简介：摘要：目的：探讨在神经危重症患者中给予肠内、肠外营养支持的效用价值。方法:本次研究共选取102例神经危重症患者进行研究，单一组实施肠内营养给予，联合组采取肠内、肠外共同的方式，对比患者的各项指标差异。结果：在对各项数据进行比对后所得，联合组的临床治疗价值与改善患者身体各项机能方面更高（P＜0.05）。结论：在神经危重症患者进行早期营养给予及免疫功能提升时实施肠内、肠外联合的方式有效性显著。

简介：摘要目的比较脂多糖(lipopolysaccharides，LPS)对多能干细胞诱导的人源心肌细胞(human induced pluripotent stem cell-derived cardiomyocytes，hiPS-CMs)及原代新生大鼠心肌细胞(cardiomyocytes，CMs)的影响。方法不同浓度LPS处理hiPS-CMs和原代新生大鼠CMs 24 ~ 48 h，通过实时无标记细胞分析技术（xCELLigence Real-Time Cell Analyser Cardio system RTCA) 观察hiPS-CMs和原代新生大鼠CMs的电生理变化；qRT-PCR方法检测NPPB mRNA表达水平和qPCR阵列法检测炎性基因表达水平。结果不同浓度LPS刺激后，原代新生大鼠CMs的电生理变化为搏动频率增加和搏动幅度减少(P<0.01)，NPPB mRNA表达水平增加(P<0.01)。在hiPS-CMs中，相对应的LPS浓度刺激未能引起搏动幅度和搏动频率显著变化（P>0.05），NPPB mRNA表达水平未显著增加（P>0.05）。进一步增加浓度（2.5 μg/mL~40 μg/mL），hiPS-CMs的搏动幅度和搏动频率仍未发生明显变化（P>0.05），NPPB mRNA在高浓度LPS(5 μg/mL~40 μg/mL)发生差异性改变（P<0.01）。最后，在炎症相关基因表达方面，原代新生大鼠CMs表现为C3、Gpnmb、Atf3、Il6r和Ly96基因水平上调至1.5倍，hiPS-CMs表现为AK4、TOLLIP、SPP1、FABP1、IL6R、LY96和C3基因水平上调至1.5倍。结论与原代新生大鼠CMs相比，hiPS-CMs受到LPS的损伤明显减轻，表现出不同的炎症基因表达模式。

简介：摘要目的探讨小鼠视神经钳夹损伤（ONC）后视网膜神经节细胞（RGCs）存活率变化。方法选取97只6~8周龄雄性C57BL/6J小鼠，按照随机数字表法分为正常组（5只）、假手术组（5只）、ONC组（87只）。正常组双眼不进行任何操作；假手术组左眼不进行任何操作，右眼行假手术操作；ONC组左眼行ONC，右眼行假手术对照。正常组分别计算左右眼RGCs密度，比较其差异；假手术组计算假手术眼RGCs密度，比较其与正常组平均RGCs密度的差异；ONC组中，以左眼（ONC眼）与右眼（假手术眼）RGCs密度的比值计算RGCs存活率，然后比较不同钳夹持续时间（5，10，20，30 s）的RGCs存活率差异（取材时间统一为钳夹后7 d），以及不同取材时间（3，4，5，7，14，30，60，90，180 d）的RGCs存活率差异（钳夹持续时间统一为20 s）。结果正常组左右眼RGCs密度分别为（5 167.3±55.6）个/mm2和（5 199.6±44.8）个/mm2，差异无统计学意义（P>0.05）。正常组与假手术组RGCs密度分别为（5 183.5±33.4）个/mm2和（5 151.5±87.6）个/mm2，差异无统计学意义（P>0.05）。ONC组不同钳夹时间（5，10，20，30 s）的RGCs存活率分别为（37.6±1.1）%、（34.0±0.9）%、（33.6±1.6）%、（30.3±0.6）%（P<0.01）。钳夹5 s与 30 s相比，ONC组小鼠RGCs存活率差异有统计学意义（P<0.01）；其余不同钳夹时间相比，ONC组小鼠RGCs存活率差异均无统计学意义（P>0.05）。ONC组不同取材时间（3，4，5，7，14，30，60，90，180 d）的RGCs存活率分别为（85.4±2.0）%、（67.6±3.1）%、（43.0±1.0）%、（33.6±1.6）%、（22.7±2.0）%、（12.8±0.6）%、（10.4±0.8）%、（8.6±0.5）%、（6.7±0.2）%（P<0.01），尤其3~5 d，RGCs存活率大幅下降，30 d后RGCs存活率呈平稳下降趋势。结论在ONC小鼠模型中，不同钳夹持续时间对RGCs造成的损伤程度不同，且ONC后RGCs死亡呈进行性发展，提示在原发性损伤（钳夹）后，小鼠的RGCs经历了继发性损伤。因此，有效控制RGCs的继发性损伤，可能成为治疗视神经损伤性疾病的关键。

