简介：摘要目的探讨miR-199a-5p对宫颈癌CaSki细胞放射敏感性的影响及潜在机制。方法体外培养宫颈癌CaSki细胞。采用脂质体Lipofectamine 2000将miR-199a-5p模拟物(miR-199a-5p mimics)转染至宫颈癌CaSki细胞，记为miR-199a-5p组，以转染模拟物对照(mimics control)的CaSki细胞为阴性对照(NC组)，以未转染的CaSki细胞为空白对照(Control组)，各组细胞经X射线照射后，采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组细胞中miR-199a-5p的表达量，通过克隆形成实验和流式细胞凋亡实验检测miR-199a-5p对CaSki细胞放射敏感性和凋亡的影响，使用生物信息学软件预测miR-199a-5p的靶基因，通过双荧光素酶报告基因实验和蛋白免疫印迹(Western blot)验证miR-199a-5p和甲状腺激素受体相互作用因子4(TRIP4)的靶向关系。结果转染miR-199a-5p mimics后，miR-199a-5p组中miR-199a-5p的表达量显著高于Control组(P<0.05)，经X射线照射后，miR-199a-5p过表达更明显(P<0.05)；过表达miR-199a-5p降低CaSki细胞克隆形成能力(P<0.05)，促进CaSki细胞的凋亡；且过表达miR-199a-5p能够进一步降低放射后细胞的克隆形成，并促进放射后细胞凋亡(P<0.05)；双荧光素酶报告基因实验和Western blot证实了miR-199a-5p能够靶向负调控TRIP4。结论miR-199a-5p可通过靶向负调控TRIP4的表达提高宫颈癌CaSki细胞的放射敏感性。

简介：摘要目的探讨miR-199a-5p对宫颈癌CaSki细胞放射敏感性的影响及潜在机制。方法体外培养宫颈癌CaSki细胞。采用脂质体Lipofectamine 2000将miR-199a-5p模拟物(miR-199a-5p mimics)转染至宫颈癌CaSki细胞，记为miR-199a-5p组，以转染模拟物对照(mimics control)的CaSki细胞为阴性对照(NC组)，以未转染的CaSki细胞为空白对照(Control组)，各组细胞经X射线照射后，采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组细胞中miR-199a-5p的表达量，通过克隆形成实验和流式细胞凋亡实验检测miR-199a-5p对CaSki细胞放射敏感性和凋亡的影响，使用生物信息学软件预测miR-199a-5p的靶基因，通过双荧光素酶报告基因实验和蛋白免疫印迹(Western blot)验证miR-199a-5p和甲状腺激素受体相互作用因子4(TRIP4)的靶向关系。结果转染miR-199a-5p mimics后，miR-199a-5p组中miR-199a-5p的表达量显著高于Control组(P<0.05)，经X射线照射后，miR-199a-5p过表达更明显(P<0.05)；过表达miR-199a-5p降低CaSki细胞克隆形成能力(P<0.05)，促进CaSki细胞的凋亡；且过表达miR-199a-5p能够进一步降低放射后细胞的克隆形成，并促进放射后细胞凋亡(P<0.05)；双荧光素酶报告基因实验和Western blot证实了miR-199a-5p能够靶向负调控TRIP4。结论miR-199a-5p可通过靶向负调控TRIP4的表达提高宫颈癌CaSki细胞的放射敏感性。

简介：摘要目的探讨血清miR-214-5p水平预测儿童心脏手术后并发急性肾损伤(acute kidney injury，AKI)的价值。方法选取2015年1月至2019年12月海口市妇幼保健院收治的先天性心脏病行体外循环手术患儿102例，按是否并发AKI分为AKI组(n＝28)和非AKI组(n＝74)，检测两组术后3 h血清miR-214-5p、血肌酐(serum creatinine，Scr)、胱抑素C(cystatin C，Cys-C)及肾损伤分子-1(kidney injury molecule-1，KIM-1)水平。分析儿童心脏手术后并发AKI的危险因素，及miR-214-5p、Scr、Cys-C和KIM-1预测儿童心脏手术后并发AKI的价值。结果AKI组与非AKI组相比，血清miR-214-5p[(3.14±1.36)比(0.95±0.47)]、Scr[(490.35±93.62)μmol/L比(108.26±22.40)μmol/L]、Cys-C[(3.27±0.85)mg/L比(0.86±0.24)mg/L]及KIM-1[(26.83±8.70)μg/L比(6.42±1.18)μg/L]水平明显升高，差异均有统计学意义(P均<0.05)。多因素Logistic回归分析显示，血清miR-214-5p、Scr、Cys-C及KIM-1水平升高是儿童心脏手术后并发AKI的独立危险因素(OR＝2.518，P<0.001；OR＝1.630，P＝0.035；OR＝1.974，P<0.001；OR＝2.902，P<0.001)。ROC曲线分析显示，miR-214-5p、Scr、Cys-C及KIM-1 4项联合预测AKI的曲线下面积(0.958，95%CI：0.905～0.996)最大，其敏感度为98.5%，特异度为86.3%。结论血清miR-214-5p水平在儿童心脏手术后并发AKI患儿中明显升高，是AKI发生的独立危险因素，联合Scr、Cys-C及KIM-1 3项指标可较好地预测AKI发生。

