敏度和特异度分别为52.2%和100%。A0485抗体的表达结果(3+、2+、0/1+)为22、45、41例。IHC 3+检出HER2基因扩增的灵敏度和特异度分别为65.2%和68.2%。两组结果差异有统计学意义(P<0.01)。以IHC 2/3+作为阳性,4B5抗体检出HER2扩增的灵敏度和特异度分别为78.3%和72.0%,A0485为100%和34.3%,结果差异有统计学意义(P<0.01)。4B5抗体IHC 2/3+检出HER2基因扩增的准确度为0.907,A0485为0.869。4B5抗体IHC和FISH检测结果的一致性为88.9%(Kappa值=0.679),A0485抗体为59.3%(Kappa值=0.284)。结论在胆囊腺癌中4B5抗体IHC结果和FISH结果的一致性高于A0485抗体。
简介:摘要目的筛选适合监测低葡萄糖代谢的胃黏液腺癌小鼠模型的89Zr标记表皮生长因子受体(EGFR)和人表皮生长因子受体2(HER2)单克隆抗体(简称单抗)分子探针。方法通过细胞爬片和移植瘤肿瘤切片验证MGC803胃癌细胞株的EGFR和HER2表达情况;用89Zr标记去铁胺-西妥昔单抗(DFO-Cetuximab)和去铁胺-帕妥珠单抗(DFO-Pertuzumab),制得分别靶向EGFR和HER2的89Zr-DFO-Cetuximab和89Zr-DFO-Pertuzumab,测定其放化纯;通过细胞结合实验、阻断实验验证89Zr-DFO-Cetuximab和89Zr-DFO-Pertuzumab与MGC803的结合力和特异性;将12只MGC803荷瘤裸鼠模型分3组(每组4只),分别注射89Zr-DFO-Cetuximab(7.4 MBq/只,74 μg/只)、89Zr-DFO-Pertuzumab(7.4 MBq/只,70 μg/只)和18F-脱氧葡萄糖(FDG)(7.4 MBq/只),于注射后4、24和48 h进行microPET显像(18F-FDG显像为注射后1 h);另取8只荷瘤裸鼠,分为89Zr-DFO-Cetuximab组和89Zr-DFO-Pertuzumab组(各4只),于探针注射后48 h进行生物分布研究。采用两独立样本t检验进行组间生物分布比较。结果肿瘤切片免疫荧光染色示MGC803胃癌细胞株EGFR表达量高于HER2。89Zr-DFO-Cetuximab和89Zr-DFO-Pertuzumab放化纯均大于95%,比活度分别为100和95 MBq/mg;2种探针在生理盐水和胎牛血清(FBS)中稳定性好,放置72 h放化纯仍高于80%。MicroPET显像示MGC803肿瘤部位89Zr-DFO-Cetuximab的摄取高于18F-FDG和89Zr-DFO-Pertuzumab。生物分布实验示,48 h肿瘤89Zr-DFO-Cetuximab摄取[每克组织百分注射剂量率(%ID/g)]为56.3±12.0,高于89Zr-DFO-Pertuzumab摄取(22.0±3.6;t=4.31, P<0.05)。结论相较于89Zr-DFO-Pertuzumab,89Zr-DFO-Cetuximab具有更好的无创监测低葡萄糖代谢胃黏液腺癌的潜能。
简介:摘要目的探讨程序性死亡蛋白-1(programmed death-1,PD-1)抑制剂在艾滋病合并恶性肿瘤患者中的可行性、疗效和不良反应。方法纳入2020年9月至2021年8月于武汉大学中南医院使用PD-1单克隆抗体的艾滋病合并恶性肿瘤患者,收集患者基本情况、实验室检查结果、CD4+T细胞计数、人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)载量。PD-1单克隆抗体持续用药直至疾病进展或出现不可耐受的毒性反应,记录治疗期间患者的不良反应,每12周评估1次疗效。在治疗后每周检测1次HIV载量,连续4次,随后每4周1次,连续2次,其后每12周1次动态监测。结果共10例患者纳入研究,其中男7例,女3例;霍奇金淋巴瘤3例,宫颈癌和肝细胞癌各2例,非霍奇金淋巴瘤、非小细胞肺癌和肛门癌各1例。治疗前4例患者CD4+T细胞计数为100~200/μL,2例CD4+T细胞计数<100/μL。所有患者均至少完成3个周期PD-1单克隆抗体治疗,HIV载量均<20拷贝/mL。3例患者完全缓解,3例患者部分缓解。7例患者发生皮肤毛细血管增生症,3例发生大出血,1例发生听力障碍。结论PD-1抑制剂对HIV载量持续抑制无不良影响,且对肿瘤控制可发挥有效作用,可用于艾滋病合并肿瘤患者的治疗。但因其不良反应较多,故需多学科合作以降低合并症出现风险及处理严重并发症。
