简介：摘要目的探讨miR-363-3p靶向TWIST1调控非小细胞肺癌A549细胞迁移和侵袭的分子机制。方法将体外培养的A549细胞分为空白对照组（细胞未做任何处理）；模拟物对照组（转染miR-363-3p模拟物阴性对照）；模拟物组（转染miR-363-3p模拟物）；后期实验另设：模拟物+ pcDNA组（转染miR-363-3p模拟物和pcDNA3.1空载体质粒）；模拟物+ TWIST1组（转染miR-363-3p模拟物和pcDNA3.1-TWIST1过表达质粒）。采用RT-PCR检测细胞中miR-363-3p的表达，Western blot检测细胞中TWIST1蛋白和上皮间质转化（EMT）相关蛋白Vimentin、E-cadherin的表达，Transwell小室实验检测细胞的迁移和侵袭。双荧光素酶报告基因实验检测miR-363-3p和TWIST1的靶向关系。两组间比较采用独立样本t检验，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验。结果与空白对照组和模拟物对照组比较，模拟物组A549细胞中miR-363-3p表达水平（1.00±0.08、0.97±0.05比3.82±0.45）升高，TWIST1 mRNA （1.00±0.06、0.98±0.06比0.39±0.02）和蛋白的表达水平（0.81±0.05、0.78±0.06比0.42±0.02）降低，差异具有统计学意义（P均< 0.05）。与空白对照组和模拟物对照组比较，模拟物组A549细胞Vimentin蛋白表达水平（0.58±0.04、0.55±0.05比0.36±0.03）降低，E-cadherin蛋白的表达水平（0.22±0.02、0.25±0.03比0.47±0.03）增高，迁移细胞数（85.75±5.45、83.52±6.85比53.05±4.50）和侵袭细胞数（128.26±6.15、125.95±8.05比71.64±5.75）降低，差异有统计学意义（P均< 0.05）。与模拟物对照组比较，模拟物组细胞中Vimentin蛋白的表达水平（0.55±0.05比0.36±0.03）降低，而E-cadherin蛋白表达水平（0.25±0.03比0.47±0.03）升高，迁移细胞数（83.52±6.85比53.05±4.50）和侵袭细胞数（125.95±8.05比71.64±5.75）均减少（P均< 0.05）。TWIST1是miR-363-3p潜在的靶基因。与模拟物+ pcDNA3.1组比较，模拟物+ TWIST1组A549细胞中Vimentin蛋白的表达水平（0.32±0.02比0.42±0.03）升高，而E-cadherin蛋白表达水平（0.56±0.04比0.38±0.03）降低，A549细胞的迁移数（49.45±4.22比67.52±5.05）和侵袭数（72.45±5.73比108.35±6.56）增加（P均< 0.05）。结论miR-363-3p可通过靶向TWIST1调控EMT抑制A549细胞迁移和侵袭。

简介：AbstractBackground:Glioblastoma is one of the most common malignant brain tumors. Conventional clinical treatment of glioblastoma is not sufficient, and the molecular mechanism underlying the initiation and development of this disease remains unclear. Our study aimed to explore the expression and function of miR-873a-5p in glioblastoma and related molecular mechanism.Methods:We analyzed the most dysregulated microRNAs from the Gene Expression Omnibus (GEO) database and examined the expression of miR-873-5p in 20 glioblastoma tissues compared with ten normal brain tissues collected in the Zhejiang Tongde Hospital. We then overexpressed or inhibited miR-873-5p expression in U87 glioblastoma cell lines and analyzed the phenotype using the cell counting kit-8 assay, wound healing assay, and apoptosis. In addition, we predicted upstream and downstream genes of miR-873-5p in glioblastoma using bioinformatics analysis and tested our hypothesis in U87 cells using the luciferase reporter gene assay and Western blotting assay. The differences between two groups were analyzed by Student’s t test. The Kruskal-Wallis test was used for the comparison of multiple groups. A P < 0.05 was considered to be significant.Results:The miR-873-5p was downregulated in glioblastoma tissues compared with that in normal brain tissues (normal vs. tumor, 0.762 ± 0.231 vs. 0.378 ± 0.114, t= 4.540, P < 0.01). Overexpression of miR-873-5p inhibited cell growth (t= 6.095, P < 0.01) and migration (t= 3.142, P < 0.01) and promoted cell apoptosis (t= 4.861, P < 0.01), while inhibition of miR-873-5p had the opposite effect. Mechanistically, the long non-coding RNA HOTAIRM1 was found to act as a sponge of miR-873-5p to activate ZEB2 expression in U87 cells.Conclusions:We uncovered a novel HOTAIRM1/miR-873-5p/ZEB2 axis in glioblastoma cells, providing new insight into glioblastoma progression and a theoretical basis for the treatment of glioblastoma.

