简介：目的：探讨热休克蛋白90（HSP90）抑制剂17-二甲胺乙胺基-17去甲氧基格尔德霉素（17-DMAG）对急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞的增殖及凋亡的影响。方法：收集Jurkat细胞,应用HSP90抑制剂17-DMAG作用于细胞株,通过半定量PCR检测HSP90的基因表达,WST技术检测17-DMAG对细胞增殖的影响,AnnexinV/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡。结果：不同浓度17-DMAG作用于Jurkat细胞48h后,HSP90mRNA表达明显减少,且呈剂量依赖性（r=0.9530,P〈0.01）;17-DMAG处理Jurkat细胞48h的IC50为3.17μmol/L,作用于Jurkat细胞后抑制Jurkat细胞增殖（r=0.9903,P〈0.01）,促进Jurkat细胞凋亡,且呈剂量依赖性（r=0.9876,P〈0.01）。结论：HSP90抑制剂17-DMAG能够抑制急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞株的增殖并诱导其凋亡。

简介：目的研究α-干扰素和环氧合酶（COX-2）抑制剂塞来昔布（Celecoxib）对人肝癌SMMC-7721细胞的生长抑制作用。方法采用MTT比色法观察不同浓度的塞来昔布和α-干扰素处理对肝癌细胞增殖的影响；通过荧光显微镜检测细胞凋亡。结果实验组与对照组相比，能抑制人肝癌SMMC-7721细胞的增殖，两种药物高浓度联合作用48h后，对肝癌细胞的生长抑制率可达92．44％±0.98％。α-干扰素和塞来昔布对肝癌细胞的增殖抑制具有协同作用。荧光显微镜观察到细胞皱缩、核质浓缩、核碎裂以及凋亡小体形成等凋亡形态学改变。结论COX-2抑制剂塞来昔布和α-干扰素对人肝细胞癌SMMC-7721细胞的增殖有协同抑制作用，同时能诱导其凋亡，并且呈剂量和时间依赖性，这提示α-干扰素和COX-2抑制剂塞来昔布对HCC的预防和治疗可能有积极意义。

简介：目的制备包载尿激酶(UK)的壳聚糖纳米粒子并探讨制备最佳条件。方法采用离子交联法制备纳米粒子;并运用酶标仪比色法测试UK药物的包封率,分析了一系列条件如磁力搅拌转速及时间、底物质量比、超声时间及功率、UK用量等条件对包封率的影响,找出包封率最高的条件;纳米粒子冻干测其载药量;用粒径仪测其粒径;最后运用超滤离心法纯化载药纳米粒子。结果在室温下,将三聚磷酸钠(TPP)溶液(浓度为0.6g/L)逐滴加入包含1mgUK量的水溶性壳聚糖(WCS)溶液中(浓度为1g/L),搅拌速度为800r/min,滴加完毕后继续搅拌60min,后在冰浴条件下超声30s,功率10W,成功制备出包封率及纯度均较高载UK纳米粒子,此纳米粒子载药量为14.5%。结论采用最简便的方法,经济无毒生物兼容性好的材料制备了高稳定性、高包封率的水溶性UK纳米粒子悬液,为下一步实验研究做好准备。

简介：目的探讨检测白细胞（WBC）、C反应蛋白（CRP）及红细胞沉降率（ESR）对临床诊断术后感染的意义。方法选取70例于本院行阑尾手术治疗患者作为此次研究对象,其中以术后正常愈合者为对照组（术后未感染,52例）与观察组（术后感染,18例）。分别检测两组患者术后血WBC、CRP及ESR水平。结果观察组患者术后血WBC、CRP及ESR水平分别为（7.79±1.25）×10-9/L、（42.87±4.16）mg/L、（45.98±3.22）mm/h,明显高于对照组（5.72±0.95）×10-9/L、（6.98±0.77）mg/L、（17.48±2.27）mm/h,t=（7.32,60.08,41.01）,P=（0.00,0.00,0.00）。血WBC、CRP及ESR间曲线下面积（AUC）分别为0.71、0.74、0.73,三者相比较,Z=0.52,P=0.49。血WBC、CRP及ESR临界值分别取7.83×10-9/L、14.98mg/L及36.97mm/h时,三者均以Youden指数最大,分别为0.34、0.47、0.38。结论阑尾术后检测血WBC、CRP及ESR水平对临床诊断术后感染具有指导价值,从而为临床及时防治提供参考,有助于促进患者术后康复。