简介：摘要本文报道了1例尿液细胞学大细胞神经内分泌癌（LCNEC）并文献复习。细胞学涂片显示肿瘤细胞呈团片状或散在分布；瘤细胞类圆形，体积较大，胞质较丰富，嗜酸性，部分细胞呈裸核状；核圆形或卵圆形，增大，核膜较平滑，染色质较细腻或呈粗颗粒状，可见核仁。免疫细胞化学显示突触素、嗜铬粒素及CD56呈阳性表达，而广谱细胞角蛋白、p63及白细胞共同抗原等阴性。电镜下可见圆形或类圆形的高电子密度神经内分泌颗粒，直径为100~300 nm。尿液细胞学形态、免疫细胞化学结果及超微结构特征符合大细胞神经内分泌癌。

简介：摘要：目的：探讨和分析不同肠内营养对重症神经外科患者营养状况及并发症的影响。方法：将某院2018年3月至2020年3月收治的80例重症神经外科患者随机分为常规组和序贯组，每组40例。常规组给予常规肠内营养，序贯组给予序贯肠内营养。比较两组患者的营养状况及并发症发生率。结果：两组患者血清总蛋白、转铁蛋白、血红蛋白、前白蛋白水平均高于治疗前。序贯治疗组上述指标明显高于常规治疗组（P

简介：摘要：目的：对神经重症患者护理过程中采用营养管理模式的护理效果进行分析。方法:研究设立了对比实验，实验对象为本院收治的78例神经重症患者，实验首先对其进行小组区分，两组采用不同护理方式并进行不同的命名，最终目的是对比护理效果。结果：经比较，观察组护理效果相较于对照组更为优质（P＜0.05）。结论：在神经重症患者护理中应用营养管理模式可以将护理效果进行提升和改进。

简介：摘要目的探讨预后营养指数（prognostic nutritional index，PNI）对索拉非尼治疗的晚期肝细胞癌（hepatocellar carcinoma，HCC）患者预后的影响。方法回顾性分析2013年1月至2018年1月在本院肿瘤科诊治的89例晚期HCC患者的临床资料。根据患者首次接受索拉非尼治疗前的白蛋白水平和淋巴细胞计数计算得到PNI，并根据受试者工作特征曲线确定PNI的最佳截断值，将患者分为L-PNI组和H-PNI组。分析PNI与患者临床病理资料、索拉非尼治疗持续时间和总生存时间的相关性。通过单因素和多因素分析比较各项因素对晚期HCC患者预后的影响。结果根据PNI的最佳截止值42.075将纳入研究的89例患者分为L-PNI组（PNI≤42，n=53）和H-PNI组（PNI＞42，n=36）。Kaplan-Meier分析结果显示，H-PNI组索拉非尼治疗持续时间和总生存时间显著优于L-PNI组（7.7个月比3.9个月，P＜0.001；12.9个月比9.9个月，P=0.001）。单因素分析结果显示，基础肝病（HR=2.659）、Child-Pugh肝功能评分（HR=0.105）、巴塞罗那（Barcelona clinic liver cancer，BCLC）分期（HR=0.267）、大血管侵犯（HR=0.229）、PNI（HR=0.906）与预后有关，多因素分析结果显示PNI≤42（HR=0.982）和BCLC分期较晚（HR=0.260）是晚期HCC患者的独立危险因素。结论PNI可以作为接受索拉非尼治疗的晚期HCC患者的预后指标，临床操作方便，价格低廉，值得临床推广应用。