简介：摘要目的探讨lncRNA HOTAIR对胶质瘤U87R细胞和移植瘤放射敏感性影响及潜在作用机制。方法将阴性对照质粒、沉默HOTAIR质粒、过表达miR-NC质粒、过表达miR-17-5p质粒分别转染到U87R细胞中，记为沉默对照组、沉默HOTAIR组、过表达miR-NC组、过表达miR-17-5p组；以上各组细胞分别用4Gy照射，记为沉默对照＋4Gy组、沉默HOTAIR＋4Gy组、过表达miR-NC＋4Gy组、过表达miR-17-5p＋4Gy组；将沉默HOTAIR质粒分别与抑制表达miR-NC质粒、抑制表达miR-17-5p质粒共转染到U87R细胞中，记为沉默HOTAIR＋抑制miR-NC组、沉默HOTAIR＋抑制miR-17-5p组，转染均用脂质体法。采用qRT-PCR检测miR-17-5p和HOTAIR的表达；细胞克隆形成实验检测瘤细胞放射敏感性影响；流式细胞术检测细胞凋亡；双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。结果HOTAIR在放射抵抗的细胞中高表达；沉默HOTAIR和过表达miR-17-5p可增加U87R细胞放射敏感性且促进放射照射诱导的凋亡。HOTAIR可靶向调节miR-17-5p表达，抑制miR-17-5p逆转了沉默HOTAIR对U87R细胞放射增敏和促进放射诱导的凋亡。结论沉默lncRNA HOTAIR对胶质瘤细胞具有放射增敏和促放射诱导的凋亡作用，其机制可能与调控miR-17-5p有关。

简介：摘要目的探讨miR-424-5p对宫颈癌放射敏感性的影响及作用机制。方法RT-qPCR检测miR-424-5p在宫颈癌组织和Hela细胞中表达；流式细胞术检测Hela细胞凋亡率；CCK-8检测Hela细胞增殖活性；蛋白印迹法检测Hela细胞中蛋白表达水平。结果相较于正常组织和细胞，宫颈癌组织和Hela细胞中miR-424-5p表达量降低(1.03∶0.88，P<0.01；1.00∶0.75，P<0.001)。过表达miR-424-5p会抑制经放射处理后Hela细胞增殖活性(P<0.01)，同时增加放射处理后Hela细胞凋亡率(24.82%∶49.94%，P<0.001)。过表达miR-424-5p会抑制HMGA1表达(1.01∶0.63，P<0.01)，miR-424-5p会直接作用HMGA1进而影响宫颈癌放射敏感性。结论miR-424-5p通过直接靶向HMGA1提高宫颈癌放射敏感性。

简介：摘要目的探讨血清miR-214-5p水平预测儿童心脏手术后并发急性肾损伤(acute kidney injury，AKI)的价值。方法选取2015年1月至2019年12月海口市妇幼保健院收治的先天性心脏病行体外循环手术患儿102例，按是否并发AKI分为AKI组(n＝28)和非AKI组(n＝74)，检测两组术后3 h血清miR-214-5p、血肌酐(serum creatinine，Scr)、胱抑素C(cystatin C，Cys-C)及肾损伤分子-1(kidney injury molecule-1，KIM-1)水平。分析儿童心脏手术后并发AKI的危险因素，及miR-214-5p、Scr、Cys-C和KIM-1预测儿童心脏手术后并发AKI的价值。结果AKI组与非AKI组相比，血清miR-214-5p[(3.14±1.36)比(0.95±0.47)]、Scr[(490.35±93.62)μmol/L比(108.26±22.40)μmol/L]、Cys-C[(3.27±0.85)mg/L比(0.86±0.24)mg/L]及KIM-1[(26.83±8.70)μg/L比(6.42±1.18)μg/L]水平明显升高，差异均有统计学意义(P均<0.05)。多因素Logistic回归分析显示，血清miR-214-5p、Scr、Cys-C及KIM-1水平升高是儿童心脏手术后并发AKI的独立危险因素(OR＝2.518，P<0.001；OR＝1.630，P＝0.035；OR＝1.974，P<0.001；OR＝2.902，P<0.001)。ROC曲线分析显示，miR-214-5p、Scr、Cys-C及KIM-1 4项联合预测AKI的曲线下面积(0.958，95%CI：0.905～0.996)最大，其敏感度为98.5%，特异度为86.3%。结论血清miR-214-5p水平在儿童心脏手术后并发AKI患儿中明显升高，是AKI发生的独立危险因素，联合Scr、Cys-C及KIM-1 3项指标可较好地预测AKI发生。