简介：

简介：目的探讨表面脱钙的脱蛋白异体骨与骨髓基质细胞的生物相容性,为骨组织工程提供合适的支架材料.方法用经物理与化学方法处理而制得的脱蛋白骨与骨髓基质细胞(MSCs)复合培养,进行形态学观察、细胞增殖、ALP的活性、骨钙素的分泌与蛋白质含量检测;扫描电镜观察细胞在脱蛋白骨材料上的情况.结果骨髓基质细胞能在脱蛋白骨上贴附、增殖,其生长及功能不受影响.结论本方法所制的脱蛋白骨与MSCs具有良好的生物相容性,可作为MSCs的载体应用于骨组织工程.

简介：目的获得表达人血栓调节蛋白的CHO-TM细胞，以便研制临床诊断治疗制品。方法重组表达质粒pTh402提纯后利用lipofectamine脂质体转染中国仓鼠卵巢细胞（CHO）．C418筛选后对阳性细胞用蛋白质印迹术（Westemblorting）定性检测人血栓调节蛋白（hTM）的表达情况。结果血栓调节蛋白成功导入宿主细胞CHO并获得高效表达。结论获得高效表达hTM的细胞CHO-TM，为进一步研究临床诊断治疗制荆创造了条件。

简介：目的研究bax和bcl-2蛋白表达在睾丸肿瘤发生发展中的作用.方法应用流式细胞术和细胞免疫荧光技术检测56例睾丸肿瘤bax和bcl-2蛋白的表达.结果bax阳性48例(857%),bcl-2阳性40例(71.4%);bax和bcl-2蛋白表达与肿瘤的病理类型、临床分期和淋巴结转移无明显相关(P>0.05).结论bax和bcl-2蛋白的异常表达尚不能成为睾丸肿瘤发生发展的预后参数.

简介：绿色荧光蛋白Greenfluorescenceprotein，GFP）最早被Shimomura等学者于1962年从水母（Jellyfish，AequoreaVictoria）发现。在1971年，Morin和Hastings注意到随着水螅体（Hyroid，Obelia）中发光复合物的分离，发光波长迅速变化：当发光复合物中的荧光蛋白从它的光源一水母发光蛋白中解离下来时，发射光从绿色变为蓝色。这些早期的观察标志着GFP的发现。在天然的发光复合物中，GFP把从水母发光蛋白（本质上是一种荧光素酶类的光蛋白）发射的高能量蓝光转换为低能量的绿光。

简介：摘要目的探讨他克莫司抑制成纤维细胞增殖预防兔膝关节瘢痕粘连的实验效果.方法体外培养人膝关节瘢痕来源的成纤维细胞和建立兔膝关节粘连动物模型,实验组给予不同浓度的他克莫司处理,观察他克莫司对成纤维细胞增殖的影响和减少膝关节瘢痕粘连的效果,并行RealtimePCR检测瘢痕组织中TGF－β和IL－４的表达.结果他克莫司处理人瘢痕成纤维细胞后,发现能够抑制成纤维细胞增殖.局部应用他克莫司处理兔膝关节骨缺损区,发现能够抑制成纤维细胞增殖和减少膝关节术后瘢痕粘连,并降低瘢痕组织中TGF－β和IL－４的表达.结论他克莫司能够抑制成纤维细胞增殖,并减少兔膝关节术后瘢痕粘连,可能是通过抑制TGF－β和IL－４表达来实现的.关键词膝关节粘连;成纤维细胞;他克莫司;增殖TheexperimentstudyoftacrolimusoninhibitingfibroblastsproliferationandpreventingintraarticualradhesionofkneeAbstractObjectiveToinvestigatetheeffectoftacrolimusoninhibitingfibroblastsproliferationandpreventingexperimentalkneeintraarticularscaradheＧsionofrabbits．MethodsThehumanfibroblastsfromkneescartissueswerecultivatedinvitroandtheanimalmodelofrabbitkneeadhesionwasestablished．Aftertreatedbydifferentconcentrationoftacrolimus,theeffectsoftacrolimusoninhibitingfibroblastsproliferationandpreventingintraarticularscaradhesionofkneeweredetermined．TheexpressionsofTGF－betaandIL－４inscartissuesweredetectedbyRealtimePCR．ResultsTacrolimuscouldinhibithumanscarfibroＧblastsproliferation．Topicalapplicationoftacrolimuscouldinhibitfibroblastproliferation,reduceintraarticularscaradhesionofkneeanddecreasetheexpressionofTGF－betaandIL－４inscartissue．ConclusionTacrolimuscaninhibitfibroblastsproliferationandreducethekneeintraarticualrscaradhesionofrabbits,whichKiseyprwoobradbslybyinhibitingtheexpressionofTGF－betaandIL－４．Kneeintraarticularadhesion;Fibroblasts;Tacrolimus;Proliferation中图分类号R６２２文献标识码A文章编号１００８－６３１５(２０１５)１２－０１５５－０２