简介：摘要目的研究miR-106a-5p对鼻咽癌细胞SUNE2增殖和迁移的影响。方法将体外培养的鼻咽癌细胞SUNE2分成对照组（细胞未做任何处理）、Anti-NC组（转染阴性对照抑制剂）、Anti-miR-106a-5p组（转染miR-106a-5p抑制剂）、后期实验另设Anti-miR-106a-5p-inhibitor+si-NC组（转染miR-106a-5p抑制剂、siRNA阴性对照）、Anti-miR-106a-5p-inhibitor+si-PTEN组（转染miR-106a-5p抑制剂、PTEN siRNA），采用Realtime PCR测定miR-106a-5p表达，MTT法检测增殖，Transwell小室检测细胞侵袭和迁移能力变化，用Western blot方法测定vimentin、E-cadherin蛋白表达。在线靶基因预测软件预测miR-106a-5p的靶基因可能为PTEN，双荧光素酶报告系统鉴定miR-106a-5p和PTEN的靶向关系。两组间比较用独立样本t检验，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验。结果与正常鼻咽上皮细胞NP69比较，鼻咽癌细胞CNE-2、HK1、SUNE2中miR-106a-5p水平（1.00±0.11比1.84±0.13、2.19±0.14、2.87±0.25）升高，差异具有统计学意义（P < 0.05）。与对照组、Anti-NC组比较，Anti-miR-106a-5p组鼻咽癌细胞miR-106a-5p水平（1.00±0.10、0.99±0.12比0.76±0.08）降低，OD值（0.56±0.05、0.57±0.04比0.32±0.02），细胞侵袭数[（128.47±11.65）个、（129.84±10.93）个比（85.12±6.75）个]，迁移数[（182.51±14.81）个、（180.68±17.64）个比（122.01±11.62）个]，vimentin蛋白表达水平（0.84±0.09、0.82±0.07比0.30±0.05）降低，E-cadherin蛋白表达水平（0.29±0.04、0.28±0.05比0.76±0.08）升高，差异具有统计学意义（P均< 0.05）。与Anti-miR-106a-inhibitor+si-NC组比较，Anti-miR-106a-inhibitor+si-PTEN组细胞OD值（0.33±0.03比0.52±0.05）、侵袭数[（84.16±5.91）个比（105.79±8.63）个]、迁移数[（118.42±10.25）个比（164.28±12.05）个]、vimentin蛋白表达水平（0.34±0.06比0.68±0.05）均升高，E-cadherin蛋白表达水平（0.72±0.06比0.29±0.05）降低，差异具有统计学意义（P均< 0.05）。结论miR-106a-5p可通过靶向调控PTEN抑制鼻咽癌细胞SUNE2增殖和迁移潜能。

简介：摘要目的探讨HOXA-AS2对动脉粥样硬化（AS）模型细胞生物学功能以及炎症因子的影响及分子机制。方法本实验共分为4个实验；实验1：用100 μg/mL的ox-LDL处理EA.hy926细胞作为ox-LDL组，正常培养的细胞作为对照组；实验2：将pcDNA3.1、pcDNA3.1-HOXA-AS2转染至EA.hy926细胞中再用100 μg/mL的ox-LDL处理，记为ox-LDL+pcDNA3.1组、ox-LDL+pcDNA3.1-HOXA-AS2组；实验3：将pcDNA3.1、pcDNA3.1-HOXA-AS2、si-NC、si-HOXA-AS2分别转染至EA.hy926细胞中，记为pcDNA3.1组、pcDNA3.1-HOXA-AS2组、si-NC组、si-HOXA-AS2组；实验4：将pcDNA3.1-HOXA-AS2与miR-NC、miR-17分别共转染至EA.hy926细胞中再用100 μg/mL的ox-LDL处理，记为ox-LDL+pcDNA3.1-HOXA-AS2+miR-NC组、ox-LDL+pcDNA3.1-HOXA-AS2+miR-17组。实时荧光定量PCR （RT-qPCR）检测HOXA-AS2和miR-17的表达水平；蛋白质印迹（Western blot）法检测细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A （P21）、cleaved caspase 3蛋白表达；MTT检测细胞增殖情况；流式细胞术检测细胞凋亡；ELISA法检测白细胞介素-1 （IL-1）、白细胞介素-6 （IL-6）水平；荧光素酶报告实验检测HOXA-AS2和miR-17的靶向关系。两组间比较采用独立样本t检验，多组间比较采用方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验。结果与对照组比较，ox-LDL组EA.hy926细胞中HOXA-AS2表达水平（0.23±0.02比1.02±0.10），细胞增殖率[（47.83±5.01）﹪比（100.06±10.20）﹪]均降低，细胞凋亡率[（26.81±2.47）﹪比（8.23±0.80）﹪]、P21 （0.82±0.08比0.20±0.02）、cleaved caspase 3 （0.67±0.06比0.14±0.01）、IL-1[（792.34±59.37）ng/L比（326.14±34.59） ng/ L]和IL-6表达水平[（53.67±4.65）ng/L比（19.25±2.11）ng/L]均升高，差异具有统计学意义（P均< 0.05）。