简介：摘要目的观察结肠癌组织及细胞中miR-30c-5p及Toll样受体4(Toll-like receptor4，TLR4)蛋白表达，探讨其与临床病理特征的关系及意义。方法采用前瞻性研究，选取2016年5月至2017年5月于中国医科大学肿瘤医院手术切除的结肠癌手术标本及配对癌旁正常组织标本30例，采用实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction，qRT-PCR)检测miR-30c-5 mRNA的表达，采用蛋白质印迹(western blot，WC)法检测TLR4蛋白的表达，观察miR-30c-5p mRNA及TLR4蛋白在肿瘤不同TNM分期、分化程度及直径中的表达差异，Pearson Rank法进行miR-30c-5p及TLR4蛋白表达的相关性分析。结果在结肠癌组织中，miR-30c-5p表达(0.311±0.147)低于癌旁正常组织(0.881±0.266)(t＝10.613，P<0.001)。TLR4蛋白在结肠癌组织(0.729±0.274)中表达高于癌旁正常组织(0.361±0.168)(t＝6.310，P<0.001)。miR-30c-5p mRNA在结肠癌细胞株中表达(0.394±0.045、0.435±0.098、0.533±0.092、0.272±0.069)低于正常结肠上皮细胞(1.371±0.101)(t值分别为6.744、6.423、6.865、6.201，P均<0.001)。TLR4蛋白在结肠癌细胞株中表达(1.108±0.169、1.035±0.177、1.114±0.253、1.116±0.157)高于正常结肠上皮细胞(0.358±0.094)(t值分别为5.789、4.799、5.311、5.291，P均<0.001)。Pearson rank相关分析显示，在结肠癌组织中miR-30c-5p及TLR4蛋白表达量呈负相关(r＝-0.487，95%CI：-0.721～-0.154，P<0.01)。miR-30c-5p随着TNM分期升高呈现下降趋势(F＝31.406，P<0.001)，随着肿瘤分化程度下降呈现下降趋势(F＝9.960，P<0.001)，随着肿瘤直径增大呈现下降趋势(F＝10.267，P<0.001)。TLR4随着TNM分期升高呈现上升趋势(F＝37.634，P<0.001)。TLR4随着肿瘤分化程度下降呈现上升趋势(F＝38.027，P<0.001)。TLR4随着肿瘤直径增大呈现上升趋势(F＝20.717，P<0.001)。结论miR-30c-5p在结肠癌中低表达，TLR4在结肠癌中高表达，二者与结肠癌TNM分期及肿瘤体积等恶性临床病理特征具有相关性。

简介：摘要目的研究LINC00665对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响和潜在的分子机制。方法选取2013年6月至2018年6月于济南市第三人民医院病理检查确诊为肝癌且经手术切除126例患者的肝癌组织及癌旁组织(距离肝癌组织边缘>2 cm)，其中男86例，女40例，年龄25.0～72.0(48.2±9.9)岁。qRT-PCR检测126例肝癌组织和癌旁组织中LINC00665的表达，CCK8法测定肝癌HCC9204细胞存活率，流式细胞术检测细胞凋亡，Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力，双荧光素酶报告系统验证LINC00665与miR-379-5p的调控关系。结果与癌旁组织相比，肝癌组织组中的LINC00665表达量升高[(1.00±0.10)比(1.82±0.18)]，差异具有统计学意义(P<0.05)。LINC00665含量降低后[(1.01±0.10)比(0.53±0.05)]，HCC9204细胞中细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白(Bcl-2)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达量降低[(0.74±0.07)比(0.13±0.01)；(0.81±0.08)比(0.35±0.03)；(0.69±0.07)比(0.22±0.02)]，p21、Bax和E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达升高[(0.20±0.02)比(0.66±0.06)；(0.26±0.03)比(0.78±0.08)；(0.17±0.02)比(0.72±0.07)]，细胞存活率降低[(100.13±10.14)%比(46.22±4.73)%]，细胞凋亡率上升[(8.42±0.91)%比(23.34±2.37)%]，迁移和侵袭细胞数均下降[(109±11)个比(53±5)个；(101±10)个比(47±5)个]，差异均具有统计学意义(均P<0.05)。过表达miR-379-5p组共转染野生型WT-LINC00665报告载体的细胞中萤火虫荧光素酶相对活性显著降低[(1.03±0.10)比(0.24±0.02)]，转染突变型MUT-LINC00665的细胞中荧光素酶相对活性差异不具有统计学意义(P>0.05)；LINC00665过表达组(pcDNA3.1-LINC00665)的miR-379-5p含量下降[(1.01±0.10)比(0.37±0.04)]；LINC00665抑制组(si-LINC00665)的miR-379-5p含量上升[(0.98±0.10)比(1.66±0.17)]，差异均具有统计学意义(P<0.05)；降低LINC00665含量同时降低miR-379-5p含量，细胞存活率升高[(46.53±4.72)%比(82.26±8.34)%]，细胞凋亡率降低[(23.51±2.44)%比(12.07±1.21)]，迁移细胞数和侵袭细胞数均升高[(54±6)个比(92±9)个；(48±5)个比(88±9)个]，差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结论在肝细胞癌HCC9204中，LINC00665靶向调控miR-379-5p的表达，进而调控肝癌细胞HCC9204增殖、迁移、侵袭和凋亡，是肝癌的潜在分子靶点。

