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  • 简介:目的探索构建针对人类转运蛋白2(KPNA2)基因的重组慢病毒干扰RNA(shRNA)载体的方法,研究其对人骨肉瘤细胞株MG63的沉默效率。方法针对KPNA2基因设计小片段干扰序列。加入AgeⅠ酶和EcoRⅠ酶酶切位点,根据设计好的序列合成单链DNAoligo并退火合成双链DNAoligo。将合成好的双链DNAoligo与GV115载体重组,形成GV115-shRNA慢病毒载体。聚合酶链式反应(PCR)法鉴定筛选出阳性重组子,经测序后包装慢病毒载体。荧光法测定病毒滴度,重组慢病毒感染骨肉瘤细胞株MG63,通过显微镜观察细胞中绿色荧光蛋白(GFP)的表达来计算其转染效率。RT-PCR法检测重组慢病毒RNA干扰载体对人骨肉瘤细胞株MG63中KPNA2表达的沉默效率。实验结果数据以均数±标准差(sx±)表示,应用SPSS13.0统计软件分析,两组均数间的比较采用t检验,以P<0.05为差异有统计意义。结果经PCR分析和测序证实,成功构建KPNA2基因重组慢病毒RNA干扰载体;荧光法测定病毒滴度为4×108TU/ml;荧光显微镜下观察GFP,显示细胞感染效率达到80%以上;RT-PCR检测对照组及实验组KPNA2mRNA表达分别为0.991±0.087vs.0.216±0.012,差异有统计学意义(P<0.01)。结论KPNA2基因重组慢病毒RNA干扰载体构建成功,并有效干扰人骨肉瘤细胞株MG63中KPNA2mRNA的表达。

  • 标签: 核转运蛋白2 慢病毒载体 RNA干扰 重组质粒
  • 简介:乳酸是运动过程中糖酵解的产物,乳酸的消除通过多种途径的乳酸穿梭得以完成,乳酸穿梭是在单羧酸转运蛋白的帮助下进行的乳酸跨膜运输,有助于乳酸的消除.研究发现运动中起主要调节作用的是MCT1和MCT4,主要对MCTs的结构、功能、分布、调控以及抑制剂进行综述,并进一步探讨MCT1和MCT4在不同运动状态下对乳酸代谢调控的重要作用.

  • 标签: 单羧酸转运蛋白 乳酸 运动 糖酵解
  • 简介:目的:构建蜱传脑炎病毒(TBEV)结构蛋白E的原表达载体,表达重组蛋白。方法:PCR扩增E蛋白全长基因片段,插入原表达载体pET-32a并转化大肠杆菌进行诱导表达,镍柱纯化、复性。结果:E蛋白在大肠杆菌中获得表达,表达量达60mg/L;重组E蛋白能与人抗TBEV多克隆抗体产生特异反应;用重组E抗原免疫家兔后,能检测到较高的抗体水平。结论:原表达的E抗原蛋白具有抗体结合活性,可用于制备ELISA诊断试剂。

  • 标签: 蜱传脑炎病毒 E蛋白 原核表达
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  • 简介:摘要目的探讨尿白蛋白、免疫球蛋白G及β2微球蛋白检测对老年糖尿病患者的临床意义。方法以2015年1月至2017年1月接受治疗的89例老年糖尿病患者作为研究对象,并标为观察组,选取同期进行健康检查的89例老年人作为对照组,分别对两组成员的尿白蛋白、免疫球蛋白G及β2微球蛋白进行检测,并对两组人员的检测结果以及阳性检出率进行比较。结果对照组人员的尿白蛋白、免疫球蛋白G及β2微球蛋白的含量要明显低于观察组患者的对应含量,同时,对照组人员的以上检测指标的阳性检出率也要明显低于观察组患者,两组患者进行比较的数据之间存在明显差异,具有统计学意义(P<0.05)。结论在对老年糖尿病患者进行诊断时,可以将尿白蛋白、免疫球蛋白G及β2微球蛋白含量作为早期诊断的参考表准,值得在临床检查中推广使用。

  • 标签: 尿白蛋白 免疫球蛋白G &beta 2微球蛋白 老年糖尿病 临床意义
  • 简介:摘要目的探讨血清β2-微球蛋白(Sβ2-MG)、尿β2-微球蛋白(Uβ2-MG)联合超敏C反应蛋白(hs-CRP)检测在早期2型糖尿病(T2DM)肾病辅助诊断中的临床应用价值。方法回归分析T2DM无肾病患者66例(NDN组)、早期T2DM肾病患者69例(早期DN组)和体检健康者70例(正常组),采集清晨空腹静脉血进行Sβ2-MG、hs-CRP和肌酐(SCrea)以及晨尿Uβ2-MG检测的结果。结果NDN组Sβ2-MG和hs-CRP检测水平高于正常组(P<0.05),SCrea、UREA和Uβ2-MG高于正常组(P>0.05),早期DN组Sβ2-MG、hs-CRP、UREA和Uβ2-MG检测水平均显著高于正常组和NDN组(P<0.01),SCrea检测水平高于正常组和NDN组(P>0.05)。各组联合检测的阳性检出率高于单项的阳性检出率(P<0.05),早期DN组阳性检出率显著高于NDM组(P<0.01)。结论血尿β2-微球蛋白和hs-CRP水平在早期T2DM肾病中均升高,其水平变化有助于早期T2DM肾功能损伤辅助诊断和病情监测,联合检测可提高其阳性检出率,为临床医生提供有价值的治疗依据。