与ox-LDL+pcDNA3.1组比较，ox-LDL+pcDNA3.1-HOXA-AS2组EA.hy926细胞中HOXA-AS2表达水平（0.87±0.09比0.22±0.02）、细胞增殖率[（89.94±8.34）﹪比（48.21±4.86）﹪]均升高，细胞凋亡率[（12.33±1.18）﹪比（26.83±2.48）﹪]、P21 （0.33±0.03比0.81±0.08）、cleaved caspase 3 （0.24±0.02比0.69±0.06）、IL-1[ （446.25±46.84）ng/L比（802.21±60.18）ng/L]和IL-6表达水平[（25.64±2.65）ng/L比（55.21±5.10）ng/L]均降低，差异具有统计学意义（P均< 0.001）。与ox-LDL+pcDNA3.1-HOXA-AS2+miR-NC组比较，ox-LDL+pcDNA3.1-HOXA-AS2+miR-17组EA.hy926细胞中miR-17表达水平（2.14±0.21比1.05±0.10）、细胞凋亡率[（23.31±2.33）﹪比（13.75±1.44）﹪]、IL-1水平[（684.26±62.38）ng/L比（451.21±43.58）ng/L]、IL-6水平[（41.29±4.37）ng/L比（26.11±2.39）ng/L]均升高，细胞增殖率[（53.67±5.46）﹪比（90.21±9.16）﹪]降低，差异具有统计学意义（P均< 0.001）。HOXA-AS2与miR-17存在结合位点，荧光素酶报告实验显示，与miR-NC组比较，miR-17组中转染WT-HOXA-AS2的EA.hy926细胞荧光素酶活性降低（0.33±0.03比1.01±0.10，P < 0.05），而转染MUT-HOXA-AS2的EA.hy926细胞荧光素酶活性差异无统计学意义（P > 0.05）；与anti-miR-NC组比较，anti-miR-17组中转染WT-HOXA-AS2的EA.hy926细胞荧光素酶活性升高（2.29±0.21比1.00±0.10，P < 0.05），而转染MUT-HOXA-AS2的EA.hy926细胞荧光素酶活性差异无统计学意义（P > 0.05）。结论过表达HOXA-AS2促进细胞增殖，抑制ox-LDL引起的细胞凋亡和炎症因子的释放，其机制可能与miR-17有关。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA LINC－PINT对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响机制。方法应用实时荧光定量聚合酶链反应检测正常成骨细胞hFOB和人骨肉瘤细胞HOS、MG63和SAOS2中LINC－PINT和miR－524－5p的表达。应用脂质体法转染至pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA－LINC－PINT组(转染pcDNA－LINC－PINT)、si－NC组(转染si－NC)、si－LINC－PINT组(转染si－LINC－PINT)、miR－NC组(转染miR－NC)、miR－524－5p组(转染miR－524－5p mimics)、pcDNA－LINC－PINT＋miR－NC组(共转染pcDNA－LINC－PINT和miR－NC)和pcDNA－LINC－PINT＋miR－524－5p组(共转染pcDNA－LINC－PINT和miR－524－5p)HOS细胞，Western blot检测细胞中PCNA和cleaved－caspase－3蛋白的表达，四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖情况，流式细胞术检测细胞的凋亡情况，双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞的荧光活性。结果人骨肉瘤细胞HOS、MG63和SAOS2中LINC－PINT的表达水平分别为0.18±0.01、0.33±0.01和0.42±0.01，miR－524－5p的表达水平分别为2.65±0.23、1.68±0.14和1.51±0.13，与正常成骨细胞hFOB(分别为1.00±0.08和1.00±0.06)比较，差异均有统计学意义(均P<0.05)。培养48、72 h时，pcDNA－LINC－PINT组HOS细胞的吸光度(A)值分别为0.41±0.05和0.57±0.05，pcDNA组细胞的A值分别为0.62±0.05和1.06±0.09，差异均有统计学意义(均P<0.01)。pcDNA－LINC－PINT组和pcDNA组细胞的凋亡率分别为(25.28±2.15)%和(9.01±0.17)%，差异有统计学意义(P<0.01)。与miR－NC组(1.00±0.03)比较，miR－524－5p组WT－LINC－PINT细胞的荧光活性(0.31±0.03)降低，差异有统计学意义(均P<0.01)。过表达miR－524－5p可逆转LINC－PINT对HOS细胞的增殖抑制和凋亡促进作用。结论长链非编码RNA LINC－PINT可抑制骨肉瘤细胞的增殖，促进凋亡，其作用机制与靶向miR－524－5p有关，可为骨肉瘤的治疗提供新的作用靶点。