简介:摘要目的利用生物信息学技术分析西妥昔单克隆抗体(以下简称单抗)耐药结直肠癌细胞中环状RNA circ_0008274的表达水平,探索其参与西妥昔单抗耐药发生的机制。方法采用人结直肠癌细胞DiFi和Caco-2,设立10、50、100、150、200 nmol/L 5个西妥昔单抗浓度点,通过浓度递增法筛选并建立西妥昔单抗耐药结直肠癌细胞DiFi-R、Caco-2-R,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测DiFi-R、Caco-2-R细胞与DiFi、Caco-2细胞中circ_0008274的表达水平。运用双萤光素酶报告基因分析circ_0008274与miR-140-3p的偶联调控关系。采用免疫印迹法验证与西妥昔单抗耐药相关的高表达基因SMARCC1的蛋白质表达水平。采用si-circ_0008274转染方法敲除DiFi-R、Caco-2-R细胞中的circ_0008274,比较敲除前后的DiFi-R、Caco-2-R细胞的增殖活性和克隆形成数。将miR-140-3p模拟物和空白对照微RNA分别转染至DiFi-R、Caco-2-R细胞,比较转染miR-140-3p模拟物与转染空白对照微RNA的DiFi-R、Caco-2-R细胞增殖活性。分析敲除circ_0008274后的Caco-2-R细胞在pcDNA3.1 SMARCC1营救前后SMARCC1蛋白质水平和细胞增殖活性。纳入2019年3月至2020年8月于武汉大学人民医院住院接受西妥昔单抗治疗的15例结直肠癌患者的肿瘤标本,根据患者的治疗效果分为敏感组(11例)和耐药组(4例);通过RT-PCR分析两组患者结直肠癌组织中circ_0008274、下游SMARCC1和miR-140-3p的相对表达水平。统计学方法采用独立样本t检验。结果circ_0008274在DiFi-R细胞中的表达水平为DiFi细胞的(2.33±0.12)倍,在Caco-2-R细胞中的表达水平为Caco-2细胞的(2.92±0.42)倍,差异均有统计学意义(t=19.97、7.80,均P<0.05)。双萤光素酶报告基因分析显示miR-140-3p模拟物与野生型circ_0008274结合后的相对荧光强度低于结合前(0.28±0.04比1.00±0.00),差异有统计学意义(t=-30.71,P=0.001)。DiFi-R、CaCo-2-R细胞中SMARCC1表达增强,其蛋白质水平分别高于DiFi、Caco-2细胞(2.22±0.36比0.61±0.17、0.85±0.11比0.35±0.08),差异均有统计学意义(t=6.23、6.32,均P<0.01)。DiFi-R、Caco-2-R细胞敲除circ_0008274后的细胞克隆形成数均低于敲除前(36.67±4.04比66.00±9.54、17.35±4.04比52.33±8.02),10、50、100、150、200 nmol/L西妥昔单抗干预下,相对活性细胞比均低于敲除前[DiFi-R细胞:(73.75±2.75)%比(88.10±2.48)%、(56.50±6.66)%比(75.15±6.03)%、(35.75±5.32)%比(59.63±6.67)%、(24.25±3.30)%比(52.40±6.71)%、(6.25±2.75)%比(48.60±5.38)%;Caco-2-R细胞:(63.74±5.25)%比(85.76±4.79)%、(56.50±4.20)%比(83.50±3.90)%、(46.00±2.94)%比(80.00±6.05)%、(35.30±5.56)%比(68.30±4.57)%、(12.25±7.37)%比(62.40±7.51)%],差异均有统计学意义(t=4.90、6.71,-7.75、-4.16、-5.60、-7.53、-14.02,-6.19、-8.33、-10.10、-9.17、-9.56;均P<0.01)。