简介：摘要目的探讨AP患者血清miR-148a-3p和miR-551b-5p的表达水平及其临床价值。方法选取2017年1月至2020年9月间儋州市人民医院收治的152例AP患者的临床资料，根据病情严重程度将患者分为MAP组(70例)、MSAP组(40例)和SAP组(42例)，SAP组又根据患者预后情况分成生存组(25例)和死亡组(17例)。另选取50例体检健康者作为对照组。于患者发病当天采集空腹静脉血，采用实时定量PCR法检测各组血清miR-148a-3p和miR-551b-5p表达水平。绘制受试者工作特征曲线(ROC)，计算曲线下面积(AUC)，分析血清miR-148a-3p和miR-551b-5p表达水平对SAP预后判断的价值。采用Pearson法分析SAP患者血清miR-148a-3p与miR-551b-5p表达水平的相关性。结果AP组患者血清miR-148a-3p和miR-551b-5p表达水平均明显高于对照组(3.18±1.27比0.96±0.28，1.94±0.85比0.51±0.12，P值均<0.001)。SAP组血清miR-148a-3p及miR-551b-5p表达水平均明显高于MSAP组、MAP组(4.36±1.70比2.84±1.10、2.50±0.92，2.80±1.04比1.68±0.53、1.42±0.45，P值均<0.001)。死亡组血清miR-148a-3p及miR-551b-5p表达水平均明显高于生存组(5.30±1.95比3.47±1.40，3.62±1.37比2.08±0.91，P值均<0.001)。ROC曲线分析显示，miR-148a-3p与miR-551b-5联合判断SAP预后的AUC值明显高于miR-148a-3p、miR-551b-5p单项指标[0.943(95%CI0.886～0.997)比0.860(95%CI0.797～0.924)、0.822(95%CI0.765～0.880)]，其灵敏度为98.3%，特异度为84.6%。相关分析显示，SAP患者血清miR-148a-3p与miR-551b-5p表达水平呈正相关(r＝0.835，P<0.001)。结论AP患者血清miR-148a-3p及miR-551b-5p表达水平明显升高，两者联合检测对判断SAP患者预后具有较好的价值。

简介：AbstractBackground:MicroRNA-20a (miR-20a) is dysregulated in many types of malignancies, including human hepatocellular carcinoma (HCC), but its expression level and functional significance in HCC are still disputed. We aimed to study the role of miR-20a-5p in HCC and its downstream molecular mechanisms.Methods:We used real-time polymerase chain reaction to detect the expression of miR-20a-5p and runt-related transcription factor 3 (RUNX3) in HCC and paraneoplastic tissue, transfected Huh7 and highly metastatic human hepatocellular carcinoma (MHCC97H) cells. A live cell workstation was used to observe the proliferation and migration of transfected cells. The invasiveness of transfected cells was verified by Transwell assay. Cell apoptosis was detected by flow cytometry. The expression levels of proteins after transfection were measured using simple western immunoblot measurements. Gene expression profiles between HCC and normal samples were obtained from The Cancer Genome Atlas. Gene Ontology and Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes enrichment results were processed by the database for annotation, visualization and integrated discovery. Potential target genes of miR-20a-5p were predicted to further investigate how miR-20a-5p regulates epithelial-mesenchymal transition (EMT) in HCC.Results:MiR-20a-5p was significantly highly expressed in HCC tissues, and overexpression of miR-20a-5p significantly promoted HCC cell proliferation, migration, and invasion and inhibited apoptosis in vitro. The protein expression of E-cadherin was decreased and that of vimentin was increased after overexpression of miR-20a-5p in HCC cells. We discovered the intersection of genes from miRDB, miR TarBase, and TargetScan, obtained 397 target genes and finally focused on RUNX3. RUNX3 was not only reduced in HCC specimens but also drastically reduced in HCC cells overexpressing miR-20a-5p. RUNX3 expression decreased with elevated miR-20a-5p, which activated downstream EMT signaling and promoted cell proliferation, migration, and invasion.Conclusions:Since RUNX3 is involved in EMT in HCC, as proven by previous research, our findings provide further evidence for a novel regulatory pathway comprising the miR-20a/RUNX3/EMT axis that upregulates EMT signaling and enhances the migration of HCC cells.