简介：摘要目的探讨lncRNA MEG3对鼻咽癌细胞的放射敏感性影响及潜在作用机制。方法实验设置过表达对照组、过表达MEG3组、抑制miR-NC组、抑制miR-7-5p组、过表达对照＋4 Gy组、过表达MEG3＋4 Gy组、抑制miR-NC＋4 Gy组、抑制miR-7-5p＋4 Gy组、过表达MEG3＋过表达miR-NC组、过表达MEG3＋过表达miR-7-5p组。采用qRT-PCR检测miR-7-5p和MEG3表达；细胞克隆形成实验检测鼻咽癌细胞放射敏感性；流式细胞术检测细胞凋亡；双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。结果MEG3在鼻咽癌组织和细胞系中低表达；过表达MEG3和抑制miR-7-5p表达可增加鼻咽癌细胞放射敏感性且促进细胞凋亡。MEG3可靶向调节miR-7-5p表达；过表达miR-7-5p逆转了过表达MEG3对鼻咽癌细胞放射增敏和促进细胞凋亡的作用。结论过表达MEG3增加鼻咽癌细胞放射敏感性，并促进细胞凋亡，其机制可能与下调miR-7-5p有关。

简介：摘要目的探讨miR－451对多发性骨髓瘤RPMI－8226细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其作用机制。方法将体外培养的RPMI－8226细胞分为空白对照组(未转染)、阴性对照组(转染miR－451模拟物阴性对照)和miR－451组(转染miR－451模拟物)，采用实时定量PCR检测各组细胞中miR－451的表达，采用四甲基偶氮唑蓝法和克隆形成实验检测细胞的增殖情况，Transwell小室实验检测细胞的侵袭和迁移情况，Western blot检测c－Myc、基质金属蛋白酶2(MMP－2)和MMP－9蛋白的表达，双荧光素酶报告基因实验检测miR－451和c－Myc的靶向关系。结果miR－451组和空白对照组细胞中miR－451的表达水平分别为2.85±0.27和1.02±0.06，细胞存活率分别为(47.28±3.15)%和(93.65±6.52)%，克隆形成率分别为(15.03±1.34)%和(28.48±2.12)%，侵袭细胞数分别为(86.65±5.58)个和(135.47±9.85)个，迁移细胞数分别为(106.36±6.48 )个和(165.28±11.05)个，c－Myc蛋白的表达水平分别为0.35±0.03和0.66±0.05，MMP－2蛋白的表达水平分别为0.20±0.02和0.48±0.03，MMP－9蛋白的表达水平分别为0.28±0.03和0.59±0.06，差异均有统计学意义(均P<0.05)。阴性对照组细胞的miR－451表达水平、细胞存活率、克隆形成率、侵袭细胞数、迁移细胞数、c－Myc蛋白的表达水平、MMP－2蛋白的表达水平和MMP－9蛋白的表达水平分别为0.94±0.05、(95.16±5.04)%、(27.55±2.26)% 、(128.96±8.32)个、(158.65±8.76)个、0.68±0.06、0.51±0.03和0.54±0.03，与空白对照组比较，差异均无统计学意义(均P>0.05)。双荧光素酶报告基因实验显示，c－Myc为miR－451的潜在靶基因。结论miR－451可通过靶向c－Myc抑制RPMI－8226细胞的增殖、侵袭和迁移。

简介：摘要目的探讨miR-98-5p对宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响以及其作用机制。方法选取2016年1月至2019年1月郴州市第一人民医院收治的宫颈癌患者的癌组织和癌旁组织；予以miR-98-5p、si-PYGO2及anti-miR-98-5p单独或共培养Siha细胞，记为：miR-NC组、miR-98-5p组、si-NC组、si-PYGO2组、anti-miR-NC组、anti-miR-98-5p组、miR-98-5p+pcDNA组、miR-98-5p+pcDNA-PYGO2组。运用qRT-PCR检测宫颈癌组织和细胞中miR-98-5p和PYGO2 mRNA的表达水平；Western blot检测蛋白表达；MTT法检测细胞增殖活性；Transwell检测细胞迁移和侵袭；将WT-PYGO2、MUT-PYGO2分别与miR-NC、miR-98-5p共转染至Siha细胞中，双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。采用方差分析和t检验进行统计学分析。结果与癌旁组织相比，宫颈癌组织中miR-98-5p表达水平降低（0.98±0.08比0.47±0.05），PYGO2 mRNA （1.00±0.07比2.43±0.24）和蛋白表达水平（0.27±0.03比0.62±0.05）均升高（P均< 0.001）。与正常宫颈细胞Ect1/E6E7相比，宫颈癌细胞Siha、Hela、Caski中PYGO2 mRNA （0.98±0.09比2.76±0.23、2.46±0.24、2.55±0.21）和蛋白表达水平（0.21±0.03比0.62±0.06、0.51±0.05、0.57±0.06）升高；miR-98-5p的表达水平降低（1.00±0.08比0.34±0.04、0.56±0.05、0.46±0.04） （P均< 0.05）。与miR-NC组相比，miR-98-5p组宫颈癌Siha细胞活性（48 h：0.61±0.05比0.42±0.04，72 h：1.02±0.09比0.59±0.06）、迁移数量[ （112.46±10.27）个比（48.35±4.96）个]及侵袭数量[ （92.47±9.56）个比（39.46±3.52）个]均降低（P均< 0.05）。与si-NC组相比，si-PYGO2组宫颈癌Siha细胞活性（48 h：0.64±0.06比0.46±0.05，72 h：1.05±0.08比0.67±0.06）、Siha迁移数量[ （106.48±9.75）个比（42.16±4.25）个]和侵袭数量[ （87.63±8.11）个比（35.42±6.20）个]均降低（P均< 0.05）；Cyclin D1、MMP-2、MMP-9、MMP-14表达水平降低，p21、p27表达水平升高，差异有统计学意义（P均< 0.05）。与miR-NC组比较，miR-98-5p组转染WT-PYGO2的Siha细胞荧光素酶活性（0.38±0.04比0.99±0.08）降低（P < 0.05），转染MUT-PYGO2的Siha细胞荧光素酶活性（1.03±0.08比1.01±0.09）差异无统计学意义（P > 0.05）。PYGO2过表达逆转了miR-98-5p过表达对宫颈癌Siha细胞的增殖、迁移和侵袭的抑制作用。结论miR-98-5p可抑制宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭，其机制可能与其靶向调控PYGO2的表达有关，将可为宫颈癌的预防和治疗提供新靶点。

简介：摘要目的探索miR-223在乳腺癌骨转移微环境中调控乳腺癌细胞、破骨细胞的功能及其机制。方法采用micro-CT检测野生型及miR-223基因敲除小鼠股骨骨小梁骨体积分数、骨密度等相关数据，并对股骨组织病理切片染色，观察miR-223缺失对破骨活动影响。利用RANKL诱导RAW 264.7细胞分化为破骨细胞的体外模型，研究miR-223在其中的作用及机制。通过MDA-MB-231细胞实验研究miR-223对乳腺癌细胞增殖、凋亡功能的调控作用及机制。结果miR-223基因敲除小鼠股骨破骨活动明显活跃；miR-223过表达可以通过NFIA基因抑制RNAKL诱导的破骨细胞分化成熟，还可通过抑制IGF-1R及PI3K/Akt信号通路，抑制乳腺癌细胞增殖并促进其凋亡。结论miR-223是骨转移微环境中抑制乳腺癌骨转移发生发展的保护性因子，可通过抑制破骨细胞分化成熟、破骨活动、乳腺癌细胞增殖及促进乳腺癌细胞凋亡来调节乳腺癌骨转移微环境。