  • 标签: 2型糖尿病 &beta 2-微球蛋白 超敏C反应蛋白 早期肾病
  • 简介:目的构建arhgap39基因真过表达载体并初步研究arhgap39蛋白表达的相关问题。方法提取小鼠海马组织总RNA,逆转录合成cDNA,根据GeneBank中基因信息设计引物,高保真PCR扩增arhgap39基因的编码区,随后将其转移到真载体上,转染NG-108细胞并观察其在细胞内的表达情况。结果经酶切和测序鉴定表明成功构建arhgap39基因的相关真过表达载体;将其转染NG-108细胞,免疫印迹试验证实arhgap39成功过表达,arhgap39的分子量约为140kD。结论我们的实验结果确认了arhgap39蛋白的分子量,并对其可能存在的存在形式做了验证性研究,可以为进一步的研究提供理论基础和研究工具。

  • 标签: arhgap39基因 过表达载体 剪切体 分子量 小鼠
  • 简介:猪瘟(Classicalswinefever,CSF)是由猪瘟病毒(Classicalswinefevervirus,CSFV)引起的一种急性、热性、高度接触性传染病,主要特征是高热、微血管变性,进而引起全身出血、坏死。CSFV为单股正链有囊膜的RNA病毒,基因组大小为12.3kb,编码一个独立的含3898个氨基酸的多聚蛋白。这个独立的多聚蛋白在宿主蛋白酶的修饰下,裂解为12种成熟的病毒蛋白,包括4种结构蛋白和8种非结构蛋白

  • 标签: 猪瘟病毒 CSFV 多聚蛋白 E2蛋白 非结构蛋白 囊膜糖蛋白
  • 简介:摘要本文通过对仪表的概述,对仪表的工作原理进行了详细的介绍,结合仪表安装设计,深入剖析仪表安装过程中应注意的一些问题,并提出一些解决的方案,为以后的仪表的安装技术和自主化安装能力提供了重要的参考。

  • 标签: 核仪表 概述 安装技术
  • 简介:摘要目的构建NR4A2真核细胞瞬时表达载体。方法设计带有酶切位点的NR4A2引物,采用PCR法从NR4A2基因载体中扩增目的基因,经限制性酶切后与目的载体连接,转化感受态细胞。挑取阳性克隆,分别采用PCR法和测序法进行验证。结果成功构建具有NR4A2表达序列的慢病毒质粒。

  • 标签: NR4A2 过表达 慢病毒质粒
  • 简介:摘要目的总结新生儿转运装置在新生儿急救转运中的作用。方法以我院2015年11月~2016年11月转运的150例新生儿为研究对象,按CRIB、转运距离分为观察组(携带转运装置,75例)、对照组(不携带转运装置,75例),比较两组新生儿的医疗操作、病情转归情况。结果观察组新生儿实施了更多医疗操作,住院时间、住院费用明显高于对照组,差异显著(P<0.05);两组自动出院率、转运病死率、成功率无明显差异(P<0.05),无统计学意义。结论在急救新生儿长途转运中,转运装置发挥着关键作用,有助于救治患儿。

  • 标签: 新生儿 转运装置 急救转运 作用
  • 简介:以海参为原料,研究海参蛋白肽的抗氧化性以及对H2O2诱导RAW264.7巨噬细胞氧化损伤的保护效果和作用机制。以清除羟自由基(·OH)能力、Fe2+螯合能力和Fe3+还原能力为指标,评价海参蛋白肽的体外抗氧化活性。以H2O2刺激RAW264.7巨噬细胞建立氧化损伤细胞模型,采用2′,7′-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)荧光探针法测定细胞活性氧(ROS)水平,四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞活力,实时荧光定量PCR测定细胞血红素氧合酶-1(HO-1)mRNA表达水平。结果表明,海参蛋白肽能够清除·OH,具有Fe2+螯合能力和Fe3+还原能力,海参蛋白肽的这种体外抗氧化能力呈现浓度依赖效应。海参蛋白肽显著降低氧化损伤RAW264.7巨噬细胞ROS水平和提高氧化损伤细胞活力(P〈0.05)。而且,海参蛋白肽显著提高巨噬细胞内HO-1mRNA表达(P〈0.05),HO-1抑制剂锌原卟啉IX(ZnPPIX)部分逆转海参蛋白肽对氧化损伤巨噬细胞活力的促进作用。这些结果说明,海参蛋白肽通过上调RAW264.7巨噬细胞HO-1mRNA表达水平,发挥对巨噬细胞氧化损伤的保护作用。