简介：摘要神经调控是利用植入性或非植入性技术，通过物理性（光、电、磁、超声）或化学性（药物）手段，对中枢神经、外周神经或自主神经系统进行可逆性调控，引起神经元或神经信号兴奋、抑制或调节作用。神经调控技术在治疗慢性疼痛中发挥着重要作用，脊柱源性疼痛作为慢性疼痛性疾病的一大类疾病总称，本文拟就神经调控技术在脊柱源性疼痛应用进展进行综述，旨在为疼痛科医师提供参考。

简介：【摘 要】目的：分析脊髓横断面损伤致神经源性膀胱失禁的护理方式及效果。方法：抽取2019年月至2021年10月在本院诊治的52例脊髓横断面损伤致神经源性膀胱失禁病例，双盲法划入综合组与普通组（n=26）。普通组实施常规护理，综合组实施综合护理，比较干预效果。结果：护理后综合组病例的膀胱容量、残留尿量显著改善，与普通组比较有统计学意义（p＜0.05）。综合组、普通组病例的症状改善率分别是96.15%、76.92%，综合组症状改善率相对较高（p＜0.05）。结论：综合护理在脊髓横断面损伤致神经源性膀胱失禁中应用效果较好，建议推广。

简介：摘要随着肿瘤学和神经科学的发展，其交叉学科——癌症-神经科学也在近年来引起学者们的广泛关注。人们逐渐认识到神经元参与肿瘤微环境的形成并影响着肿瘤的发生发展，同样，肿瘤也会引起神经系统重塑及功能障碍。其中，中枢神经系统中最常见的恶性肿瘤——脑胶质瘤与神经元的相互关系更是在近几年来有了全新的认识。笔者现回顾性总结癌症-神经科学在脑胶质瘤研究中的最新进展，对神经元与脑胶质瘤细胞相互作用的机制进行系统综述。

简介：摘要目的观察微小RNA(miR)-34对小儿恶性胶质瘤细胞增殖、侵袭和转移的影响。方法选取2017年6月到2019年6月我院收治的49例恶性胶质瘤组织和癌旁组织作为研究对象，采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析肿瘤组织和癌旁组织miR-34表达水平。用过表达对照和miR-34慢病毒感染U251神经胶质瘤细胞，建立对照组和miR-34组稳定细胞系。采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)、划痕实验和Transwell实验分析对照组和miR-34组细胞增殖、迁移和侵袭能力。采用生物信息学、双荧光素酶报告基因分析miR-34靶基因。蛋白质印迹法(Western blot)分析靶基因表达水平。计量数据比较采用t检验。结果神经胶质瘤组织中miR-34表达水平(0.44±0.10)明显低于癌旁组织(1.14±0.15)，差异有统计学意义(t＝4.109，P<0.05)。对照组细胞吸光度值(2.09±0.31)明显高于miR-34组(1.63±0.27)，差异有统计学意义(t＝3.016，P<0.05)。对照组细胞划痕愈合率[(89.37±8.19)%]明显高于miR-34组[(58.32±6.82)%]，差异有统计学意义(t＝4.781，P<0.05)。对照组细胞迁移数量[(136.22±15.29)个]明显高于miR-34组[(76.29±9.29)个]，差异有统计学意义(t＝5.891，P<0.05)。生物信息学和双荧光素酶报告基因结果显示SOX4基因是miR-34的靶基因。癌旁组织中SOX4蛋白水平(0.91±0.12)明显低于肿瘤组织(2.86±0.16)，差异有统计学意义(t＝3.471，P<0.05)。对照组细胞SOX4蛋白表达水平(1.28±0.14)明显高于miR-34组(0.64±0.12)，差异有统计学意义(t＝3.003，P<0.05)。对照组细胞TMEM2蛋白表达水平(1.37±0.17)明显高于miR-34组(0.76±0.11)，差异有统计学意义(t＝2.409，P<0.05)。结论miR-34在恶性胶质瘤组织中呈低表达，通过调控SOX4蛋白表达水平，调节恶性神经胶质瘤细胞的增殖、侵袭和转移。