10、50、100、150、200 nmol/L西妥昔单抗干预下,DiFi-R和Caco-2-R细胞转染miR-140-3p模拟物后的相对活性细胞比均低于转染空白对照微RNA后[DiFi-R细胞:(71.55±4.97)%比(85.90±2.66)%、(51.58±3.91)%比(74.95±6.35)%、(41.23±8.84)%比(58.43±7.05)%、(28.60±5.26)%比(53.75±5.65)%、(18.90±5.13)%比(51.30±3.30)%;Caco-2-R细胞:(61.75±2.22)%比(90.10±1.41)%、(53.25±4.17)%比(86.18±2.69)%、(46.38±4.55)%比(77.75±6.70)%、(36.10±8.76)%比(70.15±4.18)%、(24.25±2.63)%比(65.10±7.62)%],差异均有统计学意义(t=-5.09、-6.47、-3.05、-6.28、-10.30,-21.48、-12.83、-8.01、-6.79、-10.12;均P<0.01)。敲除circ_0008274后,Caco-2-R细胞通过pcDNA3.1 SMARCC1营救的SMARCC1蛋白质水平高于营救前(0.63±0.19比0.09±0.03),10、50、100、150、200 nmol/L西妥昔单抗干预下的相对活性细胞比均高于营救前[(93.10±3.56)%比(83.83±3.97)%、(83.28±4.26)%比(60.90±7.02)%、(61.83±2.12)%比(50.10±5.59)%、(53.20±3.74)%比(40.50±3.42)%、(46.20±4.08)%比(30.80±4.82)%],差异均有统计学意义(t=3.55、3.52、5.44、3.87、4.64、4.88,均P<0.01)。耐药组患者结直肠癌组织中circ_0008274和下游SMARCC1的相对表达水平均高于敏感组(6.45±1.32比2.26±1.39、12.53±1.60比3.82±1.56),miR-140-3p相对表达水平低于敏感组(3.91±1.25比7.43±2.23),差异均有统计学意义(t=5.22、9.51、-2.93,均P<0.01)。结论环状RNA circ_0008274在结直肠癌组织、西妥昔单抗耐药结直肠癌细胞中呈高表达,偶联并抑制miR-140-3p表达,上调SMARCC1,参与西妥昔单抗耐药的发生。pcDNA3.1 SMARCC1营救能够阻断si-circ_0008274的西妥昔单抗增敏作用,显著增加结直肠癌细胞的西妥昔单抗耐药性。
简介:摘要人表皮生长因子受体2(HER2)低表达乳腺癌具有较为独特的生物学行为,与HER2零表达乳腺癌相比,在分子分型与基因表达方面存在显著差异。以T-DXd为代表的新型抗体药物偶联物为HER2低表达乳腺癌患者提供了新的治疗选择,相关临床试验在持续开展中。目前,HER2低表达与乳腺癌患者预后的关系尚存争议。对HER2低表达乳腺癌的深入研究将有助于进一步改善该类乳腺癌患者的临床结局。
简介:载脂蛋白(APO)B主要分布在人体血液中的的低密度脂蛋白(LDL)和极低密度脂蛋白(VLDL)中,约占LDL蛋白质的95%~99%,其主要功能是参与脂质转运和被细胞膜上的LDL受体识别。研究证明,apoB与动脉粥样硬化(AS)的发生有着密切的关系。近年来,多数医院已开展了测定人体血液中apoB含量来判定AS的危险程度。而国内所用的试剂盒均为多克隆抗体,这给临床测定结果的准确性和特异性带来了一定的差异。为此国内许多研究单位拟想通过基因重组技术,将apoB单抗细胞株通过逆转录、构建使其表达apoB单链抗体。