简介：摘要目的探讨LncRNA OIP5-AS1对非小细胞肺癌放射抗拒细胞A549R的放射敏感性影响及作用机制。方法X射线6Gy照射5次A549细胞建立放射抗拒细胞A549R。qRT-PCR检测A549、A549R细胞OIP5-AS1和miR-34c-5p表达水平。转染OIP5-AS1抑制剂或miR-34c-5p模拟物至A549R细胞，OIP5-AS1过表达质粒至A549细胞。流式细胞仪检测细胞凋亡，克隆形成实验检测细胞放射敏感性，蛋白印记检测p-Chk2和p-ATM蛋白表达水平。双荧光素酶实验验证OIP5-AS1与miR-34c-5p之间关系。结果与A549细胞比，A549R细胞中OIP5-AS1表达上调(1.97±0.11︰1.01±0.05，P<0.05)，miR-34c-5p表达下调(0.43±0.02︰1.02±0.06，P<0.05)。沉默OIP5-AS1＋6Gy组A549R细胞中p-Chk2和p-ATM蛋白水平低于沉默对照＋6Gy组(0.43±0.03︰1.39±0.15和0.51±0.05︰1.21±0.11，P<0.05)，但凋亡率增加[(13.29±1.25)%︰(28.47±2.31)%，P<0.05]。过表达OIP5-AS1＋6Gy组A549细胞中p-Chk2和p-ATM蛋白水平高于过表达对照＋6Gy组(1.23±0.13︰0.75±0.06和1.08±0.11︰0.59±0.04，P<0.05)。抑制miR-34c-5p表达逆转了沉默OIP5-AS1对A549R细胞存活分数影响，增敏比为1.42。OIP5-AS1负调控miR-34c-5p表达。结论沉默OIP5-AS1通过上调miR-34c-5p表达增强A549R细胞放射敏感性，为放疗提供潜在的靶点。

简介：摘要目的分析5号染色体短臂（5p）末端的5p15.1-5p15.33重复患儿的临床特点及遗传学特征。方法收集四川大学华西第二医院儿童重症医学科于2021年7月确诊的存在5p15.1-5p15.33重复的1例患儿，总结其临床资料，并对文献报道的5p重复综合征的病例特点进行总结分析。结果患儿为男性，就诊时1岁5个月，以出生后逐渐出现生长受限及发育迟缓为主要临床表现，伴颅面畸形；7月龄时因四肢抽动被诊断为癫痫；目前为2岁龄，仍反复抽搐，不能抬头、独坐，不会爬，不会咿呀说话，伴肌张力减退。反复行头颅磁共振成像检查均示胼胝体发育不良。患儿父母表型正常。患儿拷贝数变异测序结果显示染色体5p15.1-5p15.33（chr5：1934522-18905656）存在部分重叠，根据拷贝数变异评判标准，判定为致病拷贝数变异，父母未检出异常。根据本研究设定的检索策略，共检索到10篇相关文献（均为英文）报道的17例及数据库中收录的4例，加上本例，共22例5p重复综合征患者，其中17例年龄≤14岁，起病年龄7（0，18）岁，男女比约为1.1∶1。22例患者中颅面畸形19例，发育障碍18例，骨骼/肌肉发育异常15例，自闭症11例，注意力缺陷多动障碍9例，智力障碍8例，肥胖症5例，癫痫5例，先天性心脏发育异常2例，肌张力减退4例，斜视/远视2例，表现为胼胝体发育不良、内分泌功能紊乱、腹股沟疝、脐疝各1例；多发畸形19例，单一畸形3例。结论5p15.1-5p15.33重复可能为该患儿的遗传学病因。面部畸形、发育迟缓、骨骼/肌肉发育异常、智力残疾、自闭症谱系障碍、注意力缺陷多动障碍是5p拷贝数重复最主要的临床表型；胼胝体发育不良可能为该位置染色体重复的扩展表型。