简介：摘要目的研究饥饿条件下不同浓度硝酸盐对脑胶质瘤C6和U87细胞生物活性的影响以及自噬相关蛋白的变化。方法将C6和U87细胞分为对照组和饥饿组，对照组给予常规培养基培养，饥饿组给予等体积的Hank′s平衡盐溶液培养。两组细胞分别应用0 mmol/L、0.05 mmol/L、0.20 mmol/L和0.50 mmol/L的硝酸盐处理12 h和24 h，然后采用噻唑蓝比色法检测各组细胞的增殖情况；流式细胞术检测各组细胞的凋亡水平；实时荧光定量PCR实验检测各组p62的表达水平；蛋白质免疫印迹实验检测自噬相关蛋白p62、微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅱ/Ⅰ及硝酸盐转运蛋白(SLC17A5)的表达水平。结果与对照组相比，饥饿状态引起C6和U87细胞的增殖能力下降，C6细胞培养12 h和24 h后分别下降了(63.60±2.40)%和(77.10±2.70)%；U87细胞分别下降了(65.60±2.70)%和(86.80±3.20)%(均P<0.01)；给予0.20 mmol/L和0.50 mmol/L的硝酸盐处理后，饥饿组C6和U87细胞的增殖能力与0 mmol/L组比较均明显下降(均P<0.05)，而0.05 mmol/L的硝酸盐浓度对各组细胞的增殖能力均无明显影响(均P>0.05)。流式细胞术检测显示，C6细胞对照组给予0.20 mmol/L和0.50 mmol/L硝酸盐后，各组膜联蛋白Ⅴ和碘化丙啶的阳性细胞数比较差异均无统计学意义(均P>0.05)；饥饿12 h后，0 mmol/L组膜联蛋白Ⅴ和碘化丙啶的阳性细胞所占比率分别为(13.50±0.71)%和(7.80±0.34)%；0.20 mmol/L组分别为(17.30±0.82)%和(10.30±0.42)%；0.50 mmol/L组分别为(19.40±0.75)%和(12.60±0.75)%，组间比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。U87各组细胞的凋亡水平也呈现相同的变化趋势。实时荧光定量PCR实验显示，对照组给予不同浓度的硝酸盐不影响C6和U87细胞p62 mRNA的表达水平(均P>0.05)；而饥饿组给予不同浓度的硝酸盐后C6和U87细胞p62 mRNA的表达水平均明显上调(均P<0.05)。蛋白质免疫印迹实验显示，饥饿组给予不同浓度的硝酸盐后LC3Ⅱ/Ⅰ的比值明显下调，而p62和SLC17A5的表达水平明显上调(均P<0.05)。结论硝酸盐可抑制饥饿状态下胶质瘤细胞的增殖能力和细胞内的自噬水平，从而诱导细胞发生凋亡。