简介：摘要目的我们研究已经发现微小RNA-505（miR-505）可靶向调控神经细胞黏着分子（NRCAM）抑制前列腺癌的增殖、侵袭及转移。本研究拟进一步探讨miR-505在前列腺癌动物模型的功能，以及miR-505/NRCAM参与的下游调控信号通路。方法建立裸鼠皮下形成异体移植瘤模型，分析miR-505对前列腺癌的增殖力影响，免疫组化进一步探讨其参与的可能通路；在NRCAM抑制表达的人前列腺癌细胞株LNCaP和PC3细胞株中，蛋白质印迹法检测PI3K-AKT信号通路的蛋白表达水平；抑制NRCAM表达的PC3及LNCaP，细胞增殖实验证实NRCAM对细胞增殖力的影响。结果裸鼠动物模型发现miR-505过表达细胞株形成的皮下移植瘤明显比对照组的生长速度减缓（P<0.05），并且移植瘤的AKT及EGFR蛋白的表达是明显下降的（P<0.05）。前列腺癌细胞株中，抑制NRCAM的表达均可以导致磷酸化位点的AKT、EGFR及FAK的蛋白水平表达均下调。并且抑制NRCAM的表达，前列腺癌细胞PC3及LNCaP的增殖力下降（P<0.05）。结论miR-505可能靶向调控NRCAM，影响PI3K/AKT信号通路的表达，而抑制前列腺癌细胞的增殖力。

简介：摘要目的研究lncRNA MAGI2-AS3对肺癌A549细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响和潜在的分子机制。方法根据转染载体不同将A549细胞分为pcDNA3.1组（转染pcDNA3.1）、pcDNA3.1-MAGI2-AS3组（转染pcDNA3.1-MAGI2-AS3）、anti-miR-NC组（转染anti-miR-NC）、anti-miR-31-5p组（转染anti-miR-31-5p）、pcDNA3.1-MAGI2-AS3+miR-NC组（共转染pcDNA3.1-MAGI2-AS3和miR-NC）、pcDNA3.1-MAGI2-AS3+miR-31-5p组（共转染pcDNA3.1-MAGI2-AS3和miR-31-5p mimics）。实时荧光定量PCR （qRT-PCR）检测miR- 31- 5p和MAGI2-AS3 RNA的表达，四氮唑蓝（MTT）法测定A549细胞增殖活性，Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力，双荧光素酶报告系统验证MAGI2-AS3与miR-31-5p的调控关系，流式细胞术检测细胞凋亡与周期。两组间比较采用独立样本t检验进行分析；多组间比较采用单因素方差分析，组内多重比较采用SNK-q检验。结果与人正常肺细胞HBE相比，肺癌细胞A549中的MAGI2- AS3表达量（0.48±0.03比1.29±0.06）降低，miR-31-5p表达量（1.01±0.05比0.25±0.02）升高；与pcDNA3.1组比较，pcDNA3.1-MAGI2-AS3组A549细胞活力（0.48±0.04比0.77±0.06）、迁移[（81.33±2.87）个比（124.33±3.09）个]和侵袭[（32.00±2.83）个比（53.00±3.27）个]细胞数、S期细胞所占比例（23.01﹪±1.00﹪比32.95﹪±1.06﹪）均降低，凋亡率（19.95﹪±1.25﹪比7.23﹪± 0.51﹪）、G0-G1期细胞所占比例（43.58﹪±2.15﹪比33.56﹪±1.23﹪）均升高；与anti-miR-NC组比较，anti-miR-31-5p组A549细胞活力（0.53±0.04比0.78±0.06）、迁移[（76.00±3.74）个比（108.33±2.87）个]和侵袭[（30.00±1.63）个比（42.33± 2.05）个]细胞数、S期细胞所占比例（24.43﹪±1.13﹪比32.91﹪±1.08﹪）降低，凋亡率（18.21﹪±1.24﹪比7.29﹪±0.51﹪）、G0-G1期细胞所占比例（41.56﹪±2.19﹪比33.53﹪ ± 1.27﹪）升高，差异有统计学意义（P均< 0.05）；双荧光素酶报告系统结果显示，MAGI2- AS3靶向负调控miR-31-5p的表达。与pcDNA3.1-MAGI2-AS3+miR-NC组比较，pcDNA3.1-MAGI2-AS3+miR-31-5p组A549细胞活力（0.68±0.06比0.50±0.04）、迁移[（91.00 ± 1.63）个比（52.67±2.62）个]和侵袭[（62.67±2.49）个比（31.67±4.03个）]细胞数升高，凋亡率（10.59﹪±1.0﹪比21.11﹪±1.14﹪）降低，差异有统计学意义（P均< 0.05）。结论lncRNA MAGI2-AS3通过靶向miR-31-5p抑制A549细胞的增殖、迁移和侵袭，促进细胞凋亡。lncRNA MAGI2-AS3是肺癌潜在分子治疗靶点。