简介：目的探讨microRNA-582-5p(miR-582-5p)在非小细胞肺癌(NSCLC)中表达及其对A549细胞增殖、侵袭的影响,以及对Rab27a基因的靶向调控作用。方法采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测33例行手术治疗的NSCLC患者的癌组织、对应癌旁组织以及A549细胞株、人正常支气管肺上皮细胞株BEAS-2B中miR-582-5p的表达水平。采用miR-582-5pinhibitor(anti-miR-582-5p)和miR-582-5pmimics(mim-miR-582-5p)转染A549细胞,另分别转染miRNAinhibitor无关系列(anti-NC)和miRNAmimics无关系列(mim-NC)作阴性对照。采用双荧光素酶报告实验验证Rab27a与miR-582-5p的关系。采用MTT法和Transwell小室法检测各组细胞增殖、侵袭能力;采用QPCR和Westernblotting检测各组A549细胞中Rab27amRNA和蛋白水平。结果NSCLC组织和癌旁组织中miR-582-5p表达水平分别为0.26±0.09和0.83±0.10;A549细胞株和BEAS-2B细胞株中miR-582-5p表达水平分别为0.63±0.08和1.17±0.09,差异均有统计学意义(P<0.05)。anti-miR-582-5p组A549细胞24、48、72、96h后的增殖率分别为(115.68±4.34)%、(130.48±5.48)%、(138.95±5.55)%、(147.03±5.69)%,明显高于anti-NC组;mim-miR-582-5p组A549细胞24、48、72、96h后的增殖率分别为(91.31±4.18)%、(86.74±3.23)%、(79.45±3.20)%、(75.22±4.09)%,明显低于mim-NC组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Transwell小室结果显示,anti-miR-582-5p组A549细胞侵袭数为189±19,明显高于anti-NC组;mim-miR-582-5p组A549细胞侵袭数为55±8,明显低于mim-NC组,差异均有统计学意义(P<0.05)。miR-582-5p可抑制野生型Rab27a3'-UTR报告基因载体的荧光素酶活性,而对突变型Rab27a3'-UTR的荧光素酶活性无影响。anti-miR-582-5p组A549细胞Rab27amRNA和蛋白表达水平分别为2.01±0.29和0.85±0.12,高于anti-NC组;mimi-miR-582-5p组A549细胞Rab27amRNA和蛋白表达水平分别为0.35±0.08和0.21±0.05,明显低于mim-NC组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论上调miR-582-5p表达可抑制Rab27a表达,从而抑制�

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA（lncRNA）CDKN2B-AS1靶向miR-98-5p对肺癌A549细胞增殖、侵袭的影响。方法体外培养肺癌A549细胞，分为对照组、pcDNA组（转染pcDNA）、CDKN2B-AS1组（转染pcDNA CDKN2B-AS1）和双转染组（转染pcDNA CDKN2B-AS1、pcDNA miR-98-5p）。检测A549细胞中CD-KN2B-AS1、miR-98-5p表达及PCNA、MMP-9蛋白表达，检测A549细胞活性、克隆数、克隆形成率、侵袭细胞数。结果与pcDNA组相比，CDKN2B-AS1组A549细胞中CDKN2B-AS1表达水平[（2.14±0.14）vs （1.03±0.10）]、各时间点的细胞OD值、细胞克隆数[（314.60±18.13）个比（220.08±12.46）个]、克隆形成率[（85.81±3.06）% vs （60.03±2.85）%]、侵袭细胞数[（233.30±18.98）个vs （140.84±12.30）个]及细胞中PCNA[（0.78±0.08）vs （0.48±0.07）]、MMP-9蛋白表达[（0.75±0.06）vs （0.38±0.06）]水平显著升高（均P<0.05），miR-98-5p表达水平[（0.23±0.03）vs （0.99±0.09）]显著降低（P<0.05）；与CDKN2B-AS1组相比，双转染组A549细胞中CD-KN2B-AS1表达水平差异无统计学意义（P>0.05），miR-98-5p表达水平显著升高（P<0.05），各时间点的细胞OD值、细胞克隆数、克隆形成率、侵袭细胞数及细胞中PCNA、MMP-9蛋白表达水平均显著降低（P<0.05）。结论lncRNA CDKN2B-AS1通过靶向抑制miR-98-5p表达对肺癌A549细胞增殖、侵袭具有促进作用。

简介：摘要目的探讨脑源性神经营养因子反义RNA(brain-derived neurotrophic factor-antisense，BDNF-AS)对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响和可能机制。方法体外培养肾小管上皮细胞HK-2，分别转染BDNF-AS小干扰RNA、miR-145-5p模拟物或共转染BDNF-AS小干扰RNA和miR-145-5p抑制剂，之后采用30 mmol/L葡萄糖干预转染后的细胞24 h，用RT-qPCR法检测细胞中BDNF-AS和miR-145-5p的表达，用CCK-8法检测细胞增殖，流式细胞术检测细胞凋亡，Western印迹法检测细胞中Bcl-2和Bax蛋白的表达，酶联免疫吸附法检测细胞培养上清中IL-1β和IL-6的水平。用双荧光素酶报告基因实验验证BDNF-AS和miR-145-5p的调控关系。结果高糖处理促进了HK-2细胞中BDNF-AS的表达(P<0.05)，而抑制了miR-145-5p的表达(P<0.05)。干扰BDNF-AS或过表达miR-145-5p降低了高糖诱导的HK-2细胞抑制率、凋亡率及Bax蛋白、IL-1β和IL-6的表达(P<0.05)，促进了Bcl-2蛋白的表达(P<0.05)。干扰miR-145-5p逆转了干扰BDNF-AS对高糖诱导的HK-2细胞增殖、凋亡及IL-1β和IL-6表达的影响。BDNF-AS可靶向结合并负调控miR-145-5p。结论干扰BDNF-AS可能通过靶向负调控miR-145-5p促进高糖诱导的肾小管上皮细胞增殖，并抑制细胞凋亡及炎症因子表达。