简介：背景：胶原-生物活性玻璃-聚己内酯复合材料具有良好的生物相容性、机械性能及可降解性,对细胞的黏附、增殖及血管生成极为有利。目的：观察胶原-生物活性玻璃-聚己内酯复合支架材料对人牙髓细胞的增殖、迁移和分化能力的影响。方法：分离培养人牙髓细胞,接种在胶原-生物活性玻璃-聚己内酯支架材料上,接种前及接种后第1,3,7,14,24天,采用MTT法检测细胞增殖,采用划痕实验检测细胞的迁移能力,采用ELISA法检测细胞上清液中的碱性磷酸酶活性。结果与结论：（1）与接种前比较,接种于胶原-生物活性玻璃-聚己内酯支架材料上的细胞增殖能力明显增强（P〈0.01）;随着接种时间的延长,胶原-生物活性玻璃-聚己内酯支架材料上的细胞增殖能力逐渐增强;（2）与接种前比较,接种于胶原-生物活性玻璃-聚己内酯支架材料上的细胞迁移能力明显增强（P〈0.01）;随着接种时间的延长,胶原-生物活性玻璃-聚己内酯支架材料上的细胞迁移能力逐渐增强;（3）与接种前比较,接种于胶原-生物活性玻璃-聚己内酯支架材料上的细胞上清液中碱性磷酸酶水平明显增加（P〈0.01）;随着接种时间的延长,胶原-生物活性玻璃-聚己内酯支架材料上的细胞上清液中碱性磷酸酶水平逐渐增强;（4）结果表明,胶原-生物活性玻璃-聚己内酯复合支架材料可促进人牙髓细胞的增殖、迁移和分化过程。

简介：【目的】基于5-乙炔基-2＇-脱氧尿苷（5-ethynyl-2＇-deoxyuridine,EdU）掺入法,比较利用荧光成像和流式细胞术检测细胞增殖的两种方法。【方法】细胞株采用小鼠巨噬细胞系RAW264.7,在六孔细胞培养板中用盖玻片爬片,EdU标记后,细胞爬片用荧光成像法,其余细胞用流式细胞术分别检测细胞增殖率。应用Bland-Altman法检测两种方法测量细胞增殖率的一致性,组内相关系数（interclasscorrelationcoefficient,ICC）检测两种方法的重复性。【结果】荧光显微镜下观察呈现明亮绿色荧光的细胞为EdU标记的处于增殖状态的RAW264.7细胞,其余无绿色荧光的为非增殖期细胞。荧光成像半定量分析的结果显示,约（46.75±16.87）%的细胞处于增殖期;流式细胞术定量结果显示（49.50±3.74）%的细胞处于增殖期,与荧光成像半定量结果比较,未见统计学显著性（P=0.4120）。Bland-Altman一致性检验表明,96.30%的点落在95%一致性区间内,偏倚为-2.750;重复性检测表明荧光成像法所得细胞增殖率的组内相关系数为0.562,小于0.75;流式细胞术所得细胞增殖率的组内相关系数为0.869,大于0.75。【结论】荧光成像法和流式细胞术分析均可用于EdU标记法检测细胞增殖,与荧光成像相比,流式细胞术分析法操作简便、重复性好。