  • 标签: 海参蛋白肽 氧化损伤 RAW264.7巨噬细胞 血红素氧合酶-1
  • 简介:摘要目的探讨凋亡抑制蛋白(Survivin)与基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在胃癌组织中与的表达及意义。方法采用免疫组织化学S-P法检测60例胃癌组织及15例正常胃黏膜组织中MMP-2、Survivin蛋白的表达情况。结果胃癌组织中MMP-2、Survivin的阳性率分别为43.33%、76.67%,均高于正常胃黏膜(P<0.01)。Survivin、MMP-2的表达与胃癌的临床分期、浸润深度、淋巴结转移具相关性(P<0.05),而与胃癌的病理分化程度、性别、年龄均无相关性(P>0.05)。结论MMP-2、Survivin与胃癌的发生及恶性演变密切相关。

  • 标签: Survivin MMP-2 胃癌
  • 简介:摘要目的探讨分析新生儿转运系统在危重新生儿转运中的应用。方法选取我院2014年11月至2016年去11月通过新生儿转运系统对新生儿科130例危重新生儿进行转运,回顾分析新生儿的临床资料,探讨新生儿转运系统的组织管理,装备保证,定期培训,转运前期的病情稳定措施与新生儿转运的关系。结果在对所稳重新生儿进行转运时,需要按照其疾病顺序进行转运,首先就是重度窒息患者,缺氧缺血性脑病患者,早产且体重较低患者,肺透明膜病患者,胎粪吸入综合征患者以及重症肺炎患者,对比传统的双向被动转运模式,新生儿转运系统具有较高的转运成功率,可以有效降低患者死亡情况,差异显著,P<0.05,具有统计学应用。结论在对危重新生儿转运期间使用新生儿转运系统,可以有效处理转运之前治疗医院,途中以及新生儿重症监护室三个阶段,有效提升新生儿转运成功率,降低患者死亡情况。

  • 标签: 新生儿转运系统 危重新生儿 转运 实际应用
  • 简介:摘要目的探讨高血压和糖尿病患者尿微量白蛋白和尿β2微球蛋白检测结果。方法A组为2016年1月-2017年1月本院收治的高血压患者45例。B组为同期收治的糖尿病患者45例。C组为同期到本院体检的健康人45名。三组均分别检测尿微量白蛋白和尿β2微球蛋白,分析水平变化。结果C组尿微量白蛋白、尿β2微球蛋白阳性率均低于A组、B组(P<0.05);A组、B组病程>10年组尿微量白蛋白和尿β2微球蛋白均高于5-10年组、<5年组(P<0.05)。结论相较于健康人,高血压、糖尿病患者尿微量白蛋白和尿β2微球蛋白水平明显提升,且与病程呈正相关。而联合检测能有效诊断高血压、糖尿病所致早期肾功能损伤,需高度关注。

  • 标签: 高血压 糖尿病 尿微量白蛋白 尿&beta 2微球蛋白
  • 简介:摘要地震伤员的救治中,转运治疗极为普遍,近些年来发生的汶川大地震、余数大地震、九寨沟大地震等,都出现了大量的伤员转运现象。为了保证伤员的生命安全,在远程转运过程中,一定要做好护理措施。为此,本文首先分析了远程转运地震伤员护理工作开展的重要性,在此基础上详细探讨了远程转运地震伤员的护理措施。

  • 标签: 地震灾害 受伤人员 远程转运 护理措施
  • 简介:摘要随着城市规模的扩大和人民生活水平的提高,生活垃圾总量也在逐年扩大,其年增长速度约为8%左右,城市垃圾的产量也开始进入高速发展的时期,而垃圾转运站处理过程中带来的二次污染问题也比较严重,人们对居住环境的要求日益提高,由此带来的环境污染已经成为许多城市面临的最棘手的难题之一。

  • 标签: 转运站 环境 除臭 污水
  • 简介:摘要对93例糖尿病患者的血清β2微球蛋白检测结果进行了回顾性分析,结果表明糖尿病患者血清β2微球蛋白明显高于对照组(P<0.05),且与反映近期平均血糖水平的指标糖化血红蛋白HBA1C及反映肾小球损伤的指标血清肌酐均有良好的相关性(P<0.05),是代替糖尿病肾小球损伤的良好实验室监测指标。

  • 标签: 糖尿病 &beta 2微球蛋白 肾小球损伤
  • 简介:摘要目的本次主要对安全转运护理模式在急诊科危重患者院内转运中的临床价值进行探讨。方法选取在我院接受护理的危重患者80例,根据所有患者入院的编号进行平均分组,对照组给予常规护理,实验组给予安全运转模式护理。结果通过调查和观察,发现实验组在临床护理服务质量等方面均要高于对照组,P<0.05。结论安全运转护理对于急诊科危重患者具有十分重要的价值,有利于降低运转中不良事件的发生,提高护理的质量,增加医院的美誉度。

  • 标签: 安全转运护理模式 急诊科 危重患者 院内转运