简介：无

简介：摘要目的探讨LncRNA OIP5-AS1对非小细胞肺癌放射抗拒细胞A549R的放射敏感性影响及作用机制。方法X射线6Gy照射5次A549细胞建立放射抗拒细胞A549R。qRT-PCR检测A549、A549R细胞OIP5-AS1和miR-34c-5p表达水平。转染OIP5-AS1抑制剂或miR-34c-5p模拟物至A549R细胞，OIP5-AS1过表达质粒至A549细胞。流式细胞仪检测细胞凋亡，克隆形成实验检测细胞放射敏感性，蛋白印记检测p-Chk2和p-ATM蛋白表达水平。双荧光素酶实验验证OIP5-AS1与miR-34c-5p之间关系。结果与A549细胞比，A549R细胞中OIP5-AS1表达上调(1.97±0.11︰1.01±0.05，P<0.05)，miR-34c-5p表达下调(0.43±0.02︰1.02±0.06，P<0.05)。沉默OIP5-AS1＋6Gy组A549R细胞中p-Chk2和p-ATM蛋白水平低于沉默对照＋6Gy组(0.43±0.03︰1.39±0.15和0.51±0.05︰1.21±0.11，P<0.05)，但凋亡率增加[(13.29±1.25)%︰(28.47±2.31)%，P<0.05]。过表达OIP5-AS1＋6Gy组A549细胞中p-Chk2和p-ATM蛋白水平高于过表达对照＋6Gy组(1.23±0.13︰0.75±0.06和1.08±0.11︰0.59±0.04，P<0.05)。抑制miR-34c-5p表达逆转了沉默OIP5-AS1对A549R细胞存活分数影响，增敏比为1.42。OIP5-AS1负调控miR-34c-5p表达。结论沉默OIP5-AS1通过上调miR-34c-5p表达增强A549R细胞放射敏感性，为放疗提供潜在的靶点。

简介：摘要目的探索微小RNA(miRNA，miR)-7856-5p对EPH受体A3(EPHA3)基因表达的调控作用及对结直肠癌细胞SW480迁移和增殖的影响。方法实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测结直肠癌组织和细胞系中miR-7856-5p的表达。脂质体转染法分别将miR-7856-5p模拟物和miR-NC转入结直肠癌细胞SW480，分别定义为miR-7856-5p组和miR-NC组。Real-time PCR检测转染效果。Transwell实验和CCK-8实验检测转染后细胞迁移和增殖能力。生物信息学软件预测和双荧光素酶报告基因系统验证miR-7856-5p的靶基因。Real-time PCR和Western blot检测转染后细胞中EPHA3的表达。符合正态分布的计量资料以均数±标准差(Mean±SD)表示，组间比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析。结果miR-7856-5p在结直肠癌组织的表达明显低于癌旁组织(P<0.01)。miR-7856-5p在结直肠癌细胞系的表达明显低于正常肠黏膜上皮细胞(P<0.05)，在SW480细胞中表达最低(P<0.01)。miR-7856-5p组miR-7856-5p的表达明显高于miR-NC组，差异有统计学意义[(9.49 ± 1.09)比(1.06 ± 0.18)，P<0.01]。miR-NC组和miR-7856-5p组迁移细胞数量分别为(125.70±14.05)个和(42.01±8.98)个，miR-7856-5p组细胞迁移能力明显下降(P<0.01)。与miR-NC组比较，miR-7856-5p组细胞增殖能力明显降低(P<0.05)。生物信息学软件显示miR-7856-5p的靶基因是EPHA3。双荧光素酶报告基因系统证实miR-7856-5p可靶向结合EPHA3基因(P<0.05)。与miR-NC组比较，miR-7856-5p组SW480细胞中EPHA3的表达明显降低(P<0.05)。结论miR-7856-5p可通过靶向调控EPHA3的表达，抑制结直肠癌细胞SW480的迁移和增殖能力。

简介：摘要目的观察长链非编码RNA（lncRNA）钾电压门控通道亚家族Q成员1反向转录物1（KCNQ1OT1）和微小RNA（miR）-146a-3p在子痫前期（PE）胎盘组织中的表达，并初步探索两者相互调控后对滋养细胞生物学特性的影响及作用机制。方法（1）选择2017年7月—2018年7月在海南省人民医院住院的PE孕妇45例为PE组，选择同期正常孕妇55例为对照组，采用实时荧光定量PCR技术检测两组胎盘组织中KCNQ1OT1 mRNA、miR-146a-3p的表达，并分析两者的相关性。（2）采用绒毛膜滋养细胞层细胞系HTR8/SVneo细胞，先分为空白对照组和脂多糖（LPS）组，经LPS处理24 h的HTR8/SVneo细胞再进一步分为短发夹状RNA（sh）-KCNQ1OT1组（即沉默KCNQ1OT1的表达）、miR-146a-3p抑制物（inhibitor）组和sh-KCNQ1OT1+miR-146a-3p inhibitor组，共5组。应用生物信息学软件预测KCNQ1OT1和miR-146a-3p的靶向关系，并采用双荧光素酶报告基因实验加以验证；分别采用活细胞计数（CCK-8）法、划痕实验、穿膜（transwell）小室实验检测HTR8/SVneo细胞的增殖、迁移、侵袭能力，实时荧光定量PCR技术检测细胞中KCNQ1OT1 mRNA、miR-146a-3p的表达，蛋白印迹（western blot）法检测细胞中趋化因子12（CXCL12）和趋化因子受体4（CXCR4）蛋白的表达。结果（1）PE组胎盘组织中KCNQ1OT1 mRNA的表达水平低于对照组（分别为0.23±0.03、0.51±0.04），miR-146a-3p的表达水平高于对照组（分别为0.49±0.03、0.31±0.03），两组分别比较，差异均有统计学意义（P<0.05）；PE组胎盘组织中KCNQ1OT1 mRNA的表达水平与miR-146a-3p的表达水平呈负相关（r=-0.79，P=0.031）。（2）生物信息学软件预测并经双荧光素酶报告基因实验验证显示，KCNQ1OT1与miR-146a-3p存在靶向关系。与空白对照组相比，LPS组细胞中KCNQ1OT1 mRNA的表达水平下降（分别为0.91±0.03、0.35±0.03），miR-146a-3p的表达水平升高（分别为0.22±0.03、0.63±0.04），细胞的增殖、侵袭、迁移能力及CXCL12、CXCR4蛋白的表达均下降，分别比较，差异均有统计学意义（P<0.05）；sh-KCNQ1OT1组细胞中KCNQ1OT1 mRNA的表达水平（0.23±0.03）进一步下降，miR-146a-3p的表达水平（0.85±0.03）进一步上升，细胞的增殖、侵袭、迁移能力及CXCL12、CXCR4蛋白的表达均进一步下降，分别比较，差异均有统计学意义（P<0.05）；而miR-146a-3p inhibitor组、sh-KCNQ1OT1+miR-146a-3p inhibitor组分别与sh-KCNQ1OT1组比较，KCNQ1OT1 mRNA的表达水平（分别为0.78±0.04、0.50±0.03）升高，miR-146a-3p的表达水平（分别为0.42±0.03、0.46±0.03）下降，细胞的增殖、侵袭、迁移能力及CXCL12、CXCR4蛋白的表达均增高，分别比较，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论KCNQ1OT1负调控miR-146a-3p的表达，激活CXCL12/CXCR4信号通路后，可促进滋养细胞的增殖、迁移和侵袭，可能参与了PE的发病。