简介：目的：观察三氧化二砷（As2O3）对HL-60细胞增殖、分化和凋亡的影响,并探讨其相关作用机制。方法：不同浓度As2O3处理HL-60细胞,应用MTS/PES方法检测细胞增殖,NBT实验测定细胞分化,流式细胞术检测细胞凋亡和分化相关抗原CD11b的表达,SYBRGreenreal-timeRT-PCR方法检测C-FES、BCL-2、BAX、Survivin、P21和P27mRNA水平变化。结果：As2O3能明显抑制HL-60细胞增殖,其效应呈剂量依赖和时间依赖性（r=-0.967;r=-0.954）;低浓度（0.1、0.5和1.0μmol/L）As2O3能明显促进细胞分化,NBT阳性率和CD11b表达水平均有不同程度的增高;较高浓度As2O3（2.5和5.0μmol/L）能明显诱导细胞凋亡,抑制细胞分化。HL-60细胞经1.0和5.0μmol/L浓度As2O3处理后,C-FESmRNA表达均明显上调,但以1.0μmol/L组更为明显,证实C-FESmRNA表达水平与细胞分化程度成正比。此外,5.0μmol/L浓度As2O3显著下调了HL-60细胞BCL-2和Survivin的表达,相反明显上调了BAX、P21和P27的表达。结论：As2O3能明显抑制HL-60细胞增殖、促使细胞分化成熟及诱导细胞凋亡,其机制可能涉及C-FES以及细胞周期和凋亡相关基因的调控。

简介：摘要目的研究Gli-1转录的特异性阻断剂GANT-61对胶质瘤细胞作用效果。方法用GANT-61处理血清培养分化状态的BGSCs，用DMSO做对照组。观察对裸鼠致瘤能力是否改变。结果GANT-61阻断后能明显抑制Gli-1的转录活性，细胞活性受抑制，丧失致瘤能力。对照组则无明显变化，组间差异有显著性。结论GANT-61能通过抑制Gli-1的转录活性而阻断HH信号通路，丧失致瘤能力。

简介：摘要

简介：本研究探讨胰岛素对Reh细胞胰岛素受体（IR）和胰岛素样生长因子Ⅰ型受体（IGF-ⅠR）表达的影响及对Reh细胞的促增殖作用。用CCK-8法检测Reh细胞的增殖;采用实时PCR法检测Reh细胞IR和IGF-ⅠRmRNA的表达。结果表明,胰岛素对Reh细胞具有浓度和时间依赖性的促增殖作用,当胰岛素浓度为10-9mol/L时其促增殖作用最强,进一步提高浓度,胰岛素的促增殖作用不再增强。与对照组相比,胰岛素有明显的促增殖作用（P〈0.05）。胰岛素10-9mol/L作用24、48及72h,IRmRNA表达量与对照组相比的比值分别为2.2520±0.7431、1.9956±0.9692和3.9766±1.3189,IGF-ⅠR表达量与对照组相比的比值分别为1.0803±0.2238、1.6026±0.6158和3.1013±0.1008。胰岛素刺激后IR和IGF-ⅠR的mRNA相对表达量与对照组相比均明显增加,差别有统计学显著意义（P=0.022和P=0.00）。结论：胰岛素能促进Reh细胞的增殖,其机制可能与IR和IGF-ⅠR上调有关。IR和IGF-ⅠR的高表达与白血病细胞的生长有着密切关系。

简介：目的研究PLK1在结直肠癌细胞迁移和侵袭过程中的作用.方法常规培养9株结直肠癌细胞,采用PCR和Western-blot法筛选PLK1高表达细胞株.设计3种RNA干扰片段,转染高表达PLK1的结直肠癌细胞株,利用实时定量PCR和western-blot法验证并干扰效果.选择高干扰效果的干扰片段,通过Transwe1l实验来评估转染后结直肠癌细胞迁移和侵袭能力的变化.结果SW1116细胞中PLK1mRNA及蛋白都呈现高表达3种干扰片段转染SW1116细胞后,PLK1表达量均有不同程度下降,以片段1干扰效果最为明显.在迁移实验中,PLK1干扰组穿膜细胞数为（44±14）个,低于阴性对照组[（242±40）个]和空白对照组[（240±38）个]在侵袭实验中,PLK1干扰组穿膜细胞数为（62±3）个,低于阴性对照组[（207±12）个]和空白对照组[（211±15）个]上述差异均有统计学意义（P＜0.01）.结论干扰PLK1能显著抑制肿瘤细胞的迁移、侵袭能力,提示PLK1可能在结直肠癌浸润和转移中具有一定作用.