简介：摘要目的探讨微小核糖核酸876-5p(micro ribonucleic acid-876-5p, miR-876-5p）通过靶向叉头盒蛋白M1(forkhead box M1，FOXM1）对儿童髓母细胞瘤（medulloblastoma ，MB）细胞增殖的影响。方法收集2018年1月至2020年10月在湖南省儿童医院进行手术治疗的30例MB患儿临床资料，其中男21例，女9例，年龄为（10.42±2.17）岁，范围为5~14岁。通过qPCR检测肿瘤组织和癌旁组织标本中miR-876-5p和FOXM1、TAp73、Beclin1、Livin、Cyclin D1在mRNA水平的表达情况；通过CCK8和Transwell实验观察过表达miR-876-5p后对MB细胞的增殖和侵袭能力的影响；通过qPCR和WB实验检测过表达miR-876-5p前后，FOXM1、TAp73、Beclin1、Livin、Cyclin D1在蛋白或mRNA水平表达的变化。结果miR-876-5p在MB中表达显著降低（P<0.001），过表达miR-876-5p能够显著抑制MB细胞的增殖和侵袭能力（P<0.01）。FOXM1在MB中表达上调，其表达与miR-876-5p呈负相关（r=-0.527，P=0.013 ）。在MB细胞中过表达miR-876-5p能够抑制FOXM1的表达。此外，在MB中，miR-876-5p的表达与TAp73和Beclin1呈正相关（r=0.506，P=0.008；r=0.535，P=0.003），与Livin和Cyclin D1 mRNA呈负相关（r=-0.496，P= 0.011；r=-0.574 ，P=0.005 ）。与之相反，FOXM1的表达与TAp73和Beclin1呈负相关（r=-0.554 ，P=0.007 ；r=-0.497，P=0.016 ），与Livin和Cyclin D1呈正相关（r=0.502，P=0.009 ；r=0.476，P=0. =0.015 ）。此外，miR-876-5p在MB细胞中可以下调Livin和Cyclin D1的表达，上调TAp73在Beclin1的表达。结论miR-876-5p具有抑制MB增殖和侵袭的作用，而FOXM1可能促进MB增殖和侵袭。miR-876-5p可能通过靶向调控FOXM1促进机体内抑癌基因的表达并抑制致癌基因表达，最终抑制MB细胞增殖和侵袭。

简介：摘要目的分析hsa-miR-378a-5p在血府逐瘀胶囊调节内皮细胞血管新生中的表达及作用机制。方法应用Q-PCR方法分析药物对人微血管内皮细胞（HMEC-1）对hsa-miR-378a-5p表达的影响；进而利用4个miR数据库预测其靶基因并取交集，从OMIM数据库中获取血管新生相关基因；利用Cytoscape软件构建“hsa-miR-378a-5p靶点-人类蛋白数据库”、“血管新生相关基因-人类蛋白数据库”蛋白质相互作用网络，分析上述网络的拓扑结构及重合度；对hsa-miR-378a-5p可能影响的血管新生相关基因进行GO功能和KEGG通路注释分析。结果血府逐瘀胶囊可促进HMEC-1中hsa-miR378-5p的表达，该miR可能通过GNAQ、CREB1等靶基因调节VEGF等信号途径参与这一过程。

简介：目的探讨miR-1224-5p在胶质瘤中的表达及其对人脑胶质瘤细胞增殖的影响。方法分析中国脑胶质瘤基因组计划（CGGA）数据库中miR-1224-5p在不同级别的胶质瘤组织中的表达数据,并采用原位杂交技术进行组织验证,运用CGGA数据分析miR-1224-5p的表达水平与胶质母细胞瘤患者临床预后的相关性。采用miR-1229-5p寡聚核苷酸转染胶质瘤U251及U87细胞,通过CCK8实验观察上调miR-1224-5p表达后对胶质瘤细胞增殖的影响。结果miR-1224-5p在人脑胶质瘤组织中的表达随着病理分级的升高而降低。胶质母细胞瘤患者中低表达miR-1224-5p提示预后不良。上调miR-1224-5p表达可以抑制胶质瘤细胞的增殖。结论miR-1224-5p与胶质瘤的级别和临床预后相关,miR-1224-5p可以抑制胶质瘤细胞的增殖能力。