简介：摘要目的探究高压氧(HBO)联合司来吉兰对帕金森病(PD)患者运动功能及血清微小RNA-124(miR-124)、胰岛素样生长因子1(IGF-1)水平的影响。方法选择2017年3月至2019年3月济宁市第一人民医院神经内科收治PD患者120例，按照随机数字表法分为对照组和观察组，每组60例。对照组患者接受左旋多巴和司来吉兰治疗，观察组在对照组治疗的基础上联合HBO治疗。治疗3个疗程后，观察2组患者的临床症状，统一PD评定量表(UPDRS)评估患者运动功能，PD非运动症状问卷量表(NMSQuest)和PD睡眠量表(PDSS)评估非运动功能；比较2组患者治疗前后血清氧化应激指标、炎性因子、IGF-1以及miR-124的水平。结果治疗30 d后，2组患者精神障碍、感觉障碍、自主神经功能障碍和睡眠障碍发生率均显著低于治疗前，且观察组治疗后均显著低于对照组治疗后(P<0.01)；2组患者治疗后UPDRS II、III均显著低于治疗前，观察组治疗后UPDRS II、III评分均显著低于对照组(P<0.05或P<0.01)；与治疗前比较，2组患者NMSQuest评分明显降低，PDSS评分明显升高，且观察组治疗后NMSQuest显著低于对照组，PDSS显著高于对照组(P<0.05或P<0.01)；与治疗前比较，2组患者血清hs-CRP、IL-6和MDA显著降低，SOD显著升高，且观察组治疗后hs-CRP、IL-6和MDA显著低于对照组，而SOD显著高于对照组(P<0.05)；2组患者miR-124相对表达量和IGF-1水平均显著高于治疗前，且观察组治疗后均显著高于对照组(P<0.05或P<0.01)。结论HBO联合司来吉兰可显著改善PD患者机体氧化应激失调，并促进miR-124和IGF-1的表达，发挥神经保护作用，并显著改善运动功能和非运动功能，提高治疗效果。

简介：摘要目的探讨miRNA-196b以及WDR37对于人喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinoma, LSCC)的作用及其潜在的作用机制。方法通过肿瘤基因图谱分析miR-196b和WDR37在LSCC患者中的表达以及两者的相关性。在Tu868细胞低表达miR-196b或过表达WDR37通过CCK-8、AO/EB以及克隆形成检测细胞活性，凋亡以及增殖的作用，通过荧光素酶基因报告研究miR-196b与WDR37的靶向关系，Western blot方法检测转染miR-196b后增殖相关蛋白的变化。结果miR-196b在LSCC中的表达量明显高于正常组(P＝0.028)，且高表达miR-196b的患者生存率明显低于低表达组(P＝3.000×10－4)，WDR37在LSCC中的表达量明显低于正常组(P＝0.048)。低表达miR-196b的LSCC患者生存时间明显高于高表达(P＝0.001); miR-196b与WDR37在LSCC患者中表达呈负相关(P＝5.930×10－12)。miR-196b inhibitor可使WDR37的表达增加(P＝0.032、0.042), miR-196b mimic可使WDR37的表达降低(P＝0.029、0.043)。WDR37是miR-196b的直接靶点。miR-196b inhibitor能够明显抑制细胞活性(P＝0.042)；而miR-196b mimic能够使细胞活性明显增加(P＝0.031)。结果显示miR-196b inhibitor能够诱导Tu868细胞凋亡，同时Ki67实验的结果也说明，miR-196b inhibitor能够明显的抑制Tu868细胞增殖。结论miR-196b过表达抑制人LSCC中的WDR37，导致肿瘤发展预后不良。miR-196b是一种潜在的预后评估标志物。