简介：摘要目的研究饥饿条件下不同浓度硝酸盐对脑胶质瘤C6和U87细胞生物活性的影响以及自噬相关蛋白的变化。方法将C6和U87细胞分为对照组和饥饿组，对照组给予常规培养基培养，饥饿组给予等体积的Hank′s平衡盐溶液培养。两组细胞分别应用0 mmol/L、0.05 mmol/L、0.20 mmol/L和0.50 mmol/L的硝酸盐处理12 h和24 h，然后采用噻唑蓝比色法检测各组细胞的增殖情况；流式细胞术检测各组细胞的凋亡水平；实时荧光定量PCR实验检测各组p62的表达水平；蛋白质免疫印迹实验检测自噬相关蛋白p62、微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅱ/Ⅰ及硝酸盐转运蛋白(SLC17A5)的表达水平。结果与对照组相比，饥饿状态引起C6和U87细胞的增殖能力下降，C6细胞培养12 h和24 h后分别下降了(63.60±2.40)%和(77.10±2.70)%；U87细胞分别下降了(65.60±2.70)%和(86.80±3.20)%(均P<0.01)；给予0.20 mmol/L和0.50 mmol/L的硝酸盐处理后，饥饿组C6和U87细胞的增殖能力与0 mmol/L组比较均明显下降(均P<0.05)，而0.05 mmol/L的硝酸盐浓度对各组细胞的增殖能力均无明显影响(均P>0.05)。流式细胞术检测显示，C6细胞对照组给予0.20 mmol/L和0.50 mmol/L硝酸盐后，各组膜联蛋白Ⅴ和碘化丙啶的阳性细胞数比较差异均无统计学意义(均P>0.05)；饥饿12 h后，0 mmol/L组膜联蛋白Ⅴ和碘化丙啶的阳性细胞所占比率分别为(13.50±0.71)%和(7.80±0.34)%；0.20 mmol/L组分别为(17.30±0.82)%和(10.30±0.42)%；0.50 mmol/L组分别为(19.40±0.75)%和(12.60±0.75)%，组间比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。U87各组细胞的凋亡水平也呈现相同的变化趋势。实时荧光定量PCR实验显示，对照组给予不同浓度的硝酸盐不影响C6和U87细胞p62 mRNA的表达水平(均P>0.05)；而饥饿组给予不同浓度的硝酸盐后C6和U87细胞p62 mRNA的表达水平均明显上调(均P<0.05)。蛋白质免疫印迹实验显示，饥饿组给予不同浓度的硝酸盐后LC3Ⅱ/Ⅰ的比值明显下调，而p62和SLC17A5的表达水平明显上调(均P<0.05)。结论硝酸盐可抑制饥饿状态下胶质瘤细胞的增殖能力和细胞内的自噬水平，从而诱导细胞发生凋亡。

简介：摘要抗髓鞘少突胶质细胞糖蛋白IgG相关疾病(anti-myelin oligodendrocyte glycoprotein-IgG associated disorders，MOGAD)是儿童特发性中枢神经系统脱髓鞘中最常见的一类疾病。儿童MOGAD可为单相性或多相性病程。常见临床表型包括急性播散性脑脊髓炎、视神经炎、横贯性脊髓炎、视神经脊髓炎谱系疾病等，少见表型包括脑炎、重叠综合征和颅神经炎等，对于多相性病程患儿，上述同一表型可反复或不同表型先后组合。目前推荐转染细胞法检测血清MOG-IgG作为诊断依据，血清MOG-IgG的持续存在是多相性病程的主要危险因素。多相性MOGAD的疾病修正治疗尚缺乏高质量临床研究证据，可选择的药物包括硫唑嘌呤、吗替麦考酚酯、利妥昔单抗和每月维持静脉注射免疫球蛋白等。本病的预后取决于临床表型、病程以及治疗等因素。MOGAD正在被逐渐认识，尚有很多问题亟待解决。