简介：本研究比较阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)患者和正常人骨髓中性粒细胞GPI锚定蛋白CD16b、凋亡受体Fas和凋亡相关蛋白的表达水平,并分析其相关性,以了解PNH细胞是否存在凋亡异常.用流式细胞术检测PNH患者和正常对照骨髓中性粒细胞GPI锚定蛋白CD16b、凋亡受体Fas和凋亡增殖相关蛋白Bax、Bcl-2的表达水平,比较它们在患者与正常人之间有无差别,以及CD16b与凋亡相关蛋白表达间有无相关性.结果表明:①骨髓中性粒细胞表面CD16b的表达率,PNH患者为(20.36±9.05)%,正常对照组为(71.34±26.80)%,PNH患者明显降低(P=0.01);②骨髓中性粒细胞表面CD95的表达率,PNH患者为(62.83±32.11)%,正常对照组为(48.00±38.52)%,二者的表达水平无显著差异;PNH患者骨髓中性粒细胞表面CD95表达与CD16b的表达无显著相关(P＞0.05);③骨髓中性粒细胞胞浆内Bcl-2的表达率,PNH为(8.64±5.40)%,正常对照组为(16.82±15.39)%,二者的Bcl-2表达水平无显著差异;PNH患者骨髓中性粒细胞胞浆内Bcl-2表达与CD16b的表达无显著相关(P＞0.05);④骨髓中性粒细胞胞浆内Bax表达率,PNH患者为(30.47±22.15)%,正常对照组为(48.47±15.99)%,PNH患者与正常对照组二者的Bax表达水平无显著差异;PNH患者骨髓中性粒细胞胞浆Bax表达与CD16b的表达无显著相关.结论:PNH骨髓中性粒细胞凋亡相关蛋白Bax和与其功能密切相关的Bcl-2以及凋亡受体Fas的表达与正常对照无差别,这提示PNH细胞在骨髓内的消长可能不涉及凋亡蛋白表达异常.

简介：目的探索氧化型低密度脂蛋白对血管平滑肌细胞小凹蛋白1(caveolin-1)表达的抑制作用及其影响。方法实验采用氧型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导形成的平滑肌源性泡沫细胞模型，Western印迹法观察不同浓度和时间的ox-LDL处理对细胞caveolin-1表达的影响。结果12．5、25、50、100mg/L四种不同浓度的ox-LDL与VSMC共同孵育96h后，均对caveolin-1表达产生明显的抑制作用(P<0.05)，且浓度越高，抑制作用越强。ox-LDL50mg/L作用细胞24h出现caveolin-1表达的明显下降，此后随着处理时间延长，抑制作用越明显，96h达高峰。结论在ox-LDL诱导体外培养的血管平滑肌细胞形成泡沫细胞的过程中，存在caveolin-1的表达下调，这种改变可能与平滑肌源性泡沫细胞胆固醇流出障碍有关。

简介：背景：前期实验发现掺锶的聚磷酸钙材料对单独培养内皮细胞或成骨细胞的行为有显著促进作用。目的：观察掺锶聚磷酸钙对共培养下成骨细胞与脐静脉内皮细胞行为和功能蛋白表达的影响。方法：取第3代人脐静脉内皮细胞与人成骨肉瘤细胞MG63以2∶1的浓度比接种于24孔板中，然后再分别加入掺锶聚磷酸钙、聚磷酸钙与羟基磷灰石，共培养7d后。采用ELISA法检测细胞血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子蛋白的表达，采用MTT法检测细胞活性。结果与结论：与聚磷酸钙与羟基磷灰石相比，在掺锶聚磷酸钙表面生长的细胞呈现更加良好的形态，细胞融合生长形成单层覆盖在材料表面，并且在材料表面有一定的跨度生长，说明掺锶聚磷酸钙材料能促进内皮细胞在其上黏附、伸展，有利于细胞的生长和增殖。掺锶聚磷酸钙组细胞分泌的血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子明显高于聚磷酸钙组和羟基磷灰石组（P〈0.05），说明掺锶聚磷酸钙可上调血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子蛋白的表达