简介：摘要目的本研究旨在探讨绝经后女性骨质疏松症（osteoporosis，OP）中分泌型卷曲相关蛋白2（secreted frizzled-related protein-2，SFRP2）基因DNA甲基化对转录和蛋白表达的影响，及miR-152-3p对SFRP2基因甲基化水平调控的分子机制。方法选择2017年9月至2020年9月于衡水市人民医院骨科就诊的绝经后OP患者作为研究对象，并纳入同期在本院进行体检的200例自然绝经健康女性作为对照组。定量检测OP患者和对照组的SFRP2基因甲基化水平；采用定量实时聚合酶联反应检测SFRP2基因mRNA和miRNA-148a的相对表达量；使用酶联免疫吸附测定法检测SFRP2和DNA甲基转移酶1（DNA methyltransferase，DNMT1）的蛋白表达水平；使用miRNA-152-3p模拟物（mimic）、抑制物（inhibitor）及其阴性对照（mimic NC和inhibitor NC）处理SD大鼠成骨细胞，检测DNMT1表达水平和SFRP2基因甲基化水平。结果OP组的SFRP2基因甲基化水平为（3.87±0.76）%，显著低于对照组（6.36±1.44）%（t=4.632，P<0.001）；OP组的SFRP2基因mRNA表达量为3.35±0.79，显著高于对照组（2.28±0.52）（t=4.858，P<0.001）；OP组的SFRP2基因蛋白表达水平为（4.15±0.62）pg/ml，显著高于对照组（2.83±0.51）pg/ml（t=4.858，P<0.001）；OP组的miRNA-152-3p相对表达量为（3.14±0.76），显著高于对照组（1.63±0.51）（t=5.318，P<0.001）；SD大鼠成骨细胞转染miR-152-3p后，mimic组的DNMT1表达水平和SFRP2基因甲基化水平显著降低，inhibitor组的DNMT1表达水平和SFRP2基因甲基化水平显著升高（P<0.001）。结论miR-152-3p可通过DNMT1调控SFRP2基因甲基化水平并参与OP的发生发展。

简介：摘要目的探究RPL34-AS1对卵巢癌细胞增殖、迁移的影响及其作用机制。方法取对数生长期SKOV3细胞用无血清培养基同步化12 h，将pcDNA、pcDNA-RPL34-AS1、si-NC、si-RPL34-AS1、anti-miR-NC、anti-miR-575转染至SKOV3细胞中，分别记为pcDNA组、pcDNA-RPL34-AS1组、si-NC组、si-RPL34-AS1组、anti-miR-NC组、anti-miR-575组；将pcDNA-RPL34-AS1与miR-NC、miR-575分别共转染至SKOV3细胞中，记为pcDNA-RPL34-AS1+miR-NC组、pcDNA-RPL34-AS1+miR-575组。实时荧光定量PCR （RT-qPCR）检测临床组织标本及转染后各组细胞中RPL34-AS1和miR-575的表达水平；双荧光素酶报告实验检测RPL34-AS1和miR-575的靶向关系；四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）检测细胞存活率；流式细胞术检测细胞凋亡；蛋白质印迹（Western blot）法检测细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A （p21）、B细胞淋巴瘤/白血病-2 （Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）蛋白表达水平。两组间比较采用独立样本t检验，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验。结果与癌旁组织相比，卵巢癌组织中RPL34-AS1表达水平降低（1.00±0.08比0.47±0.05），miR-575表达水平升高（1.01±0.07比3.12±0.28）（P < 0.05）。转染si-RPL34-AS1后，细胞活性升高（48 h：0.68±0.06比0.55±0.05；72 h：0.99±0.08比0.71±0.06），G1期细胞所占比例降低（13.42±1.38比32.15±2.11），S期细胞所占比例升高（53.75±5.22比34.69±3.41），细胞凋亡率降低（4.31±0.42比9.25±0.91），CyclinD1、Bcl-2表达水平升高（0.92±0.08比0.71±0.07；0.86±0.07比0.61±0.06），p21、Bax表达水平降低（0.13±0.02比0.29±0.03；0.19±0.02比0.31±0.03） （P均< 0.05）。RPL34-AS1靶向调控miR-575，过表达RPL34-AS1或抑制miR-575后可抑制细胞活性，阻滞细胞周期和促进细胞凋亡。miR-575过表达逆转了RPL34-AS1过表达对卵巢癌SKOV3细胞增殖抑制和凋亡促进的作用。结论过表达RPL34-AS1可抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖，促进细胞凋亡，其机制可能与下调miR-575有关。

简介：摘要目的探讨miR-32-5p对结直肠癌细胞放射敏感性及迁移侵袭能力的影响及其潜在作用机制。方法培养人结直肠癌SW480细胞和正常结肠上皮NCM460细胞，将结直肠癌细胞分为未转染组和转染组(分别转染anti-miR-NC、anti-miR-32-5p、pcDNA、pcDNA-TOB1、anti-miR-32-5p＋si-NC、nti-miR-32-5p＋si-TOB1)。RT-qPCR和Western blot分别检测细胞中miR-32-5p、TOB1 mRNA和蛋白表达，克隆形成实验检测转染各组细胞放射敏感性，Transwell实验检测转染各组细胞迁移、侵袭能力，双荧光素酶报告基因实验和Western blot验证miR-32-5p是否靶向TOB1。结果与人正常结肠上皮细胞相比，结肠癌细胞中miR-32-5p表达明显上调(P<0.05)，TOB1 mRNA和蛋白表达明显下调(P<0.05)。与anti-miR-NC比较，anti-miR-32-5p组细胞放射增敏比1.801，细胞迁移和侵袭数目均明显减少(P<0.05)；与pcDNA组比较pcDNA-TOB1组细胞放射增敏比1.764，细胞迁移数目和侵袭数目均明显减少(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验和Western blot结果证实miR-32-5p靶向负调控TOB1蛋白表达。与anti-miR-32-5p＋si-NC组比较，anti-miR-32-5p＋si-TOB1组细胞放射增敏比为0.591，细胞迁移数目和侵袭数目均明显增多(P<0.05)。结论抑制miR-32-5p表达能够明显增强结直肠癌细胞放射敏感性，抑制细胞迁移和侵袭，其作用机制可能与靶向促进TOB1表达有关。