简介：摘要目的探讨儿童髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)抗体相关炎性脱髓鞘疾病(IDD)患儿的临床表现、影像学特征、治疗方案及临床预后。方法选择2014年6月1日至2020年9月30日，在中山大学孙逸仙纪念医院儿科确诊的7例MOG抗体相关IDD患儿为研究对象。其中，女性患儿为2例，男性为5例；平均年龄为8.3岁。回顾性分析该7例MOG抗体相关IDD患儿的临床特征、影像学检查结果、治疗方案及临床预后等。本研究遵循的程序符合2013年修订的《世界医学协会赫尔辛基宣言》要求。结果①初诊时，这7例患儿分别被误诊为急性播散性脑脊髓炎(ADEM) (2例)、视神经炎(ON)(2例)、多发性硬化症(MS)(1例)、脑膜炎(1例)及自身免疫性脑炎(AE) (1例)。其中年龄较小患儿临床表现为ON症状，而年龄较大者为ADEM症状。②7例患儿中，2例脑脊液检查结果显示白细胞计数(WBC)增高、蛋白水平增高；而脑脊液MOG抗体呈阳性为6例，外周血抗CASPR-2抗体呈阳性为1例；6例患儿颅内压>200 mmH2O(1 mmH2O＝0.098 1 kPa)。③7例患儿中，外周血WBC增高为2例，C反应蛋白(CRP)呈阳性为1例、红细胞沉降率(ESR)增高为1例。所有患儿外周血MOG抗体检测结果均呈阳性，而外周血抗CASPR-2抗体呈阳性为1例。④影像学检查结果显示，病变累及侧脑室周围为5例、基底节为3例，丘脑、脊髓和视神经各为2例，脑干和延髓各为1例，伴脑膜强化为1例；而且这7例患儿的病灶直径均>2 cm；年龄>5岁的3例患儿的病灶边界光滑、清晰。⑤治疗方案：1例患儿于急性期静脉输注甲泼尼龙10～30 mg/(kg·d)(每3天剂量递减1/2)+静脉注射免疫球蛋白(IVIG) 2 g/(kg·d)×1 d，6例静脉输注地塞米松[起始剂量为0.5 mg/(kg·d)，序贯减量至泼尼松1 mg/(kg·d)口服维持治疗]+IVIG 0.4 g/(kg·d)× 5 d。治疗维持期内，对这7例患儿均进行泼尼松口服治疗，其中5例每个月静脉输注1剂IVIG，剂量为2 g/kg。对2例MOG抗体相关IDD复发患儿，均再次进行静脉输注甲泼尼龙+IVIG治疗，其中1例接受利妥昔单抗治疗的方案为375 mg/(m2·次)×1次/周×4周。治疗后，5例患儿获得完全恢复，2例部分恢复，平均年复发率(ARR)为0.40次/年。结论MOG抗体相关IDD患儿的临床表现多样，早期易被临床误诊。MOG抗体可与AE相关抗体同时存在，影像学诊断可见多灶性病变。MOG抗体相关IDD虽为MOG抗体所介导，但是MOG抗原的免疫致病性，则与T、B淋巴细胞息息相关。MOG抗体对激素治疗敏感，即使在该病患儿多次复发的情况下，预后亦良好。

简介：摘要放射性脑损伤（RBI）是头颈部及颅内原发和继发肿瘤患者接受放疗后出现的严重并发症。关于RBI的发生机制，目前有血管损伤、炎症免疫反应和脱髓鞘等假说。其中，炎症免疫反应在RBI的发病过程中发挥着重要作用。小胶质细胞（MG）是脑内固有的免疫细胞，其在各种中枢神经系统疾病诱导的神经炎症的病理生理过程中起重要作用。笔者对近年来MG在RBI中的作用及其机制的研究进展进行综述。

简介：摘要髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(myelin oligodendrocyte glycoprotein，MOG)在哺乳动物中枢神经系统少突胶质细胞中表达，位于髓鞘最表面，是髓鞘的重要组成部分。MOG抗体相关炎性脱髓鞘疾病是近年来神经科领域研究热点，其临床表型谱变化多样，随着对该病研究的逐渐深入，已发现越来越多的表型。目前推荐采用基于细胞的检测方法(cell-based assay，CBA)检测外周血中MOG抗体。由于其临床表现复杂多样，在不同年龄段表现亦存在差别，给临床诊断带来一定困难。目前确切致病机制仍不完全清楚，对其治疗方案、长期预后等方面仍存在争议。该文将对MOG抗体相关炎性脱髓鞘疾病的致病机制、临床表现、治疗方案及临床预后等方面进行综述。

简介：摘要抗髓鞘少突胶质细胞糖蛋白IgG相关疾病(anti-myelin oligodendrocyte glycoprotein-IgG associated disorders，MOGAD)是儿童特发性中枢神经系统脱髓鞘中最常见的一类疾病。儿童MOGAD可为单相性或多相性病程。常见临床表型包括急性播散性脑脊髓炎、视神经炎、横贯性脊髓炎、视神经脊髓炎谱系疾病等，少见表型包括脑炎、重叠综合征和颅神经炎等，对于多相性病程患儿，上述同一表型可反复或不同表型先后组合。目前推荐转染细胞法检测血清MOG-IgG作为诊断依据，血清MOG-IgG的持续存在是多相性病程的主要危险因素。多相性MOGAD的疾病修正治疗尚缺乏高质量临床研究证据，可选择的药物包括硫唑嘌呤、吗替麦考酚酯、利妥昔单抗和每月维持静脉注射免疫球蛋白等。本病的预后取决于临床表型、病程以及治疗等因素。MOGAD正在被逐渐认识，尚有很多问题亟待解决。