简介：摘要目的探讨乳腺浸润性导管癌中CXC趋化因子配体10(CXCL10)与miR-34c-5p的靶向调控关系。方法收集2016年3月至2017年3月在中山大学附属第三医院行手术切除且经病理确诊的乳腺浸润性导管癌组织(n＝56)和乳腺良性组织(n＝14)，采用HTA2.0和miRNA4.0芯片检测CXCL10和miR-34c-5p在两组中的表达并用反转录实时荧光定量PCR(RT-qPCR)进行验证；采用Pearson相关分析两者表达的相关性并用IPA软件预测靶向关系；采用双荧光素酶报告基因系统验证二者的作用靶点，最后在乳腺癌细胞株MCF-7、ZR-75-30中进一步验证。结果基因芯片检测结果显示，CXCL10 mRNA在乳腺浸润性导管癌组织和乳腺良性组织中的表达量分别为7.135±1.350和4.348±0.722，miR-34c-5p mRNA在两组中的表达量分别为1.309(1.001，2.055)和3.948(3.278，4.371)，差异均有统计学意义(t＝7.628，P<0.001；Z＝－4.405，P<0.001)；Pearson相关分析显示，CXCL10 mRNA和miR-34c-5p mRNA的表达呈负相关(r＝－0.327，P＝0.004)。CXCL10 mRNA的表达与乳腺浸润性导管癌患者人表皮生长因子受体-2(t＝2.415，P＝0.019)和Ki-67(t＝2.483，P＝0.016)的表达有关；miR-34c-5p mRNA的表达与乳腺浸润性导管癌患者组织学分级(χ2＝8.626，P＝0.013)和雌激素受体/孕激素受体(Z＝－2.195, P＝0.028)的表达有关。RT-qPCR结果显示，CXCL10 mRNA在乳腺浸润性导管癌组织和乳腺良性组织中的相对表达水平分别为6.059±1.714和1.000±0.232，miR-34c-5p的相对表达水平分别为0.093±0.004和1.000±0.244，差异均有统计学意义(t＝3.484，P＝0.002；t＝5.112，P<0.001)，该结果与芯片检测结果一致。双荧光素酶报告基因结果表明，过表达miR-34c-5p后，在MCF-7细胞中WT-CXCL10和MUT-CXCL10报告载体的荧光素酶活性分别为1.117±0.040和1.647±0.031；在HeLa细胞中，两者的荧光素酶活性分别为0.885±0.051和1.430±0.020，差异均有统计学意义(t＝18.120，P<0.001；t＝24.040，P<0.001)。分别转染miR-34c-5p和miR-NC后，ZR-75-30细胞中CXCL10的相对表达水平分别为0.008±0.000和0.012±0.000；MCF-7细胞中CXCL10的相对表达水平分别为0.315±0.000和0.386±0.004，差异均有统计学意义(t＝20.384，P<0.001；t＝3.473，P＝0.026)。结论miR-34c-5p在乳腺浸润性导管癌中表达下调，而CXCL10表达上调；CXCL10是miR-34c-5p的靶基因。

简介：摘要目的研究微RNA-873-5p(miR-873-5p)靶向调控电压依赖性阴离子通道1(VDAC1)对大鼠癫痫样神经细胞的影响及作用机制。方法通过无镁培养基诱导构建大鼠癫痫样海马神经细胞模型，将大鼠神经细胞分为对照组、模型组、miR-con组及miR-873-5p组。对照组采用正常培养大鼠神经细胞；模型组采用低镁细胞外液培养大鼠神经细胞；miR-con组采用低镁细胞外液培养大鼠神经细胞并转染miR-con；miR-873-5p组采用低镁细胞外液培养大鼠神经细胞并转染miR-873-5p。采用荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测各组神经细胞miR-873-5p及VDAC1 mRNA表达；采用Western blot技术检测神经细胞中VDAC1、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、活化的含半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved caspase-3)含量；采用DCFH-DA荧光探针检测神经细胞活性氧(ROS)水平；采用硫代巴比妥酸法检测神经细胞丙二醛(MDA)含量；采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测神经细胞谷胱甘肽(GSH)含量；采用流式细胞术检测各组神经细胞凋亡情况；采用双荧光素酶报告基因法验证miR-873-5p对VDAC1的靶向调控作用。结果与对照组比较，模型组神经细胞中miR-873-5p表达显著降低(P<0.05)，VDAC1表达显著升高(P<0.05)，Bcl-2表达下调(P<0.05)，Bax及Cleaved caspase-3表达上调(P<0.05)，GSH及MDA含量显著降低(P<0.05)，而ROS水平显著升高(P<0.05)，细胞凋亡率显著升高(P<0.05)；与miR-con组比较，miR-873-5p组神经细胞中Bcl-2表达明显上调(P<0.05)，Bax及Cleaved caspase-3表达明显下调(P<0.05)，GSH及MDA含量显著升高(P<0.05)，ROS水平显著降低(P<0.05)，细胞凋亡率明显降低(P<0.05)；双荧光素酶报告基因实验表明miR-873-5p能抑制VDAC1表达(P<0.05)。结论miR-873-5p能通过负向调控靶基因VDAC1表达而减少神经细胞凋亡，同时还能抑制神经细胞氧化应激反应，对受损神经细胞具有保护作用。