简介：摘要目的观察缺氧环境对破骨细胞形成的影响，探讨缺氧诱导因子-2α(HIF-2α)在其中的调控作用。方法在正常氧浓度、5%O2浓度和1%O2浓度条件下诱导培养破骨细胞，抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色后进行计数。Western blot检测缺氧条件下破骨细胞中HIF-2α的表达。应用HIF-2α抑制剂PT2385(5 μmol/L)抑制HIF-2α活性后，实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测破骨细胞功能相关基因的表达。结果TRAP染色显示骨髓基质单核细胞(BMM)可成功诱导成多核的破骨细胞；破骨细胞的数目在正常氧组为(55.1±8.2)个，5%O2低氧组为(72.5±10.7)个，1%O2低氧组为(94.7±15.6)个，差异有统计学意义(F＝8.341，P<0.05)。破骨细胞在低氧条件下HIF-2α的蛋白表达增高，5%O2低氧组为正常氧组的3.1倍，1%O2低氧组为正常氧组的6.5倍，差异有统计学意义(F＝21.070，P<0.05)。TRAP、组织蛋白酶K(CK)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、活化T细胞核因子1(NFATc1)基因表达在5%O2低氧组升高，PT2385(5 μmol/L)可抵消低氧这种作用，差异有统计学意义(P<0.05)。结论缺氧环境可以通过激活HIF-2α促进破骨细胞的形成和分化，阻断HIF-2α可抑制破骨细胞的骨吸收功能。

简介：摘要目的探讨色素上皮衍生因子(PEDF)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的肺癌A549细胞上皮-间充质转化(EMT)进程的影响及其分子机制。方法选取肺癌A459细胞(购自中科院上海细胞生物研究所)为研究对象，使用TGF-β1建立EMT模型，分为正常组、TGF-β1处理组(TGF-β1，10 ng/ml)、PEDF处理组(TGF-β1，10 ng/ml；PEDF，20 nmol/L)和氯化锂(GSK-3β抑制剂，LiCl)处理组(TGF-β1，10 ng/ml；PEDF，20 nmol/L；LiCl，20 mmol/L)。光镜下观察各组A549细胞的形态变化；划痕实验观察细胞的迁移能力；免疫荧光法和免疫印迹法观察和检测各组钙黏蛋白(E-cadherin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达和分布。两组间比较采用t检验。结果TGF-β1促使A549细胞呈狭长纺锤形变化，显著增加其迁移能力；PEDF部分逆转A549形态改变和迁移能力的增加；LiCl消除了PEDF的逆转作用。免疫荧光和免疫印迹结果显示，TGF-β1组α-SMA(0.973±0.081)、p-GSK-3βSer9(0.875±0.065)和snail(0.562±0.049)高于正常组α-SMA(0.594±0.041)、p-GSK-3βSer9(0.267±0.043)、snail(0.222±0.041，t＝7.283、13.886、11.634，P值均<0.05)，TGF-β1组E-cadherin(0.442±0.066)低于正常组E-cadherin(0.892±0.052，t＝10.378，P<0.05)；PEDF组α-SMA(0.712±0.063)、p-GSK-3βSer9(0.566±0.067)和snail(0.354±0.056)低于TGF-β1组α-SMA(0.973±0.081)、p-GSK-3βSer9(0.875±0.065)和snail(0.562±0.049，t＝4.383、6.256、5.927，P值均<0.05)，PEDF组E-cadherin(0.785±0.071)高于TGF-β1组E-cadherin(0.442±0.066，t＝6.845，P<0.05)；LiCl组α-SMA(1.021±0.083)、p-GSK-3βSer9(0.750±0.050)和snail(0.687±0.032)高于PEDF组α-SMA(0.712±0.063)、p-GSK-3βSer9(0.566±0.067)和snail(0.354±0.056，t＝4.868、4.276、9.667，P值均<0.05)，LiCl组E-cadherin(0.385±0.056)低于PEDF组E-cadherin(0.785±0.071，t＝8.633，P<0.05)。结论PEDF通过调节p-GSK-3βSer9/snail信号通路抑制TGF-β1诱导的A549细胞EMT进程。